生化反应曲线-基础医学-医药卫生-专业课件.ppt
- 【下载声明】
1. 本站全部试题类文档,若标题没写含答案,则无答案;标题注明含答案的文档,主观题也可能无答案。请谨慎下单,一旦售出,不予退换。
2. 本站全部PPT文档均不含视频和音频,PPT中出现的音频或视频标识(或文字)仅表示流程,实际无音频或视频文件。请谨慎下单,一旦售出,不予退换。
3. 本页资料《生化反应曲线-基础医学-医药卫生-专业课件.ppt》由用户(晟晟文业)主动上传,其收益全归该用户。163文库仅提供信息存储空间,仅对该用户上传内容的表现方式做保护处理,对上传内容本身不做任何修改或编辑。 若此文所含内容侵犯了您的版权或隐私,请立即通知163文库(点击联系客服),我们立即给予删除!
4. 请根据预览情况,自愿下载本文。本站不保证下载资源的准确性、安全性和完整性, 同时也不承担用户因使用这些下载资源对自己和他人造成任何形式的伤害或损失。
5. 本站所有资源如无特殊说明,都需要本地电脑安装OFFICE2007及以上版本和PDF阅读器,压缩文件请下载最新的WinRAR软件解压。
- 配套讲稿:
如PPT文件的首页显示word图标,表示该PPT已包含配套word讲稿。双击word图标可打开word文档。
- 特殊限制:
部分文档作品中含有的国旗、国徽等图片,仅作为作品整体效果示例展示,禁止商用。设计者仅对作品中独创性部分享有著作权。
- 关 键 词:
- 生化 反应 曲线 基础医学 医药卫生 专业 课件
- 资源描述:
-
1、 1生化反应曲线_基础医学_医药卫生_专业资料 2 3 4cobascobas 8000 8000 模块化组合分析系统模块化组合分析系统 智能、高效、智能、高效、强劲强劲 5物质对光吸收的基本定律物质对光吸收的基本定律 Lambert-Beer定律 LambertBeer定律表达为:当一束平行的单色光通过含有均匀吸光物质的溶液时,溶液的吸光度(A)与溶液的浓度(C)和光透过液层厚度(L)的乘积成正比。物质对光吸收的吸光系数(e)为常数。其数学表达式:A=e*C*L I入射光透射光I0=-光吸收的基本定律光吸收的基本定律=light detector 6根据根据Lambert-BeerLambe
2、rt-Beer定律来计算待测物浓度定律来计算待测物浓度如若吸光系数()未知,我们就需要采用定标曲线 来计算待测物的浓度。浓度(amount of substance)吸光度(amount of color)40123456706050302010Calibrator/standard 标准品(cfas)待测样本Concx=Concx=Abs Absx x x x ConcsConcs AbssAbssConcxConcx=待测样本浓度ConcConcs s=标准品浓度 AbsxAbsx=样本吸光度AbssAbss=标准品吸光度此值为定值 7 Lambert-Beer 定律 适合于任何均匀非散射
3、的介质 生化比色分析特定蛋白透射比浊分析Lambert-Beer 定律分光光度法定量分析的依据分光光度法定量分析的依据 8Roche Hitachi PhotometerRoche Hitachi Photometer 9 当相应的比色杯每一次通过光路系统时,光路系统会测量并记录下相应的吸光度光路系统可以测量后分光后12个波长的相应吸光度。12 有效波长:340,376,415,450,480,505,546,570,600,660,700,800nm 多数检测项目都使用双波长检测方法。(可去除干扰物对检测结果的影响)Reaction sequenceReaction sequence 10
4、11 12仪器读数的原理不同仪器每个循环周期的时间间隔Modular P 1818秒秒Cobas c702 1616秒秒Cobas C501 8 8秒秒Modular D 1212秒秒C311 12 12秒秒反应转盘不停的周期旋转当相应的比色杯通过光路系统时,光路系统会测量并记录下相应的吸光度在不同的时间点加入相应的反应试剂 13Reaction sequenceReaction sequence 14Instrument cycleInstrument cycle 15Endpoint and rate(kinetic)assaysEndpoint and rate(kinetic)assa
5、ys自动生化分析常用的方法有自动生化分析常用的方法有:终点法(终点法(End Point AssaysEnd Point Assays):一般在整个反应完成后再来检测吸光度 速率法(速率法(Rate assaysRate assays):一般在反应的过程中监测吸光度的变化情况 16终点分析法终点分析法时间吸光度A 1tS+R1 基于基于 被测物质在反应过程中被测物质在反应过程中到达反应终点或平衡点到达反应终点或平衡点,根据该点吸光度的大小求出被测物浓度,称为终点法根据该点吸光度的大小求出被测物浓度,称为终点法。终点法的计算:终点法的计算:从从时间时间-吸光度曲线吸光度曲线来看,到达反来看,到达
6、反应终点时,吸光度将不再变化应终点时,吸光度将不再变化。在达。在达到终点时任取一点进行测定,此时底到终点时任取一点进行测定,此时底物和产物的量都不再变化。物和产物的量都不再变化。吸光度A 1S+R1吸光度 17 两点终点法(两点终点法(2-point end2-point end)一点终点法一点终点法 (1-point end1-point end)一点终点单试剂(一点终点单试剂(1-point endpoint assay one reagent1-point endpoint assay one reagent)一点终点双试剂(一点终点双试剂(1-point endpoint assay
7、two reagents1-point endpoint assay two reagents)三点终点法(三点终点法(3 3-point endpoint end)终点分析法(终点分析法(Endpoint assaysEndpoint assays)18两点终点法两点终点法 在被测物反应或指示反应尚未开始时,选择第一在被测物反应或指示反应尚未开始时,选择第一个吸光度,在反应到达终点或平衡时选择第二个吸光度,个吸光度,在反应到达终点或平衡时选择第二个吸光度,此两点吸光度之差用于计算结果。此两点吸光度之差用于计算结果。19去除了样本的本底采用两个测量点 针对两个或多个试剂的项目第一个读数点一般选
8、在添加最后一个试剂之前第二个读数点一般选在加入最后一个试剂之后且已经达到了反应终点两点终点法的特点两点终点法的特点C +D(显色产物)+B1(试剂1)+B2(试剂 2)A A(样本)Endpoint assaysEndpoint assays 20两点终点法的反应曲线两点终点法的反应曲线Cobas c702Cobas c702Endpoint assaysEndpoint assaysSample+R1Mp1 abs before addition of R3Mp2 abs at reaction end 21两点读数的时间点:第19点测量包含了样本和试剂1的本底 sample+reagent
9、 1 第 38点在加入所有试剂后,反应达到终点 sample+reagent 1+reagent 2两点终点法的应用参数两点终点法的应用参数 Cobas c702 Cobas c702测量的两个读数点方法类型总反应时间(min)2Point Endpoint assay application settings2Point Endpoint assay application settings 22RF-II C4 C3 ASL CRPL IGG IGA IGM两点终点法分析项目举例两点终点法分析项目举例Endpoint assaysEndpoint assays 23一点终点法一点终点法A单
展开阅读全文