致病性微生物的实验诊断学基础课件.ppt

1、2022年10月16日星期日致病性微生物的实验诊致病性微生物的实验诊断学基础课件断学基础课件一、常见细菌性传染病的病原学及 血清学诊断基础法定细菌性传染病种类：甲类传染病：鼠疫、霍乱；乙类传染病：细菌性痢疾、伤寒和副伤寒、淋病、梅毒、百日咳、白喉、流行性脑脊髓膜炎、猩红热、钩端螺旋体病、布鲁氏菌病、炭疽、流行性和地方性斑疹伤寒；丙类传染病：肺结核、麻风病、感染性腹泻。采样注意事项：时间性针对性防护与消毒无菌操作标记昆虫、动物标本临 床 与 尸 解 取 材 参 考 表 病 人 取 样 解 剖 取 样 待诊 血 尿 便 痰 唾 咽 脑 腺 局 肝 脾 肺 肠 淋 骨 脑病种 液 洗 脊 穿 部 巴

2、 髓 液 液 液 穿 结 刺斑疹伤寒 +鼠 疫 +霍 乱 +炭 疽 +布 病 +伤寒、副伤寒 +痢 疾 +肉毒毒素中毒 +钩 体 病 +注:+代表一定要取样，+代表亦应取样样品保存：冷藏保存保存液保存标本运送：严格包装，外表消毒，编号，登记，贴标签，严防容器破碎、滴漏，避免活标本逃逸等；附送检单，填明名称、数量、地点、时间等；专人护送，不要委托携带，尽快到达目的地；妥善保存，运送途中避免高温、日光、过度震动等。非污染材料检验程序动 物非污染样品保存一部分(以备再查)血清学检查镜 检细菌培养查Ag查Ab染色及非染色免疫荧光镜检 鉴定镜检 分菌血清学检验G染色及其他染色免疫荧光G染色及其他染色免疫

3、荧光镜检鉴定查抗原查抗体被污染材料检验程序样品处理污染样品保存一部分(以备再查)上清或滤过液 (病毒)沉淀物或滤阻物(经一定稀释)接种小鼠查肉毒毒素接种幼猫查葡萄球菌肠毒素乳鼠.鸡胚.组织培养病毒、立克次体等细菌培养查抗原CFT协同SAT反向HATHAIT等镜检动物细菌培养G染色及其它染色IFT查抗原查抗体分菌镜检鉴定细菌病原学诊断检样处理 一般样品处理：包括洗脱、提取、浓缩和抗杂菌等；节肢动物标本处理 蚤类：制作标本时挤出前胃，涂片，分菌时可用单体也可用群体，研碎后接种培养。蜱：用消毒液浸洗后研磨，分菌。蝇：用选择性增菌液洗，培养洗液。蚊：对细菌性传染病意义不大，主要时对病毒性传染病意义较大

4、 病 原 鉴 定 菌属的确定 细菌种型的确定 细菌染色 细菌生化反应试验 糖代谢试验 有机酸、铵盐反应 蛋白、氨基酸、含氮化合物 呼吸酶类试验 毒性酶类试验 胆汁（胆盐）溶菌试验 血清学诊断基础知识（1）抗原、抗体和补体 抗原:完全Ag、半Ag、构成Ag条件，医学上主要Ag类别、共同Ag与异嗜性Ag；抗体:基本结构、特点、功能、类别等；补体:概念、组成、功能 血清学诊断基础知识（2）抗原、抗体结合原理抗原、抗体结合原理血清学诊断基础知识（3）抗原、抗体反应特点 特异性 阶段性 比例性 可逆性 血清学诊断基础知识（4）抗原、抗体反应影响因素 Ag Ab 电解质 温度 pH血清学诊断基本方法：玻片

5、凝集试验试管凝集试验抗球蛋白凝集试验补体结合试验ELISA试验琼脂扩散试验免疫荧光试验二、常见病毒性传染病的实验诊断学 基础法定病毒性传染病种类：（甲类传染病）乙类传染病：病毒性肝炎、艾滋病、脊髓灰质炎、麻疹、流行性出血质热、狂犬病、流行性乙型脑炎。丙类传染病：流行性感冒、流行性腮腺炎、风疹骊、急性出血性 结膜炎。临床诊断临床诊断 血清学诊断血清学诊断实验室诊断实验室诊断 病毒学诊断病毒学诊断 分子病毒学诊断分子病毒学诊断病毒性疾病的确诊病毒性疾病的确诊 临床诊断实验室诊断临床诊断实验室诊断病病 毒毒 病病 的的 诊诊 断断采 样 标 本*血液 *脑脊液*粪便*咽分泌物（咽拭子）*尿*疱疹液*结膜拭子*痰、鼻分泌物*尸检：脑、肝、肺、肾、心、胃、淋巴结等器官*活检：病变器官 基本方法：鸡胚 病毒培养与分离 动物 细胞 细胞阳性的判断 尿液中抗原阳性 鸡胚 绒毛尿囊膜的病变 死亡 动物 发病与死亡 培养液PH变化 细胞 干扰试验 CPE 鉴定病毒 加标准血清后的中和试验 含抗原材料的抗原性检测 电子显微镜病毒检测病病 毒毒 学学 检检 诊诊