实验八-ABO血型鉴定、心音听诊、血压测量及蛙心灌流课件.ppt

1、3.用标准的血清鉴定ABO血型时，根据凝集4.反应的结果可推测血型。（“+”表示有凝集反应，“”表示无凝集反应）B型 AB型O型A型二、实验过程1.配制红细胞悬液.消毒 受检者的指尖.捏紧指尖，用消毒过的 采血针 迅速 刺破皮肤.待血流出后将1滴血，滴入盛有 1毫升浓度为 0.9 的 生理盐水 的 小瓶 中，摇匀，即成为红细胞悬液2.玻片法鉴定血型 取1载玻片 用小滴管吸A型标准血清，滴1滴在 左侧，用 另一小滴管吸 B型 标准血清，滴1滴在右侧。用小滴管取 红细胞悬液，各滴1滴在左侧 和右侧的血清上 用一根 消毒牙签的两端 分别用来混合A型和B型标准血清和红细胞悬液 静置数分钟后，观察凝集现

2、象。3.根据观察到的 凝集 现象推测受检者的血型AB抗A抗B【实验结果】记录受检者红细胞凝集情况，根据ABO血型鉴定表(下表)，判断受检者的血型。ABO血型鉴定表Area of auscultationauscultation 实验原理-间接测定法间接的方法：以外加的压强间接反映 在某种情况下：外压分别等于收缩压、舒张压 （？何种情况）我们必须寻求我们必须寻求建立某种关系建立某种关系实验原理-间接测定法人们发现：在某些情况下会出现“血管音”当外压大于收缩压时：血管被压闭，无血流，无血管音当外压大于收缩压时：血管被压闭，无血流，无血管音当外压小于舒张压时：学流通畅，无血管音当外压小于舒张压时：学

3、流通畅，无血管音当外压小于收缩压而大于舒张压时：血管时断时续，出现血管音当外压小于收缩压而大于舒张压时：血管时断时续，出现血管音1.学习离体蛙心灌流方法学习离体蛙心灌流方法;2.了解离体器官的研究方法；了解离体器官的研究方法；3.观察观察K+、Na+、Ca2+等离子、肾上腺素、等离子、肾上腺素、乙酰胆碱、酸硷度诸因素对心脏活动的影响，乙酰胆碱、酸硷度诸因素对心脏活动的影响，理解心脏正常活动需要一适当的理化环境理解心脏正常活动需要一适当的理化环境;蛙心灌流蛙心灌流【目的目的】心脏的正常节律性活动必须在适宜的理化环境里心脏的正常节律性活动必须在适宜的理化环境里才能维持，一旦适宜的理化环境才能维持，

4、一旦适宜的理化环境(内环境内环境)被干扰或破坏被干扰或破坏，心脏活动就会受到影响。，心脏活动就会受到影响。心脏受自主性神经的双重支配，交感神经兴奋时心脏受自主性神经的双重支配，交感神经兴奋时，其末梢释放去甲肾上腺素，作用于心脏，其末梢释放去甲肾上腺素，作用于心脏1受体使心受体使心肌收缩力加强，传导增快，心率加快；而迷走神经兴肌收缩力加强，传导增快，心率加快；而迷走神经兴奋时，其末梢释放乙酰胆碱，作用于心脏奋时，其末梢释放乙酰胆碱，作用于心脏M受体使心受体使心肌收缩力减弱，心率减慢。肌收缩力减弱，心率减慢。蛙心离体后，用理化性质近似于血浆的任氏液灌蛙心离体后，用理化性质近似于血浆的任氏液灌流，在

5、一定时间内，可保持节律性收缩和舒张。改变流，在一定时间内，可保持节律性收缩和舒张。改变任氏液的组成成分，心脏跳动的节律、频率和幅度都任氏液的组成成分，心脏跳动的节律、频率和幅度都可随之发生改变。可随之发生改变。【原理原理】（1）取一青蛙，破坏脑取一青蛙，破坏脑和脊髓，暴露心脏。和脊髓，暴露心脏。（2）用小镊子夹起心包）用小镊子夹起心包膜，沿心轴剪开心包膜，膜，沿心轴剪开心包膜，仔细辨认心房、心室、动仔细辨认心房、心室、动脉圆锥、主动脉、静脉窦、脉圆锥、主动脉、静脉窦、前后腔静脉等解剖结构。前后腔静脉等解剖结构。录象录象（3）在左主动脉下穿一根线，靠近动脉）在左主动脉下穿一根线，靠近动脉分叉处结

6、扎左主动脉，另一线置主动脉分叉处结扎左主动脉，另一线置主动脉圆锥下备用。提起左主动脉结扎线，用圆锥下备用。提起左主动脉结扎线，用眼科剪在左主动脉靠近动脉圆锥处剪一眼科剪在左主动脉靠近动脉圆锥处剪一小斜口，将盛有少量任氏液的蛙心插管小斜口，将盛有少量任氏液的蛙心插管由此口插入主动脉，插至动脉圆锥时略由此口插入主动脉，插至动脉圆锥时略向后退，在心室收缩时，向心室后壁方向后退，在心室收缩时，向心室后壁方向下插，经主动脉瓣插入心室腔内，一向下插，经主动脉瓣插入心室腔内，一次不成可反复多次稍退后插，但不可过次不成可反复多次稍退后插，但不可过深顶室壁以免堵住管口。插管若成功进深顶室壁以免堵住管口。插管若成

7、功进入心室，管内液面会随着心室跳动而上入心室，管内液面会随着心室跳动而上下移动或看到血如喷泉涌入插管。用动下移动或看到血如喷泉涌入插管。用动脉圆锥下的备用线结扎插管，并将结扎脉圆锥下的备用线结扎插管，并将结扎线固定于插管侧面的小突起上防止滑脱。线固定于插管侧面的小突起上防止滑脱。（4）提起插管，在结扎线远端分别剪断左、右主动脉，轻轻）提起插管，在结扎线远端分别剪断左、右主动脉，轻轻提起插管及心脏，用线将左、右肺前后腔静脉结扎，注意：在提起插管及心脏，用线将左、右肺前后腔静脉结扎，注意：在结扎前用小弯镊沿静脉窦往下压，结扎线在镊子下方结扎，以结扎前用小弯镊沿静脉窦往下压，结扎线在镊子下方结扎，以

8、保护静脉窦防止误扎，否则出现窦房阻滞；最后在结扎线下方保护静脉窦防止误扎，否则出现窦房阻滞；最后在结扎线下方剪断上述静脉而将心脏离体。用滴管吸净插管内血液，加入新剪断上述静脉而将心脏离体。用滴管吸净插管内血液，加入新鲜任氏液，反复冲洗数次，直至液体澄清。保持灌流液面高度鲜任氏液，反复冲洗数次，直至液体澄清。保持灌流液面高度恒定（恒定（12厘米），即可进行实验。厘米），即可进行实验。（5）用试管夹将蛙心插管固定于铁支架上，将连于蛙心夹的）用试管夹将蛙心插管固定于铁支架上，将连于蛙心夹的线经滑轮转挂于张力换能器，注意避免液体滴到换能器上漏电线经滑轮转挂于张力换能器，注意避免液体滴到换能器上漏电锈蚀

9、，适当调整前负荷即可记录。锈蚀，适当调整前负荷即可记录。2仪器线路连接仪器线路连接 将张力换能器插头连接至将张力换能器插头连接至BL系统第系统第1通道（或通道（或MS系统第系统第2道道的的插座）插座）3.软件操作软件操作开机并启动相关实验系统。开机并启动相关实验系统。（1）BL系统系统“实验项目实验项目”“循环实验循环实验”“蛙心灌流蛙心灌流”。G、T、F可适当调节，让波形幅度大小适宜。可适当调节，让波形幅度大小适宜。扫描速度可根据波形进行调节，让波形分开易辩。扫描速度可根据波形进行调节，让波形分开易辩。4观察项目观察项目（1）描记正常心跳曲线）描记正常心跳曲线（曲线疏密表示心跳频率；曲线幅度

10、表（曲线疏密表示心跳频率；曲线幅度表示心脏收缩力的强弱；曲线的规律性表示心跳的节律性）。示心脏收缩力的强弱；曲线的规律性表示心跳的节律性）。（2）吸出插管内全部灌流液，换入等量的）吸出插管内全部灌流液，换入等量的0.65%NaC1，观察心观察心跳曲线。当效应明显时应及时吸出灌流液，并用新鲜任氏液反复跳曲线。当效应明显时应及时吸出灌流液，并用新鲜任氏液反复换洗，直至恢复适宜的心跳曲线为止。调节最后一次液面高度同换洗，直至恢复适宜的心跳曲线为止。调节最后一次液面高度同前（前（12厘米）。厘米）。（3）滴入）滴入2CaC12 12滴，观察及换液方法同上。滴，观察及换液方法同上。（4）滴入）滴入lKC

11、l 12滴，观察及换液方法同上。滴，观察及换液方法同上。（5）滴入）滴入3乳酸乳酸12滴，效应出现后立即滴入滴，效应出现后立即滴入2.5NaHCO3 数滴，效应明显时及时吸出灌流液，换液方法同上。数滴，效应明显时及时吸出灌流液，换液方法同上。（6）滴入）滴入1 10 000肾上腺素肾上腺素12滴，观察及换液方法同上。滴，观察及换液方法同上。（7）滴入）滴入1 100 000乙酰胆碱乙酰胆碱滴，效应明显时应立即吸出滴，效应明显时应立即吸出灌流液，并用新鲜任氏液换洗，方法同上。灌流液，并用新鲜任氏液换洗，方法同上。（8）滴入）滴入0.1%阿托品阿托品1滴，效应出现后立即滴入滴，效应出现后立即滴入1

12、 100 000乙酰胆碱乙酰胆碱1滴，观察结果并与（滴，观察结果并与（8）比较，然后用任氏液换洗，）比较，然后用任氏液换洗，方法同上。方法同上。【注意事项注意事项】1换洗时可暂停记录，且最后一次加液的换洗时可暂停记录，且最后一次加液的液面液面应保持应保持同同一一高高度度.2滴入试剂时，滴入试剂时，先先加加12滴滴，观察效应。如，观察效应。如不明显不明显可可再补再补加。加。3每项实验均应有每项实验均应有前后对照前后对照。4每次加药时，应作每次加药时，应作标记标记。5随时滴加任氏液于随时滴加任氏液于心心脏表面使之保持脏表面使之保持湿润湿润。6吸任氏液的吸管和吸蛙心插管内液的吸管要分开（吸任氏液的吸管和吸蛙心插管内液的吸管要分开（专管专用专管专用），以免影响实验结果。），以免影响实验结果。7.有些步骤，如滴加有些步骤，如滴加KCl和和Ach时，在刚时，在刚出出现抑制现抑制效应效应时时立即冲立即冲洗洗，否则作用过久抑制过深可能难以抢救。，否则作用过久抑制过深可能难以抢救。