乌司他丁对炎症组织灌注及脏器损伤的影响课件.pptx

1、1乌司他丁对炎症、组织灌注及乌司他丁对炎症、组织灌注及脏器损伤的影响脏器损伤的影响2目录目录p乌司他丁的药理作用p乌司他丁对血管内皮、血管通透性和灌注的影响p乌司他丁对脏器功能的影响Michael J.et al.Clin Chem Lab Med 2005;43(1):1163乌司他丁（乌司他丁（UTI）是天然的炎症调节物质）是天然的炎症调节物质C端K区：抑制多种水解酶N端K区：抑制组织蛋白酶G和弹性蛋白酶O-硫酸软骨素糖链：与细胞、钙结合，稳定溶酶体膜、抑制炎性细胞因子释放N-糖链：调节内皮细胞与单核细胞、粒细胞、淋巴细胞的结合力1.Caroline M,et al.Journal of

2、Cell Science 116,1863-1873(2003)2.Naohiro Kanayama,et al.BIOCHEMICAL AND BIOPHYSICAL RESEARCH COMMUNICATIONS 238,560564(1997)3.Hidenori Matsuzaki,et al.CLINICAL AND DIAGNOSTIC LABORATORY IMMUNOLOGY,Nov.2004,p.11401147 4.Seiji Kanayama,et al.Journal of Endotoxin Research 2007 13:3694乌司他丁抑制炎症介质及溶酶体酶释放

3、乌司他丁抑制炎症介质及溶酶体酶释放Ca2+Ca2+Ca2+Ca2+Ca+Ca2+Ca2+TNF-a刺激因子刺激因子Ca2+ERK1/2 磷酸化NF-B/Egr-1活化TNF-a/IL-1TNF-aTNF-aTNF-aTNF-aTNF-a硫酸软骨素糖链硫酸软骨素糖链结合结合Ca2+结合结合细胞细胞 XXX抑制钙内流抑制钙内流，阻断信号转导，阻断信号转导，减少减少TNF-a/IL-1TNF-a/IL-1产生产生X稳定细胞膜稳定细胞膜,抑制抑制TNF-a/IL-1TNF-a/IL-1释放，释放，阻断炎症阻断炎症级联反应级联反应稳定稳定溶酶体溶酶体膜膜，抑制溶酶体酶释放，减少细胞损害，抑制溶酶体酶释放

4、，减少细胞损害5乌司他丁抑制多种水解酶乌司他丁抑制多种水解酶酶的分类酶的分类酶的名称酶的名称抑制抑制50%50%酶活性的酶活性的UTIUTI浓度（浓度（U/mlU/ml）蛋白酶蛋白酶胰蛋白酶胰蛋白酶6.86.8-糜蛋白酶糜蛋白酶9.49.4粒细胞弹性蛋白酶粒细胞弹性蛋白酶5.65.6组织蛋白酶组织蛋白酶G G15.715.7纤溶酶纤溶酶34.734.7胰弹性蛋白酶胰弹性蛋白酶1,6751,675肠激酶肠激酶3,0003,000脂酶脂酶脂肪酶脂肪酶230230糖类水解酶糖类水解酶透明质酸酶透明质酸酶7575淀粉酶淀粉酶2,5002,500l乌司他丁抑制胰蛋白酶、-糜蛋白酶、透明质酸酶、弹性蛋白酶

5、和纤溶酶等多种酶的活性l乌司他丁对粒细胞弹性蛋白酶的抑制活性最强6目录目录p乌司他丁的药理作用p乌司他丁对血管内皮、血管通透性和灌注的影响p乌司他丁对脏器功能的影响7蛋白酶抑制剂对中性粒细胞介导的内皮细胞损伤的抑制作用Keigo Nakatani,et al.Journal of Leukocyte Biology Volume 69,February 20018中性粒细胞中性粒细胞/炎症介质损伤内皮细胞炎症介质损伤内皮细胞多种因子培育后洗脱的HUVEC（51Cr标记），在TNF-a激活的中性粒细胞介导下，51Cr释放率和内皮细胞死亡率明显升高 TNF-a+IFN-培育后洗脱的HUVEC（51

6、Cr标记），加入不同因子激活的中性粒细胞混悬液，51Cr释放率和内皮细胞死亡率明显升高Keigo Nakatani,et al.Journal of Leukocyte Biology Volume 69,February 20019乌司他丁抑制中性粒细胞分泌弹性蛋白酶，减乌司他丁抑制中性粒细胞分泌弹性蛋白酶，减轻内皮细胞损伤轻内皮细胞损伤 经TNF-a+IFN-y培育后洗脱的HUVEC，加入TNF-a激活的中性粒细胞，和不同浓度的乌司他丁/加倍酯/抑肽酶。只有乌司他丁培育组，细胞毒性释放呈浓度依赖性降低Keigo Nakatani,et al.Journal of Leukocyte Bio

7、logy Volume 69,February 200110乌司他丁抑制弹性蛋白酶活性，减轻内皮细乌司他丁抑制弹性蛋白酶活性，减轻内皮细胞损伤胞损伤弹性蛋白酶（ug/ml）乌司他丁（U/ml）TNF-a+IFN-y培育后洗脱的HUVEC，加入不同浓度的弹性蛋白酶，继续培育12h。内皮细胞51Cr释放率呈浓度依赖性升高TNF-a+IFN-y培育后洗脱的HUVEC，加入25ug/ml弹性蛋白酶，以及不同浓度的乌司他丁培育后，细胞毒性（表示内皮细胞损伤程度）释放呈浓度依赖性下降乌司他丁对严重脓毒症血清损伤人肺血管内皮细胞保护作用的实验研究2011年发表于中国呼吸与危重监护杂志李新宇等,乌司他丁对严重

8、脓毒症血清损伤人肺血管内皮细胞保护作用的实验研究.中国呼吸与危重监护杂志.2011;10(6):547-551.研究设计研究设计观察指标观察指标：人肺微血管内皮细胞（人肺微血管内皮细胞（PMVECs）的增值活性）的增值活性人肺微血管内皮细胞（人肺微血管内皮细胞（PMVECs）培养液中培养液中NF-B人肺微血管内皮细胞（人肺微血管内皮细胞（PMVECs）培养液中培养液中TNF-研究目的：探讨乌司他丁保护严重脓毒症血清损伤离体人肺血管内皮细胞(PMVECs)的机制。人人PMVECs细细胞株胞株患者血清组患者血清组(S组）：加组）：加10%严重脓毒症患者血严重脓毒症患者血清的清的RPMI1640培养

9、基培养基正常培养组正常培养组(N组）：组）：加加10%FBS的的RPMI1640培养基培养基健康血清组健康血清组(H组组)：加加10%健康人血清的健康人血清的RPMI1640培养基培养基李新宇等,乌司他丁对严重脓毒症血清损伤人肺血管内皮细胞保护作用的实验研究.中国呼吸与危重监护杂志.2011;10(6):547-551.乌司他丁组（乌司他丁组（U组）：加组）：加1000U/ml UTI+10%患者血患者血清的清的RPMI1640培养基培养基乌司他丁治疗可维持脓毒症血清中乌司他丁治疗可维持脓毒症血清中PMVECs增增值活性的稳定值活性的稳定与S组相比，U组1、2及6h的OD值明显升高，1和6h

10、OD值升高的差异更明显（P0.01)，说明与患者血清组（S组）相比，乌司他丁组（U组）细胞增值活性明显升高。李新宇等,乌司他丁对严重脓毒症血清损伤人肺血管内皮细胞保护作用的实验研究.中国呼吸与危重监护杂志.2011;10(6):547-551.P0.05乌司他丁可明显减轻脓乌司他丁可明显减轻脓毒症血清毒症血清中的中的NF-B的表达的表达N组及H组PMVECs未见NF-B表达，患者血清组（S组）PMVECs多数胞核呈明显阳性表达，乌司他丁组（U组）PMVECs仅少数胞核呈阳性表达。说明UTI可NF-B的活化。李新宇等,乌司他丁对严重脓毒症血清损伤人肺血管内皮细胞保护作用的实验研究.中国呼吸与危重

11、监护杂志.2011;10(6):547-551.乌司他丁可明显减轻脓毒症血清中乌司他丁可明显减轻脓毒症血清中的的TNF-TNF-的的表达表达李新宇等,乌司他丁对严重脓毒症血清损伤人肺血管内皮细胞保护作用的实验研究.中国呼吸与危重监护杂志.2011;10(6):547-551.与S组相比，U组各时间点TNF-含量均明显减少（P0.05)P0.05小结小结研究显示：p严重脓毒症血清可激活NF-B的表达及释放大量的TNF-，引起PMVECs增值活性下降pUTI可以通过抑制NF-B的活化，避免下游炎症介质TNF-等大量产生，从而起到维持PMVECs增值活性的稳定结论：结论：乌司他丁可通过抑制乌司他丁可

12、通过抑制NF-BNF-B活化，减少活化，减少TNF-TNF-的释放，减轻严重脓毒症的释放，减轻严重脓毒症血清损血清损伤伤离体离体PMVECsPMVECs程度。程度。乌司他丁抑制烫伤大鼠全身炎症反应，减少内脏乌司他丁抑制烫伤大鼠全身炎症反应，减少内脏血管通透性和组织含水量的动物研究血管通透性和组织含水量的动物研究Hong-Min Luo,et al.Burns 39(2013)916-922SD大鼠64只，随机分为四组：假烫伤+N.S组、假烫伤+UTI组、烫伤+N.S组、烫伤+UTI组55%总体表面积III度烫伤模型。于烫伤后即刻静脉分别注射生理盐水或乌司他丁40000U/kg乌司他丁降低血浆乌

13、司他丁降低血浆CRP含量含量和髓过氧化物酶和髓过氧化物酶活性，抑制炎症反应活性，抑制炎症反应*P0.05与假烫伤+N.S组比较；#P0.05与烫伤+N.S组比较Hong-Min Luo,et al.Burns 39(2013)916-922乌司他丁降低微血管通透性，减少血管内液体丢乌司他丁降低微血管通透性，减少血管内液体丢失，减轻内脏组织水肿失，减轻内脏组织水肿组织伊文思蓝含量（组织伊文思蓝含量（ug/gug/g）组织水含率（组织水含率（%）肺肺心心肝肝肾肾小肠小肠肺肺心心肝肝肾肾小肠小肠*P0.05与假烫伤+N.S组比较；#P0.05与烫伤+N.S组比较Hong-Min Luo,et al.

14、Burns 39(2013)916-922乌司他丁保护内皮、改善血管通透性，乌司他丁保护内皮、改善血管通透性，增加组织灌注的动物研究增加组织灌注的动物研究30只新西兰白兔随机分为对照组、百草枯组和乌司他丁干预组。百草枯组与干预组以35mg/kg剂量一次性腹腔注射百草枯，建立兔ALI模型，对照组以等体积生理盐水注射。干预组在ALI模型建立后立即以乌司他丁100KU/kg 的剂量治疗。实验各组分别于建模2h、4h、6h 时间点行320排CT灌注扫描胸腔，得到CTP图像及相关参数（包括毛细血管通透性 rPS；局部血容量 rBV；局部血流量 rBF），并于耳缘静脉采集2ml 血液测定血管内皮生长因子（

15、VEG F）质量浓度。6h 后用空气栓塞法处死动物，取肺组织行病理观察。Song et al.BMC Emergency Medicine 2013,13(Suppl 1):S7乌司他丁减轻内皮细胞损伤和炎性浸润乌司他丁减轻内皮细胞损伤和炎性浸润A.对照组超微结构无明显异常改变B.百草枯组受损明显：细胞空泡状结构，肺泡腔见中性粒细胞、红细胞渗出，血管内皮细胞肿胀、基底膜断裂C.乌司他丁组超微结构改变轻于百草枯组，血管基底膜较完整，内皮细胞肿胀不明显，肺泡腔内渗出较少ABCSong et al.BMC Emergency Medicine 2013,13(Suppl 1):S7乌司他丁减轻内皮细

16、胞损伤，抑制乌司他丁减轻内皮细胞损伤，抑制VEGF的释放，的释放，减小血管通透性减小血管通透性0 05 5101015152020252530303535404045452h2h4h4h6h6h对照组对照组百草枯组百草枯组乌司他丁组乌司他丁组*0 050501001001501502002002502503003003503504004002h2h4h4h6h6h对照组对照组百草枯组百草枯组乌司他丁组乌司他丁组*同一时间点百草枯组与对照组比较*P0.05，干预组与百草枯组比较P0.05 Song et al.BMC Emergency Medicine 2013,13(Suppl 1):S7V

17、EGFVEGF质量浓度（质量浓度（ng/Lng/L）rPS(ml/min/100ml)rPS(ml/min/100ml)乌司他丁明显增加肺组织血流量和血容量乌司他丁明显增加肺组织血流量和血容量rBF(ml/min/100mlrBF(ml/min/100ml）0 020204040606080801001001201201401401601601801802h2h4h4h6h6h对照组对照组百草枯组百草枯组乌司他丁组乌司他丁组0 02 24 46 68 810101212141416162h2h4h4h6h6h对照组对照组百草枯组百草枯组乌司他丁组乌司他丁组*同一时间点百草枯组与对照组比较*P0

18、.05，干预组与百草枯组比较P0.05 rBV(ml/100mlrBV(ml/100ml）Song et al.BMC Emergency Medicine 2013,13(Suppl 1):S7乌司他丁治疗改善肺灌注、减轻肺损伤乌司他丁治疗改善肺灌注、减轻肺损伤对照组百草枯组乌司他丁组2h4h6hCTP 图像无明显变化，表明肺灌注情况良好，无肺损伤。CTP 图像颜色变化大，提示肺组织损伤较重，导致肺灌注不良CTP 图像变化较百草枯组稍小，提示肺损伤较轻，肺灌注不良改善Song et al.BMC Emergency Medicine 2013,13(Suppl 1):S7中国普外基础与临床杂

19、志，2003,10(3).25乌司他丁对急性重症乌司他丁对急性重症胰腺炎胰外胰腺炎胰外器官器官血流量血流量的的影响影响中国普外基础与临床杂志，中国普外基础与临床杂志，2003,10(3).SDSD大鼠大鼠4848只随机均分为对照组、只随机均分为对照组、ANP ANP 组及乌司他丁组组及乌司他丁组ANPANP组、乌司他丁组于胰被膜下均匀注射组、乌司他丁组于胰被膜下均匀注射5%5%牛磺胆酸钠制牛磺胆酸钠制成成ANPANP模型，对照组则注射等量生理盐水模型，对照组则注射等量生理盐水乌司他丁组于制模后即由股静脉缓慢注射乌司他丁乌司他丁组于制模后即由股静脉缓慢注射乌司他丁10000 10000 U/kg

20、U/kg，对照组及，对照组及ANPANP组则注射等量生理盐水组则注射等量生理盐水分别于制模后分别于制模后2h2h及及6h6h采用放射性生物微球法测定肺、肾及采用放射性生物微球法测定肺、肾及末端回肠组织的血流量末端回肠组织的血流量中国普外基础与临床杂志，2003,10(3).26乌司他丁改善急性重症乌司他丁改善急性重症胰腺炎大胰腺炎大鼠胰外鼠胰外器官血器官血流量流量ANP 组与对照组相比较，*p0.005，*p0.001;UTI 组与对照组比较，p0.001;UTI 组与ANP 组比较，#p0.01，#p0.005，#p0.001肺组织血流量变化肺组织血流量变化肠组织血流量变化肠组织血流量变化肾

21、组织血流量变化肾组织血流量变化Takada K,et al.In Vivo.2003 Mar-Apr;17(2):129-35.27在大量出血应用输液疗法时在大量出血应用输液疗法时加用乌司他丁可有效维持微循环动态加用乌司他丁可有效维持微循环动态乌司他丁有效维持动脉管径乌司他丁有效维持动脉血流速度乌司他丁有效维持动脉血流量p纳入体16只兔子分为乌司他丁组(n=8)和对照组。静脉麻醉下，1次15ml,共5次(总计75ml)进行抽血处理，抽血过程中 用同样的速度及同样的抽血量的同时，乌司他丁组用乌司他丁+乳酸林格氏液，对照组静脉注射了乳酸林格氏液总抽血量动脉血流速度的变化对照组乌司他丁组*p0.05

22、 vs 对照组*p0.01 vs 对照组总抽血量动脉血流量的变化对照组乌司他丁组*p0.01 vs 对照组动脉管径径的变化对照组乌司他丁组*p0.05 vs 对照组总抽血量28目录目录p乌司他丁的药理作用p乌司他丁对血管内皮、血管通透性和灌注的影响p乌司他丁对脏器功能的影响乌司他丁明显乌司他丁明显降低烧伤患者血降低烧伤患者血ALT/AST水平，水平，保护肝功能保护肝功能020406080100120140160180烧伤前烧伤前1d3d7dALT(IU/L)*#*#*#*AST(IU/L)020406080100120140160烧伤前烧伤前1d3d7d*#*#*#*与正常对照比较 P 0.0

23、5,#与UTI治疗组比较P30%患者40例，随机分为常规治疗组(n=16)和UTI治疗组(n=24)，16名青壮年志愿者为正常对照组。两组患者均进行常规抗休克、创面处理和营养治疗。胡骁华等，中华医学杂志2005年11月2日第85卷第41期 2889-2894050100150200250300烧伤前烧伤前1d3d7dCKMB(IU/L)*#*#*#*0100200300400500600700烧伤前烧伤前1d3d7dLDH(IU/L)*#*#*#*与正常对照比较 P 0.05,#与UTI治疗组比较P30%患者40例，随机分为常规治疗组(n=16)和UTI治疗组(n=24)，16名青壮年志愿者为

24、正常对照组。两组患者均进行常规抗休克、创面处理和营养治疗。胡骁华等，中华医学杂志2005年11月2日第85卷第41期 2889-2894乌司他丁明显乌司他丁明显降低烧伤患者血降低烧伤患者血CKMB/LDH水平，水平，保护心功能保护心功能乌司他丁明显乌司他丁明显降低烧伤患者血降低烧伤患者血BUN/Cr水平，水平，保护肾功能保护肾功能012345678910烧伤前烧伤前1d3d7dBUN(mmol/L)*#*#01020304050607080烧伤前烧伤前1d3d7dCr(Umol/L)*#*#*与正常对照比较 P 0.05,#与UTI治疗组比较P30%患者40例，随机分为常规治疗组(n=16)和

25、UTI治疗组(n=24)，16名青壮年志愿者为正常对照组。两组患者均进行常规抗休克、创面处理和营养治疗。胡骁华等，中华医学杂志2005年11月2日第85卷第41期 2889-2894乌司他丁显著降低乌司他丁显著降低SAP患者患者ALI发病率发病率p34例人住ICU时未出现ALI/ARDS的患者(治疗组16例，对照组18例)，在治疗过程中治疗组有6例发生ALI/ARDS(37.5)，对照组有12例发生ALI/ARDS(66.7)，治疗组ALI/ARDS的发病率明显低于对照组(P0.05)37.50%66.70%0.00%20.00%40.00%60.00%80.00%100.00%治疗组治疗组(

26、n=16)对照组对照组(n=18)ALI/ARDS发病率发病率患者比例(%)p0.05张献全等,乌司他丁对重症急性胰腺炎肺损伤的防治作用.中国急救医学.2008;28(12):1060-1062.李健球等.中外医学研究,2010,8(013):24-26.33乌司他丁缓解休克患者的组织缺氧状态，乌司他丁缓解休克患者的组织缺氧状态，减少减少MODS和死亡的发生率和死亡的发生率23.710.55028.90102030405060MODS死亡比例（%）P0.05N=9N=4N=19N=11P0.05P0.05P0.05P0.05p2006年1月-2009年9月符合脓毒性休克诊断标准病例76例，分成

27、A、B两组，并排除恶性肿瘤和严重肝功能损害病例lA组为治疗组，38例lB组为对照组，38例l两组间性别、年龄和APACHE-2评分的差异无统计学意义治疗组对照组与对照组相比较,*:P 0.05SIRS发生率:天普洛安治疗组 20%；对照组 65%治疗组患者肌酸激酶(CK)谷草转氨酶(AST),谷丙转氨酶(ALT)和肌肝(Cr)值明显低于对照组(P 0.05)乌司他丁能够有效抑制CPR 后机体炎症反应并保护患者重要脏器功能荆小莉等，中华急诊医学杂志.2006.15(4):351-353乌司他丁有效降低心肺复苏患者乌司他丁有效降低心肺复苏患者SIRS发生率，保发生率，保护重要脏器护重要脏器0100200300400500600700CK（U/L）AST（U/L）ALT（U/L）Cr（umol/L）对照组乌司他丁组p乌司他丁可抑制多种血浆蛋白酶的活性，减少炎症介质的产生和释放p乌司他丁保护血管内皮，减少血管通透性，增加小血管灌注p乌司他丁保护重要脏器功能，降低病死率35小结小结36