血流感染的实验室诊断培训课件.ppt

1、血流感染的实验室诊断血流感染的实验室诊断1血流感染概述血流感染概述2自动化血培养系统自动化血培养系统3标本采集和运送标本采集和运送4阳性报警后处理方法阳性报警后处理方法5如何判断是否污染如何判断是否污染2血流感染的实验室诊断一、血流感染概述一、血流感染概述3血流感染的实验室诊断（一）血流感染的定义（一）血流感染的定义 血流感染（血流感染（bloodstream infections,BSIbloodstream infections,BSI）是指各种病原微生物侵入血循环，释放）是指各种病原微生物侵入血循环，释放毒素和代谢产物，并诱导细胞因子释放，毒素和代谢产物，并诱导细胞因子释放，对机体所有脏

2、器造成损害，严重者可导致对机体所有脏器造成损害，严重者可导致休克、多脏器衰竭、弥散性血管内凝血，休克、多脏器衰竭、弥散性血管内凝血，甚至死亡，是一种严重的全身感染性疾病甚至死亡，是一种严重的全身感染性疾病。4血流感染的实验室诊断（二）血流感染的类型（二）血流感染的类型 菌血症（菌血症（bacteremiabacteremia）：细菌侵入血流，）：细菌侵入血流，尚未大量尚未大量繁殖且未引发临床症状，往往是一过性的。繁殖且未引发临床症状，往往是一过性的。败血症（败血症（septicemiasepticemia）：细菌进入血液）：细菌进入血液大量繁殖大量繁殖，分泌毒素或代谢产物，分泌毒素或代谢产物，

3、产生严重的临床症状产生严重的临床症状。脓毒败血症（脓毒败血症（pyemiapyemia）：细菌进入血液）：细菌进入血液大量繁殖大量繁殖，分泌毒素或代谢产物，产生严重的临床症状，常伴分泌毒素或代谢产物，产生严重的临床症状，常伴有有多发性脓肿或败血性休克多发性脓肿或败血性休克。毒血症（毒血症（toxemiatoxemia）：细菌毒素或代谢产物进入血）：细菌毒素或代谢产物进入血液引起的临床病症。液引起的临床病症。5血流感染的实验室诊断（三）血培养的现状（三）血培养的现状l 送检率低送检率低送检量送检量（瓶（瓶/日）日）床床位位中国大陆三甲医院中国大陆三甲医院202050501001000 0中国香港

4、玛丽医院中国香港玛丽医院2002001401400 0中国台湾台大医院中国台湾台大医院3003002002000 0美国美国John HopinksJohn Hopinks3003004004001031039 96血流感染的实验室诊断（三）血培养的现状（三）血培养的现状 不正确采样不正确采样 污染问题污染问题 皮肤定植菌群是血培养污染的最常见细菌。阳性检出率低阳性检出率低 检验周期长检验周期长 7血流感染的实验室诊断二、全自动血培养系统二、全自动血培养系统8血流感染的实验室诊断二、自动化血培养系统二、自动化血培养系统我院使用的是我院使用的是BacT/BacT/ALERT 3D ALERT 3

5、D 全自动细全自动细菌、分枝杆菌培养系菌、分枝杆菌培养系统统工作原理：工作原理：细菌在培养基中代细菌在培养基中代谢基质时产生谢基质时产生CO2,CO2,并并水解成水解成H H+，H H+透过瓶透过瓶底滤过膜，瓶底乳胶底滤过膜，瓶底乳胶感应器颜色由墨绿色感应器颜色由墨绿色变成黄色。变成黄色。9血流感染的实验室诊断二、自动化血培养系统二、自动化血培养系统 仪器培养孔底的仪器培养孔底的光电探测器测量光电探测器测量反射光变化并按反射光变化并按相应公式计算。相应公式计算。判读公式：判读公式：加速度法加速度法 速率法速率法 起始阈值法起始阈值法10血流感染的实验室诊断三、标本采集和运送三、标本采集和运送1

6、1血流感染的实验室诊断（一）标本采集（一）标本采集 采集时间采集时间 1.1.尽可能在抗菌药物使用前；尽可能在抗菌药物使用前；2.2.对已经使用抗菌药物的病人，最好在下次用对已经使用抗菌药物的病人，最好在下次用药前采集；药前采集；3.3.寒战和发热初起时采血可提高培养阳性率，寒战和发热初起时采血可提高培养阳性率，心内膜炎（持续性菌血症）例外；心内膜炎（持续性菌血症）例外；4.4.怀疑血流感染时应尽早采血，不要强调体温怀疑血流感染时应尽早采血，不要强调体温超过超过3939才抽血，而错过时机。才抽血，而错过时机。12血流感染的实验室诊断（一）标本采集（一）标本采集 寒战后体温高峰前寒战后体温高峰前

7、细菌含量最高。细菌含量最高。血液细菌含量随着血液细菌含量随着体温从最高峰逐渐体温从最高峰逐渐下降而越来越少。下降而越来越少。血液采样的最佳时血液采样的最佳时间是在寒战后和发间是在寒战后和发热高峰前，此时阳热高峰前，此时阳性检出率最高。性检出率最高。13血流感染的实验室诊断（一）标本采集（一）标本采集l 采血量 成人采血量为510ml/瓶，分别采取需氧瓶和厌氧瓶，双部位抽血。儿童采血量为35ml/瓶，采取儿童瓶。14血流感染的实验室诊断（二）标本运送（二）标本运送 采血后的血培养瓶应立即送检，不得超过采血后的血培养瓶应立即送检，不得超过2h。不能放入冰箱或冷冻，有些苛养菌如肺炎链球菌不能放入冰箱

8、或冷冻，有些苛养菌如肺炎链球菌、脑膜炎奈瑟菌等遇冷很容易死亡。、脑膜炎奈瑟菌等遇冷很容易死亡。如在培养之前不得不放置一段时间，应置于室温如在培养之前不得不放置一段时间，应置于室温。15血流感染的实验室诊断 血培养阳性报警后，如何处理？血培养阳性报警后，如何处理？观察培养曲线观察培养曲线 涂片、转种血平板涂片、转种血平板 革兰染革兰染色色 镜检镜检 报告危急值报告危急值 若革兰染色镜检未发现细菌，若革兰染色镜检未发现细菌，怎么办？怎么办？重新涂片，作重新涂片，作瑞氏染色瑞氏染色 以培养曲线作初步判断是否假阳性，次日观察血以培养曲线作初步判断是否假阳性，次日观察血平板上是否生长平板上是否生长17血

9、流感染的实验室诊断18血流感染的实验室诊断19血流感染的实验室诊断 阳性曲线20血流感染的实验室诊断 阴性曲线21血流感染的实验室诊断 假阳性曲线22血流感染的实验室诊断五、如何判断是否污染？五、如何判断是否污染？23血流感染的实验室诊断五、如何判断是否污染？五、如何判断是否污染？（一）阳性检出瓶数（二）细菌种类（三）阳性检出时间（四）重复培养结果24血流感染的实验室诊断（一）阳性检出瓶数（一）阳性检出瓶数 两瓶血培养，检出一瓶，考虑污染两瓶血培养，检出一瓶，考虑污染 两瓶血培养，检出两瓶，即使是凝固两瓶血培养，检出两瓶，即使是凝固酶阴性的葡萄球菌，也应考虑为致病酶阴性的葡萄球菌，也应考虑为致

10、病菌菌25血流感染的实验室诊断（二）细菌种类（二）细菌种类 检出检出金黄色葡萄球菌、肺炎克雷伯菌、大肠埃希金黄色葡萄球菌、肺炎克雷伯菌、大肠埃希菌菌及其他肠杆科细菌、及其他肠杆科细菌、铜绿假单胞菌、白色念珠铜绿假单胞菌、白色念珠菌菌时，时，90%90%以上是致病菌。以上是致病菌。检出检出化脓性链球菌、无乳链球菌、产单核细胞李化脓性链球菌、无乳链球菌、产单核细胞李斯特菌、脑膜炎奈瑟菌、淋病奈瑟菌、流感嗜血斯特菌、脑膜炎奈瑟菌、淋病奈瑟菌、流感嗜血杆菌、新生隐球菌杆菌、新生隐球菌及其他假丝酵母菌，污染的可及其他假丝酵母菌，污染的可能性更低。能性更低。检出棒杆菌、微球菌、气球菌、芽胞杆菌、凝固检出棒

11、杆菌、微球菌、气球菌、芽胞杆菌、凝固酶阴性葡萄球菌，污染的可能性很大。酶阴性葡萄球菌，污染的可能性很大。26血流感染的实验室诊断（三）阳性检出时间（三）阳性检出时间 阳性检出时间与血标本中含菌量呈反比关系。阳性检出时间与血标本中含菌量呈反比关系。阳性报警出现时间小于阳性报警出现时间小于24h24h，一般为血流感染，一般为血流感染 大于大于48h48h，多为污染，多为污染27血流感染的实验室诊断（四）重复培养结果（四）重复培养结果 与病人静脉导管培养或其他部位标本的培养结果与病人静脉导管培养或其他部位标本的培养结果相比较，相比较，2 2次以上分离细菌的菌种与药敏谱相同时次以上分离细菌的菌种与药敏谱相同时，考虑血流感染。，考虑血流感染。28血流感染的实验室诊断29血流感染的实验室诊断