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类型医学红细胞血型系统课件.ppt

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    关 键  词:
    医学 红细胞 血型 系统 课件
    资源描述:

    1、目的要求与教学内容目的要求重点掌握 红细胞血型系统概要、及血型系统基因、抗原、抗体的存在及特点。熟悉 亚型分类及血型血清学特点,分泌型与非分泌型,弱D亚型表现及临床意义。了解 其他血型系统抗原与抗体及其临床意义。教学内容教学内容红细胞血型系统概要红细胞血型系统概要血型系统血型系统血型系统血型系统其他血型系统其他血型系统 红细胞血型抗原和抗体1900年,奥地利维也纳大学助教年,奥地利维也纳大学助教 第一个第一个发现血型,只发现人类血型、发现血型,只发现人类血型、三型,三型,1930年获得诺贝尔奖,并赢年获得诺贝尔奖,并赢得了得了“血型之父血型之父”的美誉。的美誉。1902年他的学生和又发现了型年

    2、他的学生和又发现了型国际联盟卫生保健委员会将这国际联盟卫生保健委员会将这4型正式命型正式命名为、型,这就是现名为、型,这就是现在人们熟知的在人们熟知的 血型系统血型系统血型是人类血液的主要特征之一,表达了血液各种成分血型是人类血液的主要特征之一,表达了血液各种成分的抗原的遗传性状。的抗原的遗传性状。红细胞血型研究的百年历史大致可分为三个阶段:红细胞血型研究的百年历史大致可分为三个阶段:?1901年到1950年,使用血型血清学方法发现和检测各种血型抗原,阐明它们的遗传特点:血型系统 和(1939年)、和(1940年)血型系统 等(1945年)血型系统 等(1946年)血型系统 (1946年)血型

    3、系统 等(1950年)血型系统 等(1951年)血型和P血型系统 (1987年)?60年代到年代到70年代,研究血型抗原的生物化年代,研究血型抗原的生物化学本质学本质?80年代始,血型的研究进入以分子生物学年代始,血型的研究进入以分子生物学为基础的新时代,逐步集中于:为基础的新时代,逐步集中于:阐明血型抗原的成分阐明血型抗原的成分 遗传多态性的分子基础遗传多态性的分子基础 血型基因的结构和组织特异性表达血型基因的结构和组织特异性表达 生物功能和演化等方面生物功能和演化等方面 红细胞血型抗原的分类及统一命名 国际输血协会()成立了红细胞表面抗原命名术语委员会(国际输血协会()成立了红细胞表面抗原

    4、命名术语委员会(),规定),规定了:了:血型抗原必须是用相应抗体检测到的红细胞表面抗原血型抗原必须是用相应抗体检测到的红细胞表面抗原属于遗传性状属于遗传性状人类红细胞血型抗原分成人类红细胞血型抗原分成 血型系统血型系统()血型集合血型集合()高、低二个抗原频率组高、低二个抗原频率组()更新至更新至2009年年2月,已将所发现的人类红细胞的近月,已将所发现的人类红细胞的近260种血型抗原,分为种血型抗原,分为30个血型系统、个血型系统、6个集合群和高个集合群和高(8个个901 )低低(18个个700 )两个频率组两个频率组 2008红细胞血型抗原的生化结构红细胞血型抗原的生化结构 有二组基本类型

    5、:有二组基本类型:一组血型抗原决定簇一组血型抗原决定簇:结合到蛋白或脂上的碳水结合到蛋白或脂上的碳水化合物(多糖),决定抗原的特异性,该组化合物(多糖),决定抗原的特异性,该组抗原基因,编码一个中间体分子,通常是酶,抗原基因,编码一个中间体分子,通常是酶,能转移糖分子到蛋白或脂上而产生抗原特异能转移糖分子到蛋白或脂上而产生抗原特异性,属于这一组的抗原有、性,属于这一组的抗原有、P P、等、等一组是由蛋白的氨基酸序列所决定,由基因直一组是由蛋白的氨基酸序列所决定,由基因直接控制抗原的多态性,大多数的血型抗原属接控制抗原的多态性,大多数的血型抗原属于这组结构类型,如于这组结构类型,如11血型抗原的

    6、免疫原性血型抗原的免疫原性不同血型抗原的相对免疫原性如下:不同血型抗原的相对免疫原性如下:12抗原位点数、剂量效应、位置效应抗原位点数、剂量效应、位置效应(一)抗原位点数(一)抗原位点数取决于遗传因素和抗原种类,红细胞上抗原位取决于遗传因素和抗原种类,红细胞上抗原位点数影响其对相应抗体的反应强度。点数影响其对相应抗体的反应强度。13(二)剂量效应(二)剂量效应当控制某血型抗原的基因为纯合子时,红细胞当控制某血型抗原的基因为纯合子时,红细胞上该抗原为双剂量,杂合子时为单剂量。某上该抗原为双剂量,杂合子时为单剂量。某些血型抗体只与纯合子红细胞发生反应,如些血型抗体只与纯合子红细胞发生反应,如系统抗

    7、体系统抗体与纯合子抗原红细胞反应较强的抗体被称为具与纯合子抗原红细胞反应较强的抗体被称为具有有“剂量效应剂量效应”,具有剂量效应的血型系统,具有剂量效应的血型系统包括(包括(D D除外)、系统除外)、系统剂量效应往往出现于共显性基因的情况,在血剂量效应往往出现于共显性基因的情况,在血型系统中,和基因型之间、和基因型之间,型系统中,和基因型之间、和基因型之间,产生的抗原强度无明显差异,反映不出剂量产生的抗原强度无明显差异,反映不出剂量效应效应(三)位置效应(三)位置效应指基因之间的互相影响指基因之间的互相影响顺式效应:发生在同一染色体的基因之间,如顺式效应:发生在同一染色体的基因之间,如基因复合

    8、物产生的基因复合物产生的E E抗原量比基因复合物产生抗原量比基因复合物产生的的E E抗原量要少,系受同一染色体上抗原量要少,系受同一染色体上D D基因的基因的影响影响反式效应:发生在同源染色体上基因之间,如反式效应:发生在同源染色体上基因之间,如基因型为和时,两者表型相同,但后者产生基因型为和时,两者表型相同,但后者产生的的D D抗原较前者弱,是一条染色体的抗原较前者弱,是一条染色体的C C基因对基因对另一条染色体上另一条染色体上D D基因的影响基因的影响15复合抗原复合抗原 有些基因复合体控制的相关表面结构称为复有些基因复合体控制的相关表面结构称为复合抗原,能引起免疫应答,产生复合抗体。合抗

    9、原,能引起免疫应答,产生复合抗体。如复合基因的产物有如复合基因的产物有C,D,eC,D,e三种抗原活性,三种抗原活性,同时也有顺式产物的抗原活性,同时也有顺式产物的抗原活性,C C、e e基因不基因不在同一条染色体上时,不产生复合抗原。同在同一条染色体上时,不产生复合抗原。同样还有、等。复合抗体只与复合抗原起反样还有、等。复合抗体只与复合抗原起反应,如抗只与复合抗原发生反应。应,如抗只与复合抗原发生反应。红细胞血型抗体红细胞血型抗体l抗体是免疫球蛋白的主体,是体液免疫反应抗体是免疫球蛋白的主体,是体液免疫反应的主要效应分子,它们能特异性地结合或识的主要效应分子,它们能特异性地结合或识别入侵的病

    10、原体(抗原),是免疫防御系统别入侵的病原体(抗原),是免疫防御系统的重要组成部分的重要组成部分l红细胞血型抗体的另一主要功能是与红细胞红细胞血型抗体的另一主要功能是与红细胞的表面抗原结合,通过补体作用,导致红细的表面抗原结合,通过补体作用,导致红细胞破坏,产生血管内或血管外溶血胞破坏,产生血管内或血管外溶血红细胞抗原和抗体反应基础红细胞抗原和抗体反应基础 红细胞血型抗原和抗体在体外的试管反应中,红细胞血型抗原和抗体在体外的试管反应中,常见有以下的几种形式:常见有以下的几种形式:凝集反应()凝集反应()沉淀反应()沉淀反应()溶血反应()溶血反应()影响红细胞凝集反应的因素影响红细胞凝集反应的因

    11、素l 温度温度 l 离子强度离子强度 l l 孵育时间孵育时间 l 抗原抗体比例抗原抗体比例 l 红细胞间距离红细胞间距离 l 蛋白水解酶的作用蛋白水解酶的作用 l 正电荷分子的作用正电荷分子的作用 红细胞凝集反应中的特殊现象红细胞凝集反应中的特殊现象 缗钱状凝集缗钱状凝集 肉眼下与红细胞凝集无异,高倍镜下,红肉眼下与红细胞凝集无异,高倍镜下,红细胞形成钱币叠层堆积状细胞形成钱币叠层堆积状 (,洗涤)(,洗涤)混合凝集现象混合凝集现象 显微镜视野下标本中存在两群红细胞,一显微镜视野下标本中存在两群红细胞,一部分凝集,另一部分不凝集(异型输血或移部分凝集,另一部分不凝集(异型输血或移植,亚型检测

    12、植,亚型检测A3A3与抗与抗AA)红细胞血型学新技术的发展红细胞血型学新技术的发展-分子生物学技术应用分子生物学技术应用 血凝反应已在红细胞血型血清学技术中应用了血凝反应已在红细胞血型血清学技术中应用了100100多年,但有时存在着检测样品的取材和定型血清多年,但有时存在着检测样品的取材和定型血清的困难,以及只能鉴定血型抗原的表型,操作时的困难,以及只能鉴定血型抗原的表型,操作时干扰因素较多等问题,在血型工作的研究和应用干扰因素较多等问题,在血型工作的研究和应用上有很多限制性上有很多限制性 分子基因定型技术有效地克服了血型血清学技术存分子基因定型技术有效地克服了血型血清学技术存在的问题,对血型

    13、学的发展和应用作出了巨大的在的问题,对血型学的发展和应用作出了巨大的贡献贡献 目前研究和应用较广泛的以为基础的血型基目前研究和应用较广泛的以为基础的血型基因定型技术有因定型技术有(聚合酶链反应(聚合酶链反应-限止性片段长度多态性)限止性片段长度多态性)(聚合酶链反应(聚合酶链反应-序列特异性引物、序列特异性引物、(聚合酶链反应(聚合酶链反应-序列特异性寡核苷酸探针)序列特异性寡核苷酸探针)(序列测定)(序列测定)血型基因定型技术已应用于血型基因定型技术已应用于 疑难血型基因和抗原的鉴定疑难血型基因和抗原的鉴定 非侵入性的胎儿新生儿溶血病危险性鉴定非侵入性的胎儿新生儿溶血病危险性鉴定 输血后供者

    14、血型等位基因的检测输血后供者血型等位基因的检测 造血干细胞移植后移植标记物的鉴定和追踪造血干细胞移植后移植标记物的鉴定和追踪 抗原阴性细胞供者的大规模筛选抗原阴性细胞供者的大规模筛选 亲子鉴定、个体识别、人种研究等工作亲子鉴定、个体识别、人种研究等工作血型系统血型系统有其它血型系统所没有的独特的性质,表现血型系统有其它血型系统所没有的独特的性质,表现在在:1 1、血清中常存在反应强的抗体,而红细胞上通常缺、血清中常存在反应强的抗体,而红细胞上通常缺乏相应的特异性抗原乏相应的特异性抗原2 2、许多组织细胞上有规律地存在着、许多组织细胞上有规律地存在着A A、B B、H H抗原,抗原,各种体液和分

    15、泌型分泌液中也存在着各种体液和分泌型分泌液中也存在着A A、B B、H H物物质质 这两种独有的性质,形成了不配合输血的天然屏障,这两种独有的性质,形成了不配合输血的天然屏障,使血型系统成为输血医学和器官移植中最重要的血使血型系统成为输血医学和器官移植中最重要的血型系统型系统常见血型分类常见血型分类 血型分布情况血型分布情况血型系统的抗原和抗体血型系统的抗原和抗体l 血型抗原是由血型抗原是由 血型抗原基因编码的特异性血型抗原基因编码的特异性糖基转移酶催化合成的红细胞膜表面的糖蛋糖基转移酶催化合成的红细胞膜表面的糖蛋白和糖脂白和糖脂l抗原决定簇共有抗原决定簇共有5 种类型种类型,由单糖经转移酶转

    16、由单糖经转移酶转移到特定核心多糖链的末端生成移到特定核心多糖链的末端生成,分别决定血分别决定血型抗原基础物质、型抗原基础物质、H 抗原、抗原、A抗原、抗原、A1 抗原抗原以及以及B 抗原的抗原表型抗原的抗原表型28岩藻糖岩藻糖乙酰半乳糖胺乙酰半乳糖胺乙酰葡萄糖胺乙酰葡萄糖胺l 抗原决定簇的主要载体是糖蛋白抗原决定簇的主要载体是糖蛋白,而只有而只有25%左右的左右的 位点位于糖脂位点位于糖脂l 在在56 周龄胚胎的红细胞上可以检测到周龄胚胎的红细胞上可以检测到 抗原抗原,但婴儿但婴儿一般在一般在18 个月后才能充分表现抗原性个月后才能充分表现抗原性l A和和B抗原在某些组织早期发育中会消失,但有

    17、时重抗原在某些组织早期发育中会消失,但有时重新出现在恶性肿瘤组织上,因此可以作为某些癌症新出现在恶性肿瘤组织上,因此可以作为某些癌症有用的预兆检测因子,例如:在正常成人结肠组织有用的预兆检测因子,例如:在正常成人结肠组织中,中,A和和B抗原是缺乏的,但是在结肠癌组织中抗原是缺乏的,但是在结肠癌组织中A和和B抗原重新表达抗原重新表达血型抗体的产生血型抗体的产生l 在正常的情况下,每个个体可针对自己所缺乏的在正常的情况下,每个个体可针对自己所缺乏的A、B和和H抗原,自然地产生相对的特异性抗体抗原,自然地产生相对的特异性抗体l 婴儿出生时,通常没有抗体,但是,由于自然界中婴儿出生时,通常没有抗体,但

    18、是,由于自然界中的一些生物体(如细菌)的细胞表面上具有类似于的一些生物体(如细菌)的细胞表面上具有类似于A、B和和H结构的抗原,人体会在不自觉中被这些结构的抗原,人体会在不自觉中被这些外来抗原不断地免疫,开始逐渐地产生了相应的抗,外来抗原不断地免疫,开始逐渐地产生了相应的抗,抗和抗抗体抗和抗抗体l婴儿在婴儿在510岁时,抗体的产生达到最高峰,岁时,抗体的产生达到最高峰,然后随年龄增长而逐渐下降然后随年龄增长而逐渐下降l随着年龄的增长随着年龄的增长,抗体效价反而降低抗体效价反而降低,老年人老年人的抗和抗的抗和抗 水平一般低于年青人水平一般低于年青人血型抗体血清学特征血型抗体血清学特征型的抗型的抗

    19、-和型的抗和型的抗-主要是类抗体,在室温中主要是类抗体,在室温中反应最强反应最强O型的抗,抗和抗通常是类抗体,能与型的抗,抗和抗通常是类抗体,能与A和和B型抗原型抗原凝集反应凝集反应由于抗体容易通过胎盘,因此由于抗体容易通过胎盘,因此O型的母亲容易引起。型的母亲容易引起。而而A或或B型母亲所生的婴儿较少发现型母亲所生的婴儿较少发现 B型个体的血清中含有的抗及抗型个体的血清中含有的抗及抗1两种抗体,两种抗体,B型个体的血清只能与型个体的血清只能与A1及及A2红细胞凝集。红细胞凝集。用用A2红细胞吸收后的红细胞吸收后的B型血清,只能与型血清,只能与A1型型红细胞反应红细胞反应 植物中的双花扁豆植物

    20、凝集素植物中的双花扁豆植物凝集素(),具有与,具有与抗抗1相似的凝集特异性相似的凝集特异性基因及其遗传特点基因及其遗传特点 基因的结构图(包括外显子、内含子)各种等位基因的结构大多有高度的相似性,但由于点突变或缺失等原因,形成了等位基因及各种亚型等位基因的差别,以及由它们转录产生的酶结构上的差异 分子生物学以及其他领域的高新技术,特别是分子分子生物学以及其他领域的高新技术,特别是分子克隆、体外扩增和测序技术,为红细胞血型学的发克隆、体外扩增和测序技术,为红细胞血型学的发展和应用带来了无限生机和前途展和应用带来了无限生机和前途 分型技术的应用,使型别分析达到了更精细的水平,分型技术的应用,使型别

    21、分析达到了更精细的水平,并因此发现了更多的多态性。和方法也在不断的发并因此发现了更多的多态性。和方法也在不断的发展和改进中,的分型技术现已成为血清学方法的竞展和改进中,的分型技术现已成为血清学方法的竞争者和互补者争者和互补者 对小量含的任何组织样品,即可以用分型技对小量含的任何组织样品,即可以用分型技术对红细胞抗原的基因型作鉴定,不受血清术对红细胞抗原的基因型作鉴定,不受血清中自身抗体、不规则抗体以及疾病和假、弱中自身抗体、不规则抗体以及疾病和假、弱凝集的影响凝集的影响 红细胞血型学的基因研究,为保证输血治疗红细胞血型学的基因研究,为保证输血治疗的安全和有效,作出了重大贡献,对于生命的安全和有

    22、效,作出了重大贡献,对于生命科学的发展有着无可估量的意义科学的发展有着无可估量的意义血型遗传示意血型遗传示意分泌型和非分泌型血型系统与、血型系统分泌型和非分泌型血型系统与、血型系统 亚型简介亚型简介 亚型(亚型():):血型抗原变异体的统称,根据血型血清血型抗原变异体的统称,根据血型血清学试验所表现的抗原性强弱程度的分级量化等血清学学试验所表现的抗原性强弱程度的分级量化等血清学特征,可鉴别出各种亚型特征,可鉴别出各种亚型A抗原亚型最多:主要是抗原亚型最多:主要是A1(占(占80%)和)和A2亚型(占亚型(占20%),其它的,其它的A亚型(亚型(A3、等)较少见或、等)较少见或罕见罕见B抗原的亚

    23、型比抗原的亚型比A亚型少,较常见的有亚型少,较常见的有B1、B3、等亚型等亚型O型血型中,常把孟买型、类孟买型和一些型血型中,常把孟买型、类孟买型和一些H缺失型、缺失型、表型等归类为表型等归类为H抗原的亚型抗原的亚型,E.(2008).J 55(3-4):174-82.A1 和和 A2 亚型区别亚型区别A1型红细胞平均有型红细胞平均有100万万A抗原数抗原数/细胞细胞A2型仅仅平均有型仅仅平均有25万万A抗原数抗原数/细胞细胞A1、A2亚型都存在的亚型都存在的“A”抗原抗原 2型型A抗原抗原A1型还有另外两种抗原形式型还有另外两种抗原形式 3、4型型A抗原,这抗原,这两种抗原在两种抗原在A2型

    24、上不存在型上不存在A1 和和 A2 亚型区别亚型区别各型红细胞上各型红细胞上H抗原数量:抗原数量:O A2 B A2B A1 A1BA1、A2转移酶()最佳值(酶此时具有最佳转移酶()最佳值(酶此时具有最佳潜能和活性):潜能和活性):转化转化A1和和A1B时最佳为时最佳为6.0 转化转化A2和和A2B时最佳为时最佳为7.0A1 和和 A2 亚型鉴别亚型鉴别 最简单的方法是使用具有与抗最简单的方法是使用具有与抗1相似的外源性凝集素相似的外源性凝集素双花扁豆植物凝集素双花扁豆植物凝集素()未稀释状态:双花扁豆素可作为抗未稀释状态:双花扁豆素可作为抗-,可以和、,可以和、都出现凝集。都出现凝集。适当

    25、稀释:凝集素可以直接与、红细胞反适当稀释:凝集素可以直接与、红细胞反应,而不与、凝集,此时出现凝集的细应,而不与、凝集,此时出现凝集的细胞为型,如果不出现凝集,则亚型主要为胞为型,如果不出现凝集,则亚型主要为型(也能和型(也能和d.发生弱凝集现象)发生弱凝集现象)其它其它A亚型亚型型:很罕见的亚型(型:很罕见的亚型(11000)主要特征:与抗主要特征:与抗-和抗和抗-,均反应呈现混合凝均反应呈现混合凝集现象集现象x()型:更罕见的亚型()型:更罕见的亚型(140,000)主要特征:抗原十分弱,仅仅只能通过抗主要特征:抗原十分弱,仅仅只能通过抗-,检测,通常其血清中存在的抗检测,通常其血清中存在

    26、的抗-。如果未用抗。如果未用抗-,进行检测,则表型易被误定为型。进行检测,则表型易被误定为型。表型的遗传性不总是遵循孟德尔遗传法则,表型的遗传性不总是遵循孟德尔遗传法则,近来研究提示不同的等位基因能导致该表型出现,近来研究提示不同的等位基因能导致该表型出现,因此不同的突变能导致相同的亚型出现,这意味着因此不同的突变能导致相同的亚型出现,这意味着 亚型具有不同的遗传异质性亚型具有不同的遗传异质性不同的等位基因可不同的等位基因可导致相同的亚型表达。导致相同的亚型表达。其它其它A亚型亚型亚型(亚型(A12):与抗):与抗-1反应程度介于反应程度介于之间,与之间,与x具有类似性。具有类似性。亚型:更加

    27、罕见亚型:更加罕见 主要特征:型红细胞在常规试验中不与抗主要特征:型红细胞在常规试验中不与抗-和抗和抗-,反应,其血清中不存在抗反应,其血清中不存在抗-1A亚型鉴别亚型鉴别B亚型鉴别亚型鉴别血型在输血医学上的意义血型在输血医学上的意义临床输血中必须要解决临床输血中必须要解决 正反定型不一致带来正反定型不一致带来的不正确的定型问题的不正确的定型问题亚型鉴定应通过上表进行综合分析亚型鉴定应通过上表进行综合分析,必要时可必要时可以进行基因分型以进行基因分型,以防止带来安全输血隐患以防止带来安全输血隐患血型在移植医学上的意义血型在移植医学上的意义 不同血型的器官组织不能在移植中随意使用,不同血型的器官

    28、组织不能在移植中随意使用,因为可能存在免疫应答导致的免疫排斥,降因为可能存在免疫应答导致的免疫排斥,降低移植物的存活。低移植物的存活。O型器官组织可以移植到其他血型受者(属于型器官组织可以移植到其他血型受者(属于血液移植血型次侧不合,要考虑风险)血液移植血型次侧不合,要考虑风险)A、B、型器官组织就应遵循同型原则(属于、型器官组织就应遵循同型原则(属于血液移植血型主侧不合,要考虑更大风险)血液移植血型主侧不合,要考虑更大风险)A2亚型似乎是例外,亚型似乎是例外,A2型肝组织已经成功地型肝组织已经成功地移植到移植到O型受者型受者特殊的亚型特殊的亚型 1B(A)型和)型和A(B)型)型 B(A)表

    29、现型在抗表现型在抗 的的()单克隆抗体混合物上市单克隆抗体混合物上市不久之后的不久之后的1985年被发现,这种红细胞与抗年被发现,这种红细胞与抗试剂发生类似试剂发生类似B型的反应。型的反应。由于红细胞表面除了产生由于红细胞表面除了产生B抗原外,还有少量抗原外,还有少量的的A抗原,血清中含有高活性的抗原,血清中含有高活性的B型转移酶,型转移酶,而而B型转移酶在某些条件下也能合成型转移酶在某些条件下也能合成A型血型型血型物质,因此被命名为物质,因此被命名为B(A)。特殊的亚型特殊的亚型B(A)红细胞为红细胞为B遗传型,其个体血清中含有遗传型,其个体血清中含有抗。而个体的血清中既不含有抗和抗,偶尔抗

    30、。而个体的血清中既不含有抗和抗,偶尔含有抗含有抗。这种差异可以用于区分这些亚型。这种差异可以用于区分这些亚型。虽然虽然B(A)基因是以的方式遗传,但血清学的基因是以的方式遗传,但血清学的差异可以使其与区分。多数表现型为差异可以使其与区分。多数表现型为A B,而而B(A)红细胞除了含有红细胞除了含有B抗原外还有少量的抗原外还有少量的A抗原。抗原。特殊的亚型特殊的亚型2孟买型孟买型1952年等在印度孟买市中年等在印度孟买市中,发现了三个男性的发现了三个男性的红细胞是红细胞是O型,但型,但H抗原为阴性,所有人的抗原为阴性,所有人的血清中均具有抗,这类亚型后来被称为孟买血清中均具有抗,这类亚型后来被称

    31、为孟买型或型型或型孟买型的红细胞与抗、抗、抗或抗都不凝集孟买型的红细胞与抗、抗、抗或抗都不凝集用红细胞吸收和放散试验不能从孟买型红细胞用红细胞吸收和放散试验不能从孟买型红细胞上检出上检出H、A或或B抗原抗原孟买型红细胞通常是(),但也可是()孟买型红细胞通常是(),但也可是()孟买型的个体不分泌,唾液中没有孟买型的个体不分泌,唾液中没有H、A和和B抗原,可以有抗原,但没有抗原抗原,可以有抗原,但没有抗原血清中可含有抗、抗和抗血清中可含有抗、抗和抗 H基因的等位基因基因的等位基因h是隐性的抑制基因,孟是隐性的抑制基因,孟买型是买型是h因子的纯合子,因此孟买型的个体因子的纯合子,因此孟买型的个体不

    32、能编码不能编码H糖基转移酶,不能产生糖基转移酶,不能产生H抗原抗原根据所获得的根据所获得的H、A和和B基因存在的结果,孟基因存在的结果,孟买型可分为、和表型买型可分为、和表型特殊的亚型特殊的亚型3.类孟买型(类孟买型()等在捷克人中发现了类似孟买型的红细胞亚型,等在捷克人中发现了类似孟买型的红细胞亚型,红细胞上没有红细胞上没有H抗原,但可以有少量抗原,但可以有少量A或或B抗抗原,血清中有抗,这种红细胞亚型被称为类原,血清中有抗,这种红细胞亚型被称为类孟买型。孟买型。红细胞表面上有少量红细胞表面上有少量A抗原的,标记为,有少抗原的,标记为,有少量量B抗原的,标记为,有抗原的标记为。抗原的,标记为

    33、,有抗原的标记为。在与抗血清反应时,红细胞上的弱在与抗血清反应时,红细胞上的弱A抗原的凝抗原的凝集情况类似于集情况类似于A2或。在与抗血清反应时,细或。在与抗血清反应时,细胞能显示有弱胞能显示有弱B抗原。抗原。类孟买型的红细胞上不能检出类孟买型的红细胞上不能检出H抗原,唾液中有些抗原,唾液中有些个体有物质。血清中含有抗,个体的血清中还含抗,个体有物质。血清中含有抗,个体的血清中还含抗,但没有抗。个体的血清中没有抗,但含有抗。但没有抗。个体的血清中没有抗,但含有抗。类孟买型或孟买型因其血型的特殊性,在临床输血类孟买型或孟买型因其血型的特殊性,在临床输血时常常难以寻找相容的血源时常常难以寻找相容的

    34、血源,因此关于因此关于H抗原缺失型抗原缺失型的分子生物学、遗传学和统计学的研究具有重要的的分子生物学、遗传学和统计学的研究具有重要的意义。意义。副孟买型(副孟买型():红细胞表面上表达弱的):红细胞表面上表达弱的A和和B抗原抗原但无但无H抗原,在其唾液中也完全缺少抗原,在其唾液中也完全缺少H抗原抗原类孟买型(类孟买型():红细胞上缺少或有弱的抗原表达,):红细胞上缺少或有弱的抗原表达,而在唾液中有些个体有物质,但也有些个体没有物而在唾液中有些个体有物质,但也有些个体没有物质质孟买型被定义为非分泌型孟买型被定义为非分泌型H抗原缺乏,而类孟买型抗原缺乏,而类孟买型的定义尚有争议,以前一直定义为分泌

    35、型的定义尚有争议,以前一直定义为分泌型H抗原缺抗原缺失,目前又有人将类孟买型分为两类:失,目前又有人将类孟买型分为两类:分泌型分泌型H抗原缺失抗原缺失(常见常见)分泌型分泌型H抗原缺失且带有少量抗原缺失且带有少量H抗原转移酶活性抗原转移酶活性 特殊的亚型特殊的亚型4型(顺式型)型(顺式型)1964年发现,在一个波兰人家庭,丈夫是年发现,在一个波兰人家庭,丈夫是O型,妻子型,妻子是是A2B型,妻子的母亲是型,妻子的母亲是O型,他们有型,他们有2个孩子是个孩子是A2B,显然,该妻子的一条染色体上有,显然,该妻子的一条染色体上有A2B基因。基因。其后,等报道了其后,等报道了1例显示弱例显示弱A和弱和

    36、弱B抗原的抗原的A2B3的表的表现型,家系研究表明现型,家系研究表明A2 和和B3基因是通过一条染色基因是通过一条染色体遗传,这种基因构型就被称为。体遗传,这种基因构型就被称为。1966年,等发现一个家庭,父亲是年,等发现一个家庭,父亲是O型,母亲是型,母亲是A2B3,3个孩子是个孩子是A2B3,是以方式遗传的。,是以方式遗传的。最主要特征最主要特征:家族成员的特殊遗传方式家族成员的特殊遗传方式 A型和型和B型基因位于一条染色体上,型基因位于一条染色体上,2个基因能个基因能同时遗传给后代同时遗传给后代 通过酶学分析研究这种构型的原因通过酶学分析研究这种构型的原因:可能是两条相邻染色体发生不均衡

    37、的基因交换,可能是两条相邻染色体发生不均衡的基因交换,导致导致A基因和基因和B基因都在一条染色体上基因都在一条染色体上基因突变引起产生一种同时具有基因突变引起产生一种同时具有A和和B酶活性的酶活性的酶酶细胞上的细胞上的A抗原虽然经常被认为是抗原虽然经常被认为是A2,但,但A抗原强度强于抗原强度强于A2B,弱于,弱于A1B细胞几乎无例外地表达弱的细胞几乎无例外地表达弱的B抗原性(与免抗原性(与免疫性疫性A 型血清反应较强,而与自然发生的人型血清反应较强,而与自然发生的人血清抗弱凝集或不凝集)血清抗弱凝集或不凝集)细胞有很强的细胞有很强的H抗原性,程度上与抗原性,程度上与A2细胞基细胞基本相同,但

    38、高于正常的本相同,但高于正常的A2B细胞细胞唾液中存在正常的唾液中存在正常的A物质、弱的物质、弱的B物质和强物质和强的的H物质物质 ,.A2,(A2B3)a A B.a ,2B3(A2B3 ),2B(A2B3 ),1B3(A2B3 1).,a .特殊的亚型特殊的亚型5.获得性获得性B(B)1959年等报道了获得性年等报道了获得性B:在:在A型的病人中发现了不型的病人中发现了不是自己遗传产生的是自己遗传产生的B抗原,血清中有抗,但这抗不抗原,血清中有抗,但这抗不与自身红细胞的抗原反应。分泌型个体的分泌液与自身红细胞的抗原反应。分泌型个体的分泌液中有中有A和和H抗原但没有抗原但没有B抗原。抗原。获

    39、得性获得性B抗原:不是由病人自己遗传而得的抗原:不是由病人自己遗传而得的B抗原抗原特殊的亚型特殊的亚型获得性获得性B抗原只出现在抗原只出现在A型红细胞上,减弱了型红细胞上,减弱了A抗抗原的抗原性原的抗原性获得性获得性B通常发生在胃肠道疾病和有细菌感染的肿通常发生在胃肠道疾病和有细菌感染的肿瘤病人中,细菌的脱乙酰基转移酶使瘤病人中,细菌的脱乙酰基转移酶使A抗原的乙酰抗原的乙酰基半乳糖转化成半乳糖胺,类似于基半乳糖转化成半乳糖胺,类似于B抗原的决定簇,抗原的决定簇,使之与抗反应使之与抗反应在正常的血清条件下,获得性在正常的血清条件下,获得性B的红细胞能与抗发的红细胞能与抗发生凝集生凝集在低于在低于

    40、6.0的酸性条件下,半乳糖胺的的酸性条件下,半乳糖胺的2变成变成3基,基,无法与抗反应,因此凝集消失无法与抗反应,因此凝集消失血型系统血型系统一、一、血型系统概述血型系统概述 血型系统是人类血型系统最复杂的一种,目血型系统是人类血型系统最复杂的一种,目前已经有明确前已经有明确45个抗原。个抗原。发现史:发现史:和于和于1939年在一例的胎儿母亲的血清中,发现年在一例的胎儿母亲的血清中,发现了一种抗体,当她输入同型丈夫的血液后,了一种抗体,当她输入同型丈夫的血液后,产生了严重的。产生了严重的。经试验证实,该抗体能凝集约经试验证实,该抗体能凝集约80%的配合的供的配合的供体血液体血液1940年和以

    41、恒河猴(年和以恒河猴()的红细胞免疫家兔和)的红细胞免疫家兔和豚鼠,发现产生的抗体能凝集猴红细胞以及豚鼠,发现产生的抗体能凝集猴红细胞以及大约大约85%的供体红细胞。的供体红细胞。他们把被这种抗恒河猴抗体凝集的红细胞称他们把被这种抗恒河猴抗体凝集的红细胞称为阳性,其余为阳性,其余15%不凝集的红细胞称为阴性。不凝集的红细胞称为阴性。和在和在1940年指出,可在输过血型相容的人的年指出,可在输过血型相容的人的血清中发现抗抗体血清中发现抗抗体等又发现胎母之间的血型不合,能引起新生等又发现胎母之间的血型不合,能引起新生儿溶血病。儿溶血病。后来证明了家兔抗后来证明了家兔抗 的血清与人的抗血清并不的血清

    42、与人的抗血清并不相同,但人们始终称人的抗体为抗,为尊重相同,但人们始终称人的抗体为抗,为尊重和的发现,将家兔抗抗体称为抗和的发现,将家兔抗抗体称为抗在临床输血医学上,除了血型系统外,血型在临床输血医学上,除了血型系统外,血型系统是最重要的血型系统之一。系统是最重要的血型系统之一。血型系统主要的抗原有:血型系统主要的抗原有:D,C,E,c,e。抗原。抗原显示剂量效应(显示剂量效应(D除外),纯合子比杂合子除外),纯合子比杂合子反应强。反应强。临床上称阳性和阴性仅考虑了(或)的存临床上称阳性和阴性仅考虑了(或)的存在或缺失在或缺失血型命名法血型命名法D01C2E3c4e5由于血型系统的复杂性,历史

    43、上存在三种命名法由于血型系统的复杂性,历史上存在三种命名法 ()1R12R20R0rrr二、血型抗原多态性的基因结构和分子生物学特征二、血型抗原多态性的基因结构和分子生物学特征 三、抗原的变异体、分子基础三、抗原的变异体、分子基础 血型的抗原存在大量的变异体,由不同的血型的抗原存在大量的变异体,由不同的等位基因所编码,包括:等位基因所编码,包括:各种弱各种弱D表型(表型(D)部分部分D表型(表型(D)等等 等位基因在分子结构、表型和临床意义之间等位基因在分子结构、表型和临床意义之间没有绝对的一致性没有绝对的一致性 D D ,a (),50 .D因为是多跨膜蛋白,只有部分蛋白片段暴露因为是多跨膜

    44、蛋白,只有部分蛋白片段暴露在红细胞表面。当氨基酸替代物位于细胞外在红细胞表面。当氨基酸替代物位于细胞外环时,部分表型可以出现。环时,部分表型可以出现。部分表型可以因编码的单核苷酸错义突变部分表型可以因编码的单核苷酸错义突变引起,但更多的是引起,但更多的是 杂交等位基因引起。这种杂交等位基因引起。这种杂交蛋白可以和正常蛋白一样在细胞膜上稳杂交蛋白可以和正常蛋白一样在细胞膜上稳定,但是缺少部分抗原表位。定,但是缺少部分抗原表位。部分部分D亚型:亚型:D 分类分类(到到)、和和 通常由通常由 杂交等位基因产生杂交等位基因产生 部分表型具有重要临床意义部分表型具有重要临床意义 携带者受到正常抗原免疫可

    45、能产生抗携带者受到正常抗原免疫可能产生抗-:最常见的:最常见的 D亚型之一亚型之一,外显子外显子 1-3 和和 7-10 是是 序列序列,但外显子但外显子4-6 是序列。是序列。D()()如果氨基酸替代物位于蛋白跨膜区或者细胞如果氨基酸替代物位于蛋白跨膜区或者细胞内片段时,内片段时,,可能产生弱表型可能产生弱表型抗原只是表达量减少,质通常保留不变抗原只是表达量减少,质通常保留不变弱携带者通常不会产生抗弱携带者通常不会产生抗-弱型弱型15、弱型、弱型4.2、型、弱型的携带、型、弱型的携带者可能会产生抗者可能会产生抗-表型的临床意义表型的临床意义供者血液必须要进行供者血液必须要进行 检测,以确保阴

    46、性患者能使用检测,以确保阴性患者能使用全部为阴性血液成分与制品全部为阴性血液成分与制品受者血液也要进行受者血液也要进行 检测,一般输血时尽量采用阴性检测,一般输血时尽量采用阴性血液成分与制品血液成分与制品 因为一些部分因为一些部分D 或或 型型,其携带者能被正常其携带者能被正常D抗原免抗原免疫而产生抗疫而产生抗产科病人要常规检测产科病人要常规检测 表型,因为阳性胎儿可能出现表型,因为阳性胎儿可能出现严重的严重的 ()表达非常弱的抗原,最先仅能由洗脱表达非常弱的抗原,最先仅能由洗脱技术技术()检测检测抗原减弱,比弱表型更显著抗原减弱,比弱表型更显著欧洲人群中很罕见欧洲人群中很罕见东亚地区阴性血供

    47、者接近东亚地区阴性血供者接近30%属于携带者属于携带者随着供血者的临床意义和基因分型方法的研随着供血者的临床意义和基因分型方法的研究,究,有关于亚型正进一步深入有关于亚型正进一步深入阳性和阴性单倍体阳性和阴性单倍体阴性分子机制阴性分子机制基因去除基因去除,出现杂交的出现杂交的:导致在大多数种族人:导致在大多数种族人群中出现群中出现D阴性单倍体阴性单倍体()和和 杂交基因杂交基因:非洲相当一部分人群的原:非洲相当一部分人群的原因因罕见原因:其他类型罕见原因:其他类型 杂交基因的隐匿机制,杂交基因的隐匿机制,以及无义或移码突变以及无义或移码突变 通过血清学实验有时在鉴别通过血清学实验有时在鉴别D阴

    48、性和表型很阴性和表型很困难,通过分子技术可以很明确鉴定等位基因困难,通过分子技术可以很明确鉴定等位基因从而避免误检。从而避免误检。蛋白不属于糖基化蛋白蛋白不属于糖基化蛋白蛋白与另一种红细胞表面糖蛋白紧密相关,即相关蛋白与另一种红细胞表面糖蛋白紧密相关,即相关糖蛋白糖蛋白()编码的基因位于编码的基因位于6号染色体上,与和有高度的相似号染色体上,与和有高度的相似性性是形成抗原的必要条件,基因如产生突变,形成了是形成抗原的必要条件,基因如产生突变,形成了无活性的基因,在纯合子状态时,将产生罕见的表无活性的基因,在纯合子状态时,将产生罕见的表型型系统的所有抗原均不能表达系统的所有抗原均不能表达 和和e

    49、的部分抗原也有报道,类似部分的部分抗原也有报道,类似部分D抗原,抗原,例如部分例如部分C抗原携带者可能经免疫刺激而产抗原携带者可能经免疫刺激而产生抗。因为诸如此类的部分抗原携带者比部生抗。因为诸如此类的部分抗原携带者比部分分D抗原更少见,而且其免疫原性更弱,因抗原更少见,而且其免疫原性更弱,因此临床重要性也并不是很大。此临床重要性也并不是很大。一些长期的血清学难题可以被分子方法解决,一些长期的血清学难题可以被分子方法解决,例如通过抗体工程技术发展更加优良的血清例如通过抗体工程技术发展更加优良的血清学试剂。学试剂。D ,D 4.2,11 15,.(1,2,3 41)D .,D D 4.2 D,a

    50、 D.a D,D ,()D (a)(,2007).四、血型系统的抗体四、血型系统的抗体 抗体的免疫球蛋白性质抗体的免疫球蛋白性质 大部份抗体属,与盐水悬浮的阳性红细胞(大部份抗体属,与盐水悬浮的阳性红细胞(D细胞例外)不起凝集反应细胞例外)不起凝集反应改变方法或试验条件:如用高分子介质(如牛改变方法或试验条件:如用高分子介质(如牛白蛋白),酶试验或间接抗球蛋白试验可以白蛋白),酶试验或间接抗球蛋白试验可以检测抗原抗体的凝集反应。检测抗原抗体的凝集反应。抗体的产生抗体的产生 主要通过输血或妊娠免疫产生主要通过输血或妊娠免疫产生一般在初次免疫后一般在初次免疫后26个月内出现个月内出现对(对(D)初

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