临床病原体检查课件.ppt

1、临床病原体检查临床病原体检查 李一荣李一荣临床病原体检查1临床病原体检查目的临床病原体检查目的 明确感染是否发生以及病原体的类型。明确感染是否发生以及病原体的类型。提供体外抗微生物药物敏感实验的结果。提供体外抗微生物药物敏感实验的结果。密切监视烈性传染病与新的传染病的发密切监视烈性传染病与新的传染病的发生，及时向行政主管部门报告。生，及时向行政主管部门报告。配合相关机构进行流行病学调查。配合相关机构进行流行病学调查。临床病原体检查2感染性疾病的现状感染性疾病的现状 感染性疾病的病原体：细菌、病毒、支感染性疾病的病原体：细菌、病毒、支原体、衣原体、立克次体原体、衣原体、立克次体 以及寄生虫等。以

2、及寄生虫等。自从抗生素的发现和预防接种的实施，自从抗生素的发现和预防接种的实施，许多曾严重危害人体健康的病原体已消许多曾严重危害人体健康的病原体已消灭或基本消灭。灭或基本消灭。新的传染病陆续被发现，曾绝迹的老传新的传染病陆续被发现，曾绝迹的老传染病部分死灰复燃。染病部分死灰复燃。条件致病菌感染比例增加。条件致病菌感染比例增加。多重耐药菌株不断出现。多重耐药菌株不断出现。临床病原体检查3临床病原体检查的基本程序临床病原体检查的基本程序 医生、护士、病人、检验师：正确采集医生、护士、病人、检验师：正确采集运送标本。运送标本。检验科：直接镜检、免疫学和分子生物检验科：直接镜检、免疫学和分子生物检测、

3、病原体分离培养鉴定、药敏实检测、病原体分离培养鉴定、药敏实验验报告结果。报告结果。医生：明确诊断、合理用药。医生：明确诊断、合理用药。临床病原体检查4标本采集的基本原则标本采集的基本原则 根据病史与临床表现确定标本采集的类根据病史与临床表现确定标本采集的类型与部位，尽量采集病变明显部位标本。型与部位，尽量采集病变明显部位标本。在发病的早期或急性期采集标本，最好在发病的早期或急性期采集标本，最好在抗生素使用前（如使用过抗生素应在在抗生素使用前（如使用过抗生素应在申请单上注明）。申请单上注明）。采集标本防止污染，并置于无菌容器，采集标本防止污染，并置于无菌容器，加盖密封、立即送检。加盖密封、立即送

4、检。标本必须贴上标签，与检验申请单同时标本必须贴上标签，与检验申请单同时送检。送检。临床病原体检查5检验申请单的基本内容检验申请单的基本内容 The patient,s name and hospital number.Age and sex.Collection date and time.Diagnosis.Exact nature and source of the specimen.Ordering physician.Immunization history and antimicrobial therapy.Objective.临床病原体检查6标本送检标本送检 标本要求在标本要求在

5、30min内送检，否则影响阳性内送检，否则影响阳性率。率。烈性传染病标本需专人护送。烈性传染病标本需专人护送。临床病原体检查7检验科可拒收部分标本检验科可拒收部分标本 The information on the label does not match the information on the requisition.The specimen has been transported at the improper temperature or in improper medium.The quantity of specimen is insufficient for testing.

6、The specimen is leaking.临床病原体检查8检验科可拒收部分标本检验科可拒收部分标本 The specimen transport time exceeds 2 hours postcollection and the specimen is not preserved.The specimen was received in a fixative which kill any microorganism present.The specimen is dried.The specimen has been received for anaerobic culture fr

7、om a site known to have anaerobes as part of normal flora.临床病原体检查9血液标本的采集血液标本的采集 适应症：疑似菌血症、败血症或脓毒血适应症：疑似菌血症、败血症或脓毒血症的病人。症的病人。一般在抗生素使用前，于发热初期或高一般在抗生素使用前，于发热初期或高峰期采血。峰期采血。24小时内采血小时内采血23次可提高阳性率。次可提高阳性率。血液与培养基的比例为血液与培养基的比例为1：10，一般成人，一般成人血量血量1020ml，婴儿，婴儿1-5ml。临床病原体检查10血液标本的采集方法血液标本的采集方法临床病原体检查11呼吸道标本采集呼吸

8、道标本采集 类型：鼻咽拭、痰和类型：鼻咽拭、痰和经气管采集的标本。经气管采集的标本。上呼吸道存在正常菌上呼吸道存在正常菌群，在采集标本与结群，在采集标本与结果分析时应予考虑果分析时应予考虑。临床病原体检查12痰标本的采集痰标本的采集 采集时间：晨痰，且采集时间：晨痰，且在取痰前用清水反复在取痰前用清水反复漱口。漱口。方法：（方法：（1）自然咳）自然咳痰法：（痰法：（2）气管镜）气管镜下采集法；（下采集法；（3）气）气管穿刺法。管穿刺法。临床病原体检查13尿标本的采集尿标本的采集 无菌采集中段尿无菌采集中段尿 如考虑厌氧菌感染，如考虑厌氧菌感染，采取膀胱穿刺法采集采取膀胱穿刺法采集标本。标本。排

9、尿困难者考虑导尿排尿困难者考虑导尿采集标本采集标本。临床病原体检查14粪便标本采集粪便标本采集 自然排便，挑取脓、血或粘液部分于清自然排便，挑取脓、血或粘液部分于清洁容器中送检。洁容器中送检。排便困难者，采用直肠拭子采集。排便困难者，采用直肠拭子采集。怀疑霍乱弧菌感染引起的腹泻，立即接怀疑霍乱弧菌感染引起的腹泻，立即接种或将标本置于碱性蛋白胨或卡种或将标本置于碱性蛋白胨或卡-布运送布运送培养液送检。培养液送检。传染性腹泻应连续送检传染性腹泻应连续送检3次。次。临床病原体检查15生殖道标本生殖道标本 男性：无菌采集尿道男性：无菌采集尿道口分泌物或前列腺液口分泌物或前列腺液。临床病原体检查16生殖

10、道标本生殖道标本 女性：用无菌棉纤采集阴道或宫颈分泌女性：用无菌棉纤采集阴道或宫颈分泌物。怀疑厌氧菌感染，应采用阴道后穹物。怀疑厌氧菌感染，应采用阴道后穹隆穿刺法，并立即接种于厌氧平板。隆穿刺法，并立即接种于厌氧平板。疑似梅毒螺旋体感染，直接从外生殖器疑似梅毒螺旋体感染，直接从外生殖器硬下疳蘸取渗出液，置于盖玻片上，立硬下疳蘸取渗出液，置于盖玻片上，立即送检。即送检。临床病原体检查17脑脊液脑脊液 由临床医生采用腰椎穿刺，抽取由临床医生采用腰椎穿刺，抽取2-3ml，置于无菌容器中立即送检，不能暂时保置于无菌容器中立即送检，不能暂时保存于冰箱中。存于冰箱中。临床病原体检查18胸腹水等穿刺液标本胸

11、腹水等穿刺液标本 标本采集应在用药前或停止用药后标本采集应在用药前或停止用药后12天天后进行。后进行。用无菌注射器抽取可疑标本，分别置于用无菌注射器抽取可疑标本，分别置于抗凝与不抗凝无菌容器中立即送检。抗凝与不抗凝无菌容器中立即送检。怀疑厌氧菌感染，采用床边接种为宜。怀疑厌氧菌感染，采用床边接种为宜。临床病原体检查19脓液及创伤感染分泌物标本脓液及创伤感染分泌物标本 开放性脓肿及脓性分泌物：用无菌棉纤开放性脓肿及脓性分泌物：用无菌棉纤采取脓液或病灶深部分泌物，置于斯氏采取脓液或病灶深部分泌物，置于斯氏运送培养基送检。运送培养基送检。封闭性脓肿：局部消毒后，用注射器抽封闭性脓肿：局部消毒后，用注

12、射器抽取，怀疑厌氧菌感染，应隔绝空气采集。取，怀疑厌氧菌感染，应隔绝空气采集。大面积烧伤的创面分泌物：用无菌棉纤大面积烧伤的创面分泌物：用无菌棉纤多点采取脓液或分泌物，置于无菌试管多点采取脓液或分泌物，置于无菌试管中送检中送检。临床病原体检查20检查方法检查方法 直接显微镜检查。直接显微镜检查。病原体抗原与抗体的检测。病原体抗原与抗体的检测。病原体核酸的检测。病原体核酸的检测。病原体的分离培养与鉴定。病原体的分离培养与鉴定。临床病原体检查21SARS（severe acute respiratory syndrome）病原体）病原体的确定的确定临床病原体检查22电子显微镜发现为电子显微镜发现为

13、某种冠状病毒某种冠状病毒临床病原体检查23基因组测序锁定为基因组测序锁定为新型冠状病毒新型冠状病毒我们的我们的我们的我们的megaBACEmegaBACEmegaBACEmegaBACE数据质量数据质量数据质量数据质量临床病原体检查24复制出相应的动物模型复制出相应的动物模型临床病原体检查25建立新的检测方法建立新的检测方法 PCR法法 间接免疫荧光法间接免疫荧光法 ELISA临床病原体检查26临床病原体检查27直接显微镜检查的目的与评价直接显微镜检查的目的与评价（1）染色标本目的：了解细菌的形染色标本目的：了解细菌的形态、染色性或观察宿主细胞内态、染色性或观察宿主细胞内包涵体。包涵体。评价：

14、为临床初步诊断提供依评价：为临床初步诊断提供依据。如据。如CSF找到抗酸杆菌，应初找到抗酸杆菌，应初步考虑结核分枝杆菌感染步考虑结核分枝杆菌感染。临床病原体检查28革兰氏阳性球菌革兰氏阳性球菌革兰氏阴性杆菌革兰氏阴性杆菌临床病原体检查29墨汁染色找墨汁染色找新型隐球菌新型隐球菌 抗酸染色抗酸染色临床病原体检查30直接显微镜检查的目的与评价直接显微镜检查的目的与评价（2）不染色标本：用于观不染色标本：用于观察病原体的大小、形察病原体的大小、形态与运动等特性。态与运动等特性。结果评价：部分病原结果评价：部分病原体可借此初步诊断，体可借此初步诊断，如暗视野显微镜下见如暗视野显微镜下见弹簧状螺旋体，应

15、怀弹簧状螺旋体，应怀疑梅毒螺旋体的感染。疑梅毒螺旋体的感染。临床病原体检查31病原体分离培养与鉴定的目的病原体分离培养与鉴定的目的 明确感染病原体。明确感染病原体。为临床提供体外抗微为临床提供体外抗微生物药物敏感试验结生物药物敏感试验结果果。临床病原体检查32细菌分离培养与鉴定的结果评价细菌分离培养与鉴定的结果评价 正常人群的无菌体液中检测到细菌，应正常人群的无菌体液中检测到细菌，应考虑细菌为感染的病原体。考虑细菌为感染的病原体。存在正常菌群的标本检测到细菌，应结存在正常菌群的标本检测到细菌，应结合细菌的量考虑是否为致病菌。合细菌的量考虑是否为致病菌。如临床表现支持感染，但培养阴性，应如临床表

16、现支持感染，但培养阴性，应考虑为标本不合格、培养不恰当等因素。考虑为标本不合格、培养不恰当等因素。直接镜检找到病原体，而培养阴性，应直接镜检找到病原体，而培养阴性，应考虑有考虑有L细菌、厌氧菌或苛氧菌感染。细菌、厌氧菌或苛氧菌感染。临床病原体检查33病毒分离培养与鉴定的结果评价病毒分离培养与鉴定的结果评价 必须结合流行病学资料、临床表现、标必须结合流行病学资料、临床表现、标本来源及病毒种类加以分析。本来源及病毒种类加以分析。从组织、血液以及脑脊液中分离到病毒从组织、血液以及脑脊液中分离到病毒可明确诊断。可明确诊断。从呼吸道、肠道等分离到病毒，如该病从呼吸道、肠道等分离到病毒，如该病毒人体不能长

17、期携带，有诊断价值，如毒人体不能长期携带，有诊断价值，如麻疹病毒、流感病毒等。反之需相应的麻疹病毒、流感病毒等。反之需相应的临床表现，才有病原学意义，如巨细胞临床表现，才有病原学意义，如巨细胞病毒，肠道病毒等。病毒，肠道病毒等。阴性不能排除病毒感染。阴性不能排除病毒感染。临床病原体检查34病原体核酸的检测病原体核酸的检测 聚合酶链式反应：扩增聚合酶链式反应：扩增病原体微生物特异的病原体微生物特异的DNA或或 RNA片段。片段。探针杂交法：通过已知探针杂交法：通过已知序列的探针与病原体的序列的探针与病原体的核苷酸杂交，用以了解核苷酸杂交，用以了解病原体的有无病原体的有无。临床病原体检查35病原体

18、核酸检测结果评价病原体核酸检测结果评价 是检测病原体微生物最灵敏的方法，但是检测病原体微生物最灵敏的方法，但具有一定的假阳性与假阴性。具有一定的假阳性与假阴性。阳性只表明存在某种病原体的核酸，是阳性只表明存在某种病原体的核酸，是否正被感染应结合临床具体分析。否正被感染应结合临床具体分析。临床病原体检查36病原体抗原与抗体的检测病原体抗原与抗体的检测 特异性特异性 IgM可作为感染性可作为感染性疾病的早期诊断指标，且疾病的早期诊断指标，且可区分原发与复发感染。可区分原发与复发感染。特异性特异性 IgG，尤其双份血，尤其双份血清的滴度呈清的滴度呈4倍或倍或4倍以上倍以上升高，考虑病原体感染。升高，

19、考虑病原体感染。排除交叉抗原的影响，病排除交叉抗原的影响，病原体抗原检测可明确感染原体抗原检测可明确感染的病原体。的病原体。临床病原体检查37第二节第二节 临床常见病原体检查临床常见病原体检查 临床常见病原体为：细菌、病毒、支原临床常见病原体为：细菌、病毒、支原体、衣原体、立克次体体、衣原体、立克次体 以及寄生虫等。以及寄生虫等。临床病原体检查38细菌感染检查项目的选择细菌感染检查项目的选择 普通细菌：常采用直接镜检、分离培养普通细菌：常采用直接镜检、分离培养与鉴定明确病原体。与鉴定明确病原体。难培养或培养要求高的细菌：综合运用难培养或培养要求高的细菌：综合运用免疫学或分子生物学检测，如结核分

20、枝免疫学或分子生物学检测，如结核分枝杆菌感染以及幽门螺杆菌感染等。杆菌感染以及幽门螺杆菌感染等。流行病学调查：病原体抗体检测，如流行病学调查：病原体抗体检测，如ASO试验与试验与Widal反应等。反应等。临床病原体检查39病毒感染检查项目的选择病毒感染检查项目的选择 细胞培养快速复制的病毒：细胞培养。细胞培养快速复制的病毒：细胞培养。细胞培养不能快速复制的病毒：目前多细胞培养不能快速复制的病毒：目前多检测病毒抗原、特异性抗体或核酸，如检测病毒抗原、特异性抗体或核酸，如CMV。不能细胞培养的病毒：病毒核酸检测与不能细胞培养的病毒：病毒核酸检测与病毒特异性抗体检测，如病毒特异性抗体检测，如HCV、

21、HPV等。等。临床病原体检查40真菌感染检查项目的选择与应真菌感染检查项目的选择与应用评价（用评价（1）直接显微镜检查：初步明确真菌直接显微镜检查：初步明确真菌感染。感染。临床病原体检查41真菌感染检查项目的选择与应真菌感染检查项目的选择与应用评价（用评价（2）分离培养：明确何种真菌感染。分离培养：明确何种真菌感染。真菌抗原检测：只适合于血清与脑真菌抗原检测：只适合于血清与脑脊液中隐球菌、念珠菌以及荚膜组脊液中隐球菌、念珠菌以及荚膜组织胞浆菌等。织胞浆菌等。真菌抗体检测：深部真菌的检测。真菌抗体检测：深部真菌的检测。临床病原体检查42寄生虫感染检查项目的选择与寄生虫感染检查项目的选择与应用评价

22、应用评价 直接显微镜检查：观直接显微镜检查：观察寄生虫生活史的各察寄生虫生活史的各阶段，是寄生虫感染阶段，是寄生虫感染的主要诊断依据。的主要诊断依据。寄生虫抗体检测：辅寄生虫抗体检测：辅助诊断。助诊断。临床病原体检查43支原体感染检查项目的选择与支原体感染检查项目的选择与评价评价 直接显微镜检查：无直接显微镜检查：无价值。价值。分离培养：阳性可明分离培养：阳性可明确诊断。确诊断。目前临床多检测支原目前临床多检测支原体抗原与核酸，用于体抗原与核酸，用于早期快速诊断。早期快速诊断。临床病原体检查44螺旋体感染检查项目的选择与螺旋体感染检查项目的选择与评价评价 直接显微镜检查有初直接显微镜检查有初步

23、诊断价值。步诊断价值。特异性抗体的检测为特异性抗体的检测为确诊依据。确诊依据。临床病原体检查45衣原体感染检查项目的选择与衣原体感染检查项目的选择与评价评价 直接显微镜检查：检直接显微镜检查：检查衣原体包涵体可提查衣原体包涵体可提供早期初步诊断。供早期初步诊断。分离培养：阳性可明分离培养：阳性可明确诊断。确诊断。目前临床多检测衣原目前临床多检测衣原体抗原与核酸，用于体抗原与核酸，用于早期快速诊断。早期快速诊断。临床病原体检查46第四节性传播疾病病原体检测第四节性传播疾病病原体检测 性传播性疾病（性传播性疾病（sexually transmitted disease,STD）：是指通过各种性接触

24、而）：是指通过各种性接触而传播的侵犯皮肤、性器官及全身多脏器传播的侵犯皮肤、性器官及全身多脏器的疾病，简称性病（的疾病，简称性病（venereal disease）临床病原体检查47重要的性病及病原体重要的性病及病原体 性病性病 病原体病原体 淋病淋病 淋球菌淋球菌 梅毒梅毒 梅毒螺旋体梅毒螺旋体 艾滋病艾滋病 人类免疫缺陷病毒人类免疫缺陷病毒 非淋球菌尿道炎非淋球菌尿道炎 溶脲支原体、沙眼衣原体等溶脲支原体、沙眼衣原体等 生殖器疱疹生殖器疱疹 单纯疱疹病毒单纯疱疹病毒 尖锐湿疣尖锐湿疣 人乳头瘤病毒人乳头瘤病毒临床病原体检查48淋病病原体的检测方法选择与淋病病原体的检测方法选择与评价（评价（

25、1）直接显微镜检查：多直接显微镜检查：多形核白细胞内见革兰形核白细胞内见革兰氏阴性双球菌，男性氏阴性双球菌，男性泌尿生殖道标本可明泌尿生殖道标本可明确诊断，而女性需结确诊断，而女性需结合培养结果分析。合培养结果分析。临床病原体检查49淋病病原体的检测方法选择与淋病病原体的检测方法选择与评价（评价（2）分离培养；广泛采用，阳性即可确诊。分离培养；广泛采用，阳性即可确诊。PCR：可用于早期快速诊断，但假阳性：可用于早期快速诊断，但假阳性率高。率高。特异性抗原与抗体检测：方法尚不成熟。特异性抗原与抗体检测：方法尚不成熟。临床病原体检查50梅毒螺旋体感染检查项目的选梅毒螺旋体感染检查项目的选择与评价择

26、与评价 直接显微镜检查：有直接显微镜检查：有初步诊断价值。初步诊断价值。非特异性抗体的检测：非特异性抗体的检测：过筛试验。过筛试验。特异性抗体的检测：特异性抗体的检测：确诊试验。确诊试验。临床病原体检查51非淋球菌性尿道炎检测方法选非淋球菌性尿道炎检测方法选择与评价择与评价 特异性抗体的检测：意义不大。特异性抗体的检测：意义不大。分离培养；阳性可确诊。分离培养；阳性可确诊。直接显微镜检查：适用于衣原体的检测。直接显微镜检查：适用于衣原体的检测。目前临床多检测抗原与核酸，用于早期目前临床多检测抗原与核酸，用于早期快速诊断。快速诊断。临床病原体检查52艾滋病病原体检测艾滋病病原体检测 直接显微镜检

27、查与分离培养：临床较少直接显微镜检查与分离培养：临床较少采用。采用。HIV-RNA检测：排除假阳性可确诊。检测：排除假阳性可确诊。HIV抗体检测：抗体检测：ELISA等为过筛实验，等为过筛实验，Westerblot为确诊实验。为确诊实验。临床病原体检查53单纯疱疹病毒单纯疱疹病毒 分离培养；阳性可确诊。分离培养；阳性可确诊。目前临床常检测目前临床常检测HSV-DNA与与HSV抗原，抗原，用于早期快速诊断。用于早期快速诊断。临床病原体检查54 人乳头瘤病毒人乳头瘤病毒 不能分离培养不能分离培养 目前临床常检测目前临床常检测HPV-DNA与与HPV抗原，抗原，用于早期快速诊断。用于早期快速诊断。临

28、床病原体检查55重要的性病及诊断金标准重要的性病及诊断金标准 性病性病 诊断金标准诊断金标准 淋病淋病 分离培养分离培养 梅毒梅毒 特异性抗体检测特异性抗体检测 艾滋病艾滋病 免疫印迹法与免疫印迹法与RT-PCR 非淋球菌尿道炎非淋球菌尿道炎 分离培养、鉴定分离培养、鉴定 生殖器疱疹生殖器疱疹 分离培养、鉴定分离培养、鉴定 尖锐湿疣尖锐湿疣 PCR临床病原体检查56第三节第三节 医院感染常见病原体检查医院感染常见病原体检查 医院感染（医院感染（nosocomial infection）：又称）：又称医院获得性感染（医院获得性感染（hospital acquired infection），指患者

29、在入院时不存在，也），指患者在入院时不存在，也不处于潜伏期，而在医院内发生的感染，不处于潜伏期，而在医院内发生的感染，包括医院内获得的而在出院后发病的感包括医院内获得的而在出院后发病的感染。广义的医院感染对象不仅指住院患染。广义的医院感染对象不仅指住院患者，还包括门诊病人、医院职工、探视者，还包括门诊病人、医院职工、探视人员与陪护人员等。人员与陪护人员等。临床病原体检查57医院感染的高危人群医院感染的高危人群 慢性疾病，如肿瘤、糖尿病以及肝硬化慢性疾病，如肿瘤、糖尿病以及肝硬化等。等。免疫抑制剂及激素的使用着。免疫抑制剂及激素的使用着。化疗及放疗患者。化疗及放疗患者。手术及麻醉患者。手术及麻醉

30、患者。使用介入性诊断与治疗的患者。使用介入性诊断与治疗的患者。广谱抗生素使用者。广谱抗生素使用者。临床病原体检查58医院感染的感染源医院感染的感染源 病人、医院职工、探病人、医院职工、探视人员、陪护人员。视人员、陪护人员。医院环境、未彻底消医院环境、未彻底消毒的医疗器戒、血液毒的医疗器戒、血液制品等。制品等。临床病原体检查59医院感染常见的病原体医院感染常见的病原体 细菌为主要病原体。细菌为主要病原体。细菌的种类因时、地细菌的种类因时、地和人而异。和人而异。不同临床类型其感染不同临床类型其感染细菌的构成比不同。细菌的构成比不同。临床病原体检查60医院感染检查内容医院感染检查内容 基本原则与病原

31、体感染类似，但更应注基本原则与病原体感染类似，但更应注意正常菌群的污染以及条件致病菌在医意正常菌群的污染以及条件致病菌在医院感染中的地位。院感染中的地位。定期对医院环境进行病原体监测。定期对医院环境进行病原体监测。定期对医疗器械的消毒效果进行监测。定期对医疗器械的消毒效果进行监测。临床病原体检查61第五节第五节 细菌耐药性检查细菌耐药性检查 抗微生物药物敏感试验抗微生物药物敏感试验(antimicrobial susceptibility test,AST)对敏感性不能预对敏感性不能预测的临床分离株进行药敏试验，以指导测的临床分离株进行药敏试验，以指导临床选择治疗药物。临床选择治疗药物。临床病

32、原体检查62体外抗菌药物敏感试验的目的体外抗菌药物敏感试验的目的 临床分离菌株，如不能对抗生素敏感性临床分离菌株，如不能对抗生素敏感性进行预测，必须常规进行药敏试验。进行预测，必须常规进行药敏试验。临床治疗效果差而考虑调整抗菌药物时。临床治疗效果差而考虑调整抗菌药物时。了解细菌耐药的流行病学情况。了解细菌耐药的流行病学情况。评价新抗菌药物的抗菌谱和抗菌活性等。评价新抗菌药物的抗菌谱和抗菌活性等。临床病原体检查63体外抗菌药物敏感试验的方法体外抗菌药物敏感试验的方法 体外抗菌药物敏感试验主要包括抑菌试体外抗菌药物敏感试验主要包括抑菌试验、杀菌试验、联合药敏试验和检测细验、杀菌试验、联合药敏试验和

33、检测细菌产生的抗生素灭活酶等。常用方法有菌产生的抗生素灭活酶等。常用方法有:纸片扩散法（纸片扩散法（Kirby-Bauer test）稀释法（稀释法（dilution test）E试验法（试验法（E test）杀菌试验杀菌试验 体外联合药物敏感试验体外联合药物敏感试验 临床病原体检查64药敏试验结果的解释（药敏试验结果的解释（1）敏感（敏感（susceptible）：表示测试菌能被测）：表示测试菌能被测定药物常规剂量给药后在体内达到的血定药物常规剂量给药后在体内达到的血药浓度所抑制或杀灭。药浓度所抑制或杀灭。耐药（耐药（resistant）：表示测试菌不能被测）：表示测试菌不能被测定药物常规剂

34、量给药后在体内达到的血定药物常规剂量给药后在体内达到的血药浓度所抑制或杀灭，治疗无效。药浓度所抑制或杀灭，治疗无效。临床病原体检查65药敏试验结果的解释（药敏试验结果的解释（2）中介中介(intermediate):该该范围作为敏感与耐药之范围作为敏感与耐药之间的缓冲区，避免由于间的缓冲区，避免由于微小技术误差影响实验微小技术误差影响实验结果。结果。最低抑菌浓度（最低抑菌浓度（MIC）：）：能够抑制检测菌肉眼可能够抑制检测菌肉眼可见生长的最低药物浓度见生长的最低药物浓度称为测定药物对检测菌称为测定药物对检测菌的最低抑菌浓度。的最低抑菌浓度。临床病原体检查66特殊的耐药菌监测的特殊试验特殊的耐药

35、菌监测的特殊试验 由于细菌存在一种或几种耐药机制，造由于细菌存在一种或几种耐药机制，造成了细菌的多重耐药性。单一的药敏试成了细菌的多重耐药性。单一的药敏试验已不能完全表示细菌的耐药性，必须验已不能完全表示细菌的耐药性，必须进行一些特殊的耐药性监测试验。进行一些特殊的耐药性监测试验。临床病原体检查67-内酰胺酶的检测内酰胺酶的检测-内酰胺酶：可水解内酰胺酶：可水解-内酰胺类抗生素。内酰胺类抗生素。临床意义：（临床意义：（1）流感嗜血杆菌、淋病奈瑟菌）流感嗜血杆菌、淋病奈瑟菌以及卡拉莫拉汉菌等阳性，表示对青霉素、氨以及卡拉莫拉汉菌等阳性，表示对青霉素、氨卞西林以及阿莫西林耐药。（卞西林以及阿莫西林

36、耐药。（2）葡萄球菌属）葡萄球菌属以及肠球菌属等，阳性表示对青霉素、氨基组以及肠球菌属等，阳性表示对青霉素、氨基组青霉素、羧基组青霉素以及脲基组青霉素耐药青霉素、羧基组青霉素以及脲基组青霉素耐药临床病原体检查68产超广谱产超广谱-内酰胺酶内酰胺酶(extend spectum-lactamase,ESBL)的肠杆菌科细菌的肠杆菌科细菌 超广谱超广谱-内酰胺酶内酰胺酶是由质粒介导的是由质粒介导的-内酰胺酶，可水解内酰胺酶，可水解青霉素类、头孢菌青霉素类、头孢菌素和氨曲南，主要素和氨曲南，主要在大肠埃希菌和克在大肠埃希菌和克雷伯菌属等肠杆菌雷伯菌属等肠杆菌科细菌中产生。科细菌中产生。临床病原体检查

37、69临床意义临床意义 产产ESBL细菌细菌,不论体外药物敏感试验结不论体外药物敏感试验结果如何果如何,对青霉素类、头孢菌素类和氨曲对青霉素类、头孢菌素类和氨曲南治疗均无效。南治疗均无效。临床病原体检查70耐万古霉素的肠球菌耐万古霉素的肠球菌 定义定义:对对30g万古霉万古霉素纸片抑菌圈直径素纸片抑菌圈直径19mm，或或MIC32g/ml应视为应视为耐万古霉素肠球菌耐万古霉素肠球菌（vancomycin resistant enteroccoccus，VRE）。）。临床病原体检查71临床意义临床意义 耐万古霉素肠球菌目前尚无有效的治疗耐万古霉素肠球菌目前尚无有效的治疗方法，但是对青霉素敏感的方法

38、，但是对青霉素敏感的VRE可用青可用青霉素和庆大霉素联合治疗，若对青霉素霉素和庆大霉素联合治疗，若对青霉素耐药而不是高水平耐氨基糖苷类可用壁耐药而不是高水平耐氨基糖苷类可用壁霉素和庆大霉素。另外氯霉素、红霉素、霉素和庆大霉素。另外氯霉素、红霉素、四环素（或多西环素、或米诺环素）及四环素（或多西环素、或米诺环素）及利福平可用于利福平可用于VRE株。株。临床病原体检查72耐青霉素的肺炎链球菌耐青霉素的肺炎链球菌 定义：定义：1g苯唑西林苯唑西林纸片的抑菌圈直径纸片的抑菌圈直径2g/ml应视为应视为耐青霉素肺炎链球菌耐青霉素肺炎链球菌（penicillin resistant strepttococ

39、cus paeumoni，PRSP）。）。临床病原体检查73临床意义临床意义 PRSP对氨苄西林、对氨苄西林、氨苄西林氨苄西林/舒巴坦、舒巴坦、头孢克肟、头孢克肟、头孢唑啉的临床治疗疗效很头孢唑啉的临床治疗疗效很差，治疗时参考药敏结果选择药物，经差，治疗时参考药敏结果选择药物，经验治疗重症感染时，可用头孢曲松或头验治疗重症感染时，可用头孢曲松或头孢噻肟联合万古霉素用药。孢噻肟联合万古霉素用药。临床病原体检查74耐甲氧西林的葡萄球菌（耐甲氧西林的葡萄球菌（methecillin resistance staphylococcus，MRS）1g苯唑西林纸片的苯唑西林纸片的抑菌圈直径抑菌圈直径10mm，或或MIC4g/ml的金的金黄色葡萄球菌黄色葡萄球菌,1g苯苯唑西林纸片的抑菌圈唑西林纸片的抑菌圈直径直径17mm，或，或MIC0.5g/ml的凝的凝固酶阴性葡萄球菌称固酶阴性葡萄球菌称耐甲氧西林葡萄球菌耐甲氧西林葡萄球菌。临床病原体检查75临床意义临床意义 对所有对所有-内酰胺类药物均无效内酰胺类药物均无效,并对氨基并对氨基糖甙类、大环内脂类、克林霉素和四环糖甙类、大环内脂类、克林霉素和四环素等抗生素多重耐药。治疗首选药物为素等抗生素多重耐药。治疗首选药物为万古霉素。万古霉素。临床病原体检查76