诊断-临床常用免疫学检查课件.ppt

1、2022年10月20日星期四诊断诊断临床常用免疫临床常用免疫学检查学检查 免疫功能检查免疫功能检查 (immunological function)血清免疫球蛋白检测血清免疫球蛋白检测 血清补体检测血清补体检测 细胞免疫检测细胞免疫检测(immunoglobulin,complements,cell immune)自身免疫检测自身免疫检测(auto-antibodies)类风湿因子测定类风湿因子测定 抗核抗体检测抗核抗体检测 组织和细胞抗体检测组织和细胞抗体检测 (RF ANA other antibodies)感染免疫检测感染免疫检测(infectious immunology)细菌感染免疫

2、检测细菌感染免疫检测 病毒感染免疫检测病毒感染免疫检测 其它其它(寄生虫感染、性病等）寄生虫感染、性病等）(bacterial,virus and so on)肿瘤标志物检测肿瘤标志物检测(tumor markers)蛋白质类肿瘤标志物蛋白质类肿瘤标志物 糖脂类肿瘤标志物糖脂类肿瘤标志物 酶类肿瘤标志物酶类肿瘤标志物(proteins,glycolipid,enzymes markers)器官与骨髓移植的检测器官与骨髓移植的检测(organ and bone marrow transplantation)病毒肝炎血清标志物病毒肝炎血清标志物(virus hepatitis markers)其它

3、其它 循环免疫复合物检测、冷球蛋白检测、丙种反应性蛋白检测循环免疫复合物检测、冷球蛋白检测、丙种反应性蛋白检测 血清免疫球蛋白检测血清免疫球蛋白检测(Immunoglobulin test)血清补体检测(Complements)细胞免疫检测(Cell immune)概念：概念：具有抗体活性和抗体样结构的球蛋白，由具有抗体活性和抗体样结构的球蛋白，由浆细胞产生，存在于体液，血液，外分泌液和一浆细胞产生，存在于体液，血液，外分泌液和一些细胞膜上。些细胞膜上。分类分类:用超速离心、免疫电泳方法可将免疫球蛋白用超速离心、免疫电泳方法可将免疫球蛋白分为五类：分为五类：IgG、IgA、IgM、IgD、Ig

4、Eu IgG最多、占75%85%抗体活性u IgA血清型和分泌型两种u IgM是有效的凝聚和溶解细胞的因子。最早；最先u IgD功能尚不完全清楚u IgE与变态反应有关(0.002%)ADCC 多克隆多克隆(Polyclonal)增高增高:IgG IgA IgM均增高均增高 单克隆单克隆(Monoclonal)增高增高:仅某一种仅某一种Ig增高而其他种不增高增高而其他种不增高 增高增高：多克隆性增高多克隆性增高(polyclonal elevate)慢性感染、慢性肝病、自身免疫性疾病慢性感染、慢性肝病、自身免疫性疾病(chronic infection,chronic hepatitis,AI

5、D)单克隆性增高单克隆性增高(monoclonal elevate)免疫增殖性疾病免疫增殖性疾病 (proliferative disease)概念：概念：单克隆单克隆B淋巴细胞异常增殖产生免疫球蛋淋巴细胞异常增殖产生免疫球蛋白，具有相同结构和电泳迁徙速度，但不具有白，具有相同结构和电泳迁徙速度，但不具有抗体活性抗体活性。减低：减低：先天性先天性(congenital)体液免疫缺陷和联合免疫缺陷（先天性无（低）丙种球蛋白血症等）获得性获得性(acquired)肾病综合征（大量流失蛋白）、淋巴网状系统肿瘤、病毒感染、免疫抑制剂应用血清免疫球蛋白检测(Immunoglobulin test)血清补

6、体检测(Complements)细胞免疫检测细胞免疫检测(Cell immune)p 组成：由传统途径的9种成分c1（c1q、c1r、c1s）c9,旁路途径的3种成分及其衍生物B、D、P、H、I等因子组成。p 作用：参与灭活病原体的免疫反应，也可破坏自身组织或自身细胞造成免疫损伤 total hemolytic complement activity CH50正常值：正常值：50100 ku/L临床意义临床意义：减低减低 1.先天性先天性 2.合成减少合成减少 hepatitis,营养不良 3.消耗或者丢失过多消耗或者丢失过多 SLE 增高增高急性炎症、组织损伤、某些肿瘤等。急性炎症、组织损伤

7、、某些肿瘤等。补体补体C3检测检测 C3在补体系统各成分中含量最多，是传统途径和旁在补体系统各成分中含量最多，是传统途径和旁路途径被激活的关键物质。路途径被激活的关键物质。正常值：0.851.7g/L 补体补体C4检测检测 C4代表补体传统活化途径，在补体活化、促进吞噬、代表补体传统活化途径，在补体活化、促进吞噬、防止免疫复合物沉着和中和病毒等方面发挥作用防止免疫复合物沉着和中和病毒等方面发挥作用。正常值：0.220.34g/L参见参见CH50减低和增高的临床意义减低和增高的临床意义 C3增高在急性炎性反应更敏感增高在急性炎性反应更敏感 C4对判断免疫复合物形成时补体消耗性减低更有对判断免疫复

8、合物形成时补体消耗性减低更有意义意义血清免疫球蛋白检测(Immunoglobulin test)血清补体检测(Complements)细胞免疫检测细胞免疫检测(Cell immune)细胞免疫检测细胞免疫检测(Cell immune)(Cell immune)T细胞免疫检测B细胞免疫检测自然杀伤细胞检测(NK cell)细胞因子检测(cytokine)T T细胞分化抗原测定细胞分化抗原测定 (免疫荧光法免疫荧光法;流式细胞）流式细胞）CDCD3 3总总T T细胞细胞 正常值：正常值：69.4%4.86%4.86%CDCD4 4T T辅助细胞（辅助细胞（T TH H）正常值：正常值：41.17%

9、5.28%5.28%CDCD8 8T T抑制细胞（抑制细胞（T TS S）正常值：正常值：24.58%4.02%4.02%CD CD4 4/CD/CD8 8 2.20.7/1 0.7/1 临床意义：临床意义：CDCD4 4降低降低病毒感染（病毒感染（CMV,HIV,HBV)CDCD4 4/CD/CD8 8增高增高恶性肿瘤、自身免疫性疾病、变态反恶性肿瘤、自身免疫性疾病、变态反应、排异反应应、排异反应 CDCD4 4/CD/CD8 8减低减低见于艾滋病见于艾滋病(HIV)(HIV)、恶性肿瘤、传单及、恶性肿瘤、传单及乙肝急性期。乙肝急性期。CDCD3 3 CD CD4 4 CD CD8 8均增高

10、均增高T T细胞型淋巴细胞恶性疾病细胞型淋巴细胞恶性疾病 (T lymphocytes malignant disease)(T lymphocytes malignant disease)B B细胞分化抗原测定：细胞分化抗原测定：应用应用CDCD1919、CDCD2020、CD CD21 21、CD CD2222 和和CDCD4040等单克隆等单克隆抗体标记单个核细胞抗体标记单个核细胞BB细胞，通过免疫荧光或流细胞，通过免疫荧光或流式细胞术进行检测。式细胞术进行检测。CD CD1919 为全部为全部B B细胞共有的表面标志，细胞共有的表面标志，B B细胞活化细胞活化后不消失，是最重要的后不消

11、失，是最重要的B B细胞标记分子。细胞标记分子。CD CD22 22 为成熟为成熟B B细胞的表面标志。细胞的表面标志。参考值：参考值：CDCD19 19 11.743.73%3.73%临床意义临床意义 升高升高BB细胞型急性淋巴细胞性白血病、慢性细胞型急性淋巴细胞性白血病、慢性淋巴细胞白血病、淋巴细胞白血病、BurkittBurkitt淋巴瘤等淋巴瘤等 减低减低无丙种球蛋白血症、长期免疫抑制剂无丙种球蛋白血症、长期免疫抑制剂应用后应用后 自然杀伤细胞免疫检测自然杀伤细胞免疫检测I.I.自然杀伤细胞（自然杀伤细胞（NKNK）介导天然免疫应答，它不依）介导天然免疫应答，它不依赖抗体和补体即能杀伤

12、靶细胞赖抗体和补体即能杀伤靶细胞II.II.自然杀伤细胞（自然杀伤细胞（NKNK）活性可作为判断机体抗肿瘤）活性可作为判断机体抗肿瘤和抗病毒感染的指标之一和抗病毒感染的指标之一 细胞因子（细胞因子（cytokinecytokine）是由活化的免疫细胞和某些）是由活化的免疫细胞和某些基质细胞分泌的，介导和调节免疫、炎症反应的小基质细胞分泌的，介导和调节免疫、炎症反应的小分子多肽。分子多肽。IL-2IL-2、IL-6IL-6、IL-8IL-8、IL-10IL-10和和TNFTNF、IFNIFN免疫功能检查免疫功能检查 自身免疫检测自身免疫检测肿瘤标志物检测肿瘤标志物检测感染免疫检测感染免疫检测(i

13、nfectious immune)器官与骨髓移植的检测器官与骨髓移植的检测 病毒肝炎血清标志物病毒肝炎血清标志物其它其它 类风湿因子测定类风湿因子测定抗核抗体检测抗核抗体检测组织和细胞抗体检测组织和细胞抗体检测 概念：概念：RF是是变性变性IgGIgG刺激机体产生的一种自身抗刺激机体产生的一种自身抗体，主要存在于类风湿性关节炎患者的血清和关体，主要存在于类风湿性关节炎患者的血清和关节液内。节液内。分型：分型：可分为可分为IgMIgM型、型、IgGIgG型、型、IgAIgA型等，用胶乳型等，用胶乳凝集法测出的主要是凝集法测出的主要是IgMIgM型，速率散射比浊检测准型，速率散射比浊检测准确定量分

14、析，用确定量分析，用ELISAELISA法可检出其它型。法可检出其它型。A.参考值：参考值：阴性阴性 30 U/L1：100为阳性 临床意义临床意义：1、ANAANA阳性最多见于未治疗的阳性最多见于未治疗的SLESLE，阳性率达，阳性率达80%80%100%100%（活动期几乎（活动期几乎100%100%阳性）阳性）2 2、ANAANA阳性是结缔组织病的标志，是阳性是结缔组织病的标志，是SLESLE最佳筛选试最佳筛选试验。验。3 3、其它疾病、其它疾病,如原发性胆汁性肝硬化如原发性胆汁性肝硬化(Primary biliary cirrhosis)、慢性肝病、慢性感染、肿瘤等也可出现阳性、慢性肝

15、病、慢性感染、肿瘤等也可出现阳性 2.2.抗脱氧核糖核酸抗体抗脱氧核糖核酸抗体 （anti-DNA antibodyanti-DNA antibody）其中抗双链其中抗双链DNADNA（double stranded-DNA,ds-DNAdouble stranded-DNA,ds-DNA）抗体的靶抗原是细胞核中的抗体的靶抗原是细胞核中的DNADNA双螺旋结构，识别双螺旋结构，识别双碱基对的双碱基对的DNADNA。正常结果：阴性正常结果：阴性 临床意义：临床意义：1.1.为为SLESLE特异性抗体特异性抗体(Specific antibody for Specific antibody for

16、 SLE)SLE)，特异性率，特异性率95%100%95%100%；敏感性；敏感性30-50%30-50%。2.2.与活动程度相关与活动程度相关3.3.特别在并发狼疮性肾炎时起重要作用。特别在并发狼疮性肾炎时起重要作用。4.4.其它风湿病中抗其它风湿病中抗ds-DNAds-DNA抗体也可阳性。抗体也可阳性。3.3.可提取性核抗原多肽抗体谱可提取性核抗原多肽抗体谱 ENAENA（extractable antinuclear antigenextractable antinuclear antigen）由多种相对分子）由多种相对分子质量不同的多肽构成，利用免疫印迹试验可对这些抗原的自身质量不同的

17、多肽构成，利用免疫印迹试验可对这些抗原的自身抗体进行检测，目前已经发现抗体进行检测，目前已经发现2020余种。余种。Scl-70Jo-1掌指关节和近端指间关节伸侧出现萎缩性掌指关节和近端指间关节伸侧出现萎缩性丘疹和斑疹，伴少量鳞屑，称丘疹和斑疹，伴少量鳞屑，称GottronGottron征征*Rheumatoid factor*Anti-Nuclear Antibody*tissue and cell antibody 组织和细胞抗体检测组织和细胞抗体检测 抗线粒体抗体抗线粒体抗体（anti-mitochondria antibody,AMA）抗甲状腺球蛋白抗体抗甲状腺球蛋白抗体（anti-t

18、hyroglobulin antibody,TG）抗甲状腺微粒体抗体抗甲状腺微粒体抗体（anti-thyroid mivrosome ntibody,TM）抗平滑肌抗体抗平滑肌抗体（antismooth muscle antibidy,ASMA）等 如AMA、ASMA在原发性胆汁性肝硬化、慢性肝病、自身免疫性肝炎中常为阳性免疫功能检查免疫功能检查自身免疫检测自身免疫检测(auto-immune)感染免疫检测感染免疫检测 肿瘤标志物检测肿瘤标志物检测器官与骨髓移植的检测器官与骨髓移植的检测 病毒肝炎血清标志物病毒肝炎血清标志物其它其它 （一）血清抗链球菌溶血素（一）血清抗链球菌溶血素“O O”（

19、anti-streptolysinanti-streptolysin“O O”，ASOASO）A组溶血性链球菌的荚膜抗原代谢产物链球菌溶血素“O”具有溶血活性，能溶解人类和一些动物的红细胞。将受检病人血清倍比稀释后，加入一定量的链球菌溶血素“O”，如病人血清中含有抗体（ASO），即能使链球菌溶血素“O”失去溶血能力，不溶血的管数越多表示ASO的效价越高。参考值参考值：胶乳凝集法为阴性 100IU/L 临床意义临床意义：当机体受A组溶血性链球菌感染后23周，血清中即出现抗链球菌溶血素“O”的抗体，这种抗体滴度直至病愈后数月到半年才下降至正常水平 ASO升高常见于活动性风湿热、风湿性关节炎、急性肾

20、小球肾炎等 假阳性见于高胆固醇血症、黄疸、溶血等（二）伤寒和副伤寒（二）伤寒和副伤寒Typhoid and paratyphoid 沙门菌免疫测定-肥达反应（Widal reactin WR）人体被伤寒沙门菌感染后，菌体“O”抗原和鞭毛“H”抗原能刺激人体产生相应抗体。副伤寒杆菌分甲、乙、丙三型参考值：伤寒WR“H”1：160；“O”1：80；副伤寒WR甲、乙、丙均 1：80临床意义：临床意义：当感染伤寒沙门菌后一周可出现阳性，第二周阳性率上升为 60%70%，第四周可达90%以上，动态观察WR持续超过参考值，或较原效价升高4倍以上更有价值 假阳性结核病、风湿病 假阴性早期使用抗生素及免疫抑制

21、剂治疗 免疫功能检查免疫功能检查自身免疫检测自身免疫检测感染免疫检测感染免疫检测肿瘤标志物检测肿瘤标志物检测(tumor marker)器官与骨髓移植的检测器官与骨髓移植的检测 病毒肝炎血清标志物病毒肝炎血清标志物其它其它 n肿瘤细胞分泌的标志物：蛋白质类、糖脂类、酶类、激素类等n宿主产生的标志物：TNF、SFn不进入循环体液的标志物：胎儿早期肝脏和卵黄囊合成的血清糖蛋白，当肝细胞或生殖腺胚胎细胞恶变，基因激活，细胞合成AFP增加。参考值：20ng/ml意义：1：原发性肝癌的诊断与鉴别诊断，10%阴性。2：生殖腺胚胎癌、胃癌、胰腺癌可升高。3：动态检测原发性肝癌治疗前后病情变化 4：孕妇可升高

22、胎儿早期消化管和一些组织合成，孕6月后减少，出生后极低。生理上孕妇可升高。参考值：15ng/ml意义：1：90%胰腺癌、74%结肠癌、60%乳腺癌、肺癌等常明显升高。2：某些良性肿瘤和良性病变：直肠息肉；胰腺炎、结肠炎、肝脏疾病、哮喘可轻度升高。3：动态观察，判断恶性肿瘤的预后；疾病活动好转 4：其他体液免疫功能检查免疫功能检查 感染免疫检测感染免疫检测 肿瘤标志物检测肿瘤标志物检测自身免疫检测自身免疫检测器官与骨髓移植的检测器官与骨髓移植的检测 病毒肝炎血清标志物病毒肝炎血清标志物其它其它 循环免疫复合物检测Circulating immune complexes冷球蛋白检测Cryoglobulinemia丙种反应性蛋白检测C-reactive protein species（一）循环免疫复合物（一）循环免疫复合物 （circulating imunocomplex,CIC）体内游离抗原与相应的抗体形成抗原抗体复合物，其中分子量小的复合物（19S）可在血循环中被检测 CIC增高见于自身免疫病(AID)、感染(infection)、肿瘤(tumor)、移植(transplantation)、变态反应(allergy)等