艾滋病检测原理和技术规范培训课件.ppt

1、艾滋病检测原理和技术规范艾滋病检测原理和技术规范艾滋病检测原理和技术规范10/16/20222艾滋病检测原理和技术规范艾滋病检测原理和技术规范Human immunodeficiency virus HIV10/16/20223艾滋病检测原理和技术规范艾滋病检测原理和技术规范Cross-species Transmission of SIVcpzSIVcpzHuman in AfricaChimpanzee 黑猩猩黑猩猩SIVcpzSIVcpz重组？重组？重组？重组？重组？重组？猴免疫缺陷病毒猴免疫缺陷病毒MM组组HIV-1N N组组HIV-1O O组组HIV-110/16/20224艾滋病检

2、测原理和技术规范艾滋病检测原理和技术规范Cross-species Transmission of SIVsmSIVsmHIV-2Human in West Africa猴免疫缺陷病毒猴免疫缺陷病毒灰身白脸猴灰身白脸猴Sooty Mangabeys重组？重组？10/16/20225艾滋病检测原理和技术规范艾滋病检测原理和技术规范Structure of H IV Virion Particlep p 2 2 4 4 C C o o r re e A A g gp p 1 1 7 7 MM a a t tr ri ix xp p 7 7-g g a ag gp p 9 9-g g a ag gp

3、 p 3 3 1 1 i in n t te eg g r ra a s se ep p r ro o t te e a a s se eStructure of HIV Virion Particle Organization of the HIV-1 Virion10/16/20226艾滋病检测原理和技术规范艾滋病检测原理和技术规范 艾滋病病毒艾滋病病毒感染后，可严重破坏人体的免疫系统，使人体丧感染后，可严重破坏人体的免疫系统，使人体丧失抵御各种疾病的能力，失抵御各种疾病的能力，有利于各种病原体的侵入，有利于各种病原体的侵入，从而导致各从而导致各种严重的、难以治愈的机会性感染或肿瘤，最终导

4、致死亡，病死种严重的、难以治愈的机会性感染或肿瘤，最终导致死亡，病死率可达率可达100100。10/16/20227艾滋病检测原理和技术规范艾滋病检测原理和技术规范10/16/20228艾滋病检测原理和技术规范艾滋病检测原理和技术规范非洲中部和东部非洲中部和东部美国、欧洲、南美洲、非洲和亚洲美国、欧洲、南美洲、非洲和亚洲南美洲、印度、赞比亚、南美洲、印度、赞比亚、中国中国非洲中部和东部非洲中部和东部泰国、中非、印度泰国、中非、印度巴西、罗马尼亚、喀麦隆巴西、罗马尼亚、喀麦隆加蓬、苏联、尼日利亚、乌干达、塞内加尔、赞比亚加蓬、苏联、尼日利亚、乌干达、塞内加尔、赞比亚喀麦隆、扎伊尔、中非喀麦隆、扎

5、伊尔、中非塞浦路斯塞浦路斯扎伊尔扎伊尔喀麦隆、加蓬喀麦隆、加蓬HIVHIV型别和亚型的型别和亚型的分类进化与地区分布：分类进化与地区分布：西非、印度西非、印度10/16/20229艾滋病检测原理和技术规范艾滋病检测原理和技术规范基因亚型与感染途径的关系基因亚型与感染途径的关系10/16/202210艾滋病检测原理和技术规范艾滋病检测原理和技术规范BEAABBEECCBBBBBBBBBBBBB E BBBCBBEEELasaHa ErbinShen YangChang ChunHuhehaoteBeijingTian JingXi NingShi JiazhuangTai YuanYin Chu

6、anLan ZhouXi anHe FeiZheng ZhouJi Nan BNan JingShang HaiNan ChangWu HanHang ZhouChang ShaFu ZhouGuang ZhouNan NingGui YangHai KouKun MingCheng DuTai BeiIndiaMyanmarThailandLaosViet NamUrumqi/CBE CBCC/B CC/BC/BA B CHIV Molecular Epidemiology Research in China Supported by MOH,Organized by NARL/NCAIDS

7、,Participated by all provincial HIV labs 7 HIV-1 subtypes with 3 major ones(B,C and E)were found origin and transmission of the HIV strains were defined providing strong support to Epidemiology,diagnostic reagents and vaccine development11艾滋病检测原理和技术规范艾滋病检测原理和技术规范艾滋病从感染到发病的一般过程艾滋病从感染到发病的一般过程10/16/202

8、212艾滋病检测原理和技术规范艾滋病检测原理和技术规范10/16/202213艾滋病检测原理和技术规范艾滋病检测原理和技术规范10/16/202214艾滋病检测原理和技术规范艾滋病检测原理和技术规范抗体检测抗体检测抗体检测抗体检测CD4CD4检测检测CD4CD4检测检测各种检测技术为艾滋病防治工作各种检测技术为艾滋病防治工作提供广泛的技术支持平台提供广泛的技术支持平台10/16/202215艾滋病检测原理和技术规范艾滋病检测原理和技术规范艾滋病艾滋病实验诊断方法实验诊断方法10/16/202216艾滋病检测原理和技术规范艾滋病检测原理和技术规范各种诊断试剂特性各种诊断试剂特性10/16/202

9、217艾滋病检测原理和技术规范艾滋病检测原理和技术规范硒标法硒标法金标法金标法HIV抗体筛查试验抗体筛查试验10/16/202218艾滋病检测原理和技术规范艾滋病检测原理和技术规范明胶颗粒凝集试验明胶颗粒凝集试验（Particle agglutination testParticle agglutination test，PAPA）10/16/202219艾滋病检测原理和技术规范艾滋病检测原理和技术规范PAPA的操作和结果判断的操作和结果判断10/16/202220艾滋病检测原理和技术规范艾滋病检测原理和技术规范5 5 450/630nm下测定OD值混匀，加盖，37温育 洗板3 3 加入底物第

10、二次特异性结合第二次特异性结合4 4 加入终止液1 1 加入样品 洗板2 2 加入酶标记物 加盖，37温育 加盖，37温育第一次特异性结合第一次特异性结合10/16/202221艾滋病检测原理和技术规范艾滋病检测原理和技术规范快速法可否单独使用？快速法可否单独使用？n 全国艾滋病检测技术规范全国艾滋病检测技术规范（20042004版）：将版）：将PAPA、dot-dot-EIAEIA、胶体硒法纳入快速检测规范方法，因此可以使用。、胶体硒法纳入快速检测规范方法，因此可以使用。n 有研究指出：有研究指出：n 任何一种快速试剂可以筛查出任何一种快速试剂可以筛查出99%99%以上的阴性样本；以上的阴性

11、样本；n 两种快速试剂均为阳性时，可以筛查出两种快速试剂均为阳性时，可以筛查出98%98%以上的阳性以上的阳性样本；样本；n 两种快速试剂结果不一致时，可用两种快速试剂结果不一致时，可用ELISAELISA复检；复检；n 单独使用或两种同时使用时，特异性差别无显著意义。单独使用或两种同时使用时，特异性差别无显著意义。10/16/202222艾滋病检测原理和技术规范艾滋病检测原理和技术规范HIV抗体确证试验抗体确证试验Western Blot 免疫印迹法免疫印迹法10/16/202223艾滋病检测原理和技术规范艾滋病检测原理和技术规范env合成外膜蛋白合成外膜蛋白gag合成核蛋白合成核蛋白pol

12、合成逆转录酶合成逆转录酶HIVHIV的主要基因及其产物的主要基因及其产物 10/16/202224艾滋病检测原理和技术规范艾滋病检测原理和技术规范ss-RNAss-RNA10/16/202225艾滋病检测原理和技术规范艾滋病检测原理和技术规范全自动免疫印迹仪全自动免疫印迹仪10/16/202226艾滋病检测原理和技术规范艾滋病检测原理和技术规范HIVHIV抗体阳性诊断标准：抗体阳性诊断标准：2 2条条env env（gp160/gp120+gp41gp160/gp120+gp41）1 1条条env+p24env+p24p55p55p66p66p31p31p51p51gp120gp120gp16

13、0gp160gp41gp41p17p17p24p24膜蛋白膜蛋白（env）核蛋白核蛋白（gag）逆转录酶逆转录酶（pol）10/16/202227艾滋病检测原理和技术规范艾滋病检测原理和技术规范10/16/202228艾滋病检测原理和技术规范艾滋病检测原理和技术规范筛查试验：筛查试验：复检复检1 1（试剂（试剂A A）：）：复检复检2 2（试剂（试剂B B）：）：确证试验：确证试验：筛查试验和确证试验的作用筛查试验和确证试验的作用10/16/202229艾滋病检测原理和技术规范艾滋病检测原理和技术规范 10/16/202230艾滋病检测原理和技术规范艾滋病检测原理和技术规范（美国CDC,199

14、3,抗-HIV阳性及其中一种疾病即可诊断）10/16/202231艾滋病检测原理和技术规范艾滋病检测原理和技术规范HIV！HIV？HIVHIV感染母亲所生婴儿：感染母亲所生婴儿：分别于分别于1212个月、个月、1818个月追踪检测个月追踪检测阴性者为阴性，阴性者为阴性，1818个月仍阳性者为阳性。个月仍阳性者为阳性。10/16/202232艾滋病检测原理和技术规范艾滋病检测原理和技术规范10/16/202233艾滋病检测原理和技术规范艾滋病检测原理和技术规范主要内容：主要内容：10/16/202234艾滋病检测原理和技术规范艾滋病检测原理和技术规范艾滋病检测原理和技术规范HIVHIV抗体检测结

15、果处理规范抗体检测结果处理规范10/16/202236艾滋病检测原理和技术规范艾滋病检测原理和技术规范艾滋病样本确证、报告流程：艾滋病样本确证、报告流程：10/16/202237艾滋病检测原理和技术规范艾滋病检测原理和技术规范受理受理送检送检取报告取报告HIV样本样本CD4样本样本每周一五：每周一五：上午上午8:308:3011:4511:45下午下午2:002:005:155:15每周一：每周一：上午上午8:308:3011:4511:45下午下午2:002:005:155:15 接收样本（及相关资料）接收样本（及相关资料）预约取报告时间预约取报告时间 给回样本受理单（客户联）给回样本受理单

16、（客户联）HIV检验报告检验报告CD4检验报告检验报告 每周四：每周四：下午下午2:002:00后后 每周四：每周四：下午下午2:002:00后后凭样本受理单（客户联）领取检验报告凭样本受理单（客户联）领取检验报告 HIV HIV样本样本 HIV HIV送检单送检单 CD4 CD4样本样本 CD4 CD4送检单送检单 传染病报告卡传染病报告卡（二八年七月一日起实施）（二八年七月一日起实施）艾滋病样本送检、艾滋病样本送检、受理、检验流程：受理、检验流程：10/16/202238艾滋病检测原理和技术规范艾滋病检测原理和技术规范认真填写各类表格（最好能打印），及时上报。认真填写各类表格（最好能打印）

17、，及时上报。10/16/202239艾滋病检测原理和技术规范艾滋病检测原理和技术规范各筛查实验室每月各筛查实验室每月10日前上报上月检测数据：日前上报上月检测数据：10/16/202240艾滋病检测原理和技术规范艾滋病检测原理和技术规范10/16/202241艾滋病检测原理和技术规范艾滋病检测原理和技术规范10/16/202242艾滋病检测原理和技术规范艾滋病检测原理和技术规范对对HIVHIV实验室的实验室的1010项基本要求项基本要求10/16/202243艾滋病检测原理和技术规范艾滋病检测原理和技术规范10/16/202244艾滋病检测原理和技术规范艾滋病检测原理和技术规范使用诊断试剂注意

18、事项使用诊断试剂注意事项10/16/202245艾滋病检测原理和技术规范艾滋病检测原理和技术规范 实验操作注意事项实验操作注意事项10/16/202246艾滋病检测原理和技术规范艾滋病检测原理和技术规范室内质控注意事项室内质控注意事项10/16/202247艾滋病检测原理和技术规范艾滋病检测原理和技术规范全国HIV抗体：抗体：EIA、WBHIV抗体：快速检测抗体：快速检测WB条带判读条带判读CD4+T淋巴细胞淋巴细胞全省HIV抗体：抗体：EIA职能工作考评职能工作考评全市HIV抗体：抗体：EIA职能工作考评职能工作考评艾滋病检测网络实验室质量考评安排艾滋病检测网络实验室质量考评安排10/16/202248艾滋病检测原理和技术规范艾滋病检测原理和技术规范如果你做到这些如果你做到这些 你就拥有一个合格的艾滋病实验室你就拥有一个合格的艾滋病实验室2008198910/16/202249艾滋病检测原理和技术规范