生理学实验医学知识培训课件.ppt
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1、生理学实验医学知识生理学实验医学知识目录目录1 12 23 34 4血液凝固血液凝固 蛙心期前收缩和代偿间歇蛙心期前收缩和代偿间歇 蟾蜍坐骨神经蟾蜍坐骨神经-腓肠骨标本的制备腓肠骨标本的制备 刺激强度、刺激频率与肌肉收缩收缩的关系刺激强度、刺激频率与肌肉收缩收缩的关系 小肠运动与吸收观察小肠运动与吸收观察 脊髓反射脊髓反射 5 56 62生理学实验医学知识实验一实验一 血液凝固血液凝固 目的:目的:了解血液凝固的基本过程及影响血液凝固了解血液凝固的基本过程及影响血液凝固的一些因素。的一些因素。原理:原理:血液流出血管后,迅速发生凝固。血液凝血液流出血管后,迅速发生凝固。血液凝固是由多种凝血因子
2、参与的一系列酶促反应的级固是由多种凝血因子参与的一系列酶促反应的级联反应,大致可分为三个主要步骤,即凝血酶原联反应,大致可分为三个主要步骤,即凝血酶原激活物的形成、凝血酶原激活物催化凝血酶原转激活物的形成、凝血酶原激活物催化凝血酶原转变为凝血酶、凝血酶催化纤维蛋白原转变为纤维变为凝血酶、凝血酶催化纤维蛋白原转变为纤维蛋白,最后由纤维蛋白聚合成血凝块。这三个步蛋白,最后由纤维蛋白聚合成血凝块。这三个步骤都需要骤都需要CaCa2+2+的参与。的参与。材料和设备:材料和设备:试管、试管架、吸管、秒表、试管、试管架、吸管、秒表、3.8%3.8%柠檬酸钠、新鲜血、柠檬酸钠、新鲜血、1%1%氯化钙、氯化钙
3、、5%5%草酸钾、烧杯草酸钾、烧杯、酒精灯、肝素、液体石腊、冰瓶、温度计等。、酒精灯、肝素、液体石腊、冰瓶、温度计等。3生理学实验医学知识 方法和步骤:方法和步骤:1 1、影响血凝的物理因素、影响血凝的物理因素(1 1)取试管)取试管3 3支,一支做对照,另两支分别加少量棉花和涂支,一支做对照,另两支分别加少量棉花和涂少许液体石腊。少许液体石腊。(2 2)加)加1ml1ml新鲜血液到三支试管内,每新鲜血液到三支试管内,每30s30s轻轻地倾斜试管轻轻地倾斜试管一次,记录三管的凝血时间。一次,记录三管的凝血时间。2 2、温度对血凝的影响、温度对血凝的影响 取试管取试管3 3支,各加入支,各加入1
4、ml1ml新鲜血液新鲜血液,然后分别置于,然后分别置于3737水浴、常温和冰水中,比较水浴、常温和冰水中,比较3 3管的凝管的凝血时间。血时间。3 3、CaCa2+2+对血凝的影响对血凝的影响(1 1)取试管)取试管3 3支,一支做对照,另支,一支做对照,另2 2支分别加入支分别加入3 3滴滴3.8%3.8%柠檬柠檬酸钠和酸钠和5%5%草酸钾,然后再向各管加入草酸钾,然后再向各管加入1ml1ml新鲜血液,混合新鲜血液,混合后观察血凝情况。后观察血凝情况。(2 2)往加入柠檬酸钠和草酸钾的两管内分别再加)往加入柠檬酸钠和草酸钾的两管内分别再加1-21-2滴滴1%1%CaClCaCl2 2后,观察
5、结果。后,观察结果。4 4、肝素的作用、肝素的作用 取一支试管放入取一支试管放入8 8单位肝素,再加入单位肝素,再加入1ml1ml新鲜血液,摇匀后,观察结果。新鲜血液,摇匀后,观察结果。4生理学实验医学知识 思考题:思考题:1 1、血液凝固包括哪些过程、血液凝固包括哪些过程?为什么正常动物血管内血液?为什么正常动物血管内血液不易凝固?不易凝固?2 2、实验中各种因素能够加、实验中各种因素能够加速或延缓血液凝固的原因是什速或延缓血液凝固的原因是什么?么?5生理学实验医学知识实验二实验二 蛙心期前收缩和代偿间歇蛙心期前收缩和代偿间歇 目的:目的:观察心肌收缩活动不同时期给予额外刺激时所做出观察心肌
6、收缩活动不同时期给予额外刺激时所做出的不同反应,了解心肌兴奋性的变化及代偿间歇的原理。的不同反应,了解心肌兴奋性的变化及代偿间歇的原理。原理:原理:心肌的一个最大特点是具有较长的不应期,有效不心肌的一个最大特点是具有较长的不应期,有效不应期占据了整个收缩期和部分舒张期,因此收缩期给予任应期占据了整个收缩期和部分舒张期,因此收缩期给予任何刺激,心室不发生反应。在心肌动作电位的相对不应期何刺激,心室不发生反应。在心肌动作电位的相对不应期对应的心室舒张期给予单个阈上刺激,会发生一次节律以对应的心室舒张期给予单个阈上刺激,会发生一次节律以外的收缩,称为期前收缩,静脉窦传来的节律性兴奋正好外的收缩,称为
7、期前收缩,静脉窦传来的节律性兴奋正好落在期前收缩的收缩期,因此心室不产生收缩,需要等到落在期前收缩的收缩期,因此心室不产生收缩,需要等到下一次的静脉窦兴奋传来。因此在期前收缩后会发生较长下一次的静脉窦兴奋传来。因此在期前收缩后会发生较长时间的舒张期,称为额外收缩的代偿间歇。时间的舒张期,称为额外收缩的代偿间歇。材料和设备:材料和设备:蛙或蟾蜍;蛙或蟾蜍;BL-420SBL-420S生物机能实验系统、张生物机能实验系统、张力换能器、刺激电极、支架、双凹夹、蛙板、蛙类手术器力换能器、刺激电极、支架、双凹夹、蛙板、蛙类手术器械、蛙心夹、玻璃小烧瓶或培养皿、滴管、任氏液、丝线械、蛙心夹、玻璃小烧瓶或培
8、养皿、滴管、任氏液、丝线。6生理学实验医学知识 方法和步骤:方法和步骤:1.1.用探针损毁蟾蜍的脑、脊髓,暴露心脏。在心舒用探针损毁蟾蜍的脑、脊髓,暴露心脏。在心舒期用蛙心夹夹住心尖,将系于蛙心夹的线与张力期用蛙心夹夹住心尖,将系于蛙心夹的线与张力换能器连接,调节张力换能器高度,使连线保持换能器连接,调节张力换能器高度,使连线保持垂直,松紧适当。按图连接线路,张力换能器输垂直,松紧适当。按图连接线路,张力换能器输入端接生物机能实验系统相应通道。打开计算机入端接生物机能实验系统相应通道。打开计算机,启动,启动BL-420SBL-420S生物机能实验系统。进入生物机能实验系统。进入“期前收期前收缩
9、与代偿间歇缩与代偿间歇”程序。调节参数,其中程序。调节参数,其中G G:100100倍倍,T:DCT:DC,F:10HZF:10HZ,扫描速度:,扫描速度:1.0s/div1.0s/div。刺激电。刺激电极接触心室:刺激参数选单刺激、波宽极接触心室:刺激参数选单刺激、波宽5ms5ms、幅度、幅度0.5V(0.02V-1V)0.5V(0.02V-1V)、脉冲数、脉冲数1 1、延时、延时1ms1ms,然后进行,然后进行实验项目。实验项目。7生理学实验医学知识8生理学实验医学知识9生理学实验医学知识10生理学实验医学知识11生理学实验医学知识12生理学实验医学知识2.2.实验观察实验观察(1 1)记
10、录正常的心跳曲线。确定曲线哪一部分代表心室收缩)记录正常的心跳曲线。确定曲线哪一部分代表心室收缩,哪一部分代表心室舒张?,哪一部分代表心室舒张?(2 2)先描记几个正常心跳曲线作为对照,然后选择适当强度)先描记几个正常心跳曲线作为对照,然后选择适当强度的阈上刺激,分别在心室收缩期和舒张的早、中、晚期刺的阈上刺激,分别在心室收缩期和舒张的早、中、晚期刺激心室,观察心跳曲线有何变化?激心室,观察心跳曲线有何变化?(3 3)在心室舒张的中、晚期改变刺激强度刺激心室,观察心)在心室舒张的中、晚期改变刺激强度刺激心室,观察心室收缩的幅度是否发生变化。室收缩的幅度是否发生变化。(4 4)如果连续刺激心室肌
11、,观察心肌是否会出现强直收缩。)如果连续刺激心室肌,观察心肌是否会出现强直收缩。13生理学实验医学知识 注意事项注意事项 1.1.实验过程中,应经常用任氏液湿润心脏。实验过程中,应经常用任氏液湿润心脏。2.2.安放在心室上的刺激电极应避免短路。安放在心室上的刺激电极应避免短路。3.3.心跳曲线的上升支应代表心室收缩,下降支代表心室心跳曲线的上升支应代表心室收缩,下降支代表心室舒张。如相反则应将换能器倒向。舒张。如相反则应将换能器倒向。4.4.选择适当刺激强度时,可先用刺激电极刺激蟾蜍腹壁选择适当刺激强度时,可先用刺激电极刺激蟾蜍腹壁肌肉,以检查强度是否有效。肌肉,以检查强度是否有效。思考题思考
12、题 1.1.讨论期前收缩和代偿间歇产生的原因。讨论期前收缩和代偿间歇产生的原因。2.2.心肌的有效不应期长有何生理意义?心肌的有效不应期长有何生理意义?3.3.当心率过速或过缓时,期前收缩后是否会出现代偿间当心率过速或过缓时,期前收缩后是否会出现代偿间歇?为什么?歇?为什么?4.4.存在不应期的实验依据是什么?存在不应期的实验依据是什么?14生理学实验医学知识实验三、蟾蜍坐骨神经实验三、蟾蜍坐骨神经-腓肠骨标本的制备腓肠骨标本的制备 目的:目的:学习坐骨神经学习坐骨神经-腓肠肌标本制备方法,掌握腓肠肌标本制备方法,掌握基本操作技术。基本操作技术。原理:原理:蛙类的离体组织所需的理化条件比较简单
13、蛙类的离体组织所需的理化条件比较简单,易于控制和掌握。因此,在实验中常用蟾蜍或,易于控制和掌握。因此,在实验中常用蟾蜍或蛙坐骨神经蛙坐骨神经-腓肠肌标本来观察兴奋性、兴奋过程腓肠肌标本来观察兴奋性、兴奋过程、刺激的一般规律以及骨骼肌的收缩特点等。、刺激的一般规律以及骨骼肌的收缩特点等。材料和设备:材料和设备:蟾蜍或青蛙、任氏液,蛙板,玻璃蟾蜍或青蛙、任氏液,蛙板,玻璃板,粗剪刀,组织剪,眼科剪,组织镊,眼科镊板,粗剪刀,组织剪,眼科剪,组织镊,眼科镊,探针,玻璃针,大头针,滴管,培养皿,锌铜,探针,玻璃针,大头针,滴管,培养皿,锌铜弓,丝线,瓷盘。弓,丝线,瓷盘。15生理学实验医学知识 方法和
14、步骤:方法和步骤:破坏脑和脊髓:取蟾蜍一只,用自来水冲洗干净。右手破坏脑和脊髓:取蟾蜍一只,用自来水冲洗干净。右手持探针从枕骨大孔垂直刺入,然后向前剌入颅腔,左右搅持探针从枕骨大孔垂直刺入,然后向前剌入颅腔,左右搅动捣毁脑组织;将探针抽出再由枕骨大孔向后刺入脊椎管动捣毁脑组织;将探针抽出再由枕骨大孔向后刺入脊椎管捣毁脊髓。此时如蟾蜍的四肢松软,呼吸消失,表示脑脊捣毁脊髓。此时如蟾蜍的四肢松软,呼吸消失,表示脑脊髓已完全破坏,否则应按上法再行捣毁(见图髓已完全破坏,否则应按上法再行捣毁(见图A A)。)。剪除躯干上部及内脏:在骶髂关节水平以上剪除躯干上部及内脏:在骶髂关节水平以上0 05 51
15、1厘厘米处剪断脊柱,使蟾蜍头与内脏自然下垂,右手持粗剪刀米处剪断脊柱,使蟾蜍头与内脏自然下垂,右手持粗剪刀,沿两侧剪除其一切内脏及头胸部,沿两侧剪除其一切内脏及头胸部(注意勿损伤坐骨神经注意勿损伤坐骨神经),仅留下后肢、骶骨、脊柱及由它发出的坐骨神经(见图,仅留下后肢、骶骨、脊柱及由它发出的坐骨神经(见图B B)。)。16生理学实验医学知识17生理学实验医学知识18生理学实验医学知识剥皮:左手握脊柱断段(注意不要握住或接触剥皮:左手握脊柱断段(注意不要握住或接触神经),右手捏住其上的皮肤边缘,向下剥掉全神经),右手捏住其上的皮肤边缘,向下剥掉全部后肢的皮肤将标本放在盛有任氏液的培养皿中部后肢的
16、皮肤将标本放在盛有任氏液的培养皿中。将手及用过的剪刀、镊子等全部手术器械洗净将手及用过的剪刀、镊子等全部手术器械洗净,再进行下述步骤。,再进行下述步骤。分离两腿:用镊子从背位夹住脊柱将标本提起分离两腿:用镊子从背位夹住脊柱将标本提起,剪去向上突出的骶骨,剪去向上突出的骶骨(注意勿损伤坐骨神经注意勿损伤坐骨神经),然后沿正中线用剪刀将脊柱分为两半并从耻骨联然后沿正中线用剪刀将脊柱分为两半并从耻骨联合中央剪开两侧大腿,这样两腿即完全分离。将合中央剪开两侧大腿,这样两腿即完全分离。将两条腿浸于盛有任氏液的培养皿中。两条腿浸于盛有任氏液的培养皿中。19生理学实验医学知识20生理学实验医学知识21生理学
17、实验医学知识22生理学实验医学知识制作坐骨神经腓肠肌标本:取一条腿放于玻璃制作坐骨神经腓肠肌标本:取一条腿放于玻璃板上。板上。()游离坐骨神经:将标本背侧向上放置,把梨()游离坐骨神经:将标本背侧向上放置,把梨状肌及其附近的结缔组织剪断,再循坐骨神经沟状肌及其附近的结缔组织剪断,再循坐骨神经沟(股二头肌及半膜肌之间的裂缝处股二头肌及半膜肌之间的裂缝处),找出坐骨神经,找出坐骨神经之大腿部分(见图之大腿部分(见图C C),用玻璃针小心剥离,在神),用玻璃针小心剥离,在神经完全暴露后,然后用粗剪刀剪下与神经相连的经完全暴露后,然后用粗剪刀剪下与神经相连的从脊柱,用镊子提起小块脊柱,用眼科剪剪断坐从
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