兽医临床病理学第三节课件.ppt
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- 兽医 临床 病理学 三节 课件
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1、第一页,共49页。兽医临床病理学第三节兽医临床病理学第三节兽医临床病理学第三节一、临床化学自动分析仪一、临床化学自动分析仪 世界上第一台用于临床生化检验的自动分仪,世界上第一台用于临床生化检验的自动分仪,是美国泰克尼康公司是美国泰克尼康公司TECHNICONTECHNICON,于于 1957 1957年年生产的,仪器名为生产的,仪器名为Auto AnalyzerAuto Analyzer。是一台单通道、连续、流动式自动分析仪。是一台单通道、连续、流动式自动分析仪。最初只用于最初只用于Glu.BUN Glu.BUN 测定。测定。报告结果是光密度值。报告结果是光密度值。第二页,共49页。一、临床化
2、学自动分析仪第二页,共4 9 页。1964 1964年,泰克尼康公司又生产出连年,泰克尼康公司又生产出连续、多道自动分析仪续、多道自动分析仪 SMA SMA。Sequential multiple Auto Sequential multiple Auto analyzeranalyzer,该仪器由电子计算机控制,该仪器由电子计算机控制,每小时测每小时测150150个样本,每个样本同时测定个样本,每个样本同时测定2020个工程,使连续流动分析到达了一个新个工程,使连续流动分析到达了一个新的水平。的水平。65 65年以后,各种自动分析仪器应年以后,各种自动分析仪器应运而生。运而生。第三页,共49
3、页。1 9 6 4 年,泰克尼康公司又生产出连续、多道自动分析 1目前临床常用的自动分析仪器有1生化分析仪 有半自动、全自动和进口、国产 2血气酸碱分析仪 3血细胞计数仪 4全自动电位滴定仪 5全自动血液细胞分析仪 第四页,共49页。1 目前临床常用的自动分析仪器有第四页,共4 9 页。2评价自动分析仪器的原那么 1方法先进 2重复性好 3要有准确重复的分析系统 4能自动定时 5结果报告醒目、直观 6适应范围广,一机多用 7灵敏性好 8处理能力强 9实用 第五页,共49页。2 评价自动分析仪器的原那么第五页,共4 9 页。二、质量控制二、质量控制 1 1质量控制的目的质量控制的目的 保证检测结
4、果准确、可靠保证检测结果准确、可靠 通过质量控制,能够到达通过质量控制,能够到达 了解试验结果的精细度了解试验结果的精细度 防止试验出现误差防止试验出现误差 了解和校正试验的准确度了解和校正试验的准确度 进展实验室之间的比较进展实验室之间的比较 监测仪器的工作状态监测仪器的工作状态 了解操作者的操作水平了解操作者的操作水平 第六页,共49页。二、质量控制第六页,共4 9 页。2与质量控制有关的概念【误差】指的是实验结果与真实数值之间的差异 系统误差恒定误差 原因:仪器使用不当 分析方法不完善 试剂不纯 环境改变 操作失误 第七页,共49页。2 与质量控制有关的概念第七页,共4 9 页。随机误差
5、偶然误差随机误差偶然误差 事先无法预料,出现误差的大小没有规律,完事先无法预料,出现误差的大小没有规律,完全符合概率论定律。这种误差通过严格操作规程,全符合概率论定律。这种误差通过严格操作规程,认真细致的工作是可以减少。当测定次数增多时,认真细致的工作是可以减少。当测定次数增多时,此时误差可相应抵消。此时误差可相应抵消。过失误差过失误差 由工作不慎或操作不当而引起。如配错试剂,由工作不慎或操作不当而引起。如配错试剂,搞错样本,操作不正确,读数、记录或计算有误等。搞错样本,操作不正确,读数、记录或计算有误等。第八页,共49页。随机误差偶然误差第八页,共4 9 页。绝对误差绝对误差 即测定值与真值
6、之差即测定值与真值之差 如:称量为如:称量为1.655g1.655g,实重,实重1.654g1.654g,绝对误差为,绝对误差为 0.001g 0.001g。相对误差相对误差 绝对误差在真实数值中所占的百分率绝对误差在真实数值中所占的百分率 如上例:如上例:相对误差相对误差=0.001/1.654=0.001/1.654100%100%=0.06%=0.06%第九页,共49页。绝对误差第九页,共4 9 页。【准确度】【准确度】测定值与真值之间的符合程度测定值与真值之间的符合程度 误差愈小,准确度越大误差愈小,准确度越大【精细度】【精细度】每次测定值与算术平均值之间的符合程度每次测定值与算术平均
7、值之间的符合程度 通常把测定值与算术平均值之间的差异称之为通常把测定值与算术平均值之间的差异称之为偏差。偏差。偏差愈小,准确度愈高。偏差愈小,准确度愈高。第十页,共49页。【准确度】第十页,共4 9 页。3 3减少误差的措施减少误差的措施 纠正系统误差纠正系统误差 a a校准仪器和量具校准仪器和量具 b b作阴性、阳性对照作阴性、阳性对照 c c用多种方法相互比较用多种方法相互比较 d d用参照标准样本检验用参照标准样本检验第十一页,共49页。3 减少误差的措施第十一页,共4 9 页。减少偶然误差减少偶然误差 a a精心操作,严格执行操作规程精心操作,严格执行操作规程 b b固定使用已校正的仪
8、器固定使用已校正的仪器 c c重复测定取均值等重复测定取均值等 消除过失误差消除过失误差 a a作好原始记录作好原始记录 b b建立核对检查制度建立核对检查制度 c c制订统一的操作规程,人人遵守制订统一的操作规程,人人遵守第十二页,共49页。减少偶然误差第十二页,共4 9 页。三、临床化学检验三、临床化学检验一一 常用的检验工程常用的检验工程 蛋白质蛋白质 葡萄糖葡萄糖 脂类脂类 无机离子无机离子 有机物:有机物:BUN,尿酸,肌肝、肌酸,尿酸,肌肝、肌酸 微量元素:微量元素:Cu、Fe、Mn、Zn、Se、Co、Mo 血气分析与酸碱平衡等血气分析与酸碱平衡等第十三页,共49页。三、临床化学检
9、验第十三页,共4 9 页。二二 各项检验各项检验 【蛋白质】【蛋白质】1.1.研究进展迅速研究进展迅速 蛋白质的合成、降解、转换更新和代谢调节蛋白质的合成、降解、转换更新和代谢调节 蛋白质生理功能的进一步研究蛋白质生理功能的进一步研究 蛋白质的遗传变异,通过它了解遗传特征蛋白质的遗传变异,通过它了解遗传特征 以新技术对血浆蛋白质进展微量和特异检测分析以新技术对血浆蛋白质进展微量和特异检测分析 在进化与个体发育的研究中,发现不少正常胎儿在进化与个体发育的研究中,发现不少正常胎儿 期蛋白可以在恶性肿瘤患者重新出现期蛋白可以在恶性肿瘤患者重新出现 蛋白质实际用于组织与细胞培养蛋白质实际用于组织与细胞
10、培养 在肿瘤的发病学研究中广泛涉及血浆蛋白质在肿瘤的发病学研究中广泛涉及血浆蛋白质第十四页,共49页。二 各项检验第十四页,共4 9 页。2.2.蛋白质的功能蛋白质的功能 可概括为:可概括为:营养作用营养作用 维持血浆胶体渗透压维持血浆胶体渗透压 维持血浆正常维持血浆正常pHpH值值 运输作用运输作用 免疫与防御功能免疫与防御功能 催化作用催化作用 代谢调控代谢调控 凝血、抗凝血及纤溶作用等凝血、抗凝血及纤溶作用等第十五页,共49页。2.蛋白质的功能 第十五页,共4 9 页。盐析法:白蛋白和球蛋白盐析法:白蛋白和球蛋白 电泳法:白蛋白、电泳法:白蛋白、11、22、球蛋白球蛋白 第十六页,共49
11、页。第十六页,共4 9 页。凯氏定氮法参考标准方法凯氏定氮法参考标准方法 消化用浓硫酸将蛋白质消化为硫酸铵耗时消化用浓硫酸将蛋白质消化为硫酸铵耗时 蒸馏用碱性溶液碱化消化液并蒸馏挥发;蒸馏用碱性溶液碱化消化液并蒸馏挥发;吸收用酸性溶液硼酸吸收气态氨使吸收用酸性溶液硼酸吸收气态氨使H+H+滴定用已标定的无机酸滴定,计算总氮量滴定用已标定的无机酸滴定,计算总氮量 定蛋白总氮量定蛋白总氮量-非蛋白氮非蛋白氮6.25=6.25=蛋白含量蛋白含量第十七页,共49页。第十七页,共4 9 页。双缩脲比色法血浆总蛋白测定推荐方法双缩脲比色法血浆总蛋白测定推荐方法 原理原理 蛋白质中的肽键蛋白质中的肽键-CON
12、H-CONH-在碱性条件下在碱性条件下与与Cu2+Cu2+络合成紫红色化合物,产生的颜色在一络合成紫红色化合物,产生的颜色在一定范围内与蛋白质含量成正比。此反响和二分定范围内与蛋白质含量成正比。此反响和二分子尿素缩合后的产物双缩脲子尿素缩合后的产物双缩脲 H2N-CO-NH-H2N-CO-NH-CO-NH2CO-NH2与碱性铜溶液作用形成紫红色化合物与碱性铜溶液作用形成紫红色化合物的反响相似,故称为双缩脲反响。的反响相似,故称为双缩脲反响。此方法简便、准确、重复性好,但灵敏此方法简便、准确、重复性好,但灵敏度较其它方法稍差,是目前临床上最常规的方度较其它方法稍差,是目前临床上最常规的方法。法。
13、第十八页,共49页。双缩脲比色法血浆总蛋白测定推荐方法第十八页,共4 9 页 紫外分光光度法紫外分光光度法 原理原理 蛋白质分子中的酪氨酸和色氨酸等芳香族氨基酸可使蛋蛋白质分子中的酪氨酸和色氨酸等芳香族氨基酸可使蛋白质溶液在白质溶液在280nm280nm处有一吸收峰。可用于测定蛋白质,但需处有一吸收峰。可用于测定蛋白质,但需防止核酸干扰。防止核酸干扰。优点优点 敏感而简便,可保存蛋白生物活性。需紫外分光光度计敏感而简便,可保存蛋白生物活性。需紫外分光光度计 及石英比色皿。及石英比色皿。缺点缺点 各种蛋白质中芳香族氨基酸含量和比例不同;在各种蛋白质中芳香族氨基酸含量和比例不同;在280nm280
14、nm测测 定易受游离色定易受游离色aaaa和酪和酪aaaa以及尿酸和胆红素的干扰;导致以及尿酸和胆红素的干扰;导致 准确性和特异性受影响。准确性和特异性受影响。第十九页,共49页。紫外分光光度法 第十九页,共4 9 页。折光测定法折光测定法原理原理 溶解在溶液中的固体可增加溶液的溶解在溶液中的固体可增加溶液的光折射率,在固定波长和温度下,光折光折射率,在固定波长和温度下,光折射率和血清中蛋白质含量成正比。射率和血清中蛋白质含量成正比。优点优点 简便、快速,易掌握,重复性较好,适合临床简便、快速,易掌握,重复性较好,适合临床缺点:缺点:准确性较差。准确性较差。第二十页,共49页。折光测定法第二十
15、页,共4 9 页。自动生化分析仪测定自动生化分析仪测定 第二十一页,共49页。自动生化分析仪测定 第二十一页,共4 9 页。TP TP:少见,属相对性:少见,属相对性 常见于脱水、休克、某些肿瘤等常见于脱水、休克、某些肿瘤等 TP TP:肝脏疾病、肾脏疾病、肠道吸收不良:肝脏疾病、肾脏疾病、肠道吸收不良 A A:少见属相对性:少见属相对性 常见于脱水、休克常见于脱水、休克 A A:肝炎、肝硬化、慢性胃肠疾病:肝炎、肝硬化、慢性胃肠疾病 某些寄生虫感染、长期饥饿或营养不良某些寄生虫感染、长期饥饿或营养不良第二十二页,共49页。第二十二页,共4 9 页。G:慢性肝炎、肝硬化 G:饲喂初乳缺乏、免疫
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