液相色谱仪的维护与保养课件.ppt
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- 关 键 词:
- 色谱仪 维护 保养 课件
- 资源描述:
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1、高效液相色谱的维护与保养高效液相色谱的维护与保养 液相色谱仪器的使用及保养样品准备样品完全溶解在流动相中样品没有完全溶解过滤样品,确保样品中不含固体颗粒用流动相或比流动相弱的溶剂溶解样品进样量尽量小色谱泵的保养n流动相要过滤n常用缓冲液时,停泵前要用水冲洗,并用水冲洗柱塞杆清洗孔n拧紧排液阀时,不要太用力,以不渗液为准n更换流动相时,要保证两种溶剂的互溶性,如不互溶,要用一种中间溶剂过渡.例如:使用无机盐缓冲液时,用前和用后均须用水过渡流动相的脱气流动相的脱气n流动相脱气的目的n使色谱泵的输液准确n输液均匀准确,并且脉动减小n保留时间及色谱峰面积的重现性提高n提高检测的性能n防止气泡引起的尖峰
2、n基线稳定,信噪比增加n溶剂的紫外吸收本底降低n保护色谱柱n减少死体积n防止填料的氧化n加热n简单,如同抽真空一起使用,其效果很好。但容易造成流动相组成的变化n抽真空n同上,一般在溶剂抽滤的同时,也有脱气的效果n超声波n简单,但效果不理想。n通惰性气体(一般用氦气)n可保持连续脱气,多用于低压梯度n在线脱气机n可保持连续脱气,多用于低压梯度流动相脱气的方法流动相脱气的方法色谱泵的排气操作n使用前,应先确认泵头内没有气体,如有气体要按以下步骤排气:n将排液阀反时针转2-3圈,用10ml注射器抽,直到出液n按以下方法之一将泵的后面放空n将U6K的C阀打开,或717设在PURGE状态n或,将参比阀打
3、开n或,把色谱柱摘下n打开电源开关n开大流速到 69ml/minn同时用10ml注射器从排液阀注入流动相n直到泵后的流速稳定无气泡为止色谱泵的运行注意用外部控制器与用泵面板控制的区别有些型号的外部控制器与面板不能同时用如需要面板控制,需要断开控制线或关闭控制器排气后的色谱泵即可运行注意排气后,先设流速为 0恢复排气时断开的部分,如 进样器、色谱柱如需要,恢复排气时断开的控制线根据色谱柱的不同,逐渐提高流速到设定值液相色谱对流动相的要求n除色谱柱对流动相的要求外,还有n与检测器匹配n脱气n避免卤素离子(不锈钢系统)n溶剂的粘度n防止细菌的生长NameAcetic AcidAcetoneAceto
4、nitrileBenzeneButyl AlcoholCarbon TetrachlorideChloroformCyclohexaneCyclopentaneDichloroethaneDichloromethaneDimethylformamideDimethyl SulfoxideDioxanEthylacetateEthyl AlcoholDi-EthyletherHeptaneHexaneMethyl AlcoholMethylethyl KetoneI-OctanePentaneI-Propyl AlcoholTetrachloroethaneTetrahydrofuranTolu
5、eneAcetic AcidAcetoneAcetonitrileBenzeneCarbon TetChloroformCyclopentaneButyl AlcoholCyclohexaneDichloroethaneCH Cl 2 2DMFDMSODioxanEthylacetateEthyl AlcoholDi-EthyletherHeptaneHexaneMethyl AlcoholMEKI-OctanePentaneI-Propyl AlcoholDi-PropyletherC H 2 2 Cl 4 THFTolueneTrichloroethaneWaterXyleneTrichl
6、oroethaneWaterXyleneDi-PropyletherImmiscibleMiscible溶剂的相溶性溶剂的紫外吸收SolventUV Cutoff(nm)Acetonitrile190WaterCyclohexane195Hexane200Methanol210Ethanol210Diethyl Ether220Dichloromethane220Chloroform190240Carbon Tetrachloride265Tetrahydrofuran280(210)Toluene280UV Cutoff is the wavelength at which absorban
7、ce equals 1 AU.流动相的保存n有机溶剂流动相:n室温下密封,避光保存n缓冲盐流动相:n当日现配现用n低温下密封保存,一般不超过3天n防止长菌n有机溶剂与水(缓冲盐)混配的流动相:n低温密封保存n防止有机相的挥发n选用适宜的容器保存于聚乙烯瓶中的超纯水2 星期1 天1 星期1 小时新鲜配制5101520250保存于标准棕色玻璃瓶中的超纯水1 天1星期新鲜配制5101520250分检测器的保养n如长时间不用检测器可以关掉紫外灯n在4小时以上不用时,太频繁开关也不好n不要让缓冲液长期停滞在检测池内n用纯水冲洗n示差检测器及荧光检测器n注意流动池的耐压,不要在后面加压关于自动进样器的针清
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