临床血液分析技术基础课件.ppt
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- 临床 血液 分析 技术 基础 课件
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1、鄂钢医院检验科鄂钢医院检验科 梅玉峰梅玉峰内容内容一、概述一、概述二、标本采集二、标本采集三、测定方法原理三、测定方法原理四、直方图四、直方图五、参考区间五、参考区间六、临床意义六、临床意义七、七、CRPCRP在临床血液分析应用在临床血液分析应用一、概述一、概述什么是临床血液学化验项目名称:血常规(血化验项目名称:血常规(血Rt)Rt)临床血液学在所有的医学实验室里扮演着最重要的角色,临床血液学在所有的医学实验室里扮演着最重要的角色,是医生在做出诊断前最先开出的化验项目。是医生在做出诊断前最先开出的化验项目。化验目的:检测全血各细胞成分的数量、比例、体积、化验目的:检测全血各细胞成分的数量、比
2、例、体积、结构和形态、分类情况及异常细胞等结构和形态、分类情况及异常细胞等血液的一般检查(血常规检查)是对血液血液的一般检查(血常规检查)是对血液中的有形成分中的有形成分(红细胞、白细胞和血小板(红细胞、白细胞和血小板)的数量和质量进行检测。包括全血细胞计的数量和质量进行检测。包括全血细胞计数和白细胞的分类计数。数和白细胞的分类计数。CBC+DF+CBC+DF+RetRet二、标本采集二、标本采集采血顺序采血顺序(according to CLSICLSI recommendation)(安安 全全 头头 盖盖)促凝剂+分离胶 促凝剂 3.2%柠檬酸钠 与血样比19 肝素锂 肝素钠 EDTA-
3、K2 EDTA-K3 氟化钠+草酸钾 氟化钠+EDTA 3.8%柠檬酸钠 与血样比14标本采集与要求标本采集与要求抗凝剂抗凝剂 :EDTA-K2EDTA-K2静脉采血方法静脉采血方法 :4 4小时内测定小时内测定毛细血管采血方法毛细血管采血方法 :半小时内测定:半小时内测定手指血与静脉血有差异,条件允许尽可能静脉手指血与静脉血有差异,条件允许尽可能静脉采血采血尽可能同一体位(血红蛋白、血细胞比容、红尽可能同一体位(血红蛋白、血细胞比容、红细胞计数于站位时增加)、一定时间和近似生细胞计数于站位时增加)、一定时间和近似生理条件下采血理条件下采血三、测定方法原理三、测定方法原理血细胞分析:计数+分类
4、 PLT PLT 血小板参数血小板参数 PLTPLT计数计数 MPV MPV 平均血小板体积平均血小板体积 Pct Pct 血小板压积血小板压积 PDW PDW 血小板分布宽度血小板分布宽度WBC WBC 白细胞参数白细胞参数 WBCWBC计数计数 WBCWBC分类计数分类计数 NE NE 中性粒细胞中性粒细胞 LY LY 淋巴细胞淋巴细胞 MOMO单核细胞单核细胞 EOEO嗜酸性粒细胞嗜酸性粒细胞 BasoBaso嗜碱性粒细胞嗜碱性粒细胞RBC RBC 红细胞参数红细胞参数 RBCRBC计数计数 HGB HGB 血红蛋白血红蛋白 Hct Hct 细胞压积细胞压积 RDW RDW 红细胞分布宽
5、度红细胞分布宽度MCV,MCH,MCHCMCV,MCH,MCHCRET RET 网织红细胞网织红细胞 NRBC NRBC 有核红细胞有核红细胞 数量:数量:手工计数法手工计数法 仪器法(电阻抗分析为主)仪器法(电阻抗分析为主)分类:分类:显微镜人工分类法显微镜人工分类法 自动分类计数仪分类方法自动分类计数仪分类方法 测定方法测定方法库尔特原理库尔特原理“当一个不良导体颗粒,例如血细胞,通过两个电极之间时,导当一个不良导体颗粒,例如血细胞,通过两个电极之间时,导致电路的电阻抗发生变化。致电路的电阻抗发生变化。”-华莱士华莱士.库尔特库尔特,1947根据血细胞根据血细胞非传导性非传导性的性质的性质
6、,以对电解质溶液中悬浮颗,以对电解质溶液中悬浮颗粒在通过计数小孔时引起的粒在通过计数小孔时引起的电阻变化进行检测为基础,电阻变化进行检测为基础,来进行血细胞计数和体积测来进行血细胞计数和体积测定,这种方法也被称为定,这种方法也被称为库尔特原理库尔特原理血细胞分析仪类别(WBCWBC)三分类血细胞分析仪)三分类血细胞分析仪库尔特原理库尔特原理分类分类WBCWBC三分群:三分群:LY,(Baso),MO,(EO),NELY,(Baso),MO,(EO),NE(WBCWBC)五分类血细胞分析仪)五分类血细胞分析仪VCS VCS 3D3D2D2D库尔特原理库尔特原理+细胞化学染色细胞化学染色激光流式细
7、胞检测激光流式细胞检测+细胞化学染色细胞化学染色MAPSSMAPSS(多角度偏振光散射)(多角度偏振光散射)VCSVCS技术技术是库尔特五分类血球仪对是库尔特五分类血球仪对白细胞分类的专利技术,即分类时白细胞分类的专利技术,即分类时不需传统的染色方法,只采用三个不需传统的染色方法,只采用三个物理量物理量VOLUMEVOLUME(体积)(体积)、CONDUCTIVITYCONDUCTIVITY(传导性)(传导性)、SCATTERSCATTER(激光)(激光)将五种白细胞分将五种白细胞分开的技术。开的技术。流体动力聚焦的流式通道流体动力聚焦的流式通道 近于原态的白细胞在鞘液的包近于原态的白细胞在鞘
8、液的包裹下通过流式通道道检测;将重裹下通过流式通道道检测;将重叠限制到最低限度。叠限制到最低限度。三种能量同时作用于一个细胞,总三种能量同时作用于一个细胞,总共计数共计数81928192个颗粒。个颗粒。VCSVCS技术技术四、直方图四、直方图直方图的由来直方图的由来在小孔计数时仪器获得细胞的数量和大小在小孔计数时仪器获得细胞的数量和大小(体积体积)的的信息,再进一步分类整理,得到在各种不同体积信息,再进一步分类整理,得到在各种不同体积下相应的数量分布,反应在坐标上下相应的数量分布,反应在坐标上坐标横轴表示细胞大小,以坐标横轴表示细胞大小,以fl(fl(飞升飞升)为单位为单位坐标纵轴表示相应数量
9、坐标纵轴表示相应数量直方图的应用直方图的应用 一一.白细胞直方图形白细胞直方图形(1)(1)可显示检测标本中是否可显示检测标本中是否存在形态异常细胞或各类细胞比例异常存在形态异常细胞或各类细胞比例异常,决定是决定是否推片检查否推片检查 (2)(2)根据图形根据图形,判断仪器工作状态;判断仪器工作状态;二二.血小板直方图血小板直方图可帮助分析被检查的血小板可帮助分析被检查的血小板体积大小分布状态体积大小分布状态,帮助判断结果能否报告;帮助判断结果能否报告;三三.红细胞直方图红细胞直方图可帮助判断治疗效果可帮助判断治疗效果,疾病疾病的诊断和鉴别诊断有较大的临床价值。的诊断和鉴别诊断有较大的临床价值
10、。红细胞直方图红细胞直方图 典型的红细胞直方图上,可以看到两个细胞群体:典型的红细胞直方图上,可以看到两个细胞群体:1 1细胞主群细胞主群 从从50 50 fLfL开始,两侧对称呈正态分布的曲线,又称开始,两侧对称呈正态分布的曲线,又称“主主峰峰”;2 2大细胞群大细胞群 在主群右侧,又称在主群右侧,又称“足趾部足趾部”,是一些红细胞二聚体、,是一些红细胞二聚体、三聚体、多聚体的混合物。三聚体、多聚体的混合物。红细胞直方图应用举例红细胞直方图应用举例(1(1)-巨幼红细胞性贫血巨幼红细胞性贫血大细胞性贫血,直方图上表现为右移大细胞性贫血,直方图上表现为右移红细胞直方图应用举例红细胞直方图应用举
11、例(2(2)-缺铁性贫血缺铁性贫血小细胞性贫血,直方图上表现为左移小细胞性贫血,直方图上表现为左移红细胞直方图应用举例红细胞直方图应用举例(3(3)-再生障碍性贫血再生障碍性贫血(输血后输血后)输血后,红细胞表现出两个细胞亚群,在直方图上表现为两个细胞峰。输血后,红细胞表现出两个细胞亚群,在直方图上表现为两个细胞峰。该病例中左峰为输入的正常人红细胞峰;右峰为患者自身的红细胞峰。该病例中左峰为输入的正常人红细胞峰;右峰为患者自身的红细胞峰。白细胞直方图白细胞直方图小细胞小细胞单个核细胞单个核细胞粒细胞粒细胞数数量量体积体积fl白细胞直方图亚群分布白细胞直方图亚群分布在上图,可以看到三个明显的亚群
12、分布:在上图,可以看到三个明显的亚群分布:小小 细细 胞胞 群:群:以淋巴细胞为主,分布在以淋巴细胞为主,分布在35 35 9090fLfL;单个核细胞群单个核细胞群 :以单核细胞为主,分布在以单核细胞为主,分布在90 90 160160fLfL;粒粒 细细 胞胞 群群 :以中性粒细胞为主,分布在以中性粒细胞为主,分布在160 160 450450fLfL。粒细胞峰明显变大,淋巴细胞峰明显变小。在严重的细菌感染时,如果中性粒细胞粒细胞峰明显变大,淋巴细胞峰明显变小。在严重的细菌感染时,如果中性粒细胞发生中毒性改变,粒细胞峰可发生中毒性改变,粒细胞峰可向左移动或向右延伸向左移动或向右延伸白细胞直
13、方图应用举例白细胞直方图应用举例(1 1)-中性粒细胞比例增高或淋巴细胞比例减低中性粒细胞比例增高或淋巴细胞比例减低白细胞直方图表现为粒细胞峰明显变小,淋巴细胞峰明显变大白细胞直方图表现为粒细胞峰明显变小,淋巴细胞峰明显变大 白细胞直方图应用举例白细胞直方图应用举例(2)(2)-中性粒细胞比例减低或淋巴细胞比例增高中性粒细胞比例减低或淋巴细胞比例增高在单个核细胞区出现一个明显的峰,其大小与单核细胞比例增高的程度有关。增在单个核细胞区出现一个明显的峰,其大小与单核细胞比例增高的程度有关。增高仅表示高仅表示可能可能是单核细胞增高,也是单核细胞增高,也可能可能是嗜酸性粒细胞或幼稚细胞等,因此,必是嗜
14、酸性粒细胞或幼稚细胞等,因此,必须涂片染色后经显微镜确认。须涂片染色后经显微镜确认。白细胞直方图应用举例白细胞直方图应用举例(3 3)-单核细胞比例增高单核细胞比例增高血小板的细胞直方图血小板的细胞直方图 可反映血小板数及可反映血小板数及MPVMPV等参数。等参数。可判断影响因素可判断影响因素 血小板细胞直方图血小板细胞直方图血细胞分析仪通常在血细胞分析仪通常在2 230fl30fl范围分析血小板,正常血小板主要集中在于范围分析血小板,正常血小板主要集中在于2 220fl20fl范围内,一般范围内,一般在在252530fl30fl之间的某一点与横坐标重合,直方图是一条呈对数正态分布的之间的某一
15、点与横坐标重合,直方图是一条呈对数正态分布的光滑曲线光滑曲线。曲线峰右侧右移,在大于曲线峰右侧右移,在大于30fl30fl的某一点与横坐标重合,的某一点与横坐标重合,MPVMPV明显增高。如果血小板数明显增高。如果血小板数减低,可见于减低,可见于ITPITP及体外循环时;如果血小板数升高,见于脾切除术后。如果血小板及体外循环时;如果血小板数升高,见于脾切除术后。如果血小板数正常,可见于慢性髓性白血病、骨髓纤维化等数正常,可见于慢性髓性白血病、骨髓纤维化等 血小板直方图应用举例血小板直方图应用举例(1 1)-大血小板直方图大血小板直方图曲线峰右侧左移,在小于曲线峰右侧左移,在小于20fl20fl
16、的某一点与横坐标重合,的某一点与横坐标重合,MPVMPV值明显减低。如果血小板数值明显减低。如果血小板数减低,可见于减低,可见于AIDSAIDS病毒感染和脾亢等;如果血小板数正常,可见于慢性再障;如果血病毒感染和脾亢等;如果血小板数正常,可见于慢性再障;如果血小板数升高,可见于反应性血小板增多症。小板数升高,可见于反应性血小板增多症。血小板直方图应用举例血小板直方图应用举例(2 2)-小小血小板直方图血小板直方图曲线峰变低,如果以曲线峰变低,如果以 20 20 20个的个的血小板聚集为主,则曲线峰血小板聚集为主,则曲线峰变低、变平,右侧抬高不明变低、变平,右侧抬高不明显。此时,在白细胞直方图显
17、。此时,在白细胞直方图的的35fl35fl处有一个小峰。见于处有一个小峰。见于标本采集不当或标本采集不当或EDTAEDTA依赖性依赖性血小板聚集等血小板聚集等 血小板直方图应用举例血小板直方图应用举例(3 3)-聚集的血小板直方图聚集的血小板直方图在曲线峰的右侧抬起并上扬,不与横坐标重合。可见于在曲线峰的右侧抬起并上扬,不与横坐标重合。可见于IDAIDA或发生溶血的标本或发生溶血的标本。血小板直方图应用举例血小板直方图应用举例(4 4)-小红细胞干扰的血小板直方图小红细胞干扰的血小板直方图 分析仪白细胞分类与镜检关系分析仪白细胞分类与镜检关系 1.1.镜检是细胞形态分析的最终手段镜检是细胞形态
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