免疫学诊断与防治课件.ppt

1、 （一）抗原抗体反应的原理（一）抗原抗体反应的原理1、利用已知抗原检测未知抗体、利用已知抗原检测未知抗体（1）检测病原微生物的相应抗体以辅助诊断疾病：）检测病原微生物的相应抗体以辅助诊断疾病：伤伤寒病、流行性乙型脑炎、寒病、流行性乙型脑炎、AIDS病等。病等。（2）检测自身抗体）检测自身抗体诊断自身免疫病：诊断自身免疫病：SLE、类风类风湿性关节炎等湿性关节炎等2、利用已知抗体检测未知抗原、利用已知抗体检测未知抗原（1）鉴定病原菌：诊断疾病）鉴定病原菌：诊断疾病（2）检测肿瘤相关抗原：检测甲胎蛋白以诊断肝癌）检测肿瘤相关抗原：检测甲胎蛋白以诊断肝癌（3）检测血型抗原、）检测血型抗原、HLA抗原

2、：鉴定血型，亲子鉴定抗原：鉴定血型，亲子鉴定（4）检测药物半抗原：）检测药物半抗原：确认运动员是否服用兴奋剂确认运动员是否服用兴奋剂（二）（二）抗原或抗体的检测方法抗原或抗体的检测方法 凝集反应凝集反应沉淀反应沉淀反应补体参与的抗原抗体反应补体参与的抗原抗体反应免疫标记技术免疫标记技术2、补体结合试验、补体结合试验(complement fixation test)：检测抗原或抗体。检测抗原或抗体。原理：用已知的指示系统检测试验系统是否结合补体进行诊断原理：用已知的指示系统检测试验系统是否结合补体进行诊断卵白及某些微生物中的蛋白质卵白及某些微生物中的蛋白质（一）淋巴细胞的分离与类型鉴定（一）淋

3、巴细胞的分离与类型鉴定（1）间接免疫荧光法：鉴定细胞的群、亚群。）间接免疫荧光法：鉴定细胞的群、亚群。用用CD3、CD4、CD8单克隆抗体检测患者外周血单克隆抗体检测患者外周血T细胞表面细胞表面相应相应抗原抗原CD3+T细胞，细胞，计算计算T细胞总数。细胞总数。CD4+CD4+T细胞，细胞，计算计算CD4+T细胞数。细胞数。CD8+CD8+T细胞，细胞，计算计算 CD8+亚群亚群T细胞数细胞数 计算计算CD4+/CD8+比例比例 正常人正常人PMB中中T细细胞占胞占6575%CD4+/CD8+约为约为1.52（3）流式细胞术（）流式细胞术（flow cytometry）用用mIgM、mIgD单

4、克隆抗体检测患者外单克隆抗体检测患者外周血周血B细胞表面相应的抗原已检测细胞表面相应的抗原已检测B细胞细胞的数量的数量（2）磁珠分离法：用抗）磁珠分离法：用抗CD4交联的微珠可将交联的微珠可将T细胞细胞 中的中的CD4+T细胞与细胞与CD8+T细胞分开。细胞分开。正常人外周血中正常人外周血中SmIg+细胞占细胞占812%流式细胞仪流式细胞仪 IL-2、IL-2R、rIFN、TNF等检测等检测（2）抗体形成细胞测定）抗体形成细胞测定 溶血空斑试验溶血空斑试验 （hemolytic forming cell assay，HFC）计算计算HFU/ml（1）B细胞增殖试验：细胞增殖试验：(immuno

5、therapy)免疫增强药物的适应症和副作用免疫增强药物的适应症和副作用 二、二、免疫抑制剂免疫抑制剂 免疫抑制药物的适应症和副作用免疫抑制药物的适应症和副作用疫苗疫苗 应用微生物制备的具有免疫原性的物质。应用微生物制备的具有免疫原性的物质。类毒素类毒素将细菌毒素用甲醛减毒后制备的具有免疫将细菌毒素用甲醛减毒后制备的具有免疫 原性的物质。原性的物质。如喉类毒素，破伤风类毒素。如喉类毒素，破伤风类毒素。（二）人工被动免疫（二）人工被动免疫（artificial passive immunization）是给人体注射含特异性抗体的免疫血清或细胞因子等制剂，以是给人体注射含特异性抗体的免疫血清或细胞

6、因子等制剂，以治疗或紧急预防感染的措施。如抗毒素、人免疫球蛋白制剂、治疗或紧急预防感染的措施。如抗毒素、人免疫球蛋白制剂、细胞因子制剂、单抗制剂等。细胞因子制剂、单抗制剂等。（一）人工主动免疫（一）人工主动免疫（artificial active immunization）用疫苗、类毒素接种机体，使之产生特异性的免疫，用疫苗、类毒素接种机体，使之产生特异性的免疫，从而预防感染的措施。从而预防感染的措施。（三）计划免疫三）计划免疫Production of an attenuated organismPathogenic virusIsolate virulence geneDelete vir

7、ulence geneMutate virulence geneProduction of a toxoid from a pathogenic toxinSite related to pathogenicityAntigenic determinantsChemical modificationToxoidExample for a DNA vaccineClone gene for influenza haemagglutinin into a plasmidInject cloned gene into muscle tissueABInfect mouse with influenza virusCMeasure virus titrecontrol DNADVaccinia virus recombinantsTK geneAntibiotic resistance markerVaccinia promoterForeign geneLigationForeign geneDNAVaccinia virusTissue culture cellsHomologous recombinationTK-negative recombinant virusForeign geneTransfectionInfectionBUdR selection