医学微生物学-专业知识讲座课件.ppt
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- 医学 微生物学 专业知识 讲座 课件
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1、医学微生物医学微生物学学 专业知专业知识讲座识讲座1.葡萄球菌的形态染色,分类,致病性葡萄球葡萄球菌的形态染色,分类,致病性葡萄球菌鉴别要点,致病物质的种类和所致疾病。菌鉴别要点,致病物质的种类和所致疾病。2.链球菌的形态染色,培养特性,分类,链球链球菌的形态染色,培养特性,分类,链球菌溶素和抗菌溶素和抗O试验,致病物质种类和所致疾病;试验,致病物质种类和所致疾病;链球菌溶血素和临床检测的关系,防治原则。链球菌溶血素和临床检测的关系,防治原则。本章重点与难点本章重点与难点(一)重点(一)重点3.肺炎链球菌形态染色,主要致病物质和所致肺炎链球菌形态染色,主要致病物质和所致疾病,与甲型链球菌的鉴别
2、要点。疾病,与甲型链球菌的鉴别要点。4.脑膜炎奈瑟菌的生物学特性,主要致病物质脑膜炎奈瑟菌的生物学特性,主要致病物质和所致疾病;标本采集分离注意点。和所致疾病;标本采集分离注意点。5.掌握淋病奈瑟菌的形态染色、培养特性、致掌握淋病奈瑟菌的形态染色、培养特性、致病物质和所致疾病及防治原则。病物质和所致疾病及防治原则。本章重点与难点本章重点与难点本章重点与难点本章重点与难点(二)难(二)难 点点1.葡萄球菌属葡萄球菌属 分类;抗原结构、致病物质的种类和分类;抗原结构、致病物质的种类和作用。作用。2.链球菌属链球菌属 分类;抗原结构、致病物质种类和作用。分类;抗原结构、致病物质种类和作用。3.肺炎链
3、球菌肺炎链球菌 主要致病物质和作用。主要致病物质和作用。4.脑膜炎奈瑟菌脑膜炎奈瑟菌 主要致病物质、作用和所致疾病。主要致病物质、作用和所致疾病。5.淋病奈瑟菌淋病奈瑟菌 致病物质、作用及所致疾病。致病物质、作用及所致疾病。化脓性球菌化脓性球菌(pyogenic coccus)革兰阳性菌:葡萄球菌,链球菌,肺炎链球菌革兰阳性菌:葡萄球菌,链球菌,肺炎链球菌 革兰阴性菌:脑膜炎奈瑟菌,淋病奈瑟菌革兰阴性菌:脑膜炎奈瑟菌,淋病奈瑟菌 球形,无鞭毛,无芽胞球形,无鞭毛,无芽胞图片来自人民卫生出版社教材及图片库图片来自人民卫生出版社教材及图片库 第八章第八章球菌球菌 第一节第一节 葡萄球菌属葡萄球菌属
4、 金黄色葡萄球菌金黄色葡萄球菌 凝固酶阴性葡萄球菌凝固酶阴性葡萄球菌 第二节第二节 链球菌属链球菌属 A群链球菌群链球菌 肺炎链球菌肺炎链球菌 B、D群链球菌群链球菌甲型溶血链球菌甲型溶血链球菌第三节第三节 肠球菌属肠球菌属 第第四四节节 奈瑟菌属奈瑟菌属脑膜炎奈瑟菌脑膜炎奈瑟菌淋病奈瑟菌淋病奈瑟菌一、金黄色葡萄球菌一、金黄色葡萄球菌(一)生物学性状(一)生物学性状 1.形态与染色形态与染色 球形,葡萄串状,革兰染色阳性球形,葡萄串状,革兰染色阳性(G+)第一节第一节 葡萄球菌属葡萄球菌属在青霉素等的作用下可变为在青霉素等的作用下可变为L型型,无鞭毛、芽胞,体外培养无荚膜。无鞭毛、芽胞,体外培
5、养无荚膜。图片来自人民卫生出图片来自人民卫生出版社的教材及图片库版社的教材及图片库 2.培养特性培养特性 易培养:普通平板易培养:普通平板血平板血平板 有色素:金黄色有色素:金黄色白色白色柠檬色柠檬色 有些菌溶血:有些菌溶血:产生溶血环产生溶血环图片来自人民卫生出版社图像库图片来自人民卫生出版社图像库3.生化反应生化反应 触酶阳性触酶阳性 多数菌分解葡萄糖、麦芽糖和蔗糖,产酸不多数菌分解葡萄糖、麦芽糖和蔗糖,产酸不产气产气 致病菌分解甘露醇致病菌分解甘露醇4.抗原构造抗原构造 葡萄球菌抗原结构复杂,葡萄球菌抗原结构复杂,有蛋白质抗原,多糖抗原有蛋白质抗原,多糖抗原 及细胞壁的成分抗原,及细胞壁
6、的成分抗原,其中以其中以SPA(staphylococcal protein A)最为重要最为重要图片来自人民卫生出版社图像库图片来自人民卫生出版社图像库SPA的生物学作用的生物学作用1)抗吞噬作用)抗吞噬作用,在吞噬反应中抑制在吞噬反应中抑制IgG调理素促吞噬和杀菌作用。调理素促吞噬和杀菌作用。2)对人类)对人类B细胞具有促有丝分裂因细胞具有促有丝分裂因子的作用等子的作用等3)A蛋白还有激活补体替代途径等蛋白还有激活补体替代途径等活性。活性。4)它与人及多种哺乳动物血清中的)它与人及多种哺乳动物血清中的lgG的的Fc段非特异结合,因而可用段非特异结合,因而可用含含SPA的葡萄球菌作为载体,结
7、合的葡萄球菌作为载体,结合特异性抗体,进行协同凝集试验,特异性抗体,进行协同凝集试验,用于多种抗原的检测。用于多种抗原的检测。SPAIgGFc 受体受体吞噬细胞吞噬细胞细菌细菌 协同凝集试验协同凝集试验将针对可溶性抗原的将针对可溶性抗原的IgG抗体与葡萄球菌(抗体与葡萄球菌(SPA)结合,然)结合,然后加入待测标本,若标本中含有相应的可溶性抗原,则抗原后加入待测标本,若标本中含有相应的可溶性抗原,则抗原抗体结合,使葡萄球菌聚集,出现凝集现象。抗体结合,使葡萄球菌聚集,出现凝集现象。含含A蛋白的金葡菌蛋白的金葡菌IgG类抗体类抗体抗抗 原原结合结合IgG的金葡菌的金葡菌协协同同凝凝集集试试验验
8、Ag+Ab+含含SPA的金的金 葡菌协同葡菌协同凝集物凝集物图片来自人民卫生出版社教材及图片库图片来自人民卫生出版社教材及图片库 金黄色葡萄球菌(金黄色葡萄球菌(S.aureus)表皮葡萄球菌(表皮葡萄球菌(S.epidermidis)腐生葡萄球菌(腐生葡萄球菌(S.saprophyticus)5.分类分类1)根据色素、根据色素、生化反应等生化反应等表型分类表型分类性状性状金黄色葡萄球菌金黄色葡萄球菌表皮葡萄球菌表皮葡萄球菌腐生葡萄球菌腐生葡萄球菌菌落色素金黄色白色白色或柠檬色血浆凝固酶+-分解葡萄糖+-甘露醇发酵+-溶血素+-A蛋白+-耐热核酸酶+-磷壁酸类型核糖醇型甘油型两者兼有噬菌体分型
9、多数能不能不能致病性强弱无新生霉素敏感敏感耐药致病性葡萄球菌的鉴别致病性葡萄球菌的鉴别2)根据有无凝固酶分型)根据有无凝固酶分型凝固酶阴性菌凝固酶阴性菌凝固酶阳性菌凝固酶阳性菌3)根据核酸分析的遗传学分型)根据核酸分析的遗传学分型 依据依据16S rRNA 不同分为不同分为40个种和个种和24个亚种个亚种 其他:噬菌体分型其他:噬菌体分型 -群群 群引起葡萄球菌肠毒素食物中毒群引起葡萄球菌肠毒素食物中毒6.抵抗力抵抗力葡萄球菌葡萄球菌对外界因素的对外界因素的抵抗力强,对碱性染料龙抵抗力强,对碱性染料龙胆紫敏感胆紫敏感耐热耐热:601小时或小时或8030分钟方能杀死。分钟方能杀死。耐盐:能在耐盐
10、:能在10%15%NaCl中生长。中生长。耐药:易产生耐药性,特别对青霉素。耐药:易产生耐药性,特别对青霉素。多重耐药多重耐药MRSA(methicillin-resistant S.aureus)(二)金黄色葡萄球菌致病性(二)金黄色葡萄球菌致病性致病物质致病物质致病作用与所致疾病致病作用与所致疾病1毒素毒素 1)葡萄球菌溶素葡萄球菌溶素 staphylolysin 毒素性疾病,损伤细胞膜毒素性疾病,损伤细胞膜2)杀白细胞素)杀白细胞素 leukocidin 食物中毒,损伤细胞膜食物中毒,损伤细胞膜3)肠毒素肠毒素 enterotoxin假膜性肠炎假膜性肠炎4)表皮剥脱毒素表皮剥脱毒素 ex
11、foliatin烫伤样皮肤综合征烫伤样皮肤综合征5)毒性休克综合征毒素毒性休克综合征毒素1 TSST-1毒性休克综合征,发热毒性休克综合征,发热多器官系统的功能紊乱多器官系统的功能紊乱2酶酶1)凝固酶凝固酶 Coagulase侵袭性疾病,抗吞噬侵袭性疾病,抗吞噬 局限化及形成血栓局限化及形成血栓2)其他酶)其他酶透明质酸酶(扩散因子)透明质酸酶(扩散因子)降解结缔组织的透明质酸降解结缔组织的透明质酸葡激酶(纤维蛋白溶酶)葡激酶(纤维蛋白溶酶)水解纤维素水解纤维素脂酶脂酶 分解脂肪分解脂肪耐热核酸酶耐热核酸酶DNA酶酶水解水解DNA,测定葡萄球菌有无致病性的重要指标,测定葡萄球菌有无致病性的重要
12、指标触酶触酶分解分解H2O2凝固酶(凝固酶(coagulase)概念概念 使含有抗凝剂的人或兔血浆发生凝固的酶类物质使含有抗凝剂的人或兔血浆发生凝固的酶类物质 游离凝固酶游离凝固酶 free coagulase 结合凝固酶结合凝固酶 bound coagulase意义意义 鉴别有无致病性的重要指标鉴别有无致病性的重要指标致病机制:致病机制:抵抗吞噬细胞的吞噬抵抗吞噬细胞的吞噬 保护病菌不受血清中杀菌物质的破坏保护病菌不受血清中杀菌物质的破坏 是感染局限化和形成血栓是感染局限化和形成血栓 约约1/3临床分离金黄色葡萄球菌可产生临床分离金黄色葡萄球菌可产生 引起急性胃肠炎,即食物中毒引起急性胃肠炎
13、,即食物中毒 小分子蛋白酶,耐热,耐胃肠液中蛋白酶小分子蛋白酶,耐热,耐胃肠液中蛋白酶 作用机制:作用机制:刺激呕吐中枢导致以呕吐为主要症状的食物中毒;刺激呕吐中枢导致以呕吐为主要症状的食物中毒;作用于胃肠黏膜,引起充血、水肿、甚至糜烂作用于胃肠黏膜,引起充血、水肿、甚至糜烂等炎症改变及水与电解质代谢紊乱,出现腹泻。等炎症改变及水与电解质代谢紊乱,出现腹泻。肠毒素(肠毒素(enterotoxin)肠毒素形成条件肠毒素形成条件:1)存放温度:)存放温度:37内,温度越高,产毒时间越短;内,温度越高,产毒时间越短;2)存放地点:通风不良氧分压低易形成肠毒素;)存放地点:通风不良氧分压低易形成肠毒素
14、;3)食物种类:含蛋白质丰富,水分多,同时含一)食物种类:含蛋白质丰富,水分多,同时含一定量淀粉的食物,肠毒素易生成。定量淀粉的食物,肠毒素易生成。所致疾病:所致疾病:感染类型感染类型所致疾病所致疾病侵袭性(化脓性感染)局部感染 皮肤,器官,呼吸道或血流 全身感染 败血症、脓毒血症等 毒素性假膜性肠炎食物中毒毒性休克综合征(TSS)烫伤样皮肤综合征(SSSS)图片来自人民卫生出版社教材及图片库图片来自人民卫生出版社教材及图片库(三)免疫性(三)免疫性 人类有一定的天然免疫力;人类有一定的天然免疫力;感染后获得一定免疫力,但不强,难以防止再感染后获得一定免疫力,但不强,难以防止再次感染。次感染。
15、(四)微生物学检查法(四)微生物学检查法标本:脓汁,血液,剩余食物,呕吐物等标本:脓汁,血液,剩余食物,呕吐物等1直接镜检直接镜检 涂片镜检涂片镜检 2分离培养鉴定分离培养鉴定3药敏实验药敏实验4葡萄球菌肠毒素的检测葡萄球菌肠毒素的检测G+葡萄球菌葡萄球菌,形态、排列、染色性形态、排列、染色性生长现象生长现象 色素,溶色素,溶血血,菌落菌落生化反应生化反应 血浆凝固血浆凝固酶酶发酵甘露醇发酵甘露醇耐热核酸酶耐热核酸酶毒素检查毒素检查 小猫试验小猫试验(五五)防治原则防治原则 预防预防注意注意消毒隔离消毒隔离注意注意个人卫生个人卫生防止防止医源性感染医源性感染防止防止耐药性产生耐药性产生治疗治疗
16、合理使用合理使用抗生素抗生素药敏试验药敏试验自身菌苗疗法自身菌苗疗法二、凝固酶阴性葡萄球菌二、凝固酶阴性葡萄球菌 (coagulase negative staphylococcus,CNS)1.CNS为革兰阳性菌,不产生血浆凝固酶、为革兰阳性菌,不产生血浆凝固酶、溶血溶血素等毒性物质。素等毒性物质。2.最常见最常见CNS是表皮葡萄球菌和腐生葡萄球菌,是表皮葡萄球菌和腐生葡萄球菌,约约30多种多种 3.CNS是人体皮肤和黏膜的正常菌群,检出率约是人体皮肤和黏膜的正常菌群,检出率约90%。当机体免疫功能低下或进入非正常寄居部。当机体免疫功能低下或进入非正常寄居部位时,位时,CNS可引起多种感染,
17、在各类感染中仅次可引起多种感染,在各类感染中仅次于大肠埃希菌,居病原菌第于大肠埃希菌,居病原菌第2位。位。4.致病机制主要是:致病机制主要是:细菌胞壁外粘质;细菌胞壁外粘质;溶血素;溶血素;选择性吸附在尿道上皮细胞。选择性吸附在尿道上皮细胞。5.CNS引起感染引起感染 泌尿系感染,泌尿系感染,细菌性心内膜炎,细菌性心内膜炎,败血症败血症术后及植入医用器械引起的感染术后及植入医用器械引起的感染第二节第二节 链球菌属(链球菌属(Streptococcus)一、一、A群链球菌群链球菌(一)生物学特性(一)生物学特性 1.形态:形态:G+,球形,链状排列,革兰染色阳性,球形,链状排列,革兰染色阳性(G
18、+)v广泛分布于自然界、人及动物粪便和健康人的鼻咽部,广泛分布于自然界、人及动物粪便和健康人的鼻咽部,v大多数为正常菌群,不致病。大多数为正常菌群,不致病。v对人类致病的主要是对人类致病的主要是A组链球菌和肺炎链球菌。组链球菌和肺炎链球菌。图片来自人民卫生出版社教材及图片库图片来自人民卫生出版社教材及图片库 2.培养特性培养特性 营养要求高:血平板或含血清培养基营养要求高:血平板或含血清培养基(血液、血清、葡萄糖)。(血液、血清、葡萄糖)。液体培养为沉淀生长液体培养为沉淀生长 血平板呈灰白色表面光滑小菌落,出现血平板呈灰白色表面光滑小菌落,出现溶血现象溶血现象,不同菌株溶血不一。不同菌株溶血不
19、一。3.生化反应生化反应 分解葡萄糖分解葡萄糖 触酶(触酶(-),不分解菊糖,不被胆汁溶解),不分解菊糖,不被胆汁溶解(鉴别甲型溶血性链球菌与肺炎链球菌)(鉴别甲型溶血性链球菌与肺炎链球菌)图片来自人民卫生出版社教材及图片库图片来自人民卫生出版社教材及图片库 4.分类分类1)根据溶血现象分类)根据溶血现象分类溶血现象溶血现象名称名称类别类别致病性致病性草绿色溶血草绿色溶血 溶血溶血甲型溶血性链球菌甲型溶血性链球菌多为条件致病菌多为条件致病菌完全溶血完全溶血 溶血溶血乙型溶血性链球菌乙型溶血性链球菌致病力强致病力强不溶血不溶血丙型链球菌丙型链球菌无致病性无致病性 完全溶血完全溶血 不溶血不溶血
20、草绿色溶血草绿色溶血图片来自人民卫生出版社教材及图片库图片来自人民卫生出版社教材及图片库 2)根据抗原分类)根据抗原分类分分A、B、C等等20个群,对人致病的个群,对人致病的菌株菌株90%左右属左右属A群。群。A群致病菌群致病菌据据M抗原,抗原,分约分约100个型个型(溶血性链球菌或化脓性链球菌)溶血性链球菌或化脓性链球菌)根据蛋白抗原根据蛋白抗原进一步分类进一步分类M抗原抗原荚膜荚膜细胞壁细胞壁蛋白质蛋白质多糖多糖肽聚糖肽聚糖细胞膜细胞膜细胞质细胞质图片来自人民卫生出版社教材及图片库图片来自人民卫生出版社教材及图片库 抗原构造抗原构造 蛋白质抗原或表面抗原蛋白质抗原或表面抗原 型特异性型特异
21、性 多糖抗原或多糖抗原或C抗原抗原 群特异性群特异性 核蛋白抗原或核蛋白抗原或P抗原抗原 无特异性无特异性图片来自人民卫生出版社图片库图片来自人民卫生出版社图片库(二)致病性(二)致病性 1.致病物质致病物质 细菌胞壁成分细菌胞壁成分 脂磷壁酸脂磷壁酸 M蛋白蛋白 抗吞噬,抗吞噬细胞内杀菌作用,抗吞噬,抗吞噬细胞内杀菌作用,超敏反应超敏反应 F蛋白蛋白 黏附素,利于在宿主体内定植和繁黏附素,利于在宿主体内定植和繁殖殖 胞外酶胞外酶 透明质酸酶(扩散因子)分解细胞间质透明质酸酶(扩散因子)分解细胞间质的透明质酸的透明质酸 链激酶链激酶 链道酶(链道酶(DNA酶)酶)侵袭力侵袭力 致热外毒素(红疹
22、毒素)引起猩红致热外毒素(红疹毒素)引起猩红热热 链球菌溶素链球菌溶素SLO 对对O2敏感,链球菌新近感染敏感,链球菌新近感染 风湿热辅助诊断风湿热辅助诊断 SLS 对对O2稳定,稳定,溶血环溶血环 外毒素外毒素毒毒 素素链球菌的致病物质与致病作用链球菌的致病物质与致病作用致病物质致病物质致病作用致病作用致热外毒素致热外毒素 Pyrogenic exotoxin,SPE猩红热(猩红热(scarlet fever)链球菌溶素链球菌溶素 Streptolysin SLO 辅助诊断指标辅助诊断指标 SLS 溶血环溶血环透明质酸酶透明质酸酶 Hyaluronidase 扩散因子,分解细胞间扩散因子,分
23、解细胞间 质透明质质透明质酸酸链激酶链激酶 Streptokinase链道酶链道酶 Streptodornase酶解核酸酶解核酸M蛋白蛋白 Protein M 抗吞噬,抗吞噬细胞内杀菌作用,抗吞噬,抗吞噬细胞内杀菌作用,超敏反应超敏反应F蛋白蛋白 Protein F 黏附素,利于宿主内定植和繁殖黏附素,利于宿主内定植和繁殖脂磷壁酸脂磷壁酸 LPA链球菌致热外毒素链球菌致热外毒素 来源:处于溶原期的来源:处于溶原期的A群链球菌产生,群链球菌产生,特性:小分子蛋白质,耐热特性:小分子蛋白质,耐热9645min 生物学作用:生物学作用:1.致热性,通过改变血脑屏障的通透性实现。致热性,通过改变血脑屏
24、障的通透性实现。2.细胞毒性:对体外培养的脾细胞及巨细胞具有细细胞毒性:对体外培养的脾细胞及巨细胞具有细胞毒性。胞毒性。3.增加动物对内毒素的敏感性增加动物对内毒素的敏感性 溶血素(溶血素(streptolysin)链球菌溶血素链球菌溶血素O(streptolysin O,SLO):):SLO为含有为含有-SH基的蛋白质,对热及氧敏感,遇氧时基的蛋白质,对热及氧敏感,遇氧时-SH基被氧化成基被氧化成-S-S-基,暂时失去溶血能力,若加入还原剂如半胱氨酸等,又可恢复其溶基,暂时失去溶血能力,若加入还原剂如半胱氨酸等,又可恢复其溶血能力。血能力。SLO有抗原性,其抗体即抗有抗原性,其抗体即抗O抗体
25、(抗体(ASO)有中和)有中和SLO的活性,阻止其的活性,阻止其溶血作用。溶血作用。85%90%的患者于链球菌感染后的患者于链球菌感染后23w到病愈后数月或一到病愈后数月或一年内可查到这种抗体。年内可查到这种抗体。对氧稳定的溶血素对氧稳定的溶血素S(streptolysin S,SLS):SLS是小分子糖肽,无抗原性是小分子糖肽,无抗原性2.A 群链球菌所致疾病群链球菌所致疾病(1)化脓性感染化脓性感染(2)中毒性疾病中毒性疾病猩红热猩红热由产生致热外毒素的化脓性链球菌所致。由产生致热外毒素的化脓性链球菌所致。细菌经咽喉黏膜侵入机体,增殖并产生毒素引起细菌经咽喉黏膜侵入机体,增殖并产生毒素引起
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