(整理)HE4的临床应用课件.ppt

1、(最新整理)HE4的临床应用2021/7/2612021/7/262第一部分：概述1、肿瘤标志物的定义、分类2、肿瘤标志物的实验室检测3、肿瘤标志物检测的应用原则第二部分：HE4的临床应用1、卵巢癌研究现状2、HE4的生物学特性3、HE4临床应用进展3、HE4参考值调查及应用评价2021/7/263思考题1、肿瘤标志物的定义2、请写出敏感性、特异性、阳性预测值、阴性预测值的计算公式3、HE42021/7/264一般肿瘤细胞在癌前病变时，会产生表达肿瘤异常蛋白质，多数肿瘤从癌前病变发展到0.5 cm 以上的占位性病变需要 510年的时间。如果能够在这段时间内运用肿瘤标志物检测技术，早期检测到患者

2、血液中肿瘤所表达的异常蛋白质，就可以早期发现、早期诊断，并获得早期治疗的良好效果。2021/7/265人们对肿瘤标志物的检测寄予了极大的希望。那么肿瘤标志物测定能否达到早期诊断的目的？能否对一般人群进行筛查？其临床意义到底有多大？评价有多高？目前对肿瘤标志物在肿瘤诊断中的作用认识和评价不一致。2021/7/266肿瘤标志物（tumor marker，TM）是指在恶性肿瘤发生和增殖过程中，由肿瘤细胞的基因表达而合成分泌的或是由机体对肿瘤反应而异常产生和/或升高的,反映肿瘤存在和生长的一类物质，它包括蛋白质、激素、酶（同工酶）、多胺及癌基因产物等。TM存在于肿瘤患者的血液、体液、细胞或组织中，可用

3、生物化学、免疫学及分子生物学等方法测定，且对肿瘤的辅助诊断、鉴别诊断、观察疗效、监测复发以及预后评价具有一定的价值。2021/7/2671846年 本-周蛋白1940年 酸性磷酸酶1960年 免疫测定法1963年 甲胎蛋白1965年 癌胚抗原1975年 单克隆抗体1980年 CA125，PSA，糖类抗原1970-1980年 肿瘤基因及抑癌基因2001年 芯片，神经网络，多参数分 析，生物传感器，等Eleftherios P.Diamandis,et al.Tumor Markers:Physiology,Pathobiology,Technology,and Clinical Applicat

4、ions.AACC Press.2002:p4.2021/7/2681978年 Herberman在美国国立癌症研究所召开的 人类肿瘤免疫诊断会上提出了TM的概念1979 英国第7届肿瘤发生生物学和医学会议 TM 被确认并应用临床 2021/7/269 1、按肿瘤标志物的来源2、按肿瘤标志物本身的化学性质和免疫学特性3、按存在部位分类2021/7/26101、肿瘤的特异性标志物，指仅有某一种肿瘤所 产生的特异性物质。2、肿瘤辅助标志物，在一类组织类型相似而性 质不同的肿瘤发生时，其水平都有升高。2021/7/2611.由肿瘤细胞分泌的标志物由肿瘤细胞分泌的标志物）分化抗原标志物）分化抗原标志物

5、）胚胎抗原标志物（）胚胎抗原标志物（AFPAFP、CEACEA等）等）糖脂或糖蛋白类）糖脂或糖蛋白类(CA19-9(CA19-9、CA15-3CA15-3、CA242CA242等）。等）。）同工酶类标志物（）同工酶类标志物（NSE,PAP,CK-BBNSE,PAP,CK-BB等）等）5 5）激素类标志物（）激素类标志物（HCG,ACTHHCG,ACTH等）等）6 6）肿瘤相关抗原（）肿瘤相关抗原（PSAPSA，TPATPA等）等）7 7）基因类标志物（）基因类标志物（P53P53、C-MYCC-MYC、BCLBCL2 2）8 8）其它：多胺、唾液酸等）其它：多胺、唾液酸等2021/7/2612

6、.宿主反应标志物宿主反应标志物 血清铁蛋白、免疫复合物、同工酶、血清铁蛋白、免疫复合物、同工酶、白细胞介素受体、肿瘤坏死因子等白细胞介素受体、肿瘤坏死因子等 SF SF、-MG-MG、IL-2RIL-2R、TNFTNF2021/7/2613蛋白类标志物糖类标志物酶类标志物激素类标志物基因类标志物2021/7/2614甲胎蛋白（AFP）癌胚抗原（CEA）2-微球蛋白（2-MG）铁蛋白（SF）细胞角蛋白19片段（CYFRA21-1）鳞状上皮癌相关抗原（SCC-Ag）前列腺特异抗原（PSA）组织多肽抗原（TPA）糖类抗原（CA50、CA125、CA15-3、CA199、CA242、CA72-4）神经

7、元特异性烯醇化酶（NSE）前列腺酸性磷酸酶（PAP）激素类肿瘤标志物(-HCG、ACTH)蛋白类肿瘤标志物糖脂类肿瘤标志物酶及同工酶类肿瘤标志物激素类肿瘤标志物2021/7/2615组织肿瘤标志物组织肿瘤标志物血浆血浆/血清肿瘤标志物血清肿瘤标志物2021/7/2616 组织肿瘤标志物：组织肿瘤标志物：位于细胞膜上或细胞内 1、分化标志,激素受体：如 ER,PR2、增殖标志：端粒酶，生长因子及其受体，CD 抗原3、转移潜在性标志：蛋白酶，基因产物，粘附因子4、癌基因及抗癌基因：myc，H-ras，P53，等2021/7/2617血浆血浆/血清肿瘤标志物血清肿瘤标志物1、胚胎类抗原；如 CEA,

8、AFP2、肿瘤相关糖脂及糖蛋白 糖决定簇：CA19-9，CA242 上皮粘蛋白：CA15-3 糖蛋白：CA125,PSA3、激肽，酶，蛋白等 激肽：ACTH，GH 酶：NSE 蛋白：B-微球蛋白，CYFRA-21-12021/7/26182021/7/2619优点费用较低，应用较广固相分离干扰小无放射污染试剂有效期长有酶标仪即可开展缺点需要孵育结果受环境及人为因素影响2021/7/2620优点优点标记物分子小，稳定性好，发光强度高，时间长高灵敏度,最高检测限值可达10-15g/ml-10-18g/ml标准化程度高,快速、简便、重复性好无放射污染缺点缺点仪器昂贵检测成本高封闭系统，开展项目受试剂

9、供应的制约2021/7/2621具有高通量、大信息量的特点主要应用于药物筛选，基因测试，基因定位等方面蛋白芯片在临床应用尚需时日产业化仍然有技术障碍目前基因芯片主要用于研究2021/7/2622敏感性敏感性阳性结果在肿瘤患者中的比例 敏感性敏感性=特异性特异性在非肿瘤患者个体中(如健康人或良性疾病患者),阴性实验结果的比例 特异性特异性=真正阳性结果数患病人群总数真正阴性结果数对照组人群总数2021/7/2623n预测值（Predictive Value）阳性预测值：阳性预测值：在阳性结果的病人中，癌症存在的可能性 PPV 阴性预测值：阴性预测值：在阴性结果病人中,非癌症存在的可能性 NPV=

10、真正的阳性结果数/阳性结果总数真正的阴性结果数/阴性结果总数2021/7/2624 浓度浓度肿瘤患者肿瘤患者 真阴性真阴性 真阳性真阳性界值界值假阳性假阳性假阴性假阴性正常人群正常人群敏感性=TP/(TP+FN)特异性=TN/(TN+FP)阳性预测值=TP/(TP+FP)阴性预测值=TN/(TN+FN)2021/7/2625特异性100%灵敏度100%器官特异性与肿瘤大小或分期有关能进行疗效监测与预后有关具有可靠的预测价值 陈允硕.中华医学检验杂志 2000年;23(1)但如正确合理使用，仍有很大临床价值，关键是要正确评价和应用。2021/7/2626体内因素体内因素：-肝、肾功能异常致AFP

11、，CEA升高 -强烈的治疗作用(手术、放疗、化疗)和连续的细胞死亡 -肿瘤部位供血障碍 -药物 -存在嗜异性抗体 -抗原异质性体外因素体外因素 -血液的稀释作用 -污染：唾液污染致SCC升高；溶血致NSE升高试剂盒因素试剂盒因素 -使用的抗体作用位点不同 -HOOK效应陈允硕.中华医学检验杂志 2000年,23(1).2021/7/2627肿瘤标志物的检测能否达到早期诊断的效果？在人群中进行普查或筛查的价值？其临床意义如何解释？怎样规范与合理应用？目前存在诸多争议。2002年至2004年时，中华医学会检验医学分会肿瘤标志物专家委员会分别召开3次专家研讨会，起草制定了“肿瘤标志物临床检测的基本原

12、则（建议稿）。2021/7/26281、TM对肿瘤的辅助诊断价值：2、TM的器官定位价值：3、TM在判断肿瘤的大小和临床分期的价值：4、TM在肿瘤监测中的价值：5、TM的联合检测原则：6、同一患者在治疗前后及随访中，应采用同一种方法 和试剂；在更换检测方法和试剂时，应作比对。7、应用TM对高危人群进行筛查时应遵循的原则：2021/7/2629 治疗后TM浓度变化，常有三种类型：（1）TM浓度下降到参考范围，提示肿瘤治疗有效。（2）TM浓度下降但仍持续在参考范围以上，提示有 肿瘤残留和/或肿瘤转移。（3）TM浓度下降到参考范围一段时间后，又重新升 高，提示肿瘤复发或转移。2021/7/2630疗

13、效观察可参照下列标准：无效：TM浓度与治疗前相比下降 50 改善：TM浓度与治疗前相比下降50 有效：TM浓度与治疗前相比下降90 显效：TM浓度下降至临界值以下。2021/7/263102550751001251501752002252500369121518212427术后时间（月）术后时间（月）患者患者D患者患者C患者患者B患者患者A正常水平正常水平手术手术 化疗化疗32肿瘤标志物水平肿瘤标志物水平2021/7/2632TM的定期随访原则：恶性肿瘤治疗结束后，应根据病情对治疗前升高的TM作定期随访监测。不同的TM半寿期不同，所以监测的时间和周期也不同。2021/7/2633肿瘤标志物肿瘤

14、标志物半寿期半寿期参考范围参考范围CEA34天天5ng/mLCA19-98.5天天37UmlAFP45天天10.9ng/mLPSA2.33.2天天4ng/mLHCG1220小时小时2.9mIU/mLCA15-3815天天28U/mlCA1254.8天天35U/mlSCC20分分1.5g/LCYFRA21-14天天80%晚期卵巢癌病人水平升高也见于卵巢癌临床前期无症状患者CA125与超声检查联合使用能提高检测特异性和阳性预测值CA125 的局限性良性妇科疾病患者也有CA125 水平升高某些其它恶性肿瘤患者也有CA125 水平升高检测I 期卵巢癌的灵敏度较低CA1252021/7/2647其它CA

15、125升高的情况良性平滑肌瘤 子宫内膜异位原发性免疫缺陷病 怀孕出血性囊肿 肝病或充血性憩室炎 恶性结肠癌乳腺癌胰腺癌胆管癌肝癌肺癌子宫内膜癌2021/7/2648Cancer Antigen 125（CA125）Bast等人在等人在1981年用卵巢癌细胞株年用卵巢癌细胞株OVCA433免疫小鼠，通过杂交瘤技免疫小鼠，通过杂交瘤技术获得单克隆抗体（术获得单克隆抗体（monoclonal antibody，McAb）OC125，该抗体，该抗体可识别卵巢癌相关抗原可识别卵巢癌相关抗原CA125，用这种单克隆抗体制备的试剂盒随后用，用这种单克隆抗体制备的试剂盒随后用于卵巢癌的临床监测。于卵巢癌的临床

16、监测。2001年年Lloyd研究小组克隆了研究小组克隆了CA125抗原，证实抗原，证实CA125是含有是含有5797个碱个碱基对的跨膜糖蛋白基对的跨膜糖蛋白MUC16，定位于染色体，定位于染色体19p13.2区。区。正常人血清正常人血清CA125（RIA）的阳性临界值为）的阳性临界值为35ku/L。二十多年来，。二十多年来，CA125作为作为上皮性卵巢癌标志物，在临床上得到广泛应用上皮性卵巢癌标志物，在临床上得到广泛应用 2021/7/2649HE4是卵巢癌的一种常见标志物血清HE4 是卵巢癌的早期诊断标志物HE4 和CA125 组合有助于预报匿患卵巢癌的风险性2021/7/2650HE4的生

17、物学特性的生物学特性HE4：人类附睾蛋白：人类附睾蛋白4（Human epididymis protein 4）1、基因：WFDC2，编码蛋白为含有4个2硫键核心的酸性乳清蛋白，属于Whey酸性蛋白家族。2、最初在人的附睾上皮细胞中被发现3、可能具有抗蛋白酶活性目标蛋白酶尚未确认4、在正常的附睾中与精子成熟相关5、在肿瘤的发展中可能具有抗炎作用2021/7/26512021/7/26522021/7/2653仅在正常人的附睾、呼吸道上皮细胞、唾液腺及生殖道表达肺、前列腺、垂体、甲状腺、肾脏低表达1？在卵巢癌中高表达：在浆液性、上皮性及透明状细胞性卵巢癌中高表达。而在未分化性及粘液性卵巢癌中几乎

18、不表达在肺腺癌、个别乳腺腺癌、胰腺癌、子宫内膜癌也可见中度或高表达HE4的表达模式的表达模式Comprehensive analysis of HE4 expression in normal and malignant human tissues.Mary T Galgano1,Garret M Hampton2 and Henry F Frierson Jr12021/7/2654HE4在癌组织的表达2021/7/26552021/7/2656 HE4在早期（在早期（I期）的卵巢癌中的敏感性及期）的卵巢癌中的敏感性及检测卵巢癌总的敏感性均高于检测卵巢癌总的敏感性均高于CA125，是，是卵巢癌敏感及特异的标志物，可用于对卵卵巢癌敏感及特异的标志物，可用于对卵巢癌的早期诊断及辅助监控卵巢癌患者的巢癌的早期诊断及辅助监控卵巢癌患者的治疗情况。治疗情况。英国的一项研究对英国的一项研究对200，000妇女用妇女用30多种多种肿瘤标记物分别单独或与肿瘤标记物分别单独或与CA125联合进行联合进行卵巢癌筛查，卵巢癌筛查，HE4可以使诊断卵巢癌的可以使诊断卵巢癌的敏感度和特异度提高敏感度和特异度提高 2021/7/26572021/7/2658