白血病疾病的常用实验检测培训课件.ppt
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- 白血病 疾病 常用 实验 检测 培训 课件
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1、文档仅供参考,不能作为科学依据,请勿模仿;如有不当之处,请联系网站或本人删除。常见细胞化学染色的临床意义常见细胞化学染色的临床意义本章节教学目的和任务本章节教学目的和任务 良性白细胞疾病的实验诊断良性白细胞疾病的实验诊断文档仅供参考,不能作为科学依据,请勿模仿;如有不当之处,请联系网站或本人删除。血细胞的正常形态学特征血细胞的正常形态学特征文档仅供参考,不能作为科学依据,请勿模仿;如有不当之处,请联系网站或本人删除。形态学特点形态学特点红细胞红细胞淋巴细胞淋巴细胞粒细胞粒细胞单核细胞单核细胞巨核细胞巨核细胞血细胞的形态学特点血细胞的形态学特点文档仅供参考,不能作为科学依据,请勿模仿;如有不当之
2、处,请联系网站或本人删除。核染色质核染色质 胞核胞核 胞浆胞浆核仁核仁胞质颗粒胞质颗粒细胞大小细胞大小 大大小小细致细致粗糙粗糙 疏松疏松致密致密少少多多 核质比:大核质比:大小小大大小小 圆圆凹陷凹陷分叶分叶有有无无 无无少少多多 小淋巴细胞无颗粒小淋巴细胞无颗粒血细胞发育过程中的形态学变化规律血细胞发育过程中的形态学变化规律 原始粒细胞比早幼粒小原始粒细胞比早幼粒小 巨核细胞:小巨核细胞:小大大文档仅供参考,不能作为科学依据,请勿模仿;如有不当之处,请联系网站或本人删除。一、骨髓细胞学的临床应用一、骨髓细胞学的临床应用 适应证:适应证:1 1、患者多次检查外周血象有异常。、患者多次检查外周
3、血象有异常。2 2、患者有原因未明的肝、脾、淋巴结肿大。、患者有原因未明的肝、脾、淋巴结肿大。3 3、查明感染的原因,如黑热病患者通过骨髓涂片、查明感染的原因,如黑热病患者通过骨髓涂片 查找黑热病原虫等。查找黑热病原虫等。4 4、查恶性肿瘤有无骨髓转移。、查恶性肿瘤有无骨髓转移。5 5、助诊类脂质沉积病,如戈谢病及尼曼、助诊类脂质沉积病,如戈谢病及尼曼皮克病。皮克病。6 6、血液病进行鉴别诊断和疗效观察、利用骨髓液进、血液病进行鉴别诊断和疗效观察、利用骨髓液进 行祖细胞培养及染色体核型检查等。行祖细胞培养及染色体核型检查等。7 7、提高某些疾病诊断率。检验疟原虫、黑热病原虫、提高某些疾病诊断率
4、。检验疟原虫、黑热病原虫等等文档仅供参考,不能作为科学依据,请勿模仿;如有不当之处,请联系网站或本人删除。禁忌证:禁忌证:1 1、血友病血友病患者,由于患者,由于凝血因子缺凝血因子缺陷陷引起的出血性疾病。引起的出血性疾病。2 2、晚期妊娠晚期妊娠的孕妇作骨穿刺术应的孕妇作骨穿刺术应慎重。慎重。文档仅供参考,不能作为科学依据,请勿模仿;如有不当之处,请联系网站或本人删除。评价评价 1)辅助诊断 2)鉴别诊断 3)判断疗效文档仅供参考,不能作为科学依据,请勿模仿;如有不当之处,请联系网站或本人删除。注意事项注意事项 1)骨髓取材,涂片,染色良好时,才能进行骨髓检查.2)骨髓抽取0.2-0.3ml,
5、骨髓片应在采集后迅速涂片,避免凝固。文档仅供参考,不能作为科学依据,请勿模仿;如有不当之处,请联系网站或本人删除。四、骨髓细胞学检查的内容四、骨髓细胞学检查的内容低倍镜低倍镜高倍镜高倍镜有核细胞分类;计算粒有核细胞分类;计算粒/红比红比值;观察有无特殊细胞和寄值;观察有无特殊细胞和寄生虫。生虫。血片检查血片检查骨髓有核细胞增生程度(骨髓有核细胞增生程度(增生极度活增生极度活跃、增生明显活跃、增生活跃、增生跃、增生明显活跃、增生活跃、增生减低、增生明显减低减低、增生明显减低)巨核细胞计数巨核细胞计数和分类;其它特殊细胞。和分类;其它特殊细胞。有核细胞分类;观察有无特有核细胞分类;观察有无特殊细胞
6、和寄生虫。殊细胞和寄生虫。文档仅供参考,不能作为科学依据,请勿模仿;如有不当之处,请联系网站或本人删除。五、常见细胞化学染色的临床意义五、常见细胞化学染色的临床意义铁染色等铁染色等中性粒细胞碱性磷酸酶(中性粒细胞碱性磷酸酶(NAPNAP)糖原染色(糖原染色(PASPAS)酯酶染色(酯酶染色(E E)髓过氧化物酶染色(髓过氧化物酶染色(POXPOX)常用的细胞常用的细胞化学染色化学染色文档仅供参考,不能作为科学依据,请勿模仿;如有不当之处,请联系网站或本人删除。过氧化物酶染色(过氧化物酶染色(POXPOX)原理:原理:血细胞中的过氧化物酶能分解试剂中的底物血细胞中的过氧化物酶能分解试剂中的底物H
7、 H2 2O O2 2,释出新生态氧,使无色联苯胺化为蓝色联,释出新生态氧,使无色联苯胺化为蓝色联苯胺,后者与亚硝基铁氰化钠结合形成蓝黑色的苯胺,后者与亚硝基铁氰化钠结合形成蓝黑色的颗粒,沉着于细胞质中。颗粒,沉着于细胞质中。文档仅供参考,不能作为科学依据,请勿模仿;如有不当之处,请联系网站或本人删除。POXPOX染色示意图染色示意图文档仅供参考,不能作为科学依据,请勿模仿;如有不当之处,请联系网站或本人删除。临床意义临床意义 主要用急性白血病的鉴别主要用急性白血病的鉴别 急性淋巴细胞白血病(急性淋巴细胞白血病(POX3%POX3%POX3%阳性)阳性)文档仅供参考,不能作为科学依据,请勿模仿
8、;如有不当之处,请联系网站或本人删除。1.1.急性粒细胞白血病急性粒细胞白血病I I型原粒细型原粒细 阴性,阴性,型型原粒细胞及其各阶段粒细胞原粒细胞及其各阶段粒细胞 均阳性,均阳性,M3 M3型最强。(型最强。(POX3%POX3%阳性)阳性)2.2.急性单核细胞白血病急性单核细胞白血病 原单、幼单细胞原单、幼单细胞 弱阳性(弱阳性(POX3%POX3%阳性)阳性)3.3.急性淋巴细胞白血病急性淋巴细胞白血病 阴性(阴性(POX3%POX3%阳性)阳性)4.4.巨核细胞白血病巨核细胞白血病 阴性(阴性(POX3%POX3%阳性)阳性)文档仅供参考,不能作为科学依据,请勿模仿;如有不当之处,请
9、联系网站或本人删除。非特异性酯酶染色(非特异性酯酶染色(NSE)主要存在于单核细胞和组织细胞内。又称主要存在于单核细胞和组织细胞内。又称单核单核细胞酯酶染色细胞酯酶染色 原理:原理:血细胞内的血细胞内的-醋酸萘酚酯酶又称非持异醋酸萘酚酯酶又称非持异性酯酶。其能将基质液中的性酯酶。其能将基质液中的-醋酸萘酚水解,醋酸萘酚水解,产生产生-萘酚萘酚,萘酚再与重氮染料偶联,形成不萘酚再与重氮染料偶联,形成不溶性的有色沉淀,定位于胞质内。溶性的有色沉淀,定位于胞质内。文档仅供参考,不能作为科学依据,请勿模仿;如有不当之处,请联系网站或本人删除。临床意义:临床意义:主要用于鉴别主要用于鉴别急性单核细胞白血
10、病急性单核细胞白血病和和急性粒细胞白血病。急性粒细胞白血病。1.急性单核细胞白血病 阳性 可被氟化钠(NaF)抑制(抑制率大于50%)2.急性粒细胞白血病阴性或弱阳性其弱阳性反应不被NaF抑制(抑制率小于50%)文档仅供参考,不能作为科学依据,请勿模仿;如有不当之处,请联系网站或本人删除。单核细胞(单核细胞(a a)、血小板()、血小板(b b)、巨核细胞()、巨核细胞(c c)胞浆)胞浆中有弥漫性灰黑色阳性反应产物,淋巴细胞(中有弥漫性灰黑色阳性反应产物,淋巴细胞(d d)呈)呈点状阳性反应,幼红细胞(点状阳性反应,幼红细胞(e e)呈阴性反应)呈阴性反应文档仅供参考,不能作为科学依据,请勿
11、模仿;如有不当之处,请联系网站或本人删除。A A:急性单核细胞白血病呈强阳性:急性单核细胞白血病呈强阳性 B B:急性单核细胞白血病细胞:急性单核细胞白血病细胞NSENSE活性明显受活性明显受NaFNaF抑制抑制 C C:急性原粒细胞白血病呈点状弱阳性反应:急性原粒细胞白血病呈点状弱阳性反应 D D:急性原粒细胞白血病细胞不受:急性原粒细胞白血病细胞不受NaFNaF抑制抑制文档仅供参考,不能作为科学依据,请勿模仿;如有不当之处,请联系网站或本人删除。特异性酯酶染色(特异性酯酶染色(SESE)氯化醋酯氯化醋酯AS-DAS-D萘酚酯酶主要分布于中萘酚酯酶主要分布于中性粒细胞中,又称性粒细胞中,又称
12、粒细胞酯酶。粒细胞酯酶。原理:原理:此酶能将基质液中的氯化醋酯此酶能将基质液中的氯化醋酯AS-DAS-D萘酚水萘酚水解,产生萘酚解,产生萘酚AS-DAS-D,进而与重氮盐,进而与重氮盐GBCGBC偶联,偶联,形成不溶性的红色沉淀,定位细胞质内。形成不溶性的红色沉淀,定位细胞质内。文档仅供参考,不能作为科学依据,请勿模仿;如有不当之处,请联系网站或本人删除。临床意义:临床意义:1.1.急性粒细胞白血病时原粒细胞和早幼粒急性粒细胞白血病时原粒细胞和早幼粒 细胞酶活性明显增强细胞酶活性明显增强 强阳性;强阳性;2.2.急性单核细胞白血病及急性淋巴细胞白急性单核细胞白血病及急性淋巴细胞白 血病时血病时
13、 阴性;阴性;3.3.急性粒急性粒-单核细胞白血病单核细胞白血病 白血病粒细胞(粒系)白血病粒细胞(粒系)阳性,阳性,白血病细胞(单核系)白血病细胞(单核系)阴性。阴性。文档仅供参考,不能作为科学依据,请勿模仿;如有不当之处,请联系网站或本人删除。A+BA+B:急性早幼粒细胞白血病细胞胞浆内有大量蓝:急性早幼粒细胞白血病细胞胞浆内有大量蓝 色阳性反应物质色阳性反应物质 C C:急性原粒细胞白血病(:急性原粒细胞白血病(M1M1型)呈阳性反应型)呈阳性反应 D D:急性淋巴细胞白血病呈阴性反应:急性淋巴细胞白血病呈阴性反应文档仅供参考,不能作为科学依据,请勿模仿;如有不当之处,请联系网站或本人删
14、除。-NBE染色染色 主要存在与单核系细胞中,故又称单核细胞酯酶。临床意义:临床意义:急性粒-单核细胞白血病 原粒细胞NAS-DCE染色阳性或弱阳性 单核系细胞-NAE和-NBE染色阳性文档仅供参考,不能作为科学依据,请勿模仿;如有不当之处,请联系网站或本人删除。糖原染色(糖原染色(PASPAS)原理原理:又称过碘酸-雪夫(Schiff)反应。过碘酸能将血细胞内的糖原氧化,生成醛基。醛基与Schiff液中的无色品红结合,形成紫红色化合物,定位于胞质内。文档仅供参考,不能作为科学依据,请勿模仿;如有不当之处,请联系网站或本人删除。临床意义:临床意义:1.1.鉴别淋巴系统增生性质鉴别淋巴系统增生性
15、质 恶性增生时恶性增生时PASPAS反应反应 强阳性(阳性反应强阳性(阳性反应见于急、慢性淋巴细胞白血病、淋巴瘤等)。见于急、慢性淋巴细胞白血病、淋巴瘤等)。2.2.鉴别红系增生性质鉴别红系增生性质 恶性增生者,如红血病、红白血病其原幼红细恶性增生者,如红血病、红白血病其原幼红细 胞胞 强阳性强阳性 增生性贫血和巨幼红细胞性贫血增生性贫血和巨幼红细胞性贫血 阴性。阴性。3.3.巨核细胞巨核细胞 强阳性(有助于巨核细胞白血强阳性(有助于巨核细胞白血病的诊断)。病的诊断)。文档仅供参考,不能作为科学依据,请勿模仿;如有不当之处,请联系网站或本人删除。糖原染色:成熟粒细胞(糖原染色:成熟粒细胞(a
16、a),巨核细胞(),巨核细胞(b b)呈)呈强阳性反应,单核细胞(强阳性反应,单核细胞(c c)呈弱阳性反应,正常)呈弱阳性反应,正常幼红细胞(幼红细胞(d d)呈阴性反应)呈阴性反应文档仅供参考,不能作为科学依据,请勿模仿;如有不当之处,请联系网站或本人删除。A A:慢性淋巴细胞白血病细胞呈红色粗颗粒状阳性反应:慢性淋巴细胞白血病细胞呈红色粗颗粒状阳性反应 B B:急性淋巴细胞白血病细胞呈红色颗粒状阳性反应,:急性淋巴细胞白血病细胞呈红色颗粒状阳性反应,幼红细胞呈阴性反应幼红细胞呈阴性反应文档仅供参考,不能作为科学依据,请勿模仿;如有不当之处,请联系网站或本人删除。A A:急性红白血病幼红细
17、胞呈红色阳性反应:急性红白血病幼红细胞呈红色阳性反应 B B:巨幼细胞性贫血时巨幼红细胞呈阴性反应:巨幼细胞性贫血时巨幼红细胞呈阴性反应文档仅供参考,不能作为科学依据,请勿模仿;如有不当之处,请联系网站或本人删除。中性粒细胞碱性磷酸酶染色(中性粒细胞碱性磷酸酶染色(NAPNAP)原理:原理:碱性磷酸酶在碱性条件下将基质液中的碱性磷酸酶在碱性条件下将基质液中的-甘油磷酸钠水甘油磷酸钠水 解产生磷酸钠。磷酸钠依次解产生磷酸钠。磷酸钠依次与硝酸钙、硝酸钴、硫化胺与硝酸钙、硝酸钴、硫化胺 发生发生 一系列一系列反应形成不溶性棕黑色的硫化钴,定位于反应形成不溶性棕黑色的硫化钴,定位于酶活性之处。酶活性之
18、处。文档仅供参考,不能作为科学依据,请勿模仿;如有不当之处,请联系网站或本人删除。临床意义:临床意义:1.1.鉴别慢性粒细胞白血病及中性粒细胞型类白血病反应鉴别慢性粒细胞白血病及中性粒细胞型类白血病反应 前者阳性率及积分值均前者阳性率及积分值均极低极低,甚至为,甚至为“0”“0”,后者后者强阳性强阳性,阳性率可达,阳性率可达100%100%,积分值可达,积分值可达400400。2.2.初步鉴别感染的类型初步鉴别感染的类型 在急性细菌性感染时在急性细菌性感染时NAPNAP阳反应强,而病毒和寄生虫及结核菌感染时阳反应强,而病毒和寄生虫及结核菌感染时NAPNAP染色染色结果多在正常范围。结果多在正常
19、范围。3.3.再生障碍性贫血(再生障碍性贫血(AA)AA)和阵发性睡眠性血红蛋白尿(和阵发性睡眠性血红蛋白尿(PNHPNH)AA NAP AA NAP染色常增高,染色常增高,PNH NAPPNH NAP染色常减低染色常减低4.4.恶性组织细胞病与反应性组织细胞增生症的鉴别恶性组织细胞病与反应性组织细胞增生症的鉴别 前者常降低,后者常增高。前者常降低,后者常增高。5.5.真性红细胞增多症与继发性红细胞增多症的鉴别真性红细胞增多症与继发性红细胞增多症的鉴别 前者常增高,后者无明显变化。前者常增高,后者无明显变化。文档仅供参考,不能作为科学依据,请勿模仿;如有不当之处,请联系网站或本人删除。NAPN
20、AP染色:中性粒细胞呈不同程度阳性染色:中性粒细胞呈不同程度阳性 a a:+c+c:+e+e:阴性反应:阴性反应 b b:+d+d:+f+f:嗜酸细胞呈阴性:嗜酸细胞呈阴性文档仅供参考,不能作为科学依据,请勿模仿;如有不当之处,请联系网站或本人删除。慢性粒细胞白血病(慢性粒细胞白血病(CMLCML)中性粒细胞碱性磷酸酶)中性粒细胞碱性磷酸酶(NAPNAP)染色:)染色:未见阳性反应未见阳性反应文档仅供参考,不能作为科学依据,请勿模仿;如有不当之处,请联系网站或本人删除。急性化脓性感染急性化脓性感染NAPNAP染色:染色:NAPNAP反应阳性率及积分均增高,片中反应阳性率及积分均增高,片中4 4
21、个细胞均为个细胞均为+阳性反应阳性反应文档仅供参考,不能作为科学依据,请勿模仿;如有不当之处,请联系网站或本人删除。铁染色铁染色 原理:原理:细胞外含铁血黄素和幼红细胞内的铁与细胞外含铁血黄素和幼红细胞内的铁与酸性亚铁氰化钾发生普普鲁士蓝反应,形酸性亚铁氰化钾发生普普鲁士蓝反应,形成蓝色的亚铁氰化铁沉淀普鲁士蓝),定成蓝色的亚铁氰化铁沉淀普鲁士蓝),定位于含铁的部位。故此法又称为普鲁士蓝位于含铁的部位。故此法又称为普鲁士蓝反应。反应。文档仅供参考,不能作为科学依据,请勿模仿;如有不当之处,请联系网站或本人删除。应用:应用:鉴别缺铁性贫血与非缺铁性贫血鉴别缺铁性贫血与非缺铁性贫血 前者细胞外铁减
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