动物细胞工程医学课件.ppt

1、知识目标：知识目标：1、简述动物细胞培养的过程2、动物细胞培养的特点3、细胞株与细胞系的区别4、动物细胞培养的条件5、简述动物细胞培养的应用6、图示体细胞核移植的过程7、体细胞核移植选什么作受体细胞？为什么？知识目标：知识目标：8、促进动物细胞融合的方法？9、单克隆抗体的制备过程10、传统抗体与单克隆抗体的特点11、杂交瘤细胞的特点12、10代以内的传代细胞具有什么特点？动物细胞工程的基本技术动物细胞工程的基本技术 动物细胞培养动物细胞培养动物细胞核移植动物细胞核移植动物细胞融合动物细胞融合单克隆抗体制备单克隆抗体制备动物细胞动物细胞工工 程程20032003年月日下午，年月日下午，1212岁

2、的四川简阳少年小林放岁的四川简阳少年小林放学路上捡了些鞭炮，并把里学路上捡了些鞭炮，并把里面的火药抖出来，蹲在地上面的火药抖出来，蹲在地上将其点燃，导致面部、四肢将其点燃，导致面部、四肢不幸被严重烧伤并感染，在不幸被严重烧伤并感染，在当地医院治疗半月后，于当地医院治疗半月后，于4 4月月2222日转入武警四川消防总队日转入武警四川消防总队医院烧伤整形科。医院烧伤整形科。为了挽救儿子的生命，小林的爸爸、妈妈向医生恳求：为了挽救儿子的生命，小林的爸爸、妈妈向医生恳求：“割割我们的皮给儿子吧！我们的皮给儿子吧！”烧伤整形科主任魏平经不起这份烧伤整形科主任魏平经不起这份亲情的重托，最终亲情的重托，最终

3、“妥协妥协”了：同意进行这种国内了：同意进行这种国内极其罕见的亲体皮肤移植手术。极其罕见的亲体皮肤移植手术。.细胞培养图思考一下！思考一下！1、小林在皮肤烧伤之后，很容易得病，为什么？、小林在皮肤烧伤之后，很容易得病，为什么？2、皮肤在我们人体当中是第几道防线，其他几道防线是什么？、皮肤在我们人体当中是第几道防线，其他几道防线是什么？3、选取植皮时，理论上选择谁的皮肤最好？为什么？、选取植皮时，理论上选择谁的皮肤最好？为什么？4、自身的健康皮肤是有限的，能不能通过其他途径获得自身、自身的健康皮肤是有限的，能不能通过其他途径获得自身 的皮肤？的皮肤？缺少皮肤的保护作用缺少皮肤的保护作用第一道防线

4、，第二道防线是溶菌酶、吞噬细胞等，第三第一道防线，第二道防线是溶菌酶、吞噬细胞等，第三道防线是细胞、体液免疫系统道防线是细胞、体液免疫系统自己的，不发生免疫排斥反应自己的，不发生免疫排斥反应动物细胞培养动物细胞培养一、动物细胞培养一、动物细胞培养 1 1、概念：、概念：就是从动物机体中取出就是从动物机体中取出相应的组织，将它相应的组织，将它分散成单个细胞分散成单个细胞，然后放在适宜的培养基中，让这些细然后放在适宜的培养基中，让这些细胞胞生长和增殖生长和增殖。原理：原理：细胞增殖细胞增殖 2 2、过程、过程取材：取材：选取选取动物胚胎动物胚胎或或幼龄动物幼龄动物的组织、器官（分的组织、器官（分裂

5、能力强）裂能力强）分散成单个细胞：分散成单个细胞：用胰蛋白酶用胰蛋白酶(PH:8-9)或胶原蛋白酶或胶原蛋白酶一、动物细胞培养一、动物细胞培养 制成细胞悬液：制成细胞悬液：用培养液将分散的细胞制成细胞悬液；用培养液将分散的细胞制成细胞悬液；原代细胞培养：原代细胞培养：动物组织消化后的初次培养；动物组织消化后的初次培养；传代细胞培养：传代细胞培养：贴满瓶壁的细胞重新用贴满瓶壁的细胞重新用胰蛋白酶胰蛋白酶处理处理后分瓶继续培养，让细胞继续增殖；后分瓶继续培养，让细胞继续增殖；一、动物细胞培养一、动物细胞培养 动物胚胎或幼龄动物的组织、器官动物胚胎或幼龄动物的组织、器官细胞悬浮液细胞悬浮液胰蛋白酶胰

6、蛋白酶1010代细胞代细胞原代培养原代培养40-5040-50代细胞代细胞传代培养传代培养细胞株细胞株无限传代无限传代细胞系细胞系单个细胞单个细胞加培养液加培养液遗传物质遗传物质未改变未改变遗传物质遗传物质已改变已改变3 3、动物细胞培养过程的基本概念、动物细胞培养过程的基本概念细胞贴壁：细胞贴壁：细胞在培养过程中，分散的细胞在培养过程中，分散的细胞贴附在瓶壁上。细胞贴附在瓶壁上。接触抑制：接触抑制：贴壁细胞分裂生长到表面相贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时，细胞会停止分裂增殖；互接触时，细胞会停止分裂增殖；一、动物细胞培养一、动物细胞培养 细胞在贴壁细胞在贴壁生长过程中，随生长过程中，随着细胞

7、分裂，数着细胞分裂，数量不断增加，最量不断增加，最后形成一个单细后形成一个单细胞层，此时细胞胞层，此时细胞间相互接触，细间相互接触，细胞分裂和生长停胞分裂和生长停止，数量不再增止，数量不再增加。加。贴壁生长、接触抑制贴壁生长、接触抑制细胞贴壁过程细胞贴壁过程培养瓶或培养皿壁要求：培养瓶或培养皿壁要求：表面光滑、无毒、易表面光滑、无毒、易于贴附。于贴附。3 3、动物细胞培养过程的基本概念、动物细胞培养过程的基本概念细胞株：细胞株：细胞在传代培养中，传到细胞在传代培养中，传到1010代左右就代左右就不容易传下去，少数细胞度过危机可继续传下去，不容易传下去，少数细胞度过危机可继续传下去，这些存活细胞

8、能传这些存活细胞能传40405050代，这种传代细胞叫代，这种传代细胞叫细细胞株胞株，其，其遗传物质没有改变遗传物质没有改变。细胞系：细胞系：极少数细胞株细胞度过危机，极少数细胞株细胞度过危机，遗传物遗传物质改变质改变，带有，带有癌细胞癌细胞特点，可无限制的传下去，特点，可无限制的传下去，这部分细胞叫这部分细胞叫细胞系细胞系。(1)(1)为什么选用动物胚胎或幼龄个体的器官为什么选用动物胚胎或幼龄个体的器官或组织做动物细胞培养材料？或组织做动物细胞培养材料？答：答：因为这些组织或器官，因为这些组织或器官，分裂能分裂能力旺盛力旺盛，易于培养。，易于培养。(2)(2)为什么培养前要将组织细胞分散成单

9、为什么培养前要将组织细胞分散成单个细胞？个细胞？答：答：成块组织中细胞与细胞靠在一起，成块组织中细胞与细胞靠在一起，限制了细胞的生长和增殖限制了细胞的生长和增殖，且，且细胞不能与培细胞不能与培养液充分接触养液充分接触，不利于培养。，不利于培养。(3)(3)胰蛋白酶的作用是什么？由此可说明胰蛋白酶的作用是什么？由此可说明细胞间的物质是什么成份？细胞间的物质是什么成份？能够用胃蛋白酶能够用胃蛋白酶代替胰蛋白酶吗？为什么？代替胰蛋白酶吗？为什么？答：答：催化蛋白质水解催化蛋白质水解。细胞间的物质主。细胞间的物质主要是要是蛋白质蛋白质(胶原蛋白等胶原蛋白等)。不能。不能。因为两者的最适因为两者的最适p

10、H不同不同，而正，而正常组织细胞的生存环境与胰蛋白酶的最适常组织细胞的生存环境与胰蛋白酶的最适pH较接近。较接近。（4 4）目前使用的或冷冻保存的正常细胞通）目前使用的或冷冻保存的正常细胞通常在常在1010代以内，为什么？代以内，为什么？因为因为10代以内的细胞代以内的细胞遗传物质不改变，遗传物质不改变，保持正常二倍体核型保持正常二倍体核型。（5 5）用胰蛋白酶处理不会把所培养的细胞消化掉）用胰蛋白酶处理不会把所培养的细胞消化掉 吗？吗？控制好时间！长时间处理当然会损伤细胞。控制好时间！长时间处理当然会损伤细胞。4 4、动物细胞培养条件、动物细胞培养条件 无菌、无毒环境无菌、无毒环境 可以培养

11、基中加一些抗生素，以防培养可以培养基中加一些抗生素，以防培养过程的污染；过程的污染；定期更换培养液，以便清除代谢产物，定期更换培养液，以便清除代谢产物，防止代谢产物积累对细胞自身造成危害；防止代谢产物积累对细胞自身造成危害；一、动物细胞培养一、动物细胞培养 营养条件营养条件:水、无机盐、水、无机盐、葡萄糖葡萄糖、氨基、氨基酸（作为氮源）、生长因子、维生素等；酸（作为氮源）、生长因子、维生素等；可加可加血清、血浆血清、血浆等天然成分。等天然成分。一、动物细胞培养一、动物细胞培养 温度和温度和PHPH值值 温度：温度：36.536.50.50.5O OC C PH：7.27.27.47.4 气体环

12、境气体环境 95%95%氧气氧气:细胞代谢所需细胞代谢所需;5%5%二氧化碳二氧化碳:维持培养液的维持培养液的PHPH值值;一、动物细胞培养一、动物细胞培养 5 5、实际应用、实际应用 大规模生产生物制品，如单克隆抗体大规模生产生物制品，如单克隆抗体;基因工程的受体细胞基因工程的受体细胞;培养的动物细胞用于检测有毒物质培养的动物细胞用于检测有毒物质;培养正常或病变细胞，用于生理、培养正常或病变细胞，用于生理、药理、病理研究药理、病理研究;一、动物细胞培养一、动物细胞培养 获得细胞获得细胞细胞的全能性细胞的全能性细胞株、细胞系细胞株、细胞系植物体植物体培养结果培养结果或细胞分泌蛋白或细胞分泌蛋白

13、快速繁殖、培育快速繁殖、培育无病毒植株等无病毒植株等培养目的培养目的葡萄糖、动物血清葡萄糖、动物血清蔗糖、植物激素蔗糖、植物激素培养基特有成分培养基特有成分液体培养基液体培养基固体培养基固体培养基培养基性质培养基性质细胞增殖细胞增殖原理原理动物细胞培养动物细胞培养植物组织培养植物组织培养比较项目比较项目 1 1、动物细胞核移植技术的概念、动物细胞核移植技术的概念 动物核移植是将动物的一个细胞的动物核移植是将动物的一个细胞的细细胞核胞核,移入一个已经去掉细胞核的移入一个已经去掉细胞核的卵母细卵母细胞胞中中,使其重组并发育成一个使其重组并发育成一个新的胚胎新的胚胎,这这个新的胚胎最终发育成为动物个

14、体个新的胚胎最终发育成为动物个体;二、动物体细胞核移植技术和克隆动物二、动物体细胞核移植技术和克隆动物 2 2、克隆动物的概念、克隆动物的概念 用核移植方法得到的动物称为用核移植方法得到的动物称为克隆动克隆动物物;3 3、核移植的种类、核移植的种类 胚胎细胞核移植胚胎细胞核移植:细胞分化程度低，细胞分化程度低，恢复全能性容易恢复全能性容易;体细胞核移植：体细胞核移植：细胞分化程度高，细胞分化程度高，恢复全能性困难恢复全能性困难;二、动物体细胞核移植技术和克隆动物二、动物体细胞核移植技术和克隆动物 4 4、体细胞核移植的过程、体细胞核移植的过程去核卵母细胞去核卵母细胞供体体细胞供体体细胞重组细胞

15、重组细胞重组胚胎重组胚胎克隆动物克隆动物代孕母牛代孕母牛C C卵母细胞培卵母细胞培养至减养至减中中供体细胞培养供体细胞培养高产奶牛高产奶牛A供卵奶牛供卵奶牛B采用物理或化学方法激活重组细胞，采用物理或化学方法激活重组细胞，使其完成细胞分裂和发育过程使其完成细胞分裂和发育过程。细胞核移植细胞核移植胚胎移植胚胎移植卵细胞卵细胞母羊母羊B B母羊母羊A A 乳腺细胞乳腺细胞胚胎移植胚胎移植细胞核移植细胞核移植细胞质细胞质 融合后的卵细胞融合后的卵细胞细胞核细胞核母羊母羊C子宫子宫早期胚胎早期胚胎多莉羊多莉羊分娩分娩 卵裂卵裂妊娠妊娠问题问题1 1、多莉羊是雄还是雌？、多莉羊是雄还是雌？2 2、克隆羊

16、多莉的成功证明了什么？、克隆羊多莉的成功证明了什么？(1)(1)为什么体细胞核移植技术要选为什么体细胞核移植技术要选MM期的卵期的卵母细胞作为受体细胞？母细胞作为受体细胞？减减中期的卵母细胞中期的卵母细胞,此时具备受精能力此时具备受精能力,细胞细胞质中合成与分裂分化有关的物质，能刺激融合后质中合成与分裂分化有关的物质，能刺激融合后重组细胞进行分裂分化重组细胞进行分裂分化,从而形成重组胚胎。从而形成重组胚胎。（2）选择卵母细胞作为受体细胞的原因是什么？）选择卵母细胞作为受体细胞的原因是什么？大大,易于操作易于操作;卵黄多卵黄多,营养丰富营养丰富,为发育提供充足为发育提供充足的营养的营养;激发重组

17、细胞分裂分化。激发重组细胞分裂分化。（3）为什么不直接用体细胞培养为动物？为什么不直接用体细胞培养为动物？（4）克隆属于什么生殖方式？）克隆属于什么生殖方式？（5）克隆出来的奶牛是什么性别？）克隆出来的奶牛是什么性别？（6）克隆奶牛出现说明了什么？）克隆奶牛出现说明了什么？A、体细胞核移植技术的、体细胞核移植技术的成功率非常低成功率非常低。B、克隆动物、克隆动物存在健康问题存在健康问题，表现出生，表现出生理缺陷、遗传缺陷等。理缺陷、遗传缺陷等。C、克隆动物食品的、克隆动物食品的安全性问题安全性问题存在争存在争议。议。5 5、体细胞核移植技术存在的问题、体细胞核移植技术存在的问题 6 6、体细胞

18、核移植技术的应用前景、体细胞核移植技术的应用前景 在畜牧业中可以加速家畜遗传改在畜牧业中可以加速家畜遗传改良的进程；良的进程；保护濒危物种；保护濒危物种；生产医用蛋白质及组织器官移植生产医用蛋白质及组织器官移植的供体；的供体；二、动物体细胞核移植技术和克隆动物二、动物体细胞核移植技术和克隆动物 三、动物细胞融合三、动物细胞融合 1 1、概念：、概念：也叫也叫细胞杂交细胞杂交，指，指两个两个或多个或多个动物细胞结合成一个细胞的过动物细胞结合成一个细胞的过程程。整合后的细胞叫杂交细胞。整合后的细胞叫杂交细胞。三、动物细胞融合三、动物细胞融合 2 2、细胞融合方法：、细胞融合方法：物理方法：物理方法

19、：离心、电刺激、振动离心、电刺激、振动化学方法：化学方法：PEG（聚乙二醇）（聚乙二醇）生物方法：生物方法：灭活的病毒灭活的病毒细胞核细胞核病毒颗粒病毒颗粒细胞核细胞核 灭活的病毒与细胞膜灭活的病毒与细胞膜上的糖蛋白作用，使细胞上的糖蛋白作用，使细胞相互融合。相互融合。细胞膜上的糖蛋白细胞膜上的糖蛋白分子和脂质重新排布分子和脂质重新排布细胞膜打开细胞膜打开细胞融合，形成杂种细胞细胞融合，形成杂种细胞三、动物细胞融合三、动物细胞融合 3 3、细胞融合意义：、细胞融合意义：突破了有性杂交的局限，使远缘突破了有性杂交的局限，使远缘杂交成为可能；杂交成为可能；用途用途:：制备单克隆抗体：制备单克隆抗体

20、植物、动物细胞融合的比植物、动物细胞融合的比较较比较项目比较项目植物体细胞杂交植物体细胞杂交动物细胞融合动物细胞融合原原 理理细胞膜的流动性细胞膜的流动性细胞全能性细胞全能性细胞膜的流动性细胞膜的流动性目目 的的获得杂种植株获得杂种植株获得细胞产品获得细胞产品诱导细胞诱导细胞融合方法融合方法物理物理化学化学物理、化学物理、化学灭活的病毒灭活的病毒杂交前处理杂交前处理 用纤维素酶或果用纤维素酶或果胶酶去壁得原生胶酶去壁得原生质体质体用胰蛋白酶使之用胰蛋白酶使之分散成单个细胞分散成单个细胞四、单克隆抗体的制备四、单克隆抗体的制备生产：生产：注射抗原注射抗原从动物血清中分离从动物血清中分离 问题：问

21、题：抗体产量低、纯度低、特异性差；抗体产量低、纯度低、特异性差；、传统抗体生产及特点、传统抗体生产及特点四、单克隆抗体的制备四、单克隆抗体的制备B B淋巴细胞受抗原刺激后，可以产生抗体淋巴细胞受抗原刺激后，可以产生抗体动物体内的动物体内的B B淋巴细胞可以产生百万种以淋巴细胞可以产生百万种以上的抗体，每种抗体对特定的抗原具有特异性上的抗体，每种抗体对特定的抗原具有特异性免疫作用；免疫作用；每一个淋巴细胞只能产生一种抗体每一个淋巴细胞只能产生一种抗体；、B B淋巴细胞与抗体的关系淋巴细胞与抗体的关系四、单克隆抗体的制备四、单克隆抗体的制备3 3、单克隆抗体的制备、单克隆抗体的制备思路：思路：克隆

22、单一的浆细胞成为细胞群，克隆单一的浆细胞成为细胞群，同时解决浆细胞不能无限增殖的问同时解决浆细胞不能无限增殖的问题将浆细胞与骨髓瘤细胞融合；题将浆细胞与骨髓瘤细胞融合；四、单克隆抗体的制备四、单克隆抗体的制备3 3、单克隆抗体的制备、单克隆抗体的制备过程过程 小鼠注射抗原小鼠注射抗原体外培养体外培养注射到小鼠腹腔注射到小鼠腹腔B B淋巴细胞淋巴细胞骨髓瘤细胞骨髓瘤细胞诱导融合诱导融合3 3种两两融合细胞种两两融合细胞HAT选择培养基筛选选择培养基筛选多种杂交瘤细胞多种杂交瘤细胞专一性抗体检验专一性抗体检验能产生某一种特定抗体的杂交瘤细胞能产生某一种特定抗体的杂交瘤细胞单克隆抗体单克隆抗体单克隆

23、杂交瘤细胞单克隆杂交瘤细胞四、单克隆抗体的制备四、单克隆抗体的制备3 3、单克隆抗体的制备、单克隆抗体的制备单克隆抗体的单克隆抗体的特点特点：特异性强、灵敏度高、可大量生特异性强、灵敏度高、可大量生产产单克隆抗体的单克隆抗体的原理原理：免疫原理免疫原理细胞融合原理细胞融合原理动物细胞培养原理动物细胞培养原理四、单克隆抗体的制备四、单克隆抗体的制备3 3、单克隆抗体的制备、单克隆抗体的制备应用应用作为诊断试剂作为诊断试剂用于治疗疾病和运载药物用于治疗疾病和运载药物四、单克隆抗体的制备四、单克隆抗体的制备3 3、单克隆抗体的制备、单克隆抗体的制备杂交瘤细胞的杂交瘤细胞的特点特点：既能无限增殖，又能

24、产生特异性既能无限增殖，又能产生特异性抗体；抗体；1 1、动物细胞融合和植物原生质体融合比较，、动物细胞融合和植物原生质体融合比较，在动物细胞融合中有特殊性的是（在动物细胞融合中有特殊性的是（）A A、融合的原理、融合的原理 B B、融合的优点、融合的优点C C、融合的诱导手段、融合的诱导手段 D D、融合的过程、融合的过程2 2、动物细胞融合的目的中最重要的是（、动物细胞融合的目的中最重要的是（）A A、克服远缘杂交不亲和、克服远缘杂交不亲和 B B、制备单克隆抗体、制备单克隆抗体C C、培育新物种、培育新物种 D D、生产杂种细胞、生产杂种细胞3 3、科学家用小鼠骨髓瘤细胞与某种细胞融合，

25、、科学家用小鼠骨髓瘤细胞与某种细胞融合，得到杂交细胞，经培养可产生大量的单克隆抗得到杂交细胞，经培养可产生大量的单克隆抗体，与骨髓瘤细胞融合的是（体，与骨髓瘤细胞融合的是（）A A、经过免疫的、经过免疫的B B淋巴细胞淋巴细胞 B B、不经过免疫的、不经过免疫的T T淋巴细胞淋巴细胞 C C、经过免疫的、经过免疫的T T淋巴细胞淋巴细胞 D D、不经过免疫的、不经过免疫的B B淋巴细胞淋巴细胞4.单克隆抗体制备过程中，骨髓瘤细胞和单克隆抗体制备过程中，骨髓瘤细胞和B淋巴细胞淋巴细胞诱导融合后，要用特定培养基筛选出杂交瘤细胞，诱导融合后，要用特定培养基筛选出杂交瘤细胞，在这种培养基上不能存活增殖

26、的细胞是（在这种培养基上不能存活增殖的细胞是（）淋巴细胞小鼠骨髓瘤细胞淋巴细胞小鼠骨髓瘤细胞B淋巴细胞自身融淋巴细胞自身融 合细胞小鼠骨髓瘤细胞自身融合细胞合细胞小鼠骨髓瘤细胞自身融合细胞 杂交瘤细胞杂交瘤细胞 A B C D 5 5、研究单克隆抗体治疗癌症的思路是（、研究单克隆抗体治疗癌症的思路是（）A A利用单克隆抗体特异性地对抗癌细胞利用单克隆抗体特异性地对抗癌细胞 B B以单克隆抗体作抗癌药物杀死癌细胞以单克隆抗体作抗癌药物杀死癌细胞C C抗癌物质在克隆细胞中大量合成抗癌物质在克隆细胞中大量合成D D单克隆抗体携带抗癌药物特异性地与癌细胞单克隆抗体携带抗癌药物特异性地与癌细胞结合结合6

27、 6只能使动物细胞融合的常用诱导方法（只能使动物细胞融合的常用诱导方法（）A APEGPEG B B灭活的病毒灭活的病毒 C C电刺激电刺激 D D离心离心7 7、“生物导弹生物导弹”是指是指 （）A.A.单克隆抗体单克隆抗体 B.B.杂交瘤细胞杂交瘤细胞 C.C.产生特定抗体的产生特定抗体的B B淋巴细胞淋巴细胞 D.D.在单抗上连接抗癌药物在单抗上连接抗癌药物8 8、下列关于单克隆抗体的制备和应用的叙述中，、下列关于单克隆抗体的制备和应用的叙述中，不正确的是（不正确的是（）A AB B淋巴细胞与骨髓瘤细胞的融合，一般不淋巴细胞与骨髓瘤细胞的融合，一般不 需要灭活的仙台病毒或聚乙二醇诱导需要

28、灭活的仙台病毒或聚乙二醇诱导B B融合后形成的杂交瘤细胞既能无限增殖，又融合后形成的杂交瘤细胞既能无限增殖，又 能产生单克隆抗体能产生单克隆抗体C C体外培养时，一个效应体外培养时，一个效应B B淋巴细胞可以产生淋巴细胞可以产生 抗体，但不能无限增殖抗体，但不能无限增殖D D单克隆抗体与常规抗体相比，特异性强，灵单克隆抗体与常规抗体相比，特异性强，灵 敏度高，优越性明显敏度高，优越性明显A图中图中B为为_过程，过程，常用常用_作为诱导剂作为诱导剂，该细胞继承，该细胞继承_的遗传特性，既能的遗传特性，既能_,又能又能_ 。B体外培养体外培养骨髓瘤细胞骨髓瘤细胞杂交瘤细胞杂交瘤细胞足够数量的细胞群

29、足够数量的细胞群注射到注射到小鼠腹腔小鼠腹腔AC 1下列与动物细胞培养有关的表述中，不下列与动物细胞培养有关的表述中，不正确的是正确的是 （）A培养液通常含有葡萄糖、氨基酸、培养液通常含有葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素和动物血清无机盐、维生素和动物血清B原代培养的细胞一般传至原代培养的细胞一般传至10代左右代左右便会出现生长停滞便会出现生长停滞C动物细胞培养一般能够传到动物细胞培养一般能够传到4050代，但其遗传物质发生了改变代，但其遗传物质发生了改变D动物细胞培养可用于检测有毒物质动物细胞培养可用于检测有毒物质和获得大量自身健康细胞和获得大量自身健康细胞智力快餐智力快餐:C2生物技术的发展速

30、度很快，已灭绝生物的生物技术的发展速度很快，已灭绝生物的“复复生生”将不再是神话。如果世界上最后一只野驴刚将不再是神话。如果世界上最后一只野驴刚死亡，以下较易成功死亡，以下较易成功“复生复生”野驴的方法是野驴的方法是 （）A将野驴的体细胞取出，利用组织培养技术，将野驴的体细胞取出，利用组织培养技术，经经 脱分化、再分化，培育成新个体脱分化、再分化，培育成新个体B将野驴的体细胞两两融合，再经组织培养培将野驴的体细胞两两融合，再经组织培养培育育 成新个体成新个体C取出野驴的体细胞核移植到母家驴的去核卵取出野驴的体细胞核移植到母家驴的去核卵细胞中，经孕育培养成新个体细胞中，经孕育培养成新个体D将野驴的基因导入家驴的受精卵中，培育成将野驴的基因导入家驴的受精卵中，培育成新个体新个体C3一只羊的卵细胞核被另一只羊的体细胞核置一只羊的卵细胞核被另一只羊的体细胞核置换后，这个卵细胞经过多次分裂，再植入第三换后，这个卵细胞经过多次分裂，再植入第三只羊的子宫内发育，结果产下一只羊羔。这种只羊的子宫内发育，结果产下一只羊羔。这种克隆技术具有多种用途，但是不能克隆技术具有多种用途，但是不能（）A有选择地繁殖某一性别的家畜有选择地繁殖某一性别的家畜 B繁殖家畜中的优秀个体繁殖家畜中的优秀个体 C用于保存物种用于保存物种 D改变动物的基因型改变动物的基因型D