细胞工程医学知识课件.ppt

1、资料仅供参考,不当之处，请联系改正。体外受精和早期胚胎培养体外受精和早期胚胎培养卵母细胞的收卵母细胞的收集和培养集和培养对不同动物对不同动物,采取卵母采取卵母细胞的方细胞的方法不同法不同资料仅供参考,不当之处，请联系改正。精子的收集和获能精子的收集和获能 1)1)收集的方法收集的方法:假阴假阴道法道法,手握法手握法和和电电刺激刺激等等 2)2)获能处理获能处理:培养法：啮齿动物、培养法：啮齿动物、家兔和猪家兔和猪化学法：牛、羊化学法：牛、羊资料仅供参考,不当之处，请联系改正。受精受精 在获能在获能溶液或专用溶液或专用的受精溶液的受精溶液中完成受精中完成受精过程过程资料仅供参考,不当之处，请联系

2、改正。胚胎的早期培养胚胎的早期培养v培养液培养液:水、无机盐、有机盐、维生素、激素、水、无机盐、有机盐、维生素、激素、氨基酸、核苷酸以及动物血清等氨基酸、核苷酸以及动物血清等.资料仅供参考,不当之处，请联系改正。采集良种母牛的卵母细胞采集良种母牛的卵母细胞卵母细胞的体外培养卵母细胞的体外培养采集良种公牛精子采集良种公牛精子精子体外获能精子体外获能体外受精体外受精良种牛体外受精胚胎良种牛体外受精胚胎胚胎移植胚胎移植受体牛受体牛良种犊牛良种犊牛成熟期牛成熟期牛屠宰加工厂屠宰加工厂市场市场采集卵巢中的采集卵巢中的卵母细胞卵母细胞“试管牛试管牛”工厂化生产的技术流程工厂化生产的技术流程图图资料仅供参考

3、,不当之处，请联系改正。胚胎移植的现状和意义1)1)加速育种工作和品种改良；加速育种工作和品种改良；2)2)大量节省购买种畜的费用；大量节省购买种畜的费用；3)3)一胎多产；一胎多产；4)4)保存品种资源和濒危物种；保存品种资源和濒危物种；5)5)可充分发挥优秀个体的繁殖潜能可充分发挥优秀个体的繁殖潜能缩短繁殖周期缩短繁殖周期,增加一生繁殖的后增加一生繁殖的后代数量。代数量。资料仅供参考,不当之处，请联系改正。试管婴儿技术试管婴儿技术v第一代试管婴儿（in vitro fertilization,IVF体外受精）v第二代试管婴儿(intracytoplasmic sperm injection

4、,ICSI单精子卵细胞浆内注射)v第三代试管婴儿（pre-implantation genetic diagnosis,PGD胚胎植入前诊断)资料仅供参考,不当之处，请联系改正。单精子卵细胞浆内注射（单精子卵细胞浆内注射（ICSI）示意图如下：资料仅供参考,不当之处，请联系改正。试管婴儿与分子生物学的联系试管婴儿与分子生物学的联系v植入前遗传诊断即PGD:指对配子或移入到子宫腔之前的胚胎进行遗传学分析，去除有遗传缺陷的配子或胚胎。v1989年，英国Handyside成功地用聚合酶链反应（PCR）技术分析卵裂球的性别构成，完成了世界上第一例PGD诊断,我国首例1998年在中山医科大学生殖医学中心

5、诞生。vPGD是辅助生育技术与分子生物学技术相结合而发展的产前诊断技术资料仅供参考,不当之处，请联系改正。第三代试管婴儿与分子生物学的联系第三代试管婴儿与分子生物学的联系v植入前遗传诊断即PGD:指对配子或移入到子宫腔之前的胚胎进行遗传学分析，去除有遗传缺陷的配子或胚胎。v1989年，英国Handyside成功地用聚合酶链反应（PCR）技术分析卵裂球的性别构成，完成了世界上第一例PGD诊断,我国首例1998年在中山医科大学生殖医学中心诞生。vPGD是辅助生育技术与分子生物学技术相结合而发展的产前诊断技术资料仅供参考,不当之处，请联系改正。PGDPGD的取材的取材v极体细胞v卵裂球细胞v囊胚期细

6、胞资料仅供参考,不当之处，请联系改正。PGD:Genetic testing performed prior to embryo transfer资料仅供参考,不当之处，请联系改正。PGD的应用前景的应用前景v遗传病的诊断（优生）v疾病治疗（干细胞）v拯救濒危珍稀动物v研究人类基因在发育早期的表达（人类肿瘤易感综合征的易感性分析）资料仅供参考,不当之处，请联系改正。PGD展望展望v多重突变分析 多重PCR，间期核转换，全基因组扩增（whole genome amplificatio，WGA），基因芯片，微流控v诊断标准化 v伦理学研究 v相关领域研究：v1、人类胚胎体外的有效培养和定 向诱导分

7、化 2、人体基因在胚胎早期的特异表达 资料仅供参考,不当之处，请联系改正。PCRPCR和和FISHFISH的局限性的局限性v尽管PCR在PGD中起了重要的作用，但PCR对单个细胞扩增失败率高。由于获得细胞数目极少，而致使对单个细胞只能作一次分析，不能重复实验结果。等位基因脱失 v对45XO或YO，18单体核型的胚胎细胞，FISH诊断可能存在错误，出现这一结果时有两种可能，一是被检测的单个细胞就是单体核型的细胞；也可以是技术方法问题未能显示另一个杂交信号，FISH信号尚缺乏统一的标准 资料仅供参考,不当之处，请联系改正。实时荧光实时荧光PCRPCR检测单个地贫基因突变检测单个地贫基因突变v分离已

8、知基因型的外周血标本单个淋巴细胞，用巢式PCR外引物进行第一轮扩增，第二轮用TaqMan探针进行相应基因型的实时PCR检测，其中不同荧光报告基团标记的探针分别与正常、异常等位基因特异杂交，结合各荧光的终点变化及其实时动力学曲线判断对应等位基因存在与否。使单个碱基突变更敏感地干扰不匹配的探针与等位基因间的退火，更有效地检测出匹配的探针与等位基因间的结合v优点：快速、有效防污染、灵敏性高资料仅供参考,不当之处，请联系改正。试管婴儿的开始试管婴儿的开始v 世界上第一个试管婴儿于1978年7月25日在英国的奥尔德姆市医院诞生，她的名字叫路易丝.布朗。1988年北京医科大学第三医院诞生了我国内地第一位试管婴儿 v 培养在恒温器中的受精卵。恒温器温度保持在与人体温度相同的摄氏37度v 4岁8个月大的路易丝和她的妹妹、同样是试管婴儿的9个月大的娜塔莉 资料仅供参考,不当之处，请联系改正。2010年诺贝尔生理学或医学奖年诺贝尔生理学或医学奖v获奖者为素有“试管婴儿之父”之称的英国生理学家罗伯特爱德华兹。由其开创的体外受精技术使400多万人得以降生。资料仅供参考,不当之处，请联系改正。0802班占晶班占晶