乙型肝炎病毒标志物的检测培训课件.ppt

1、乙型肝炎病毒标志物的检测2乙型肝炎病毒标志物的检测3乙型肝炎病毒标志物的检测4乙型肝炎病毒标志物的检测5乙型肝炎病毒标志物的检测6乙型肝炎病毒标志物的检测1、把抗体固定、把抗体固定在固相支持物在固相支持物上（上（96孔板）；孔板）；2、加入蛋白质、加入蛋白质样品保温，再样品保温，再洗去未结合的洗去未结合的杂蛋白；杂蛋白；3、加入第二抗、加入第二抗体，第二抗体体，第二抗体结合一个供检结合一个供检测用的酶（辣测用的酶（辣根过氧化物酶）根过氧化物酶）4、洗去未结合、洗去未结合第二抗原，酶第二抗原，酶活测定。活测定。双抗体夹心法双抗体夹心法测抗原测抗原7乙型肝炎病毒标志物的检测8乙型肝炎病毒标志物的检

2、测9乙型肝炎病毒标志物的检测步骤一步骤一将抗原将抗原HBsAg吸附于载体表面（厂家吸附于载体表面（厂家已经完成）已经完成）11乙型肝炎病毒标志物的检测步骤二步骤二原理：将待测血清加入，原理：将待测血清加入，温育，血清中如有温育，血清中如有HBsAb，则抗原抗体结合则抗原抗体结合操作：操作：阳性血清，阴性血清，待阳性血清，阴性血清，待检血清各加检血清各加1孔，每孔孔，每孔50ul(1滴滴)12乙型肝炎病毒标志物的检测步骤三步骤三 原理：加入酶复合物，原理：加入酶复合物，(HBsAg-HRP),酶复合物酶复合物与表面抗体结合与表面抗体结合操作：操作：加酶复合物加酶复合物1滴滴,混匀混匀,置置37温

3、育温育30分钟分钟 倒出液体倒出液体,洗涤洗涤5次，拍次，拍干。干。13乙型肝炎病毒标志物的检测步骤四步骤四 加入酶的底物，酶与加入酶的底物，酶与底物反应，显色底物反应，显色操作：操作：每孔加显色液每孔加显色液A液液,B液，各液，各1滴，滴，37温温育育15分钟，使充分显分钟，使充分显色。色。14乙型肝炎病毒标志物的检测 终止反应：每孔加终止液终止反应：每孔加终止液50l（一滴）（一滴）肉眼观察或上机比色肉眼观察或上机比色步骤五步骤五15乙型肝炎病毒标志物的检测16乙型肝炎病毒标志物的检测HBsAg（外衣壳蛋白）（外衣壳蛋白）HBcAg（内衣壳蛋白）（内衣壳蛋白）HBV DNADNAP17乙型

4、肝炎病毒标志物的检测过剩的衣壳过剩的衣壳（HBsAg）18乙型肝炎病毒标志物的检测19乙型肝炎病毒标志物的检测20乙型肝炎病毒标志物的检测 内衣壳，仅存在于感染的肝细胞核内，内衣壳，仅存在于感染的肝细胞核内，不不易在血液中检出易在血液中检出 抗原性强，刺激机体先产生抗原性强，刺激机体先产生IgM，后产生，后产生IgG，后者可在血清中存在多年，后者可在血清中存在多年 抗抗HBc无中和作用，高效价抗无中和作用，高效价抗HBc IgM提示提示病毒在体内复制增殖病毒在体内复制增殖。21乙型肝炎病毒标志物的检测22乙型肝炎病毒标志物的检测23乙型肝炎病毒标志物的检测结果分析结果分析HBsAgHBeAg抗抗-HBs抗抗-HBe抗抗-HBc结果分析结果分析+-肝功能正常为无症状携带者肝功能正常为无症状携带者肝功能异常为乙肝患者肝功能异常为乙肝患者+-同上，传染性强同上，传染性强+-+急性或慢性乙型肝炎（传染急性或慢性乙型肝炎（传染性强，性强，“大三阳大三阳”）-+-/+乙肝恢复期乙肝恢复期-+感染过感染过HBV或或“窗口期窗口期”+-+急性感染趋向恢复（急性感染趋向恢复（“小三小三阳阳”）-+-既往感染或接种过疫苗既往感染或接种过疫苗24乙型肝炎病毒标志物的检测