流式细胞的原理和临床应用培训课件.ppt
- 【下载声明】
1. 本站全部试题类文档,若标题没写含答案,则无答案;标题注明含答案的文档,主观题也可能无答案。请谨慎下单,一旦售出,不予退换。
2. 本站全部PPT文档均不含视频和音频,PPT中出现的音频或视频标识(或文字)仅表示流程,实际无音频或视频文件。请谨慎下单,一旦售出,不予退换。
3. 本页资料《流式细胞的原理和临床应用培训课件.ppt》由用户(晟晟文业)主动上传,其收益全归该用户。163文库仅提供信息存储空间,仅对该用户上传内容的表现方式做保护处理,对上传内容本身不做任何修改或编辑。 若此文所含内容侵犯了您的版权或隐私,请立即通知163文库(点击联系客服),我们立即给予删除!
4. 请根据预览情况,自愿下载本文。本站不保证下载资源的准确性、安全性和完整性, 同时也不承担用户因使用这些下载资源对自己和他人造成任何形式的伤害或损失。
5. 本站所有资源如无特殊说明,都需要本地电脑安装OFFICE2007及以上版本和PDF阅读器,压缩文件请下载最新的WinRAR软件解压。
- 配套讲稿:
如PPT文件的首页显示word图标,表示该PPT已包含配套word讲稿。双击word图标可打开word文档。
- 特殊限制:
部分文档作品中含有的国旗、国徽等图片,仅作为作品整体效果示例展示,禁止商用。设计者仅对作品中独创性部分享有著作权。
- 关 键 词:
- 细胞 原理 临床 应用 培训 课件
- 资源描述:
-
1、流式细胞的原理和临流式细胞的原理和临床应用床应用什么是流式细胞仪?检测流动中细胞(颗粒)的仪器 目标物可以是细胞、细菌或各种微粒0.5um50um范围内流式细胞的原理和临床应用2流式细胞仪原理介绍流式细胞的原理和临床应用3流式细胞仪基本原理示意图流式细胞仪基本原理示意图流式细胞的原理和临床应用4流式细胞仪检测什么信号?细胞抗原抗体荧光激光束流式细胞的原理和临床应用5通过流式细胞仪我们可以得到以下信息 -相对细胞颗粒密度和内部复杂度(SSC)-相对细胞大小(FSC)-染色过细胞的相对荧光强度流式细胞的原理和临床应用6流式细胞仪标本准备染色的一般原则及方法7标本来源:外周血、骨髓、组织块、培养细胞
2、、脱落细胞及其他。以及血清或各类体液样本。流式细胞的原理和临床应用8抗体染色一般方法 外周血白细胞分析:100ul全血 血小板分析:15ul全血(根据样本血小板数量)红细胞分析:1ul全血(根据样本中红细胞数稀释后使用)骨髓:100ul 其他样本,计数后决定使用体积目标细胞数量及检测终浓度:目标细胞数量及检测终浓度:1106/ml流式细胞的原理和临床应用9孵育、溶血、固定孵育、溶血、固定 抗体孵育:室温下避光15分钟(某些情况下如:细胞内因子检测需冰育)溶血:如样本含中有红细胞需溶血 样本溶血后离心上机检测(固定后可放置较长时间)流式细胞的原理和临床应用10流式细胞仪分析报告及图谱流式细胞仪分
3、析报告及图谱 SS(侧向散射光)-反应细胞内物质的多少FS(前向散射光)-反应细胞大小流式细胞的原理和临床应用11设门:选择要分析的细胞群体设定阴性、阳性范围流式细胞的原理和临床应用12目前流式细胞仪临床检测项目目前流式细胞仪临床检测项目流式细胞的原理和临床应用13流式细胞仪的临床应用流式细胞仪的临床应用=HIV免疫分型,CD4绝对计数=白血病和淋巴瘤的免疫分型=肿瘤的细胞周期和倍体分析=网织红细胞计数=细胞移植的交叉配型和免疫状态监测=干细胞计数=残量白血病细胞检查=HLA-B27检查=血小板功能及相关疾病流式细胞的原理和临床应用141、HLA-B27的检测流式细胞的原理和临床应用15强直性
4、脊柱炎(ankylosing spondylistis)意为弯曲的脊柱。它是和种慢性、进行性和炎性疾病,主要累及骶骼关节、脊柱、脊柱骨软组织及四肢关节,表现为椎间盘维环和纤维环附近结缔组织的骨化,椎间动关节和四肢关节滑膜的炎症和增生,严重者可失去劳动能力。强直性脊柱炎是血清阴性脊柱关节病中具有代表性的疾病,临床上曾长期把AS 误认为是类风湿性关节炎的一个亚型,60 年代以来人们才认识到期无论从病因学、遗传学、流行病学和临床表现特点等诸多方面来看,AS 都是一种不同于类风湿性关节炎的独立疾病。就目前的研究文献而言,HLA-B27 与AS 并非绝对相关,有些AS 患者表现为HLA-B27阴性,而且
5、并非所有HLA-B27 阳性者均出现AS 症状。B27与强直性脊柱炎与强直性脊柱炎流式细胞的原理和临床应用16HLA-B27诊断的临床意义强直性脊柱炎强直性脊柱炎90-100%的强直性脊柱炎患者HLAB27为阳性。但是HLA-B27阳性的人群中只有820是强直性脊柱炎。瑞特综合征瑞特综合征6590瑞特综合症患者HLA-B27为阳性。如果HLAB27+个体是非淋菌性尿道炎,那么有20-25%的可能性发展为瑞特综合症,只有1的可能性正常。HLAB27不是该疾病发生的必要条件,但是却与病程发展有紧密联系。“反应性关节炎反应性关节炎”是一种自身限制的少关节型关节炎伴随着革兰氏阴性细菌如杆菌性痢疾,沙门
6、氏菌,弧形杆菌,耶尔森氏菌和至贺氏菌引起的胃肠感染。银屑病关节炎银屑病关节炎-90%的银屑病关节炎联合荐肠关节炎和脊椎炎患者HLA B27阳性。急性前葡萄膜炎急性前葡萄膜炎通常表现为疼痛,畏光和流泪。可能是虹膜感染或结合了睫状体或视网膜萎缩。青少年风湿症青少年风湿症/慢性关节炎慢性关节炎II 这些儿童中75为HLA B27+。相反,青少年风湿症/慢性关节炎I,同样也是少关节性的,但是更常见于女孩,与慢性虹膜睫状体炎(30%),阳性的ANA(80%)和HLA DR5关联,却不是B27。流式细胞的原理和临床应用17HLA-B27的临床检测的临床检测 HLA-B27属于1型MHC基因。基本上表达在机
7、体所有有核细胞上,特别是淋巴细胞表面有丰富的含量。使用荧光定量标准微球,校正HLA-B27实验条件后,测定样本中T淋巴细胞HLA-B27表达水平。若HLA-B27表达水平大于标准微球设定MARK,则为阳性结果;若HLA-B27表达水平低于标准微球设定MARK,则为阴性结果。Anti-HLA-B27 Kit(美国BD Biosciences公司;CAT:340183),其中包括:1、Anti-HLA-B27-FITC/CD3-PE 2、HLA-B27 Calibration beads 3、FACS Lysing Solution流式细胞的原理和临床应用182 2、淋巴细胞亚群分析、淋巴细胞亚群
展开阅读全文