荧光PCR法检测GBS的临床意义课件.pptx

1、荧光法检测 的临床意义国家地方联合工程实验室钟菲菲族链球菌的介绍世纪年代国外学者 报道了例死于引起的产后心内膜炎病例,由此证实 了 为 人 类 致 病 菌。世纪年代首次发现其可以导致严重的新生儿感染，引起新生儿死亡。世纪年代，已被证实为围产期母婴感染的主要致病菌之一，在围产医学中占有不可忽视的地位。表面蛋白质荚膜多糖(抗原)肽聚糖磷壁酸族链球菌()学名无乳链球菌，为革兰氏阳性球菌，寄居于阴道和直肠，属于条件致病菌。族链球菌的介绍根据其是否溶血分：不完全溶血、完全溶血、不溶血种。根据其致病血清分：、和，其毒力荚膜多糖抗原、脂磷壁酸、神经氨酸酶等有关（发达国家（）发展中国家、（）。(分娩前五周内检

2、测，阴性预测值为)。健康女性 的生殖道和消化道中存在菌落,而且种族、人群有明显区别。定植表现为一过性,间歇性或持久性,导致孕妇不同时期检测结果不同。性生活活跃,多次妊娠,妊娠期间糖尿病等因素更容易获得。族链球菌流行病学（1535%1535%）一般健康良好的并不致病。（约（约25%25%）早产，胎膜早破，泌尿系感染、胎膜感染、宫内膜感染和创伤感染。（约（约50%50%）约约1 12%2%新生儿发病新生儿发病新生儿肺炎，败血症和脑膜炎，发育障碍，可导致新生儿听力和视力受损以及脑瘫等后遗症。族链球菌危害母婴传播是新生儿母婴传播是新生儿感染的主要途径，感染的主要途径，母婴传播发生在临母婴传播发生在临产

3、，新生儿暴露于产，新生儿暴露于有族链球菌产道，有族链球菌产道，可吞进和吸入细菌。可吞进和吸入细菌。阳性的孕妇中新生儿感染率对孕妇的危害 抑制乳酸杆菌抑制乳酸杆菌生长，值升高，生长，值升高，利于杂菌。利于杂菌。胎膜早破羊膜腔胎膜早破羊膜腔感染，早产、晚感染，早产、晚期先兆流产。期先兆流产。对绒毛膜的对绒毛膜的吸附力及穿透力最吸附力及穿透力最强，宫内感染的主要原因。强，宫内感染的主要原因。胎膜表面张力降低炎性细胞吞噬作用细菌代谢蛋白质水解酶“释放”磷酸酯酶A2，前列腺素，细胞因子IL-1、IL-6、IL-8、IL-12刺激子宫收缩 对孕妇的危害关于例高危孕妇的研究感染患者治疗后的情况如下:早产例中

4、有例感染经治疗后，其中例至周后分娩，时间最长个月，新生儿体重达 ；胎膜早破早产例中有例感染经治疗后，其中例延长了孕周，最长延长天，达足月分娩；晚期先兆流产例中有例感染，经过治疗，例早产，孕周增长最长的达周（周入院至周剖宫产结束分娩，早产儿体重 经抢救存活，随访个月目前情况良好）。：经干预治疗后,可延长孕周,使胎儿获得宫内生长机会，增加存活率和生存质量,降低极低出生体重儿和围产儿死亡率,减少母婴感染率及其并发症。参考文献：中国妇幼保健年第卷 族溶血性链球菌感染与胎膜早破、早产、晚期先兆流产的关系与干预刘剑等.对孕妇的危害对新生儿的危害早发型：0-6 天迟发型：7-89 天症状包括呼吸窘迫，呼吸暂

5、停，以败血症最症状包括呼吸窘迫，呼吸暂停，以败血症最常见，肺炎和脑膜炎是早发型的形式常见，肺炎和脑膜炎是早发型的形式早期病死率高达，近年来，为早期病死率高达，近年来，为无症状带菌母亲分娩传播。无症状带菌母亲分娩传播。主要为足月儿主要为足月儿 和和 近近 足足 月儿月儿 。早发型感染危害早发型感染危害.:.对新生儿的危害新生儿族链球菌感染死亡例分析 新生儿出生后吃奶差，反应欠佳；出生后情况加重，四肢微凉、体温正常；出生后呼吸急促、反应低下、刺激不哭。以败血症、呼吸功能不全、新生儿肺炎急转儿科；出生后病情进一步加重，提示严重感染、酸中毒、低钙及心肌受损；出生后出现呼吸表浅、暂停等；出生后呼吸首先停

6、止，然后心跳停止，经抢救无效死亡。资料来源：中国实用妇科与产科杂志年月第卷第期资料来源：中国实用妇科与产科杂志年月第卷第期 新生儿族链球菌感染死亡例分析新生儿族链球菌感染死亡例分析北京儿童医院新生儿肺炎死亡病例中族链球菌的检测收集 例年至年间新生儿肺炎死亡病例回顾研究。死亡的例肺炎患儿，有例查实阳性感染，高达。例阳性患儿，有名，名。早发型中名为早产儿。例患儿中，例有完整临床资料。其中例可查到一项或多项与感染有关的危险因素，如早产，低体重，胎膜早破，羊水异常等，检测结果均为阳性。结论：是新生儿肺炎死亡病例中的重要病原，尤其在早发型肺炎病例中感染占很大比重。中华儿科杂志年月第卷第期新生儿肺炎死亡病

7、例中族链球菌的检测新生儿误诊分析例 西南某三甲军区医院 政委孙女出生后出现感染，经临床科室、检验科经验判断，疑似感染，建议临床使用万古霉素。政委不认可该结果。后经过荧光法快速检测，确诊为族链球菌感染，而临床的症状与链球菌感染表现相近，经过族链球菌治疗方案后，天即痊愈。对新生儿的危害 常表现为隐匿发病，最初为脑膜炎，常表现为隐匿发病，最初为脑膜炎，如发烧，昏睡呕吐等，多伴败血症如发烧，昏睡呕吐等，多伴败血症 病死率约，但存活者病死率约，但存活者 严重后遗症，痴呆、脑积水，智力障碍等。严重后遗症，痴呆、脑积水，智力障碍等。感染一般系医院内感染，主要是感染一般系医院内感染，主要是 型引起型引起 发病

8、多为产科并发症的早产儿和低体重发病多为产科并发症的早产儿和低体重 儿，发病率是足月的倍，若发生脓毒血症，儿，发病率是足月的倍，若发生脓毒血症，病死率高。病死率高。晚发型感染危害晚发型感染危害新生儿族链球菌脑膜炎例临床分析和随访温州某医院年至年月收治的例新生儿族链球菌脑膜炎的临床资料进行回顾性分析。例患儿治愈例，好转自动出院例，因严重并发症死亡例。出院个月后例早发型伴脑积水早产儿在家中死亡。例随访至个月：例早发型患儿中，生长发育正常例，运动发育落后例；例晚发型患儿，生长正常发育例，运动发育落后例，癫痫发作例。结论：新生儿脑膜炎住院时间长，死亡率高，易出现神经系统并发症和后遗症。中华儿科杂志年月第

9、卷第期年代美国新生儿的发病率第一组委会AAP的报表CDC准则草案公布共识准则B组链球菌协会成立年的预防共识准则年预防的共识准则概述了两种方法，对确定需要的妇女。基础筛查：在周的胃肠道，泌尿生殖道基于风险的方法：早产，胎膜早破小时 或产时发热美国预防共识准则2010年美国疾病预防控制中心对早发性B族链球菌病的预防指南指出：1、在35-37孕周的孕妇的普遍筛查2、青霉素是首选药物，氨苄青霉素也可进行替代3、不推荐分娩期间常规使用抗生素预防感染基数大，正常寄居产妇影响新生儿：早发、晚发疾病；死亡率高纠纷、风险及时筛查干预美国：发病率、死亡率大幅下降中国开展推广年年年年孕前和孕期保健指南（第一版）：建

10、议在孕周进行族链球菌的筛查。围产期预防指南：所有孕妇于周筛查。早产临床诊断与治疗指南：筛查宫颈阴道感染有可能预防早产。胎膜早破的诊断与处理指南：明确指出胎膜早破是 族溶血性链球菌上行性感染的高危因素，是导致孕妇产时及产褥期感染、胎儿感染及新生儿感染的重要病原菌，应重视感染的防治。中华医学会妇产科学分会美国疾病预防控制中心建议权威指南共识权威指南共识全球常规筛查的地区中国部分省份及香港，日本等中国部分省份及香港，日本等德国、法国、西班牙、波兰、瑞士、德国、法国、西班牙、波兰、瑞士、意大利、比利时、捷克、斯诺文尼亚意大利、比利时、捷克、斯诺文尼亚等等美国、加拿大美国、加拿大澳大利亚澳大利亚肯尼亚肯

11、尼亚阿根廷阿根廷方法方法原理原理优点优点缺点缺点培养法培养法细菌培养细菌培养,形态鉴定形态鉴定,生化鉴定生化鉴定易开展易开展耗时长以上培养难度高耗时长以上培养难度高,灵敏度差，容易漏检灵敏度差，容易漏检免疫方法免疫方法彩色乳胶免疫层析法彩色乳胶免疫层析法胶体金胶体金快速、简便，无快速、简便，无需任何辅助仪器需任何辅助仪器设备设备灵敏度和特异性较差灵敏度和特异性较差 只取一个部位，易漏只取一个部位，易漏检检微生物自动微生物自动分析鉴定系分析鉴定系统统生物与计算机的联合生物与计算机的联合应用应用全面的自动化全面的自动化时间长，成本高，设备时间长，成本高，设备昂贵昂贵荧光荧光采用技术结合分子荧采用技

12、术结合分子荧光标记探针技术，快光标记探针技术，快速、准确地检测速、准确地检测快速内出结果快速内出结果 灵敏度高灵敏度高特异性强特异性强重复性高重复性高需有实验室需有实验室检测方法检测方法 在羊血培养基上培养后的菌落：形成灰白、光滑、圆形突起小菌落 有明显的溶血圈。培养法培养法 荧光仪给出客观的判别标准阳性弱阳阴性检测方法检测方法族链球菌核酸检测试剂盒（荧光法）族链球菌核酸检测试剂盒（荧光法）优点：简便快捷、灵敏度高（物理破碎）重复性好、特异性强（分子信标）闭管操作、避免污染国内首家，发明专利 核酸检测试剂盒适用核酸检测试剂盒适用生殖道分泌物生殖道分泌物和直肠分泌物和直肠分泌物标本类型标本类型荧

13、光法的取材方法新生儿鼻咽拭子的取材方法新生儿鼻咽拭子的取材方法感染检查时机及治疗方案新生儿：母亲阳性、出生后有高危疑似感染症状、同产房内有阳性者不需要干预（）对症治疗（）产时高危因素：分娩时 周，产时发热,胎膜早破小时,进行检测 不需要干预（）立即干预（）不需要干预孕周取阴道和直肠拭子检测上次新生儿感染史本次妊娠有菌尿症（）立即干预产前干预有症状无症状（）预防医疗指南：抗生素治疗方案有无青霉素过敏有无青霉素过敏青霉素，首次剂量万单位青霉素，首次剂量万单位,然然后每小时后每小时万单位，直至分万单位，直至分娩或者氨苄西林，首次剂量，娩或者氨苄西林，首次剂量，然后每个小时，直到分娩然后每个小时，直到

14、分娩病人在接受青霉素或头孢病人在接受青霉素或头孢菌素时有无出现下列任一菌素时有无出现下列任一症状？症状？过敏症、血管性水肿、呼过敏症、血管性水肿、呼吸窘迫、荨麻疹吸窘迫、荨麻疹头孢唑啉，首次剂量，头孢唑啉，首次剂量，然后每个小时，直到分然后每个小时，直到分娩娩是否对红霉素和克林是否对红霉素和克林霉素敏感霉素敏感万古霉素每小时（静脉万古霉素每小时（静脉注射）直至分娩注射）直至分娩克林霉素每小时（静脉克林霉素每小时（静脉注射）直至分娩注射）直至分娩国内治疗推荐国内治疗推荐中华医学会妇产科学分会产科学组青霉素青霉素 首次剂量首次剂量 万单位静万单位静脉滴注脉滴注 万单位万单位 直至分娩。直至分娩。或

15、氨苄青霉素或氨苄青霉素,负荷量负荷量 静脉静脉滴注滴注,然后每然后每 小时小时 的剂量的剂量静脉滴注直至分娩静脉滴注直至分娩对青霉素过敏者则选对青霉素过敏者则选用头孢唑啉用头孢唑啉 作为起始作为起始剂量静脉滴注剂量静脉滴注,然后每然后每 小时小时 直至分娩。直至分娩。对头孢菌素类过敏者对头孢菌素类过敏者则用红霉素则用红霉素,每每 小时小时 次静脉滴注次静脉滴注,或克林霉或克林霉素素 静脉滴注静脉滴注,每每 小时小时 次。次。快速检测的临床意义避免抗生素滥用常规筛查阳性率提高，避免漏诊,避免医患纠纷为胎膜早破、早产、晚期先兆流产治疗提供诊断、治疗监控依据GBS对于产前高危症状，可及时诊断延长孕周,增加存活率和生存质量,减少母婴感染率及其并发症。谢谢！