血管疾病并发症培训课件.ppt

1、血管疾病并发症血管疾病并发症一、概述一、概述（一）糖尿病与代谢异常综合征（一）糖尿病与代谢异常综合征 胰岛素抵抗通常先于胰岛素抵抗通常先于型糖尿病出现，型糖尿病出现，而且常伴有其他危险因素而且常伴有其他危险因素血脂异常，血脂异常，高血压和促凝因子激活，即代谢异常综高血压和促凝因子激活，即代谢异常综合征。合征。2血管疾病并发症3血管疾病并发症（三）糖尿病血管病变密切相关的并发症（三）糖尿病血管病变密切相关的并发症 冠心病冠心病(患病危险性提高24倍)中风中风(危险性提高410倍)外周血管病外周血管病(危险性提高710倍)肾病肾病 视网膜病视网膜病 神经疾病和心肌病神经疾病和心肌病4血管疾病并发症

2、（四）糖尿病并发动脉粥样硬化的概况（四）糖尿病并发动脉粥样硬化的概况（糖尿病患者的死因有（糖尿病患者的死因有80%是动脉粥样硬化症）是动脉粥样硬化症）75%由于冠状动脉粥样硬化症由于冠状动脉粥样硬化症 25%由于脑血管或外周血管疾病由于脑血管或外周血管疾病 糖尿病并发症的住院治疗患者中糖尿病并发症的住院治疗患者中75%以上以上是因为动脉粥样硬化症是因为动脉粥样硬化症 目前，诊断患有目前，诊断患有型糖尿病的患者中超过型糖尿病的患者中超过50%患有冠心病患有冠心病 5血管疾病并发症（五）糖尿病并发肾病的概况（五）糖尿病并发肾病的概况 未治疗的未治疗的2 2型糖尿病型糖尿病病人，有明显蛋白尿病人，有

3、明显蛋白尿者高达者高达2040，其中，其中20的病人将在二十年的病人将在二十年内发展成晚期肾病。内发展成晚期肾病。糖尿病肾病以肾小球基底膜的增厚为特点糖尿病肾病以肾小球基底膜的增厚为特点,最终进展为肾小球硬化及肾功能丧失。最终进展为肾小球硬化及肾功能丧失。6血管疾病并发症二、糖尿病血管病变发生的可能机制二、糖尿病血管病变发生的可能机制 血浆蛋白和动脉血管壁蛋白的糖基化和进一血浆蛋白和动脉血管壁蛋白的糖基化和进一步步糖基化形成的非酶晚期糖基化终产物糖基化形成的非酶晚期糖基化终产物(Advanced glycation end products，AGEs)糖基氧化和氧化作用产生活性氧簇（糖基氧化和

4、氧化作用产生活性氧簇（Reactive oxygen species，ROS）促凝血状态促凝血状态 胰岛素抵抗和高胰岛素血症胰岛素抵抗和高胰岛素血症 激素、生长因子和细胞因子促进的血管平滑激素、生长因子和细胞因子促进的血管平滑肌肌细胞增生和泡沫细胞形成细胞增生和泡沫细胞形成7血管疾病并发症（一）晚期糖基化终产物（一）晚期糖基化终产物(AGEs)的作用的作用 动脉粥样硬化的主要临床表现为冠心病。动脉粥样硬化的主要临床表现为冠心病。约约70%70%的的2 2型糖尿病人死于冠心病型糖尿病人死于冠心病，传统的危险传统的危险因素包括高脂血症，高血压，吸烟，肥胖，缺因素包括高脂血症，高血压，吸烟，肥胖，缺

5、乏锻炼和阳性家族史，这些危险因素在糖尿病乏锻炼和阳性家族史，这些危险因素在糖尿病人中有一定的升高。但糖尿病特异性的危险因人中有一定的升高。但糖尿病特异性的危险因素应该是除此以外的一些因素。素应该是除此以外的一些因素。8血管疾病并发症 上世纪，几项前瞻性研究显示高血糖本身上世纪，几项前瞻性研究显示高血糖本身就很明显的预示着冠心病就很明显的预示着冠心病。在新诊断的在新诊断的2 2型糖尿型糖尿病病人中，糖化血红蛋白高达三倍者，十年后病病人中，糖化血红蛋白高达三倍者，十年后心血管发病增长了三倍。最近发现，心梗和冠心血管发病增长了三倍。最近发现，心梗和冠状动脉疾病的发生率与餐后高血糖水平相关状动脉疾病的

6、发生率与餐后高血糖水平相关。目前认为，餐后高血糖致病的主要途径是目前认为，餐后高血糖致病的主要途径是诱导产生诱导产生AGEsAGEs。9血管疾病并发症1.AGEs 的形成的形成 AGEs形成于梅拉德氏反应形成于梅拉德氏反应(MaillardMaillard reaction)reaction)。MaillardMaillard reaction reaction是为了记念法国化学是为了记念法国化学家家Louis CamilleLouis Camille MaillardMaillard在在19121912年发现氨基年发现氨基酸与糖共加热变褐色的反应而命名。该反应为酸与糖共加热变褐色的反应而命名

7、。该反应为糖分子或乙醛中的酮基与蛋白质中的氨基之间糖分子或乙醛中的酮基与蛋白质中的氨基之间的非酶促反应。的非酶促反应。10血管疾病并发症AGEs形成过程形成过程11血管疾病并发症 2.AGEs参与糖尿病血管损伤的证据参与糖尿病血管损伤的证据 2型糖尿病肾病肾动脉切片，免疫组化显型糖尿病肾病肾动脉切片，免疫组化显示肾动脉壁中有示肾动脉壁中有AGEs沉积（棕色）沉积（棕色）12血管疾病并发症Eric J.Topol,et al.Receptor for AGE(RAGE)Mediates Neointimal Formation in Response to Arterial Injury.Cir

8、culation.2003;107(17):2238-2243 A片正常鼠颈动脉切片；内膜及中层无明显片正常鼠颈动脉切片；内膜及中层无明显AGEs沉积（免疫组化）沉积（免疫组化）B片为糖尿病鼠颈动脉切片；内膜及中层有明显片为糖尿病鼠颈动脉切片；内膜及中层有明显AGEs沉积（褐色）沉积（褐色）A B13血管疾病并发症A片片:非糖尿病肾切片；肾小球血管中无非糖尿病肾切片；肾小球血管中无AGEs沉积（免疫组化）沉积（免疫组化）B片片:糖尿病患者肾切片；肾小球血管中有明显糖尿病患者肾切片；肾小球血管中有明显AGEs沉积（棕色）沉积（棕色）A B14血管疾病并发症 糖尿病肾组织切片糖尿病肾组织切片,肾小

9、球血管及肾小球内新月体肾小球血管及肾小球内新月体有明显有明显AGEs沉积（免疫组化，深棕色为阳性信号）沉积（免疫组化，深棕色为阳性信号）15血管疾病并发症3.AGEs致大血管损伤的基本机制致大血管损伤的基本机制 1)1)大分子交联物大分子交联物AGEsAGEs在动脉壁内的沉积在动脉壁内的沉积,降降低脉管的弹性低脉管的弹性 2)2)AGEsAGEs灭活内皮源性灭活内皮源性NO NO 血管扩张缺陷血管扩张缺陷 Bucala R,Tracey KJ,Cerami A.Advanced glycosylation products quench nitric oxide and mediate def

10、ective endothelium-dependent vasodilatation in experimental diabetes.J Clin Invest 1991;87:432-8.16血管疾病并发症 3)3)AGEsAGEs修饰修饰LDL LDLLDL LDL清除清除 正常正常ApoB、E可与可与LDL受体和受体和LDL受体受体相关蛋白结合，糖化相关蛋白结合，糖化ApoB、E不能结合不能结合LDL受体受体 Bucala R,Mitchell R,Arnold K,et al.Identification of the major site of apolipoprotein B

11、modification by advanced glycosylation end products blocking uptake by the low density lipoprotein receptor.J Biol Chem 1995;270:10828-32.17血管疾病并发症 4)4)AGEsAGEs作用于作用于RAGE RAGE NF-k kB激活激活 表达表达 ICAM-1 MCP-1 PAI-1 组织因子组织因子 VEGF VCAM-1 Jean-Luc Wautier,Ann Marie Schmidt.Protein Glycation A Firm Link to

12、 Endothelial Cell Dysfunction.Circulation Research.2004;95（3）:233 Vlassara H,Fuh H,Donnelly T,et al.Advanced glycation end products promote adhesion molecule(VCAM-1,ICAM-1)expression and atheroma formation in normal rabbits.Mol Med 1995;1:447-56.18血管疾病并发症 5)AGEs与与RAGE 交互作用交互作用 血管紧张素血管紧张素II诱导的平滑肌细胞增殖

13、诱导的平滑肌细胞增殖 Shaw SS,Schmidt AM,Banes AK,et al.S100B-RAGE-mediated augmentation of angiotensin II-induced activation of JAK2 in vascular smooth muscle cells is dependent on PLD2.Diabetes 2003;52:2381-8.19血管疾病并发症 4.AGEs致肾致肾损伤的基本机制损伤的基本机制 1)AGEs的直接作用的直接作用 2 2）刺激结缔组织生长因子和转化生长因子）刺激结缔组织生长因子和转化生长因子1 表达表达 ，促

14、进结缔组织增生，致肾纤维化，促进结缔组织增生，致肾纤维化 Cai Li*and Lu Caidagger ddagger Advanced Glycation End-Products Induce Connective Tissue Growth Factor-Mediated Renal Fibrosis Predominantly through Transforming Growth Factor-Independent Pathway.American Journal of Pathology.2004;165（6）:2033-2043 20血管疾病并发症 Wister 大鼠大鼠,分

15、为尾静脉注射分为尾静脉注射PBS、RSA（100 mg/kg）和和 AGE-RSA（100mg/kg）6周，肾小球中纤维结合素（周，肾小球中纤维结合素（FN）和和4型型胶原表达的变化。胶原表达的变化。21血管疾病并发症 肾小球中肾小球中转化生长因转化生长因子子 1（TGF-1）和结缔组织和结缔组织生长因子生长因子（CTGF）表达的变化。表达的变化。22血管疾病并发症 3)刺激血管紧张素刺激血管紧张素-II增加，加速肾间质纤维化增加，加速肾间质纤维化 Jennifer L.Faulkner*,Lisa M.Szcykalski*,Fredyne Springer,et al.Origin of

16、Interstitial Fibroblasts in an Accelerated Model of Angiotensin II-Induced Renal Fibrosis.American Journal of Pathology.2005;167:1193-1205.4）诱导细胞凋亡诱导细胞凋亡和和VEGF表达表达 5）刺激肾小球系膜细胞中单核细胞化学趋化因刺激肾小球系膜细胞中单核细胞化学趋化因子子-1(MCP-1)表达，表达，促进促进MCP-1在间质细胞中在间质细胞中分泌，导致糖尿病肾病的启动分泌，导致糖尿病肾病的启动 Yamagishi S,et al.Advanced glyc

17、ation end product-induced apoptosis and overexpression of vascular endothelial growth factor and monocyte chemoattractant protein-1 in human-cultured mesangial cells.J Biol Chem 2002;277:20309-15.23血管疾病并发症（二）活性氧簇（二）活性氧簇（ROS）的作用的作用 在促进糖尿病血管病变及糖尿病肾病中，在促进糖尿病血管病变及糖尿病肾病中，AGEs 与与ROS互为因果，加速糖尿病并发症的进展。互为因果，加

18、速糖尿病并发症的进展。AGE-RAGE能诱导能诱导ROS生成，生成，ROS又能又能介导介导AGEs的有害影响的有害影响。1.ROS可上调可上调RAGE mRNA的水平的水平，正反馈地加强正反馈地加强AGE的作用。的作用。2.ROS通过有丝分裂原活化蛋白激酶通过有丝分裂原活化蛋白激酶(MAPK)途径途径的核因子的核因子-B(NF-B)的激活的激活,增加微血管内皮细胞中增加微血管内皮细胞中VEGF基因的转录基因的转录,促血管平滑肌和促血管平滑肌和结缔组织增生，结缔组织增生，促进动脉硬化及肾单位的纤维化。促进动脉硬化及肾单位的纤维化。24血管疾病并发症 Yves Gorin,Karen Block,

19、James Hernandez,et al.NAD(P)H oxidase mediates hypertrophy and fibronectin expression in the diabetic kidney.J.Biol.Chem.2005;10.1074/jbc.M502412200 辅酶辅酶II氧化酶产生活性氧介导氧化酶产生活性氧介导糖尿病肾病的糖尿病肾病的肾单位肥大和肾单位表达纤维结合素肾单位肥大和肾单位表达纤维结合素。Atsushi Konishi,Toru Aizawa,Amy Mohan,et al.Hydrogen Peroxide Activates the Gas6

20、-Axl Pathway in Vascular Smooth Muscle Cells.J.Biol.Chem.2004;Vol.279,Issue 27,28766-28770 过氧化氢激活血管平滑肌细胞中过氧化氢激活血管平滑肌细胞中VEGF基因基因的转录。的转录。3.ROS的其他多作用环节的其他多作用环节25血管疾病并发症 Andrea M.Vincent,James W.Russell,Phillip Low，et al.Oxidative Stress in the Pathogenesis of Diabetic Neuropathy.Endocrine Reviews 2004；

21、25(4):612-628 高糖血症可致氧化应激，活性氧簇损伤蛋白，高糖血症可致氧化应激，活性氧簇损伤蛋白，降低其生物活性，损害能量代谢、细胞信号转降低其生物活性，损害能量代谢、细胞信号转导、运输功能等，最终导致细胞死亡。导、运输功能等，最终导致细胞死亡。Jean-Luc Wautier,Ann Marie Schmidt.Protein Glycation A Firm Link to Endothelial Cell Dysfunction Circulation Research.2004;95（3）:233.在内皮细胞，在内皮细胞，AGEs与与RAGE结合诱导细胞结合诱导细胞粘附分子、

22、组织因子、细胞因子如粘附分子、组织因子、细胞因子如IL-6和单核和单核细胞趋化蛋白细胞趋化蛋白-1等的表达。等的表达。AGEs通过通过RAGE充分发挥其效应是产生活性氧。充分发挥其效应是产生活性氧。26血管疾病并发症 Antonio Ceriello;Enrico Motz.Is Oxidative Stress the Pathogenic Mechanism Underlying Insulin Resistance,Diabetes,and Cardiovascular Disease?The Common Soil Hypothesis Revisited.Arterioscleros

23、is,Thrombosis,and Vascular Biology.2004;24(5):816 氧化应激是导致胰岛素抵抗、糖尿病和心血管疾病氧化应激是导致胰岛素抵抗、糖尿病和心血管疾病的主要发病机制？的主要发病机制？认为胰岛素抵抗、糖尿病伴有氧化应激。而活性氧认为胰岛素抵抗、糖尿病伴有氧化应激。而活性氧是胰岛素抵抗伴有的内皮细胞功能障碍、最终导致明是胰岛素抵抗伴有的内皮细胞功能障碍、最终导致明显的糖尿病和心血管疾病的发病。认为治疗心血管疾显的糖尿病和心血管疾病的发病。认为治疗心血管疾病的药物如钙通道阻滞剂、血管紧张素转换酶（病的药物如钙通道阻滞剂、血管紧张素转换酶（ACE）抑制剂、血管紧张

24、素抑制剂、血管紧张素1（AT-1）受体阻断剂等的原因受体阻断剂等的原因在于药品均有细胞内抗氧化活性，结果可减少糖尿病在于药品均有细胞内抗氧化活性，结果可减少糖尿病的发病。的发病。27血管疾病并发症三、糖尿病血管并发症的防治策略三、糖尿病血管并发症的防治策略 (一一)抗糖基化抗糖基化 1.作用机理作用机理 阻断糖与蛋白等生物大分子功能物质的联结。阻断糖与蛋白等生物大分子功能物质的联结。如氨基胍、维生素如氨基胍、维生素B6等可试用于糖尿病并发等可试用于糖尿病并发症的防治。症的防治。28血管疾病并发症氨基胍的分子结构式氨基胍的分子结构式 H H N N H H C N N H H29血管疾病并发症蛋

25、白质糖基化过程蛋白质糖基化过程 蛋白质、核酸蛋白质、核酸 N N NH H H H C HCH O HCOH C=O HC HOCH HOCH HCOH HCOH HCOH HOCH HOCH HOCH HCOH HCOH HCOH HOCH H H HCOH H 解链葡萄糖解链葡萄糖30血管疾病并发症氨基胍的抗糖基化、抗交联作用氨基胍的抗糖基化、抗交联作用31血管疾病并发症2.近年的相关研究近年的相关研究 Yi-Tsen Lin*,Yung-Zu Tseng*,and Kuo-Chu Chang*,1 Aminoguanidine Prevents Fructose-Induced Arte

26、rial Stiffening in Wistar Rats:Aortic Impedance Analysis Experimental Biology and Medicine 2004;229（10）:1038-1045 氨基胍防止果糖诱导的氨基胍防止果糖诱导的Wistar大鼠的动脉大鼠的动脉硬化硬化:主动脉阻抗分析主动脉阻抗分析 发现氨基胍可能通过抑制果糖源性晚期糖发现氨基胍可能通过抑制果糖源性晚期糖基化终产物的形成而防止果糖引起的基化终产物的形成而防止果糖引起的Wistar大大鼠的动脉硬化改变。鼠的动脉硬化改变。32血管疾病并发症 Josephine M.Forbes1,Louis

27、Teo Loon Yee1,Vicki Thallas1,et al.Advanced Glycation End Product Interventions Reduce Diabetes-Accelerated Atherosclerosis.Diabetes 2004;53（7）:1813-1823,抑制晚期糖基化终产物形成减少糖尿病促成的动脉抑制晚期糖基化终产物形成减少糖尿病促成的动脉硬化硬化.应用链脲佐菌素诱导的糖尿病应用链脲佐菌素诱导的糖尿病apoE基因缺陷小鼠基因缺陷小鼠20只，给予只，给予AGEs交联阻断剂交联阻断剂ALT-711，或或AGEs形成形成抑制剂氨基胍抑制剂氨基胍(

28、AG)AG)20周，结果发现用周，结果发现用ALT-711组大鼠组大鼠动脉硬化斑块的面积减少动脉硬化斑块的面积减少30%，用氨基胍组减少，用氨基胍组减少40%，且斑块明显变薄。且斑块明显变薄。糖尿病也伴随主动脉总胶原尤其是胶原糖尿病也伴随主动脉总胶原尤其是胶原I、III 和和 IV的积聚，并有纤维化细胞因子的积聚，并有纤维化细胞因子-转换生长因子转换生长因子和结和结缔组织生长因子及细胞内缔组织生长因子及细胞内-平滑肌肌动蛋白增加。在平滑肌肌动蛋白增加。在两糖尿病治疗组均可见这些因素减少的变化。两糖尿病治疗组均可见这些因素减少的变化。33血管疾病并发症 Markus Lassila,Kwee K

29、.Seah,Terri J.Allen,et al.Accelerated Nephropathy in Diabetic Apolipoprotein E-Knockout Mouse:Role of Advanced Glycation End Products.J Am Soc Nephrol 2004;15（8）:2125-2138 晚期糖基化终产物的作用晚期糖基化终产物的作用Apo E基因敲除糖尿病基因敲除糖尿病小鼠加速肾病的发病小鼠加速肾病的发病 本研究采用本研究采用Apo E基因敲除基因敲除(apo E-KO)链脲佐菌素链脲佐菌素糖尿病小鼠模型。分为阳性对照组、糖尿病小鼠模型。分

30、为阳性对照组、AGEs抑制剂抑制剂氨氨基胍基胍(1g/kg per d)治疗组或交联阻断剂治疗组或交联阻断剂ALT-711(20 mg/kg per d)应用应用20周。用非糖尿病周。用非糖尿病apo E-KO小鼠作小鼠作对照。发现两治疗组胶原及转化生长因子对照。发现两治疗组胶原及转化生长因子1的表达，的表达，-平滑肌肌动蛋白免疫染色、巨噬细胞的渗出和血平滑肌肌动蛋白免疫染色、巨噬细胞的渗出和血浆及肾的浆及肾的AGEs表达均被削弱。糖尿病表达均被削弱。糖尿病apo E-KO小鼠小鼠的肾损害加速，抑制肾内的肾损害加速，抑制肾内AGEs的积聚则可减轻这些的积聚则可减轻这些损害。损害。34血管疾病并

31、发症 Kuo-Chu Chang1,*,Kwan-Lih Hsu2,Tsai-Fwu Chou3,et al.Aminoguanidine prevents age-related deterioration in left ventriculararterial coupling in Fisher 344 rats British Journal of Pharmacology 2004;142(7):1099-1104 氨基胍防止氨基胍防止Fisher 344大鼠左心室与动脉大鼠左心室与动脉衔接处随年龄发生的退行性变衔接处随年龄发生的退行性变 发现氨基胍防止大鼠左室动脉联合与年龄发现氨基

32、胍防止大鼠左室动脉联合与年龄相关的退化。相关的退化。35血管疾病并发症 Subramaniam Pennathur ,Yasuo Ido,Jozsef I.Heller,.et al Reactive Carbonyls and Polyunsaturated Fatty Acids Produce a Hydroxyl Radical-like Species.J.Biol.Chem.,Vol.280,Issue 24,22706-22714,June 17,2005 本研究采用高糖所致的氧化应激时羟自由本研究采用高糖所致的氧化应激时羟自由基引起脂肪酸过氧化、蛋白质损伤的灵长类基引起脂肪酸过

33、氧化、蛋白质损伤的灵长类模型，发现氨基胍能明显减少体内的脂质过模型，发现氨基胍能明显减少体内的脂质过氧化产物和糖基化的蛋白产物。氧化产物和糖基化的蛋白产物。36血管疾病并发症(二二)抗氧化抗氧化 某些抗氧化酶、还原活性的物质或维生素某些抗氧化酶、还原活性的物质或维生素及活血化淤、消炎类中药。及活血化淤、消炎类中药。1999 1999年年,国内研究披露国内研究披露,活血化淤药川芎嗪活血化淤药川芎嗪可增加血管内皮细胞构建型一氧化氮合酶可增加血管内皮细胞构建型一氧化氮合酶（cNOScNOS）的合成，并有减少糖尿病并发症的的合成，并有减少糖尿病并发症的应用报道。应用报道。有关中药方面的研究，目前尚未查

34、到国外有关中药方面的研究，目前尚未查到国外的相应报道。的相应报道。37血管疾病并发症 川芎嗪是从伞形科藁本属植物川芎根茎川芎嗪是从伞形科藁本属植物川芎根茎中提取分离的生物碱单体。其化学结构为四中提取分离的生物碱单体。其化学结构为四甲基吡嗪甲基吡嗪(tetramethel pyrazine)tetramethel pyrazine)，现已可现已可人工合成。其化学结构式如下：人工合成。其化学结构式如下：38血管疾病并发症 1.国内外的相关研究国内外的相关研究 Lucy B.Esberg 和 Jun Ren.The Oxygen Radical Generator Pyrogallol Impair

35、s Cardiomyocyte Contractile Function Via a Superoxide and p38 MAP Kinase-Dependent Pathway:Protection by Anisodamine and Tetramethylpyrazine.Cardiovascular Toxicology;2004,Volume 4,Issue 4,pps.375-384 发现川芎嗪通过抗氧化具有保护心肌作用。发现川芎嗪通过抗氧化具有保护心肌作用。冉兴无，等.中国循证医学杂志中国循证医学杂志 2004 Vol.4 No.6 P.393-3972004 Vol.4 No

36、.6 P.393-397 研究认为，研究认为，TMPTMP对治疗糖尿病周围病变可能有一定对治疗糖尿病周围病变可能有一定疗效疗效,但由于尚缺乏高质量的证据支持但由于尚缺乏高质量的证据支持,TMPTMP治疗治疗DPNDPN的的疗效还需进行更多高质量的随机对照试验才能得出肯疗效还需进行更多高质量的随机对照试验才能得出肯定性结论定性结论.39血管疾病并发症 曾素耘，樊素璇，蒋小青.川芎嗪对妊娠高血压综合征患者川芎嗪对妊娠高血压综合征患者脐静脉内皮细胞粘附分子表达的抑制作用脐静脉内皮细胞粘附分子表达的抑制作用.中华妇产科杂志.2000;Vol.35No.5P.282-284 川芎嗪川芎嗪与氨基胍与氨基胍

37、联合应用联合应用结果：结果：1)1)明显增敏胰岛素作用，降低血糖；降低糖明显增敏胰岛素作用，降低血糖；降低糖化血清蛋白含量。化血清蛋白含量。2 2）抑制外周血白细胞）抑制外周血白细胞iNOS-mRNAiNOS-mRNA与与ecNOS-ecNOS-mRNAmRNA表达。以抑制表达。以抑制iNOS-mRNAiNOS-mRNA表达作用强大。表达作用强大。40血管疾病并发症高果糖大鼠外周血白细胞高果糖大鼠外周血白细胞ecNOS-mRNA表达的变化表达的变化A:高糖饮水高糖饮水1个月大鼠外周血白细胞个月大鼠外周血白细胞ecNOS-mRNA表达表达(1000);B:高糖饮水高糖饮水2个月大鼠外周血白细胞个

38、月大鼠外周血白细胞ecNOS-mRNA表达表达(1000);C:高糖饮水高糖饮水6个月用药个月用药3个月大鼠外周血白细胞个月大鼠外周血白细胞ecNOS-mRNA表达表达(1000);41血管疾病并发症 高糖大鼠外周血白细胞高糖大鼠外周血白细胞iNOS-mRNA的表达的表达1B:高糖饮水高糖饮水2月大鼠外周血白细胞月大鼠外周血白细胞iNOS-mRNA的表达的表达(1000)；1C:高糖饮水高糖饮水3月大鼠外周血白细胞月大鼠外周血白细胞iNOS-mRNA的表达的表达(1000)；1D:高糖饮水高糖饮水6月用药月用药3个月大鼠外周血白细胞个月大鼠外周血白细胞iNOS-mRNA的表达的表达(1000)

39、42血管疾病并发症 3)糖尿病大鼠外周血白细胞糖尿病大鼠外周血白细胞PI-3K P85亚亚单位单位mRNA表达降低，应用川芎嗪与氨基胍可表达降低，应用川芎嗪与氨基胍可改善胰岛素信号改善胰岛素信号PI-3K mRNA表达。表达。A：正常对照；正常对照；B：糖尿病对照；糖尿病对照；C：用药用药1月；月；D：用药用药3月月 A B43血管疾病并发症 C D44血管疾病并发症 4)糖尿病大鼠外周血白细胞糖尿病大鼠外周血白细胞IGF-1mRNA表表达降低，应用川芎嗪与氨基胍可改善达降低，应用川芎嗪与氨基胍可改善IGF-1mRNA表达。表达。A：正常对照；正常对照；B：糖尿病对照；糖尿病对照；C：用药用药

40、1月；月；D：用药用药3月月 A B45血管疾病并发症 C D46血管疾病并发症 5)糖尿病大鼠外周血白细胞糖尿病大鼠外周血白细胞TGF-mRNA表表达增加达增加，川芎嗪与氨基胍使川芎嗪与氨基胍使TGF-mRNA表达降表达降低。低。A：糖尿病对照；糖尿病对照；B：用药用药3月月 A B47血管疾病并发症 6)7月龄糖尿病大鼠月龄糖尿病大鼠，肾间质发生明显纤维肾间质发生明显纤维化，川芎嗪与氨基胍能减轻肾间质纤维化。化，川芎嗪与氨基胍能减轻肾间质纤维化。A：糖尿病对照；糖尿病对照；B：用药用药3月月 A B48血管疾病并发症2004年年获获得得发发明明专专利利49血管疾病并发症50血管疾病并发症一

41、、概述一、概述 型糖尿病与胰岛素抵抗型糖尿病与胰岛素抵抗 糖尿病患者以糖尿病患者以型糖尿病居多（型糖尿病居多（90以上）以上），发生于中老年，多存在胰岛发生于中老年，多存在胰岛素介导的葡萄糖代谢障碍（胰岛素抵抗）素介导的葡萄糖代谢障碍（胰岛素抵抗）或合并胰岛或合并胰岛细胞分泌胰岛素功能缺陷细胞分泌胰岛素功能缺陷。51血管疾病并发症二、胰岛素抵抗课题研究背景二、胰岛素抵抗课题研究背景 1.胰岛素信号途径胰岛素信号途径 52血管疾病并发症2.前期研究发现及其研究背景 果糖喂养2月龄Wistar大鼠3个月复制出明显地胰岛素抵抗模型，空腹血糖（7.341.02）mmol/L，空腹血浆胰岛素（46.21

42、3.62）mIU/L。喂饲果糖6个月时该大鼠的死亡率高达45.5%(10/22)。同时，外周血白细胞PKCmRNAPKCmRNA阳性细胞率（40.159.09%）明显高于正常对照组（6.262.93%）；PI-3KmRNA（22.557.64%）及IGF-1mRNA（25.556.54%）阳性细胞率明显低于正常对照组（35.6211.07%、41.3311.27%）；显示该胰岛素抵抗大鼠的IGF-1及PI-3K信号转录水平下调53血管疾病并发症 胰岛素样生长因子胰岛素样生长因子-1-1信号信号55血管疾病并发症 2003 2003年，年，Holzenberger1Holzenberger1发现

43、胰岛素样生发现胰岛素样生长因子长因子-1-1受体（受体（IGF-1RIGF-1R）杂合子基因敲除鼠）杂合子基因敲除鼠Igf1r(+/-)Igf1r(+/-)的抗氧化应激能力明显增强，其平的抗氧化应激能力明显增强，其平均寿命较同窝野生鼠延长均寿命较同窝野生鼠延长26%26%。56血管疾病并发症 Holzenberger M,Dupont J,Ducos B,et al.IGF-1 receptor regulates lifespan and resistance to oxidative stress in mice.Nature 2003;421(6919):182-187 Studies

44、in invertebrates have led to the identification of a number of genes that regulate lifespan,some of which encode components of the insulin or insulin-like signalling pathways1,2,3.Examples include the related tyrosine kinase receptors InR(Drosophila melanogaster)and DAF-2(Caenorhabditis elegans)that

45、 are homologues of the mammalian insulin-like growth factor type 1 receptor(IGF-1R).To investigate whether IGF-1R also controls longevity in mammals,we inactivated the IGF-1R gene in mice(Igf1r).Here,using heterozygous knockout mice because null mutants are not viable,we report that Igf1r+/-mice liv

46、e on average 26%longer than their wild-type littermates(P 0.02).Female Igf1r+/-mice live 33%longer than wild-type females(P 0.001),whereas the equivalent male mice show an increase in lifespan of 16%,which is not statistically significant.Long-lived Igf1r+/-mice do not develop dwarfism,their energy

47、metabolism is normal,and their nutrient uptake,physical activity,fertility and reproduction are unaffected.The Igf1r+/-mice display greater resistance to oxidative stress,a known determinant of ageing.These results indicate that the IGF-1 receptor may be a central regulator of mammalian lifespan.57血

48、管疾病并发症 2005年 Hiroshi Kurosu 2 等在转基因实验研究中发现，Klotho基因过度表达小鼠，其Klotho表达产物（Klotho蛋白）通过与细胞膜受体结合，明显抑制胰岛素/胰岛素样生长因子-1(Ins/IGF-1)信号并延寿。58血管疾病并发症 Science 16 September 2005:Vol.309.no.5742,pp.1829-1833DOI:10.1126/science.1112766Prev|Table of Contents|Next Research Articles SUPPRESSION OF AGING IN MICE BY THE HO

49、RMONE KLOTHO Hiroshi Kurosu,1 Masaya Yamamoto,1 Jeremy D.Clark,1 Johanne V.Pastor,1 Animesh Nandi,1 Prem Gurnani,1 Owen P.McGuINness,3 Hirotaka Chikuda,4 Masayuki Yamaguchi,4 Hiroshi Kawaguchi,4 Iichiro Shimomura,5 Yoshiharu Takayama,2 Joachim Herz,2 C.Ronald Kahn,6 KevIN P.Rosenblatt,1 Makoto Kuro-

50、o1*A defect IN KLOTHO gene expression IN MICE accelerates THE degeneration OF multiple age-sensitive traits.Here,we show that overexpression OF KLOTHO IN MICE extends life span.KLOTHO proteIN functions as a circulatINg HORMONE that bINds to a cell-surface receptor and represses INtracellular signals