实验二血乳酸的测定及其应用学习培训课件.ppt

1、一、一、实验目的实验目的 以以NAD+为氢受体，为氢受体，LDH催化乳酸催化乳酸 脱氢生成丙酮酸，使脱氢生成丙酮酸，使NAD+转化成转化成NADH。其中。其中PMS递氢使递氢使NBT还原为还原为紫色呈紫色呈色物色物，呈色物的吸光度在，呈色物的吸光度在530nm时与乳酸含量成线性关系。时与乳酸含量成线性关系。二、实验原理二、实验原理 三、实验器材与试三、实验器材与试剂剂 1.1.实验仪器实验仪器 采血针、吸血管、移液管、水浴锅、离采血针、吸血管、移液管、水浴锅、离心机、生化分析仪等心机、生化分析仪等 2.2.试剂盒（南京建成生物工程研究所）试剂盒（南京建成生物工程研究所）四、实验步骤四、实验步骤

2、采血制备上清液：采血制备上清液：指尖采血指尖采血40l，全血加入，全血加入0.24ml的蛋白沉淀剂的蛋白沉淀剂混匀，混匀，3500400转转/分，离心分，离心10分钟，取上清待测。分钟，取上清待测。运动方案：运动方案：用功率自行车进行大强度运动训练建立运动实验模用功率自行车进行大强度运动训练建立运动实验模型（自行设计）。型（自行设计）。空白管空白管标准管标准管测定管测定管蒸馏水（蒸馏水（mlml）0.020.023mmol/L3mmol/L标准液（标准液（mlml）0.020.02上清液（上清液（mlml）0.020.02酶工作液（酶工作液（mlml）1 11 11 1显色剂（显色剂（mlml

3、）0.20.20.20.20.20.2混匀，混匀，3737水浴准确反应水浴准确反应1010分钟分钟 终止液（终止液（mlml）2 22 22 2混匀，混匀，530nm530nm，1cm1cm光径，蒸馏水调零，测各管吸光度光径，蒸馏水调零，测各管吸光度 标准浓度为标准浓度为3mmol/L3mmol/L，稀释倍数为，稀释倍数为7 7倍倍 五、实验结果五、实验结果 六、注意事项六、注意事项1 1、设计运动方案时，应注意检索文献资料，注意运动、设计运动方案时，应注意检索文献资料，注意运动 时间与强度的关系，注意研究对象的物种差异。时间与强度的关系，注意研究对象的物种差异。2 2、严格按照实验方法与步骤

4、进行操作。、严格按照实验方法与步骤进行操作。3 3、做好实验数据的统计分析。、做好实验数据的统计分析。1 1、实验目的、实验目的2 2、实验步骤、实验步骤3 3、实验结果：公式计算、实验结果：公式计算4 4、实验结果分析：乳酸是糖酵解供能系统的终产物，又是有、实验结果分析：乳酸是糖酵解供能系统的终产物，又是有氧代谢系统的重要氧化物质，运动时乳酸主要在骨骼肌中生氧代谢系统的重要氧化物质，运动时乳酸主要在骨骼肌中生成，可在肝内经糖异生途径转变为葡萄糖，在供能体系中占成，可在肝内经糖异生途径转变为葡萄糖，在供能体系中占有重要地位，可直接用运动后血乳酸的浓度来评定无氧代谢有重要地位，可直接用运动后血乳酸的浓度来评定无氧代谢的能力。如的能力。如400 m400 m跑后，血乳酸低于跑后，血乳酸低于10 10 mmolmmol/L/L表明无氧代谢表明无氧代谢能力差；达到能力差；达到14-15 14-15 mmolmmol/L/L表明无氧酵解能力强。表明无氧酵解能力强。七、实验报告七、实验报告