护理班常用免疫学检查教学课件.ppt
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- 护理 常用 免疫学 检查 教学 课件
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1、护理班常用免疫学检查(优选)护理班常用免疫学检查教学目的与要求:了解掌握临床免疫学检查的主要内容、检测原理以及临床实际应用的重要意义重点与难点1.各种抗体的特点2.补体定义及CH50测定3.肿瘤标志物及其特异性,AFP与CEA的特点,各种类型的特异性4.自身抗体与自身免疫的关系及各类型自身抗体检测的方法及临床意义5.乙肝五项测定以及临床意义临床常用免疫学检查包括一、血清免疫球蛋白检测二、血清补体检测三、肿瘤标志物检测四、自身抗体检测五、感染免疫检测免疫球蛋白(Ig)定义:是由浆细胞合成分泌的一组具有抗体活性的球蛋白,存在于机体的血液、体液、外分泌液和部分细胞的膜上。检测:感染性疾病、免疫增值性
2、疾病和免疫缺陷性疾病的诊断、鉴别诊断、疾病进展和预后。血清免疫球蛋白分类根据重链稳定区的分子根据重链稳定区的分子结构和抗原特异性的不结构和抗原特异性的不同,分为五类:同,分为五类:IgG、IgA、IgM、IgD、IgE血清免疫球蛋白分类血清免疫球蛋白分类检测方法 酶联免疫法(ELISA)放射免疫(RIA)荧光标记免疫(IFA)化学发光法(CLIA)免疫透射比浊、免疫散射比浊 IgG人体内含量最多,占Ig的70-80 再次免疫应答的主要抗体 对细菌、病毒和寄生虫都有抗体活性 唯一可通过胎盘的Ig参考值 7.016.6 g/L临床意义-IgG 增高 多克隆性增高 见于各种慢性感染、慢性肝病、淋巴瘤
3、、肺结核、链球菌感染以及自身免疫性疾病 单克隆性增高 仅见一种Ig增高,主要见于免疫增殖性疾病,如IgG分泌型多发性骨髓瘤临床意义-IgG 降低 见于各种先天性和获得性免疫缺陷病、联合免疫缺陷病、也见于重链病、轻链病、肾病综合症、病毒感染和免疫抑制剂患者免疫球蛋白A检测 两型:血清型IgA,分泌型IgA(SIgA)。血清型IgA以单体形式存在分泌型IgA(S IgA)由J链连接的二聚体和分泌片组成。参考值 血清IgA 0.73.5 g/L,IgA占10-15。SIgA 唾液0.3 g/L,泪液3080 g/L,初乳5.06 g/L,粪便1.3 g/L临床意义 IgA增高 见于IgA型MM,SL
4、E,类风湿性关节炎,肝硬化,湿疹和肾脏疾病等 IgA降低 见于反复呼吸道感染,非IgA型MM,重链病,轻链病,原发和继发性免疫缺陷病和自身免疫性疾病抗Rib抗体阳性主要见于SLE,为SLE的又一标志抗体,HCV-RNA RT-PCR 阴性与ANA比较,抗ss-DNA抗体的检测不能提供更进一步的信息。梅毒(syphilis)是由梅毒螺旋体(treponema pallidum,TP)引起的一种危害性严重的性传播性疾病,早期主要侵犯皮肤与黏膜,晚期可侵犯全身各组织器官,特别易侵犯心脏与神经系统。它们或是由于消耗或丢失过多或是由于合成能力降低造成。肠道憩室炎,直肠息肉,结肠炎,肝硬化,肝炎和肺部疾病
5、也有不同程度的升高。核心含有单链正股RNA,包膜由结构蛋白和非结构蛋白区域组成。然而CA-125血清浓度轻微上升还可见于1健康妇女,36的良性卵巢疾患或非肿瘤患者,包括孕期起始3个月、行经期、子宫内膜异位、子宫纤维变性、子宫肌瘤、良性卵巢瘤、急性输卵管炎、急性胰腺炎、肝病、胸腹膜和心包感染等。抗RNP抗体阳性见于多种风湿性疾病,如MCTD、SLE、系统性硬化病、皮肌炎等,以MCTD的阳性率最高,约为95-100%,且抗体的滴度亦高,故此抗体对MCTD有较高的诊断价值。一、血清免疫球蛋白检测半分子病:系由一条重链和一条轻链组成的单克隆Ig片段。性滥交者,性病患者的配偶或性伴侣抗HAV-IgG是一
6、种保护性抗体,出现于恢复期并长期存在。+子宫内膜癌、透明细胞癌、输卵管癌及未分化卵巢癌患者中CA-125含量也可明显升高 乙肝恢复期,弱传染性在胎儿发育早期,由肝脏和卵黄囊合成,出生后一年内降至正常水平。患者常伴有贫血、肾功损害和免疫功能障碍。若联合检测抗ds-DNA和抗Sm抗体可提高SLE诊断的准确性。指标,常见于急性HCV感染。免疫球蛋白M检测 IgM是五聚体,分子量最大的Ig 不能通过血管壁,不能通过胎盘 个体发育过程中最早合成的抗体,脐带血IgM增高提示胎儿宫内感染 体液免疫应答中IgM是最早产生的抗体参考值 参考值 0.5 2.6 g/L临床意义 IgM增高 见于初期病毒性肝炎、肝硬
7、化、类风湿关节炎、SLE等,原发性巨球蛋白血症时,IgM呈单克隆性明显增高 IgM降低 见于IgG型重链病,IgA型MM,先天性免疫缺陷病,使用免疫抑制剂,淋巴系统肿瘤和肾病综合症。免疫球蛋白E的检测 IgE是血清中最少的一种Ig,占血清总Ig的0.002%。是一种亲细胞抗体,介导型变态反应,与变态反应、寄生虫感染和皮肤过敏等有关。参考值 ELISA法为0.1 0.9m g/L临床意义 IgE增高 见于IgE型MM、重链病、肝脏病、结节病、类风湿性关节炎,以及各种过敏性疾病和寄生虫感染等。IgE降低 见于先天性和获得性丙种球蛋白缺乏症、恶性肿瘤、长期应用免疫抑制剂和共济失调性毛细血管扩展症等。
8、血清M蛋白 M蛋白(M protein)或称单克隆免疫球蛋白,是一种单克隆B细胞增殖产生的具有相同结构和电泳迁移率的免疫球蛋白分子及其分子片段。【参考值】蛋白电泳法、免疫比浊法或免疫电泳法:正常人为阴性。图图1 14 4号为多发性骨髓瘤病人的血清蛋白电泳图谱号为多发性骨髓瘤病人的血清蛋白电泳图谱13 13 1 12 23 34 45 56 67 78 89 91010 11111212【临床意义】检测到M蛋白,提示单克隆免疫球蛋白增殖病。见于:多发性骨髓瘤:以IgG型最常见,其次为IgA型,IgD和IgE罕见,也有IgM型的报道。类风湿性关节炎患者RF的阳性率为52%-92%,平均为70%。通
9、过检测抗ENA抗体的类型及其组合,可综合诊断自身免疫病的类型。是一种由肝脏合成的2-球蛋白。(3)抗Z-DNA抗体肿瘤细胞内糖基化过程发生变异,从而导致细胞分泌性或细胞膜上的糖蛋白或糖脂中的糖基序列发生改变,形成了一种和正常糖蛋白不同的特殊抗原,可利用单克隆抗体技术检测这些抗原,结果诞生了糖蛋白类抗原。选择特异标志物或最佳组合有利于提高肿瘤诊断的阳性率。抗-HCV IgG :阳性表明体内有HCV感染。TPA 蛋白质 膀胱癌、前列腺癌、乳腺癌、卵巢癌临床常用免疫学检查包括荧光标记免疫(IFA)广义ANA:整个细胞成分,包括细胞核和细胞浆。检测胰腺癌的治疗效果及术后复发情况IgM降低 见于IgG型
10、重链病,IgA型MM,先天性免疫缺陷病,使用免疫抑制剂,淋巴系统肿瘤和肾病综合症。梅毒螺旋体抗体的检测ENA多肽抗体谱是针对核内ENA的一类自身抗体,约有10余种,主要为抗核糖核蛋白(RNP)抗体和抗Sm抗体,其它还有抗SS-A抗体、抗SS-B抗体、抗Scl-70抗体、抗JO-1抗体等。丙型肝炎病毒(hepatitis C virus,HCV)由核心和包膜组成。多发性骨髓瘤(multiple myeloma)是浆细胞异常增生的恶性肿瘤,也称浆细胞瘤(plasnocytoma),因其引起骨破坏而得名。血清 25g/L抗-HBc IgG:高滴度表明机体正感染HBV;0g/L,f-PSA/t-PSA
11、 的比值对诊断更有价值,f-PSA/t-PSA0.多发性骨髓瘤(多发性骨髓瘤(multiple myeloma)是浆细胞异常增生的恶性肿瘤,也称浆细是浆细胞异常增生的恶性肿瘤,也称浆细胞瘤(胞瘤(plasnocytoma),因其引起骨破),因其引起骨破坏而得名。患者常伴有贫血、肾功损害和坏而得名。患者常伴有贫血、肾功损害和免疫功能障碍。男性多发,男女比约为免疫功能障碍。男性多发,男女比约为2:1,平均发病年龄是平均发病年龄是46.5岁。岁。多发性骨多发性骨髓瘤患者髓瘤患者骨破坏所骨破坏所致头颅肿致头颅肿物及眼球物及眼球突出突出巨球蛋白血症(macroglobulinemia):该病血液中存在大
12、量单克隆IgM。重链病:出现Ig重链轻链病:出现单克隆游离轻链。半分子病:系由一条重链和一条轻链组成的单克隆Ig片段。恶性淋巴瘤:血液中可出现M蛋白。良性M蛋白血症:临床常用免疫学检查包括一、血清免疫球蛋白检测二、血清补体检测三、肿瘤标志物检测四、自身抗体检测五、感染免疫检测补体(Complement)补体是一组具有酶源活性的糖蛋白,由传统途径的九种成分C1(C1q/C1r/C1s)-C9,旁路途径的三种成分及其衍生物B/D/P/H/I等因子组成 参与机体的抗感染和免疫调节,介导病理反应补体的三条激活途径总补体溶血活性检测(CH50)原理:抗体致敏的绵羊红细胞(抗原抗体复合物)可激活血清中的补
13、体C1,从而引起补体经典途径的连锁反应,导致绵羊红细胞膜上形成多分子的聚合物,绵羊红细胞溶解。在分光光度计上542nm读取吸光度。溶解程度与样品中补体量正相关。主要反应补体经典途径的综合水平。+C一、溶细胞作用:靶细胞抗 体抗原抗体 复合物C1-C9靶细胞溶 解Ca+C1rC1sC1q C4C4ab细胞膜细胞膜识识 别别 阶阶 段段C3转化酶的形成C4bMg+C4aCa+C1rC1sC1q C2C2abC2bC4b2b 为为C3转化酶转化酶活活化化阶阶段段子宫内膜癌、透明细胞癌、输卵管癌及未分化卵巢癌患者中CA-125含量也可明显升高作为新一代的肿瘤标记物,远较酶和激素类标记物敏感、特异。可分
14、为HIV-1和HIV-2型HCV-RNA RT-PCR 阴性R=Rubella Virus,风疹病毒的二聚体和分泌片组成。【I临床意义】婴幼儿腹泻约有50是由轮状病毒所致,常呈IgM阳性,提示现症感染;是抗原决定簇、糖和多肽组成的糖蛋白抗原阴性(胶乳凝集试验或ELISA法)3、IgG阳性IgM阳性e抗原为一种可溶性抗原。通过检测抗ENA抗体的类型及其组合,可综合诊断自身免疫病的类型。临床常用免疫学检查包括 急性HBV感染康复期或有既往感染史,有乙肝是肝癌的病因之一。临床常用免疫学检查包括201,048,57694年:502CA19-9的器官特异性不强在肿瘤发生和发展过程中,由肿瘤细胞所产生或机
15、体在肿瘤细胞刺激下产生的,与肿瘤存在相关的物质,存在于血液、细胞、组织液、体液中。C5转化酶的形成C4bMg+C4aCa+C1rC1sC1q C2aC2bC3 C3abC4b2b3b 是是C5 转化酶转化酶;它导它导致膜攻击复合体致膜攻击复合体(MAC)的形成的形成活活化化阶阶段段C3b C2aC4bC5bC5a C5b C6C7膜攻击阶段膜攻击阶段MAC形成并插入到细胞内C5b C6C7C8 C9C9C9C9C9C9C9C9C9CH50 在50%溶血附近,“S”形曲线最陡,接近一条直线。在此范围内补体活性稍有变动,溶血程度就有明显变化,即是以50%溶血作为反应的终点比以100%溶血作为终点更
16、为敏感,因而该试验被称为补体50%溶血试验(complement hemolysis 50%),即CH50试验。CH50测定的临床意义 增高:见于急性炎症,组织损伤和某些恶性肿瘤。减低:免疫复合物性疾病(如肾小球肾炎)、自身免疫性疾病活动期、感染性心内膜炎、病毒性肝炎、慢性肝病、肝硬化、重症营养不良和遗传性补体成分缺乏症等补体C3检测 是一种由肝脏合成的2-球蛋白。C3在补体系统各成分中含量最多,是经典途径和旁路途径的关键物质。它也是一种急性时相反应蛋白。【参考值】成人血清C3:O815gL。【临床意义】(1)增高:常见于一些急性时相反应,如急性炎症、传染病早期、肿瘤、排异反应、急性组织损伤。
17、(2)减低:见于系统性红斑狼疮和类风湿性关节炎活动期、大多数肾小球肾炎(如链球菌感染后肾小球炎、狼疮性肾炎、基底膜增殖性肾小球肾炎)、慢性活动性肝炎、慢性肝病、肝硬化、肝坏死、先天性补体缺乏(如遗传性C3缺乏症)等。它们或是由于消耗或丢失过多或是由于合成能力降低造成。临床常用免疫学检查包括一、血清免疫球蛋白检测二、血清补体检测三、肿瘤标志物检测四、自身抗体检测五、感染免疫检测 肿瘤标志物 肿瘤标志物(tumor marker、TM):在肿瘤发生和发展过程中,由肿瘤细胞所产生或机体在肿瘤细胞刺激下产生的,与肿瘤存在相关的物质,存在于血液、细胞、组织液、体液中。IgE增高 见于IgE型MM、重链病
18、、肝脏病、结节病、类风湿性关节炎,以及各种过敏性疾病和寄生虫感染等。标志物 检测方法 参考值血液为其主要传播途径。与ANA比较,抗ss-DNA抗体的检测不能提供更进一步的信息。是一种由肝脏合成的2-球蛋白。CH50测定的临床意义乙肝五项测定以及临床意义与ANA比较,抗ss-DNA抗体的检测不能提供更进一步的信息。HCV-RNA RT-PCR 阴性也可能是其它干扰因素造成的IgM假阳性。抗-HCV IgG :阳性表明体内有HCV感染。抗ss-DNA抗体的临床意义0g/L、f-PSA0.抗原阴性(胶乳凝集试验或ELISA法)乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)为嗜肝DNA病毒
19、,在电镜下可见大球形颗粒、小球形颗粒和管型颗粒。主要用于乳腺癌病人的治疗监测和预后判断。与肿瘤组织的定位有关;病毒性肝炎与肝硬化患者血清中AFP可增高,但常300g/L。e抗体和e抗原一般不同时存在,e抗原消失,e抗体产生。19851988年 传入期 86年4例血友病20082008年城乡居民前十位疾病死亡专率及死亡原因构成年城乡居民前十位疾病死亡专率及死亡原因构成顺位城市农村死亡原因(ICD-10)死亡专率(1/10万)构成(%)死亡原因(ICD-10)死亡专率(1/10万)构成(%)1恶性肿瘤166.97166.9727.1227.12恶性肿瘤156.73156.7325.3925.392
20、心脏病121.0019.65脑血管病134.1621.733脑血管病120.7919.62呼吸系病104.2016.884呼吸系病73.0211.86心脏病87.1014.115损伤及中毒31.265.08损伤及中毒53.028.596内分泌营养和代谢疾病21.093.43消化系病16.332.657消化系病17.602.86内分泌营养和代谢疾病11.051.798泌尿生殖系病6.971.13泌尿生殖系病5.700.929神经系病6.341.03神经系病4.350.7010精神障碍3.690.60精神障碍4.270.6920082008年我国卫生事业发展统计公报年我国卫生事业发展统计公报 卫生
21、部统计信息中心 10-100 g榛子大小针头大小免疫学方法生物物理学方法早期亚临床阶段晚期1 mg1 g1kg1 g高灵敏度的肿瘤标志物的测定对肿瘤的早期诊断和治疗方案设计是十分重要的手段 世界卫生组织(WHO)指出:若能早期诊断并若能早期诊断并及时治疗,及时治疗,90%90%95%95%的的肿瘤是可以治愈的肿瘤是可以治愈的。临床可检测的肿瘤临床可检测的肿瘤肿瘤标记物肿瘤标记物(无形的肿瘤无形的肿瘤)一般肿瘤细胞在癌前病变时,会产生表达肿瘤异常蛋白质,多数肿瘤从癌前病变发展到0.5 cm 以上的占位性病变需要 5 y10 y的时间。如果能够在这段时间内运用肿瘤标志物检测技术,早期检测到患者血液
22、中肿瘤所表达的异常蛋白质,就可以早期发现、早期诊断,并获得早期治疗的良好效果。Tumor mass1g10 1mg1061g109 10-100g1010-11 1kg1012肿瘤标记物肿瘤标记物(无形的肿瘤无形的肿瘤)临床可检测的肿瘤临床可检测的肿瘤肿瘤增长肿瘤增长Tumor cellsLead time世界卫生组织(WHO)指出:若能早期诊断并若能早期诊断并及时治疗,及时治疗,90%95%的肿瘤是可以治愈的的肿瘤是可以治愈的。肿瘤标志物免疫分析现实的肿瘤标志物 灵敏度有限;特异性有限;存在正常异常交错;存在不稳定性 与临床表现存在差异理想的肿瘤标志物 肿瘤患者血液中含量明显增高;与肿瘤组织
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