肠道杆菌专业知识培训培训课件.ppt
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1、肠道杆菌专业知识培肠道杆菌专业知识培训训肠道杆菌专业知识培训2肠道杆菌专业知识培训3肠杆菌科中与医学有关的常见菌族和菌属埃希菌族 埃希菌属 大肠杆菌 志贺菌属 痢疾志贺菌爱德华菌族 爱德华菌属 迟钝爱德华菌沙门菌族 沙门菌属 伤寒沙门菌 枸橼酸菌属 佛劳第枸橼酸菌克雷伯菌族 克雷伯菌属 肺炎克氏菌 肠杆菌属 产气肠杆菌 哈夫尼亚菌属 蜂窝哈夫尼亚菌 沙雷菌属 粘质沙雷菌变形杆菌族 变形杆菌属 普通变形杆菌 摩根菌属 摩氏摩根菌属 普罗威登斯菌属 雷氏普罗威登斯菌耶尔森菌族 耶尔森菌属 鼠疫耶尔菌欧文菌族本 欧文菌属 草原居民欧文菌菌族 菌属(菌种数)代表种肠道杆菌专业知识培训4共同特性共同特性
2、 一、形态与结构一、形态与结构:G 杆菌、中等大小、无芽胞;大多有菌毛(粘附于肠道粘膜上皮细胞表面);多数有鞭毛(志贺菌-无鞭毛)。二、培养特性二、培养特性:兼性厌氧菌或需氧菌;营养要求不高。三、生化反应、生化反应:活泼;能分解多种糖类和蛋白质,产生各不相同的代谢产物;可用各种生化反应检测其产物,以鉴别不同的细菌。肠道杆菌专业知识培训5乳糖发酵试验乳糖发酵试验初步鉴别肠道致病菌和肠道非致病菌肠道致病菌肠道非致病菌不发酵不发酵乳糖 发酵发酵乳糖肠道杆菌专业知识培训6 生化反应对乳糖的分解可初步鉴别 肠道致病菌(志贺菌、沙门菌):-非致病菌(大肠杆菌):+变形杆菌例外。重要的试验v分离肠杆菌科的培
3、养基:EMB-伊红美兰平板、MAC麦康凯平板、SS琼脂平板v定科试验:革兰氏染色阴性、触酶阳性、氧化酶阴性、硝酸盐还原试验阳性。v定属和定种试验:KIA、MIU、IMViC等,再结合血清学试验。肠道杆菌专业知识培训7 EMBEMB平板平板:弱选择性培养基,有利肠杆菌科生长,肠道致 病菌无色菌落、非致病菌紫黑色等有色菌落。MACMAC平板平板:中选择性培养基,有利肠杆菌科生长,肠道致 病菌无色菌落、非致病菌红色菌落。SSSS琼脂平板琼脂平板:强选择性培养基,有利志贺菌属、沙门菌属 生长,致病菌无色菌落、非致病菌红色菌落。触酶触酶试验试验:细菌分泌过氧化氢酶。氧化酶试验氧化酶试验:细菌含有细胞色素
4、氧化酶。硝酸盐还原试验硝酸盐还原试验:还原硝酸盐成为亚硝酸盐的能力。肠道杆菌专业知识培训8KIA:低层黄色,发酵葡萄糖;斜面黄色,发酵乳糖;黄色-产酸-A;红色-产碱-K;黑色-H2S。MIU:接种线模糊,有鞭毛;培养基变红色,产生尿素酶;加吲哚试剂,变红色,反应阳性。IMViC:吲哚试验、甲基红试验、VP试验、枸橼 酸盐利用试验的合称。肠道杆菌专业知识培训94、抗原构造复杂、抗原构造复杂 鞭毛抗原(H)菌体抗原(O)K或Vi抗原肠道杆菌专业知识培训10抗原结构:O抗原、H抗原、表面抗原O O抗原抗原v细胞壁结构的脂多糖,包含类属抗原和特异性抗原,最外端的特异性多糖赋予其高度的特异性。v耐热,
5、100 不被破坏。v是肠道杆菌血清学分型和分群的主要抗原、如大肠杆菌O157,霍乱弧菌O139。vIgM型抗体,凝聚反应vS-R变异肠道杆菌专业知识培训11H H抗原:抗原:即细菌的鞭毛蛋白;v不耐热,60 30分钟即被破坏;v其特异性取决于多肽链氨基酸的组成、排列顺序和空间构型。vIgG型抗体表面抗原表面抗原v包绕O抗原的多糖抗原,如K抗原、Vi抗原等;v不耐热,60 30分钟即被破坏;v可阻断O抗原与相应抗体的结合。肠道杆菌专业知识培训125、抵抗力、抵抗力不强6、易变异、易变异溶源性转换生化反应性变异通过引起耐药性变异毒力性变异转导接合肠道杆菌专业知识培训13变异 肠杆菌易出现变异菌株,
6、在诊断、治疗方面有重要意义。变异方式:表型变异、基因型变异(自发突变、可通过转导、接合或溶原性转换等转移遗传信息)。变异性状:S-R变异、H-O变异、耐药性、毒力、生化反应特 性改变等。肠道杆菌专业知识培训14检验方法 标本采集-v 肠外标本:依据感染部位而定。v 肠道标本多采自新鲜粪便,最好带脓血或粘液。分离培养-v 肠外标本:无菌标本用血平板分离培养、有菌标本用MAC、EMB分离培养。v 肠道标本用强选择性SS平板分离培养。细菌鉴定:v 革兰氏染色阴性、触酶阳性、氧化酶阴性、硝酸盐还原试验阳性。v KIA、MIU、IMViC等v 血清学试验等。肠道杆菌专业知识培训15第一节 埃希菌属(Es
7、cherichia)大肠埃希菌(大肠埃希菌(E.coli)E.coli)是典型代表。分布:婴儿出生后数小时即进入肠道,并终生伴随,是人 体肠道正常菌群的重要构成菌。A A:分解代谢产物,抑制痢疾杆菌等致病菌的生长:分解代谢产物,抑制痢疾杆菌等致病菌的生长 B B:合成:合成 ViB ViB、ViKViK等,供人体吸收利用。等,供人体吸收利用。C C:天然抗原,:天然抗原,致病:正常菌群-肠道外感染 特殊菌株-肠道内感染 应用:环境卫生、食品卫生的检测指标-饮水 3个大肠菌群数/升、瓶装汽水 5个大肠菌群数/100ml。分子生物学、基因工程-实验材料和研究对象。肠道杆菌专业知识培训16一、生物学
8、性状 G 小杆菌,有鞭毛、菌毛、多数菌株有多糖微荚膜。发酵多种糖类,产酸并产气,大部分菌株迅速发酵乳糖,但引起肠内感染的菌株(致病性大肠杆菌)不发酵或缓慢发酵乳糖;在肠道鉴别培养基上呈现有色菌落;IMViC,脲酶试验阴性、硫化氢试验阴性。三种抗原,血清型表示式-O:K:H O111:K58:H2肠道杆菌专业知识培训17大肠埃希菌(乳糖发酵试验和吲哚试验)肠道杆菌专业知识培训18二、致病性 肠道外感染-机会性感染以化脓感染最为常见:泌尿系统感染、伤口感染、腹膜炎、阑尾炎、胆囊炎。在婴儿、老年人:败血症、脑膜炎。肠道内感染-腹泻v 肠产毒性大肠杆菌(enterotoxigenic E.coli E
9、TEC)v 肠侵袭性大肠杆菌(enteroinvasive E.coli EIEC)v 肠致病性大肠杆菌(enteropathogenic E.coli EPEC)v 肠出血性大肠杆菌(enterohemorrhagic E.coli EHEC)v 肠集聚型大肠杆菌(enteroaggregative E.coli EAggEC)肠道杆菌专业知识培训19引起腹泻的大肠埃希菌 菌株 作用 部位 疾病与症状 致病机制 ETEC6、8、15、25、27、78、148、159 小肠 旅行者腹泻,婴幼儿腹泻,水样便,恶心,呕吐,腹痛,低热 LT 和(或)ST 肠毒素,大量分泌液体和电解质 EIEC28a
10、c、29、112ac124、136、143。大肠 水样便,少量血便,腹痛,发热 质粒介导侵袭和破坏结肠粘膜上皮细胞 EPEC2、55、86、111、114、119、125-128、142、158小肠 婴儿腹泻,水样便,恶心,呕吐,发热 粘附和破坏上皮细胞 EHEC157、26、111大肠 水样便,大量出血,剧烈腹痛,低热或无,可并发HUS、血小板减少性紫癜 SLT-I 或 SLT-II,中断蛋白质合成 EAggEC42、44、3、86 小肠 婴儿持续性腹泻,呕吐,脱水,低热 集聚性粘附上皮细胞,阻止液体吸收 肠道杆菌专业知识培训201.1.肠产毒性大肠杆菌肠产毒性大肠杆菌 (ETEC)ETEC
11、)ETECETEC 粘粘 定居因子(定居因子(colonization factorcolonization factor)附附 又称粘附素(又称粘附素(adhesinadhesin)是细菌的特殊菌毛是细菌的特殊菌毛 CFA/CFA CFA/CFA (colonization factor antigen colonization factor antigen,)小肠粘膜小肠粘膜以免被肠蠕动、肠分泌液所清除以免被肠蠕动、肠分泌液所清除 释释 放放 肠毒素肠毒素 由细菌的质粒由细菌的质粒DNADNA编码编码 不耐热肠毒素(不耐热肠毒素(heat labile enterotoxinheat la
12、bile enterotoxin,LTLT)6530 6530分钟失去活性分钟失去活性 耐热肠毒素(耐热肠毒素(heat stable enterotoxinheat stable enterotoxin,STST)100 100加热加热2020分钟仍不被破坏分钟仍不被破坏肠道杆菌专业知识培训21 不耐热肠毒素(不耐热肠毒素(LTLT)B B亚单位亚单位 受体受体:肠粘膜上皮细胞膜肠粘膜上皮细胞膜 表面的表面的GMGM1 1神经节苷脂神经节苷脂 A A亚单位(毒性活性部分)亚单位(毒性活性部分)穿越细胞膜穿越细胞膜 活化活化 腺苷环化酶腺苷环化酶 ATP cAMPATP cAMP 水、电解质紊
13、乱水、电解质紊乱 腹泻腹泻肠道杆菌专业知识培训22临床症状:轻度腹泻临床症状:轻度腹泻/严重的霍乱样症状严重的霍乱样症状是婴幼儿和旅游者腹泻的重要病原菌是婴幼儿和旅游者腹泻的重要病原菌 耐热肠毒素(耐热肠毒素(STST)鸟苷环化酶鸟苷环化酶 GTP cGMP GTP cGMP水、电解质紊乱水、电解质紊乱 腹泻腹泻 肠道杆菌专业知识培训23 2 2、肠侵袭性大肠杆菌(、肠侵袭性大肠杆菌(EIEC)EIEC)无外毒素无外毒素-肠毒素,但有强的侵袭力(类似痢疾杆菌肠毒素,但有强的侵袭力(类似痢疾杆菌)定位于结肠定位于结肠 侵入肠粘膜上皮细胞,生长繁殖,产生内毒素。侵入肠粘膜上皮细胞,生长繁殖,产生内
14、毒素。破坏细胞形成炎症和溃疡,破坏细胞形成炎症和溃疡,引起腹泻,呈脓血便引起腹泻,呈脓血便 ,有里急后重,有里急后重,临床症状酷似志贺菌感染,主要侵犯较大儿童、成人。临床症状酷似志贺菌感染,主要侵犯较大儿童、成人。肠道杆菌专业知识培训243 3、肠致病性大肠杆菌(、肠致病性大肠杆菌(EPEC)EPEC)是婴儿腹泻的主要病原菌;是婴儿腹泻的主要病原菌;不产生肠毒素;不产生肠毒素;也无侵袭力;也无侵袭力;但能但能粘附小肠粘膜上皮细胞粘附小肠粘膜上皮细胞,在小肠黏膜表面在小肠黏膜表面大量繁殖,大量繁殖,破坏微绒毛破坏微绒毛,导致刷状缘破坏,绒导致刷状缘破坏,绒毛萎缩,上皮细胞结构、功能受损,毛萎缩,
15、上皮细胞结构、功能受损,干扰细胞干扰细胞的再吸收的再吸收,造成严重腹泻,严重者可致死;造成严重腹泻,严重者可致死;最近报导,可产生类志贺毒素。最近报导,可产生类志贺毒素。肠道杆菌专业知识培训254 4、肠出血性大肠杆菌(、肠出血性大肠杆菌(EHECEHEC)亦称为亦称为VeroVero毒素大肠埃希菌毒素大肠埃希菌 主要血清型:主要血清型:O157O157:H7H7 主要毒力因子:主要毒力因子:菌毛菌毛质粒编码质粒编码,介导细菌与肠粘膜细胞结合。介导细菌与肠粘膜细胞结合。v 志贺样毒素(志贺样毒素(Shiga-like toxinShiga-like toxin,SLTSLT)噬菌体编码噬菌体编
16、码 细胞毒素细胞毒素 主要临床症状:主要临床症状:出血性结肠炎、伴以剧烈腹痛、血便。出血性结肠炎、伴以剧烈腹痛、血便。轻重不一。轻重不一。10%10%小于十岁患儿,有严重并发症,死亡小于十岁患儿,有严重并发症,死亡率高率高肠道杆菌专业知识培训26E.coliE.coli O157:H7 induced hemorrhagic O157:H7 induced hemorrhagic colitiscolitisin a three-year-old girlin a three-year-old girl肠道杆菌专业知识培训27 5 5、肠集聚性大肠埃希菌、肠集聚性大肠埃希菌质粒编码粘附素、使细
17、菌吸附在肠粘膜细胞表面。质粒编码粘附素、使细菌吸附在肠粘膜细胞表面。分泌肠毒素、导致肠液大量分泌。分泌肠毒素、导致肠液大量分泌。婴儿水样腹泻。婴儿水样腹泻。肠道杆菌专业知识培训28三、微生物学检查法三、微生物学检查法1 1、临床细菌学检查、临床细菌学检查 标本标本 肠外感染:尿液;脓液;血液肠外感染:尿液;脓液;血液 肠道感染:粪便肠道感染:粪便 分离培养分离培养 计数培养计数培养 纯培养纯培养形态学检查形态学检查 生化反应生化反应 毒素检测毒素检测 血清血清学试验学试验 报告结果报告结果 肠道杆菌专业知识培训29 埃希菌属鉴定 肠杆菌科:革兰氏染色阴性、触酶阳性、氧化酶阴性、硝酸盐还原试验阳
18、性。定属和定种试验:v KIA(K/AH2S-或A/AH2S-)v IMViC(+-)v MIU(-+-或+-)v 多价血清和单价血清的凝集试验,确定血清型。致病性大肠杆菌:v ETEC-毒素v EIEC-侵袭力试验。肠道杆菌专业知识培训30在环境和食品卫生学上,常被用作粪便污染的检测指标 3个大肠菌群/1L饮水 100个细菌总数/1ml饮水卫生学指标卫生学指标大肠菌群指数每1000ml水中大肠菌群数我国的卫生标准:细菌总数每1ml或1g样品中细菌总数肠道杆菌专业知识培训31 在分子生物学和基因工程实验中重要的实验材料和研究对象重要的实验材料和研究对象也是重要的实验材料和研究对象肠道杆菌专业知
19、识培训32能分解葡萄糖,产酸不产气,不分解乳糖,除宋内志贺菌第二节 志贺菌属 shigella是人类细菌性痢疾最为常见的病原菌,通称痢疾杆菌dysentery bacteria无鞭毛无鞭毛,有菌毛生化反应低于其他肠道杆菌,对酸敏感形态对理化因素的抵抗力肠道杆菌专业知识培训33 抗原构造及分类抗原构造及分类 志贺菌志贺菌O O抗原抗原-分类、分类、4 4群群4444个血清型个血清型 菌种菌种 群群 型型 亚型亚型 痢疾志贺菌痢疾志贺菌 A 110 8aA 110 8a,8b8b,8c 8c 福氏志贺菌福氏志贺菌 B 16B 16,1a1a,1b1b,2a2a,2b 2b X X,Y Y变种变种
20、3a3a,3b3b,4a4a,4b 4b 鲍氏志贺菌鲍氏志贺菌 C 118C 118宋内志贺菌宋内志贺菌 D 1D 1 K K抗原抗原-与分类无关。与分类无关。中国福氏志贺菌多见。中国福氏志贺菌多见。肠道杆菌专业知识培训34 致病性传染源:患者和带菌者粪口传播感染灶局限于结肠粘膜层,一般不入血病后免疫期短,也不巩固肠道杆菌专业知识培训35志贺菌属肠道杆菌专业知识培训36 致病物质1、侵袭力:、侵袭力:菌毛有利于菌粘附至肠粘膜2、毒、毒 素素:内毒素内毒素肠粘膜通透性升高毒素吸收发热、神志障碍、休克破坏肠粘膜炎症、溃疡、脓血粘液便肠壁植物神经肠蠕动失调、痉挛腹痛、里急后重内毒素血症外毒素(A群、
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