植物呼吸速率的测定专业知识培训培训课件.ppt
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1、植物呼吸速率的测定植物呼吸速率的测定专业知识培训专业知识培训一、原理一、原理:1.在密闭、定温及固定体积的系统中,在密闭、定温及固定体积的系统中,当气体被吸收时,气体分子减少,压力降低。当气体被吸收时,气体分子减少,压力降低。相反,当产生气体时,压力上升。压力的变相反,当产生气体时,压力上升。压力的变化可以用微量检压计测出,并可据此计算气化可以用微量检压计测出,并可据此计算气体吸收或释放的数量。因此,微量检压计可体吸收或释放的数量。因此,微量检压计可用以研究呼吸作用、光合作用及与用以研究呼吸作用、光合作用及与O2、CO2及其它气体交换相关的反应如某些酶的活性及其它气体交换相关的反应如某些酶的活
2、性等。等。植物呼吸速率的测定专业知识培训2一、原理一、原理:2.由于在呼吸过程中吸收氧气和产生二由于在呼吸过程中吸收氧气和产生二氧化碳是同时进行的,所以从压力计上所观氧化碳是同时进行的,所以从压力计上所观察到的压力变化是氧的吸收量和二氧化碳释察到的压力变化是氧的吸收量和二氧化碳释放量的总结果。若在反应瓶中加入碱液(如放量的总结果。若在反应瓶中加入碱液(如氢氧化钾),呼吸时所产生的二氧化碳被碱氢氧化钾),呼吸时所产生的二氧化碳被碱吸收,则可由压力的变化计算出氧的吸收量。吸收,则可由压力的变化计算出氧的吸收量。植物呼吸速率的测定专业知识培训3二、材料、仪器设备二、材料、仪器设备及试剂及试剂(一)材
3、料:萌发的小(一)材料:萌发的小麦种子。麦种子。(二)仪器设备:(二)仪器设备:1.1.瓦瓦布格呼吸计(微量呼吸布格呼吸计(微量呼吸检压计);检压计);2.2.移液管;移液管;3.3.量筒;量筒;4.4.小镊子;小镊子;5.5.橡皮筋;橡皮筋;6.6.吸水纸吸水纸植物呼吸速率的测定专业知识培训4植物呼吸速率的测定专业知识培训5二、材料、仪器设备及试剂二、材料、仪器设备及试剂(三)试剂:(三)试剂:1.201.20KOHKOH;2.2.凡士林;凡士林;3.Brodie3.Brodie氏溶液:氏溶液:NaCl 23gNaCl 23g,牛胆酸,牛胆酸钠钠5g5g,溶于,溶于500ml500ml水中,
4、另加少许染料水中,另加少许染料(酸性品红)使溶液染色,并加数滴浓(酸性品红)使溶液染色,并加数滴浓麝香草酚乙醇溶液作为防腐剂麝香草酚乙醇溶液作为防腐剂。植物呼吸速率的测定专业知识培训6三、三、实验步骤实验步骤2.2.反应瓶及压力计处理:反应瓶及压力计处理:在中央小槽内加入在中央小槽内加入2020KOH 0.2mlKOH 0.2ml,用以,用以吸收吸收COCO2 2。为了增大吸收。为了增大吸收COCO2 2的能力,可将的能力,可将1cm1cm2cm2cm滤纸折叠后插入中央小槽内,并在滤纸折叠后插入中央小槽内,并在中央小槽口上涂少量凡士林,防止碱液逸出。中央小槽口上涂少量凡士林,防止碱液逸出。侧管
5、的玻璃棒涂以凡士林后塞紧。压力计侧管的玻璃棒涂以凡士林后塞紧。压力计口亦涂上凡士林和反应瓶连接,转动反应瓶,口亦涂上凡士林和反应瓶连接,转动反应瓶,使封口凡士林呈透明为止,然后用橡皮筋将使封口凡士林呈透明为止,然后用橡皮筋将反应瓶固定在压力计上。反应瓶固定在压力计上。植物呼吸速率的测定专业知识培训8三、三、实验步骤实验步骤3.3.压力计及反应瓶与水槽间温度的平衡:将压力计及反应瓶与水槽间温度的平衡:将压力计固定在水槽上,并打开压力计活塞。压力计固定在水槽上,并打开压力计活塞。设置恒温水槽温度,启动水槽搅拌装置并启设置恒温水槽温度,启动水槽搅拌装置并启动转盘振荡,使压力计平衡动转盘振荡,使压力计
6、平衡101015min15min。在。在此过程中要注意检查反应瓶是否漏气。此过程中要注意检查反应瓶是否漏气。植物呼吸速率的测定专业知识培训9三、三、实验步骤实验步骤4.4.测定与读数:当反应瓶内温度与水槽温度测定与读数:当反应瓶内温度与水槽温度平衡后,停止振荡,将压力计上的活塞关闭平衡后,停止振荡,将压力计上的活塞关闭并重新开始振荡,记录开始时间。每隔并重新开始振荡,记录开始时间。每隔15min15min记录压力计左侧毛细管记录压力计左侧毛细管BrodieBrodie液面高液面高度(度(h )。读数时暂停振荡,并将压力计)。读数时暂停振荡,并将压力计的右管液面调至的右管液面调至150mm150
7、mm处,记录左管液面高处,记录左管液面高度,共计四次(共度,共计四次(共1h1h)。)。植物呼吸速率的测定专业知识培训10三、三、实验步骤实验步骤(二)空白实验与测压计压力值校正(二)空白实验与测压计压力值校正 由于压力计左管口与大气相通,实验时由于压力计左管口与大气相通,实验时室内气压或水槽温度微小变化对读数均有影室内气压或水槽温度微小变化对读数均有影响,为此,必须进行校正。响,为此,必须进行校正。校正方法:反应瓶中除不加种子外,校正方法:反应瓶中除不加种子外,其他处理、测定及读数与测压计完全相同其他处理、测定及读数与测压计完全相同(即空白实验,作温压计用);由测压计(即空白实验,作温压计用
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