白细胞检验医学知识培训课件.ppt
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1、白细胞检验医学知识白细胞检验医学知识本章目录本章目录第一节第一节 白细胞生理概要白细胞生理概要第二节第二节 白细胞计数白细胞计数第三节第三节 白细胞分类计数白细胞分类计数第四节第四节 中性粒细胞常见的形态变化中性粒细胞常见的形态变化第五节第五节 白细胞计数和白细胞分类计数的临床意义白细胞计数和白细胞分类计数的临床意义第六节第六节 嗜酸性粒细胞计数嗜酸性粒细胞计数第七节第七节 红斑狼疮细胞检验红斑狼疮细胞检验白细胞检验医学知识2第一节第一节 白细胞生理概要白细胞生理概要 外周血常见白细胞的种类与功能外周血常见白细胞的种类与功能 白细胞的寿命和归宿白细胞的寿命和归宿白细胞检验医学知识3学习目标学习
2、目标1.叙述白细胞显微镜计数法的原理、试剂组叙述白细胞显微镜计数法的原理、试剂组成、注意事项成、注意事项2.学会白细胞显微镜计数法的操作方法学会白细胞显微镜计数法的操作方法3.准确识别外周血常见正常和异常白细胞形准确识别外周血常见正常和异常白细胞形态态4.学会白细胞分类计数方法学会白细胞分类计数方法白细胞检验医学知识4外周血常见白细胞的种类与功能外周血常见白细胞的种类与功能(一一)外周血常见白细胞的种类外周血常见白细胞的种类1.白细胞的形态:白细胞的形态:无色有核,球形,直径无色有核,球形,直径7m25m。2.白细胞的种类(形态分类):白细胞的种类(形态分类):三类五种三类五种-白细胞检验医学
3、知识5 中性粒细胞(中性粒细胞(N N)粒细胞粒细胞 嗜酸粒细胞(嗜酸粒细胞(E E)嗜碱粒细胞(嗜碱粒细胞(B B)白细胞白细胞 淋巴细胞淋巴细胞 (L L)单核细胞单核细胞 (M M)白细胞检验医学知识6起源于骨髓多能造血干细胞。起源于骨髓多能造血干细胞。白细胞检验医学知识7白细胞的功能白细胞的功能中性粒细胞:具有较强的运动能力和吞噬活性。胞中性粒细胞:具有较强的运动能力和吞噬活性。胞内酶有复杂的杀菌系统。内酶有复杂的杀菌系统。嗜酸粒细胞:可作变形运动,吞噬抗原抗体复合物,嗜酸粒细胞:可作变形运动,吞噬抗原抗体复合物,灭活组织胺减轻过敏反应。灭活组织胺减轻过敏反应。嗜碱粒细胞:与嗜碱粒细胞
4、:与IgEIgE具有较强的结合力,脱粒释放组具有较强的结合力,脱粒释放组胺导致速发性变态反应。胺导致速发性变态反应。淋巴细胞:参与体液免疫和细胞免疫。淋巴细胞:参与体液免疫和细胞免疫。单核细胞:有强大的吞噬功能,传递抗原信息。单核细胞:有强大的吞噬功能,传递抗原信息。白细胞检验医学知识8白细胞的寿命白细胞的寿命 粒细胞:粒细胞:10 101515天天 淋巴细胞:数天淋巴细胞:数天2020余年余年 单核细胞:数月单核细胞:数月白细胞检验医学知识9白细胞的归宿白细胞的归宿 衰老的粒细胞被单核衰老的粒细胞被单核-吞噬细胞系统清除,也吞噬细胞系统清除,也有一部分从口腔、气管、消化道和泌尿生殖道排有一部
5、分从口腔、气管、消化道和泌尿生殖道排出。出。B B淋巴细胞经抗原刺激后分化为浆细胞,产生淋巴细胞经抗原刺激后分化为浆细胞,产生特异性抗体,参与体液免疫。特异性抗体,参与体液免疫。T T淋巴细胞经抗原致淋巴细胞经抗原致敏后,可产生多种免疫活性物质,参与细胞免疫。敏后,可产生多种免疫活性物质,参与细胞免疫。粒粒-单核系祖细胞在骨髓经分化成原始单核细单核系祖细胞在骨髓经分化成原始单核细胞后发育为成熟单核细胞,释放入血液。胞后发育为成熟单核细胞,释放入血液。白细胞检验医学知识10白细胞检验医学知识11学习目标学习目标 1.1.叙述白细胞显微镜计数法的原理、试叙述白细胞显微镜计数法的原理、试剂组成、注意
6、事项。剂组成、注意事项。2.2.学会白细胞显微镜计数法的操作方法学会白细胞显微镜计数法的操作方法 3.3.准确识别外周血常见正常和异常白细准确识别外周血常见正常和异常白细胞形态。胞形态。4.4.学会白细胞分类计数方法。学会白细胞分类计数方法。白细胞检验医学知识12显微镜计数法显微镜计数法 【原理原理】用白细胞计数稀释液,将血液稀释一定用白细胞计数稀释液,将血液稀释一定倍数并破坏红细胞后,混匀充入计数池中,倍数并破坏红细胞后,混匀充入计数池中,在显微镜下计数一定容积内的白细胞数,经在显微镜下计数一定容积内的白细胞数,经换算即可求得每升血液中白细胞的总数。换算即可求得每升血液中白细胞的总数。白细胞
7、检验医学知识13显微镜计数法显微镜计数法【器材】【器材】1.显微镜(目镜显微镜(目镜10;物镜;物镜10)2.微量吸管(微量吸管(Hb吸管)吸管)传统的传统的Hb吸管玻璃吸管玻璃上有上有10l和和20l(误差(误差1%)两个刻度。)两个刻度。使用前应经严格校正。橡胶乳头提供负压使用前应经严格校正。橡胶乳头提供负压 白细胞检验医学知识14Hb吸管的消毒清洗吸管的消毒清洗 每次使用后,应每次使用后,应经经2 2/过氧乙酸浸过氧乙酸浸泡泡2 2消毒。然后依消毒。然后依次用蒸馏水冲洗,次用蒸馏水冲洗,0.950.95/乙醇除乙醇除脂脱水,脂脱水,乙醚干燥乙醚干燥后,才能再次使用。后,才能再次使用。注意
8、清洗的顺序不可注意清洗的顺序不可颠倒。颠倒。白细胞检验医学知识15显微镜计数法显微镜计数法3.计数池计数池白细胞检验医学知识16显微镜计数法显微镜计数法 3.计数池计数池 各各池刻划有池刻划有9 92 2面面积的刻度,分为积的刻度,分为 9 9个大方格,每格长、个大方格,每格长、宽各宽各1 1,面积,面积1 12 2,体积为,体积为 0.1 0.1,容量,容量 0.1l0.1l。白细胞检验医学知识17计数白细胞的四个大方格计数白细胞的四个大方格 四个角的大四个角的大方格都用单线划方格都用单线划分为分为16个中方格,个中方格,为计数密度小的为计数密度小的(白)细胞用。(白)细胞用。容量:容量:0
9、.1l/大方格大方格白细胞检验医学知识18计数红细胞的五个中方格计数红细胞的五个中方格中央的一个大方格,中央的一个大方格,用双线划分为用双线划分为25个个中方格,每个中方中方格,每个中方格又被单线划分为格又被单线划分为16个小方格,共有个小方格,共有400个小方格,供个小方格,供计数密度大的(红)计数密度大的(红)细胞用。细胞用。容量:容量:0.1l/大方格大方格 0.004l/中方格中方格白细胞检验医学知识19 .盖玻片盖玻片 特制的计数池专用盖片,要求玻璃表面特制的计数池专用盖片,要求玻璃表面平整光滑,有一定重量,不被细胞悬液所抬平整光滑,有一定重量,不被细胞悬液所抬浮,厚度应为浮,厚度应
10、为0.40.40.70.7。盖玻片两。盖玻片两面的平整度是:面的平整度是:0.0020.002以内,以内,大小大小:24mm:24mm20mm20mm0.6mm0.6mm。白细胞检验医学知识20显微镜计数法显微镜计数法 白细胞稀释液白细胞稀释液 冰乙酸冰乙酸 2.0 2.0 10g 10g亚甲蓝(或结晶紫)数滴亚甲蓝(或结晶紫)数滴 蒸馏水加至蒸馏水加至100100白细胞检验医学知识21稀释液中各组分的作用蒸馏水蒸馏水 低渗溶解红细胞,低渗溶解红细胞,乙乙 酸酸 可加速红细胞溶解,同时乙酸能固可加速红细胞溶解,同时乙酸能固定核蛋白,使白细胞核显现,便于辨定核蛋白,使白细胞核显现,便于辨认。认。
11、染染 料料 使核略着色,且易与红细胞稀释液使核略着色,且易与红细胞稀释液 区别。区别。白细胞检验医学知识22显微镜计数法【操作】【操作】取小试管支,加入白细胞稀释液取小试管支,加入白细胞稀释液0.380.38。用微量吸管准确吸取外周血用微量吸管准确吸取外周血20ul20ul。擦去管尖外部余血,立即将吸管插入盛有稀释液的擦去管尖外部余血,立即将吸管插入盛有稀释液的试管底部,轻轻将血放出,并吸取上清液漱洗吸管次试管底部,轻轻将血放出,并吸取上清液漱洗吸管次次,注意每次不能冲浑稀释液,最后用手振摇试管混匀。次,注意每次不能冲浑稀释液,最后用手振摇试管混匀。白细胞检验医学知识23操作 .充液充液 将计
12、将计数板和盖玻片擦净,盖数板和盖玻片擦净,盖片盖在计数池上,用毛片盖在计数池上,用毛细滴管或玻璃棒取已混细滴管或玻璃棒取已混匀的细胞悬液匀的细胞悬液1 1滴,充滴,充入计数池与盖玻片间的入计数池与盖玻片间的缝隙中,静置缝隙中,静置2min2min3min3min,待白细胞下沉。,待白细胞下沉。白细胞检验医学知识24镜下白细胞形态镜下白细胞形态 似成熟蚕卵,似成熟蚕卵,中央核深染,中央核深染,胞质色淡。胞质色淡。白细胞检验医学知识25显微镜计数法显微镜计数法5.计数方法计数方法 用低倍镜依次计数四用低倍镜依次计数四角的四个大格内的白细胞角的四个大格内的白细胞数。对于压线的白细胞,数。对于压线的白
13、细胞,应采取数上不数下;数左应采取数上不数下;数左不数右(左、上计入,右、不数右(左、上计入,右、下弃去)的原则,保证计下弃去)的原则,保证计数域的一致性,使计数准数域的一致性,使计数准确。确。白细胞检验医学知识26白细胞检验医学知识27让我们再试一次:白细胞检验医学知识28显微镜计数法显微镜计数法【计算计算】四个大格白细胞数四个大格白细胞数白细胞数白细胞数 10 20 106 4 4 式中:式中:得每个大格(即得每个大格(即 0.1 0.1l l)内白细胞平均数)内白细胞平均数 10 10 因一大格容积为因一大格容积为0.10.1l l,换算为,换算为1 1l l 20 20 血液稀释倍数。
14、血液稀释倍数。10106 6 将将1 1l l换算为换算为 1 1。白细胞检验医学知识29稀释倍数的确认稀释倍数的确认稀释倍数(溶质溶剂)稀释倍数(溶质溶剂)/溶质溶质注意:体积单位需一致后方能运算。注意:体积单位需一致后方能运算。白细胞检验医学知识30请您练习请您练习求以下操作的稀释倍数:求以下操作的稀释倍数:稀释液(稀释液(mlml)血液()血液(l l)稀释倍数)稀释倍数 0.38 20 0.38 20 0.48 20 0.48 20 0.39 10 0.39 10 2.00 10 2.00 10202025254040201201白细胞检验医学知识31请您练习请您练习按常规取血稀释后数
15、得按常规取血稀释后数得4 4个大格共有白细个大格共有白细胞胞280280个,求白细胞计数结果?个,求白细胞计数结果?解:解:WBCWBC280/4280/41010202010106 6141410109 9/L/L白细胞检验医学知识32请您练习请您练习 取血取血40ul40ul加入稀释液加入稀释液0.36ml0.36ml,镜下计数,镜下计数了了8 8个大格共有白细胞个大格共有白细胞320320个,求其白细胞计个,求其白细胞计数结果?数结果?答案:稀释倍数(答案:稀释倍数(3603604040)4040WBCWBC 320 3208 81010101010106 6 1010 4 410109
16、 9/L/L白细胞检验医学知识331.技术误差技术误差:由于操作不正确和仪器不精由于操作不正确和仪器不精确造成的误差。确造成的误差。2.固有误差固有误差:因每次白细胞分布不可能因每次白细胞分布不可能完全相同所造成的偏差属固有误差,也称计完全相同所造成的偏差属固有误差,也称计数域误差。数域误差。白细胞检验医学知识34常见技术误差:常见技术误差:血液凝固血液凝固 稀释倍数不准稀释倍数不准 充液不当充液不当 识别错误识别错误 器材不符合要求器材不符合要求白细胞检验医学知识35 根据统计学研究,白细胞在计数池内的根据统计学研究,白细胞在计数池内的随机分布符合泊森分布。随机分布符合泊森分布。从计算公式中
17、可以看出计数范围越大,从计算公式中可以看出计数范围越大,计数的细胞越多,计数域误差越小。计数的细胞越多,计数域误差越小。白细胞检验医学知识36注意事项注意事项 1 1、稀释液要过滤使用,试管、计数板等均须清、稀释液要过滤使用,试管、计数板等均须清洁。洁。2 2、计数池内细胞分布要均匀。、计数池内细胞分布要均匀。总数在参考范围内,每个大方格间白细胞数不总数在参考范围内,每个大方格间白细胞数不得相差得相差8 8个以上,两次重复计数误差不得超过个以上,两次重复计数误差不得超过10%10%,否则要重新充液计数。否则要重新充液计数。3 3、遇白细胞数太低者、白细胞数太高者稀释、遇白细胞数太低者、白细胞数
18、太高者稀释倍数应灵活掌握。倍数应灵活掌握。4 4、当外周血出现大量有核红细胞时应予以校、当外周血出现大量有核红细胞时应予以校正除去。正除去。白细胞检验医学知识37总总 结结1.白细胞的种类按形态分类包括:白细胞的种类按形态分类包括:三类五种三类五种2.显微镜法计数原理:显微镜法计数原理:用稀乙酸溶液将血液稀释并破坏红细胞用稀乙酸溶液将血液稀释并破坏红细胞后,混匀充入计数池中,在镜下计数一定容后,混匀充入计数池中,在镜下计数一定容积中的白细胞数,经换算求得每升血液中的积中的白细胞数,经换算求得每升血液中的白细胞总数。白细胞总数。白细胞检验医学知识38总总 结结 3.3.计数池的结构:分为计数池的
19、结构:分为 9 9个大方格,每个大方格,每个大方格长、宽各个大方格长、宽各1 1,面积,面积 2 2,体,体积为积为 0.1 0.1,容量,容量 0.1 0.1l l。4.4.稀释液中各组分的作用为:蒸馏水低稀释液中各组分的作用为:蒸馏水低渗溶解红细胞;乙酸加速红细胞溶解同时固渗溶解红细胞;乙酸加速红细胞溶解同时固定核蛋白,使白细胞核显现,便于辨认;染定核蛋白,使白细胞核显现,便于辨认;染料使核略着色,且易与红细胞稀释液区别。料使核略着色,且易与红细胞稀释液区别。白细胞检验医学知识39总总 结结 5.Hb 5.Hb吸管的清洗顺序是:蒸馏水冲洗吸管的清洗顺序是:蒸馏水冲洗95%95%乙醇脱水除脂
20、乙醇脱水除脂 乙醚干燥乙醚干燥 6.6.镜下计数时要遵循一定顺序,对于压镜下计数时要遵循一定顺序,对于压线的白细胞,应采取线的白细胞,应采取:数上不数下;数左不数数上不数下;数左不数右(左、上计入,右、下弃去)的原则计数。右(左、上计入,右、下弃去)的原则计数。白细胞检验医学知识40总总 结结计算公式计算公式 四个大格白细胞数四个大格白细胞数白细胞数白细胞数1010202010106 6 4 4白细胞检验医学知识41第三节第三节 白细胞分类计数白细胞分类计数一、外周血常见白细胞的形态一、外周血常见白细胞的形态二、白细胞分类计数二、白细胞分类计数白细胞检验医学知识42学习目标学习目标 1.1.叙
21、述外周血常见白细胞的形态叙述外周血常见白细胞的形态 .分析白细胞在血涂片上的分布,正确分析白细胞在血涂片上的分布,正确选择分类计数区域选择分类计数区域 .述说显微镜白细胞分类计数法述说显微镜白细胞分类计数法白细胞检验医学知识43一、外周血常见白细胞的形态一、外周血常见白细胞的形态经瑞特染色后外周血中常见各种成熟白经瑞特染色后外周血中常见各种成熟白细胞形态如下:细胞形态如下:细胞大小、形态细胞大小、形态细胞核形态、染色质结构细胞核形态、染色质结构细胞浆、特异性颗粒细胞浆、特异性颗粒白细胞检验医学知识44(一)中性粒细胞(一)中性粒细胞胞体呈圆形,直径胞体呈圆形,直径10101515,约为红细,约
22、为红细胞的倍。胞质量丰富染粉红色,含大量细小胞的倍。胞质量丰富染粉红色,含大量细小均匀的紫红色中性颗粒。细胞核染色质粗糙不均匀的紫红色中性颗粒。细胞核染色质粗糙不匀,排列紧密成小块状染深紫红色。根据核匀,排列紧密成小块状染深紫红色。根据核的形状分为中性杆状(带状)核粒细胞和中性的形状分为中性杆状(带状)核粒细胞和中性分叶核(多节核)粒细胞两种。分叶核(多节核)粒细胞两种。白细胞检验医学知识45(一)中性粒细胞(一)中性粒细胞 中性分叶核粒细胞的核分叶叶或更多中性分叶核粒细胞的核分叶叶或更多叶,以叶叶为常见叶间以核丝或核桥相连。叶,以叶叶为常见叶间以核丝或核桥相连。分叶的大小、形状和排列各不相同
23、。分叶的大小、形状和排列各不相同。白细胞检验医学知识46中性分叶核粒细胞的核中性分叶核粒细胞的核白细胞检验医学知识47杆状核和分叶核的划分标准杆状核和分叶核的划分标准 胞核完全分离或核间以丝状相连,或核叶重叠,胞核完全分离或核间以丝状相连,或核叶重叠,使核的轮廓看不清,划分为分叶核粒细胞。胞核细使核的轮廓看不清,划分为分叶核粒细胞。胞核细长多样,弯曲盘绕,可呈长多样,弯曲盘绕,可呈C C型、型、S S型、型、V V型或不规则型,型或不规则型,划分为杆状核粒细胞。为不完全成熟细胞。划分为杆状核粒细胞。为不完全成熟细胞。白细胞检验医学知识48杆状核粒细胞的核形杆状核粒细胞的核形白细胞检验医学知识4
24、9(二)嗜酸粒细胞(二)嗜酸粒细胞 圆形,直径圆形,直径13m13m15m15m,略大于中性粒细,略大于中性粒细胞。胞核常分两叶,似眼胞。胞核常分两叶,似眼镜形。也可见叶叶镜形。也可见叶叶者。核染色质粗。染紫红者。核染色质粗。染紫红色。胞质中充满粗大、均色。胞质中充满粗大、均匀、整齐、紧密排列的橘匀、整齐、紧密排列的橘红色嗜酸性颗粒。偶见少红色嗜酸性颗粒。偶见少许淡蓝或无色胞质。嗜酸许淡蓝或无色胞质。嗜酸粒细胞较易碎,破碎后颗粒细胞较易碎,破碎后颗粒多散在胞核附近。粒多散在胞核附近。白细胞检验医学知识50(三)嗜碱粒细胞(三)嗜碱粒细胞圆形,直径圆形,直径10m10m1 1m m,较,较其他粒
25、细胞小。胞核常被颗粒遮盖,其他粒细胞小。胞核常被颗粒遮盖,核染色质粗着色较浅,分叶常不明核染色质粗着色较浅,分叶常不明显形态不规则,清楚时可见叶显形态不规则,清楚时可见叶叶。胞质量较少,常呈淡红或淡紫叶。胞质量较少,常呈淡红或淡紫红色,含少量粗大,但大小不均、排红色,含少量粗大,但大小不均、排列不规则的紫黑色嗜碱性颗粒,常盖列不规则的紫黑色嗜碱性颗粒,常盖于核上。嗜碱性颗粒易溶于水,故染于核上。嗜碱性颗粒易溶于水,故染色时易被溶解消失,而呈淡红色空穴色时易被溶解消失,而呈淡红色空穴状。状。白细胞检验医学知识51(四)单核细胞(四)单核细胞 呈不规则的圆或椭呈不规则的圆或椭圆形,为外周血中最大圆
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