微生物学第3章病毒课件.ppt
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- 微生物学 病毒 课件
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1、第三章第三章 非细胞生物非细胞生物 病毒病毒 VirusVirus第一节第一节病毒形态与结构病毒形态与结构Morphology and Structure of Virus病毒(病毒(Virus)病毒是超显微的、无细胞结构的、只含一病毒是超显微的、无细胞结构的、只含一种核酸种核酸(或或DNA或或RNA)、只能在活细胞内只能在活细胞内存活的寄生物存活的寄生物 。病毒在活细胞外以病毒粒子的形式存在,病毒在活细胞外以病毒粒子的形式存在,不能进行代谢和繁殖,不具有生命特征,不能进行代谢和繁殖,不具有生命特征,但一旦进入宿主细胞就具有生命特征但一旦进入宿主细胞就具有生命特征 2,病毒的基本特性:(1)没
2、有细胞结构(2)只含DNA或RNA一种核酸(3)不以二分裂法繁殖,只能在特定的寄主细胞内以核酸复制的方式增殖(4)没有核糖体,不含与能量代谢有关的酶,在活体外没有生命特征。微生物微生物 DNA无生命培养无生命培养二分裂二分裂 核糖体核糖体 抗生素抗生素 干扰素干扰素种类种类&RNA基上生长基上生长敏感性敏感性 敏感性敏感性细菌细菌+-支原体支原体+-立克次氏体立克次氏体+-+-衣原体衣原体+-+病毒病毒DNA or RNA-+病毒的大小病毒的大小非常微小,以非常微小,以nm表示。较大的痘病毒直径约为表示。较大的痘病毒直径约为300nm,较小的较小的口蹄疫病毒颗粒直径为口蹄疫病毒颗粒直径为102
3、2nm。动物病毒动物病毒 腺病毒(腺病毒(Adenovirus)7090nm 骨髓灰质炎病毒(骨髓灰质炎病毒(Poliovirus)2730nm 植物病毒植物病毒 南瓜花叶病毒南瓜花叶病毒(Squash mosaic virus)22nm 噬菌体噬菌体 大肠杆菌噬菌体大肠杆菌噬菌体fd(Coliphage fd)700 x 5nm 大肠杆菌噬菌体大肠杆菌噬菌体T2,T4,T6(Coliphage T2,T4,T6)头部头部90 x 60nm 尾部尾部100 x 20nm 大肠杆菌噬菌体大肠杆菌噬菌体M13(Coliphage M13)长长600800nm 病毒一般呈球形或杆形,也有呈卵圆形、砖
4、形、病毒一般呈球形或杆形,也有呈卵圆形、砖形、丝状和蝌蚪状丝状和蝌蚪状 动物病毒多呈球形、卵圆形或砖形。如腺病毒为动物病毒多呈球形、卵圆形或砖形。如腺病毒为球状,痘病毒为砖形球状,痘病毒为砖形 植物病毒多呈杆形或丝状,少数为球状。如烟草植物病毒多呈杆形或丝状,少数为球状。如烟草花叶病毒为丝状,苜蓿花叶病毒为杆状,花椰菜花花叶病毒为丝状,苜蓿花叶病毒为杆状,花椰菜花叶病毒为球状叶病毒为球状 细菌病毒即噬菌体多为蝌蚪状,也有为球状和丝细菌病毒即噬菌体多为蝌蚪状,也有为球状和丝状,如大肠杆菌偶数状,如大肠杆菌偶数T噬菌体系列为蝌蚪状,大肠杆噬菌体系列为蝌蚪状,大肠杆菌噬菌体菌噬菌体fd为丝状,为丝状
5、,X174为球形为球形病毒粒子(病毒粒子(Virion)是指一个结构和功能完整的病毒颗粒是指一个结构和功能完整的病毒颗粒。简称毒粒。病毒的结构组成:病毒的结构组成:核酸(核酸(nuclear acid)蛋白质壳体蛋白质壳体(protein coast)囊膜囊膜(envelope)病毒结构示意图病毒结构示意图病毒模式图病毒模式图病病 毒毒 的的 核核 酸酸 位于病毒粒子中心,构成位于病毒粒子中心,构成了其核心或基因组了其核心或基因组(Genome)。)。一种病毒只有一种病毒只有一种类型的核酸,或一种类型的核酸,或RNA或或DNA。可能单股,也可能双可能单股,也可能双股股。大病毒含有大病毒含有1
6、904个碱基对,个碱基对,小的仅含小的仅含5个基因个基因。作用:作用:病毒核酸储存有病病毒核酸储存有病毒的遗传信息,控制着病毒毒的遗传信息,控制着病毒的遗传变异、增殖和对宿主的遗传变异、增殖和对宿主的感染性的感染性。无蛋白质壳体的病毒核酸无蛋白质壳体的病毒核酸仍具有感染性,且感染范围仍具有感染性,且感染范围更广,但感染力较弱更广,但感染力较弱。病毒的蛋白质壳体病毒的蛋白质壳体 是指围绕病毒核酸并与之是指围绕病毒核酸并与之紧密相连的蛋白质外壳,由紧密相连的蛋白质外壳,由许多壳粒(许多壳粒(Capsomere)组成组成 壳粒是指在电子显微镜下壳粒是指在电子显微镜下可以认辩的组成壳体的亚单可以认辩的
7、组成壳体的亚单位,由一个或多个多肽分子位,由一个或多个多肽分子组成组成 功能功能:主要是构成病毒粒主要是构成病毒粒子外壳,保护病毒核酸;决子外壳,保护病毒核酸;决定病毒感染的特异性,与易定病毒感染的特异性,与易感染细胞表面存在的受体有感染细胞表面存在的受体有特异亲和力;还具有抗原性,特异亲和力;还具有抗原性,能刺激机体产生相应抗体。能刺激机体产生相应抗体。组成壳体的壳粒基本上有两组成壳体的壳粒基本上有两种对称排列:一种为二十面体,种对称排列:一种为二十面体,即壳粒沿着三根相互垂直的轴即壳粒沿着三根相互垂直的轴形形成对称体,壳体即为二十形形成对称体,壳体即为二十面体。另一种为螺旋状体,壳面体。另
8、一种为螺旋状体,壳粒和核酸呈螺旋对称形排列成粒和核酸呈螺旋对称形排列成直杆形直杆形,伸长的纤维状,弯曲杆伸长的纤维状,弯曲杆状状病毒壳体的对称性病毒壳体的对称性烟草花叶病毒结构示意图烟草花叶病毒结构示意图病毒的二十面体结构病毒的二十面体结构病毒的囊膜病毒的囊膜 囊膜也称封套或包膜(Envelope)是指包被在病毒核壳体外的一层包膜,含有脂类、蛋白质和糖类 囊膜为双脂层膜,与之相连的是病毒特异性蛋白 囊膜表面具有突起物,称为刺突(Spike),也称为包膜子粒(Peplomer)囊膜对脂溶剂敏感 有囊膜的病毒易于吸附于寄主细胞表面,破坏宿主细胞表面受体,易于侵入细胞。包膜的作用:维系毒粒结构,保护
9、病毒核壳。尤其是病毒的包膜糖蛋白,是启动病毒感染所必需的。病毒结构示意图病毒结构示意图病病 毒毒 的的 包包 涵涵 体体 包涵体(包涵体(Inclusion body)是指宿主细胞被病毒感染后是指宿主细胞被病毒感染后存在于细胞内形成的一种光学显微镜下可见的小体。是存在于细胞内形成的一种光学显微镜下可见的小体。是由完整的病毒颗粒或尚未装配的病毒亚单位聚集而成的由完整的病毒颗粒或尚未装配的病毒亚单位聚集而成的小体。也有宿主细胞对病毒侵染的反应产物小体。也有宿主细胞对病毒侵染的反应产物 包涵体多为圆形、卵圆形或不定形的蛋白质包涵体多为圆形、卵圆形或不定形的蛋白质。l不同病毒在细胞中的包涵体形状、数量
10、、大小、位置各不同病毒在细胞中的包涵体形状、数量、大小、位置各异。或在细胞质中,或在细胞核中,或在两者内都有异。或在细胞质中,或在细胞核中,或在两者内都有 包涵体壳从宿主细胞中移出,接种至其他细胞仍可引起包涵体壳从宿主细胞中移出,接种至其他细胞仍可引起感染感染。l 特殊名称:天花病毒包涵体称为顾氏小体特殊名称:天花病毒包涵体称为顾氏小体(Guarnier),),狂犬病毒包涵体称为内基氏体(狂犬病毒包涵体称为内基氏体(Negri),),烟草花叶病毒包涵体称为烟草花叶病毒包涵体称为X体体 病毒的包涵体图病毒的包涵体图第二节第二节病病 毒毒 的的 分分 类类 Classification of Vi
11、rus分分 类类实用性分类实用性分类寄主型分类寄主型分类 动物性病毒动物性病毒 植物性病毒植物性病毒 细菌病毒细菌病毒 病毒理化特性分类病毒理化特性分类 科(科(viridae)亚科(亚科(virrinae)属(属(virus)以病毒核酸分类以病毒核酸分类 类型:类型:DNA或或RNA 股数股数:单股或双股单股或双股 病毒粒子有无囊膜病毒粒子有无囊膜 随着电镜技术的发展以及分离、提纯病毒新方法的应用,逐渐转向病毒本身的结构特征、化学组成的研究、使病毒的分类朝着自然系统的方向发展。病毒分类的依据有:基因组性质与结构;衣壳对称性;有无包膜;病毒粒子的大小、形状;对理化因素的敏感性;病毒脂类、碳水化
12、合物、结构蛋白和非结构蛋白的特征;抗原性;生物学特性(繁殖方式、宿主范围、传播途径和致病性)。国际病毒分类委员会(International Committee on Taxonomy of Viruses,简称 ICTV)在 2001 年公布的病毒分类和命名第七次报告中病毒分类系统设立了 3 个病毒目、66 个病毒科(包括 2 个类病毒科)、9 个病毒亚科和 244 个病毒属(包括 32 个暂定属和 7 个类病毒属)。国际病毒分类系统采用目、科、属、种的分类单元,但是亚病毒感染因子采用任意分类。病毒分类图病毒分类图1 1病毒分类图病毒分类图2第第 三三 节节噬噬 菌菌 体体 Bacterio
13、phage不同噬菌体的形态结构不同噬菌体的形态结构在电子显微镜下观察噬菌体有三种基本形态:蝌蚪形、微球形和丝状 大肠杆菌大肠杆菌T偶数噬菌体典型图偶数噬菌体典型图T4噬菌体的示意图与电镜照片噬菌体的示意图与电镜照片噬菌体的分类噬菌体的分类烈性噬菌体烈性噬菌体(Virulent phage)凡侵入寄主细胞后进凡侵入寄主细胞后进行复制繁殖并导致细胞行复制繁殖并导致细胞裂解的噬菌体即为烈性裂解的噬菌体即为烈性噬菌体噬菌体。温和性噬菌体温和性噬菌体(Temperate phage)凡侵入细胞后与宿主凡侵入细胞后与宿主细胞同步复制,并随宿细胞同步复制,并随宿主细胞的生长繁殖而传主细胞的生长繁殖而传代下去
14、,在一般情况下代下去,在一般情况下不引起宿主细胞裂解的不引起宿主细胞裂解的噬菌体,称为温和性噬噬菌体,称为温和性噬菌体菌体。噬菌体的增殖周期噬菌体的增殖周期吸附(吸附(Absorption)侵入(侵入(Penetration)复制(复制(Replication)装配(装配(Assembly)裂解(裂解(Lysis)噬噬 菌菌 体体 的的 吸附吸附(Absorption)吸附是噬菌体侵染宿主细胞的第一步吸附是噬菌体侵染宿主细胞的第一步 吸附过程决定于:吸附过程决定于:1)细胞表面受)细胞表面受体体的结构;的结构;2)噬菌体的吸附器官)噬菌体的吸附器官 吸附过程为噬菌体的吸附器官吸附过程为噬菌体的
15、吸附器官与与敏感细菌细胞表面敏感细菌细胞表面的敏感接受点相互特异性的互补不可逆接合的敏感接受点相互特异性的互补不可逆接合 一种细菌细胞表面可被多种和多个噬菌体吸附感染。一种细菌细胞表面可被多种和多个噬菌体吸附感染。据测定,一个细菌细胞表面可被据测定,一个细菌细胞表面可被250 360个噬菌体个噬菌体吸附达到饱和量吸附达到饱和量 吸附受环境因子温度、吸附受环境因子温度、pH、阳离子浓度等阳离子浓度等噬菌体的吸附与侵染图噬菌体的吸附与侵染图噬噬 菌菌 体体 的的 侵染侵染(Penetration)l 侵染即注入核酸 噬菌体以其尾部固着于敏感细菌细胞表面后,将尾丝展开固着于细胞,尾部的酶水解细胞壁的
16、肽聚糖,使细胞壁产生一个小孔,然后尾鞘收缩,将头部的核酸通过中空的尾髓压入细胞内,而蛋白质外壳则留在细胞外。此过程可在几十秒内完成 通常一种细菌可受到几种噬菌体的侵染,但细菌细胞一般只允许一种噬菌体进入细胞。往往先进入的噬菌体可排斥或抑制后进入者。即使进入了,也不能增殖而消亡 尾鞘并不是侵染的必备条件,无尾鞘者也可有效侵染,但有尾鞘者可提高侵染效率。噬噬 菌菌 体体 的的 复复 制制(Replication)包括噬菌体包括噬菌体DNA的复制和蛋白质的合成的复制和蛋白质的合成 DNA的复制:噬菌体进入细胞后立即以噬菌体的复制:噬菌体进入细胞后立即以噬菌体DNA为模为模板,利用细菌原有的板,利用细
17、菌原有的RNA合成酶合成早期的合成酶合成早期的mRNA,由由早期早期mRNA翻译成早期蛋白质。这些早期蛋白质是病毒翻译成早期蛋白质。这些早期蛋白质是病毒复制所需的酶及抑制细胞代谢的调节蛋白复制所需的酶及抑制细胞代谢的调节蛋白 在这些酶催化下,以亲代在这些酶催化下,以亲代DNA为模板,半保留复制出子为模板,半保留复制出子代代DNA 在在DNA开始复制后转录的开始复制后转录的mRNA为晚期为晚期mRNA,再由晚再由晚期期mRNA翻译成晚期蛋白质即噬菌体外壳的结构蛋白,翻译成晚期蛋白质即噬菌体外壳的结构蛋白,如头部蛋白质、尾部蛋白质如头部蛋白质、尾部蛋白质 此时为潜伏期,在细胞内还观察不到噬菌体粒子
18、此时为潜伏期,在细胞内还观察不到噬菌体粒子 潜伏期(潜伏期(Latent period)是指噬菌体栖于宿主细胞至宿主是指噬菌体栖于宿主细胞至宿主细胞裂解,释放噬菌体的最短时间细胞裂解,释放噬菌体的最短时间噬菌体的装配噬菌体的装配(Assembly)装配是将分别合成的噬菌体核酸、蛋白质装配成装配是将分别合成的噬菌体核酸、蛋白质装配成一个成熟的、有侵染力的噬菌体粒子的过程一个成熟的、有侵染力的噬菌体粒子的过程。大肠杆菌噬菌体的大肠杆菌噬菌体的DNA、头部蛋白质亚单位、头部蛋白质亚单位、尾鞘、尾髓、基板、尾丝等合成后,收缩聚集,尾鞘、尾髓、基板、尾丝等合成后,收缩聚集,被头部外壳蛋白包围,形成二十面
19、体的噬菌体被头部外壳蛋白包围,形成二十面体的噬菌体头部。尾部也同时装配,头部。尾部也同时装配,并并与头部连接与头部连接。最后装配完毕,成为新的子代噬菌体最后装配完毕,成为新的子代噬菌体噬菌体各元件的装配噬菌体各元件的装配噬菌体的裂解噬菌体的裂解(Lysis)成熟的噬菌体粒子大多借宿主细胞的裂解而得到释成熟的噬菌体粒子大多借宿主细胞的裂解而得到释放放。细菌细胞的裂解可导致原浑浊的培养液变清,固体细菌细胞的裂解可导致原浑浊的培养液变清,固体培养物出现噬菌斑培养物出现噬菌斑。也有丝状噬菌体也有丝状噬菌体fd成熟后不裂解细菌细胞,而是从成熟后不裂解细菌细胞,而是从宿主细胞中钻出来,细菌细胞仍可生长宿主
20、细胞中钻出来,细菌细胞仍可生长。大肠杆菌的大肠杆菌的T偶数噬菌体从吸附到粒子成熟释放需偶数噬菌体从吸附到粒子成熟释放需1530min时间时间。噬菌体的侵染、复制和释放噬菌体的侵染、复制和释放1.Attachment(adsorption)of the virion to a susceptible host cell.2.Penetration(injection)of the virion or its nucleic acid into the cell.3.Early steps in replication during which the host cell biosynthetic
21、 machinery is altered as a prelude to virus nucleic acid synthesis.Virus-specific enzymes are typically made.4.Replication of the virus nucleic acid.5.Synthesis of proteins used as structural subunits of the virus coat.6.Assembly of structural subunits(and membrane components in enveloped viruses)an
22、d packaging of nucleic acid into new virus particles.7.Release of mature virions from the cell细菌的溶源性细菌的溶源性 溶源性(溶源性(Lysogeny)是温和噬菌体侵入宿主细胞后是温和噬菌体侵入宿主细胞后没没有成熟噬菌体的有成熟噬菌体的产生产生,这一现象称为溶源性这一现象称为溶源性。温和性噬菌体侵入到宿主细菌细胞后,其温和性噬菌体侵入到宿主细菌细胞后,其DNA可整可整合到宿主细胞的染色体上合到宿主细胞的染色体上,并与宿主细胞染色体并与宿主细胞染色体DNA同步复制,但不合成自己的蛋白质壳体,宿主细胞不
23、同步复制,但不合成自己的蛋白质壳体,宿主细胞不裂解而能继续生长繁殖裂解而能继续生长繁殖,亦有少数是亦有少数是而是附着在细胞膜而是附着在细胞膜的某一位点上的某一位点上以质粒形式存在以质粒形式存在(如如P1)。整合在宿主细胞上整合在宿主细胞上或以质粒形式存在的或以质粒形式存在的温和性噬菌体温和性噬菌体的基因称为原噬菌体(的基因称为原噬菌体(Prophage)。含有原噬菌体的宿主细胞称为溶源性细胞(含有原噬菌体的宿主细胞称为溶源性细胞(Lysogenic cell)。温和噬菌体的遗传学特性温和噬菌体的遗传学特性 温和性噬菌体的基因能整合到宿主细胞染色体温和性噬菌体的基因能整合到宿主细胞染色体DNA中
24、,中,有一个与细菌染色体相附着的位点,并在其某种基因产物有一个与细菌染色体相附着的位点,并在其某种基因产物(酶)的作用下,两者在此发生特异性重组(酶)的作用下,两者在此发生特异性重组。温和噬菌体能编码合成一种阻遏体蛋白的基因,它可阻温和噬菌体能编码合成一种阻遏体蛋白的基因,它可阻止噬菌体所有有关增殖基因的表达,使其不能进入营养状止噬菌体所有有关增殖基因的表达,使其不能进入营养状态态。另外有一些基因调节、控制阻遏体的合成,以维持稳定另外有一些基因调节、控制阻遏体的合成,以维持稳定的溶源状态的溶源状态。溶源细胞的自发性裂解:当阻遏体水平降低到不足以维溶源细胞的自发性裂解:当阻遏体水平降低到不足以维
25、持溶源状态,原噬菌体可离开宿主细胞的染色体而进入增持溶源状态,原噬菌体可离开宿主细胞的染色体而进入增殖周期,并引起宿主细胞裂解的现象。自发性裂解的频率殖周期,并引起宿主细胞裂解的现象。自发性裂解的频率在在10-210-5。溶源性细胞的特性溶源性细胞的特性1溶源细胞的诱发裂解溶源细胞的诱发裂解:溶源细胞可受各种理化因子如射线、化学诱变剂的影响而溶源细胞可受各种理化因子如射线、化学诱变剂的影响而诱发裂解,释放出噬菌体粒子诱发裂解,释放出噬菌体粒子 溶源细胞的免疫性溶源细胞的免疫性:阻遏体蛋白除阻遏原噬菌体的基因组外,也同样能阻遏进阻遏体蛋白除阻遏原噬菌体的基因组外,也同样能阻遏进入溶源细菌的其他同
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