临床生化检验(肾功)课件.ppt
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- 临床 生化 检验 肾功 课件
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1、1检测项目:检测项目:Cre(肌酐)(肌酐)BUN(尿素氮)(尿素氮)UA(尿酸)(尿酸)Cys C(胱抑素(胱抑素C)2目的:目的:判断肾脏疾病的严重程度以及预测预后、判断肾脏疾病的严重程度以及预测预后、确定疗效和调整药物用量确定疗效和调整药物用量34肾脏的生理功能肾脏的生理功能 排泄功能排泄功能 :排泄水以及机体的代谢产物排泄水以及机体的代谢产物 内分泌功能内分泌功能 :生成一些生物活性物质如:生成一些生物活性物质如肾素、前列腺素肾素、前列腺素、EPO等等 调节功能调节功能 :参与机体的体液酸碱调节,参与机体的体液酸碱调节,保证体内水和电解质的动态平衡保证体内水和电解质的动态平衡5几个概念
2、几个概念肾小球滤过率(肾小球滤过率(GFR):指在单位时间内):指在单位时间内(min)经过肾小球滤出的血浆液体量。)经过肾小球滤出的血浆液体量。肾清除率:指双肾在单位时间(肾清除率:指双肾在单位时间(min)内能)内能将若干毫升血浆中某种物质全部加以清除。将若干毫升血浆中某种物质全部加以清除。利用清除率可测定利用清除率可测定GFR内生肌酐清除率(内生肌酐清除率(Ccr):指肾脏在单位时):指肾脏在单位时间内把若干毫升血浆中的内生肌酐全部清间内把若干毫升血浆中的内生肌酐全部清 除出去。除出去。反应的是肾小球的滤过功能反应的是肾小球的滤过功能6血肌酐(血肌酐(Cre)的测定)的测定肌酐是肌酸代谢
3、的终产物。肌酸部分来自肌酐是肌酸代谢的终产物。肌酸部分来自食物摄入,部分在体内生成,在控制外源食物摄入,部分在体内生成,在控制外源性来源、未进行剧烈运动的条件下,肌酐性来源、未进行剧烈运动的条件下,肌酐在血中浓度在血中浓度主要取决于主要取决于GFR(肾小球滤过(肾小球滤过率)。在肾功能受损,率)。在肾功能受损,GFR(肾小球滤过(肾小球滤过率)下降到临界点时,血中肌酐浓度明显率)下降到临界点时,血中肌酐浓度明显上升,随受损程度加重,上升速度也加上升,随受损程度加重,上升速度也加 快。快。7测定原理:测定原理:肌酐+H2O 肌酸肌酸+H2O+O2 肌氨酸+尿素肌氨酸+H2O+O2 甘氨酸+HCH
4、O+H2O2H2O2+4-APP+ESPMT 醌亚胺+4H2O参考值:参考值:40103mol/L 肌酐氨基水解酶肌酸脒基水解酶肌氨酸氧化酶过氧化物酶8临床意义:反映反映GFR减退的后期指标:当肾小球减退的后期指标:当肾小球GFR功能减退至功能减退至50%时,血清时,血清Cr仍可正常;仍可正常;患者患者Ccr(内生肌酐清除率)降至正常水平(内生肌酐清除率)降至正常水平1/3时,血清时,血清Cr有明显上升,且上升曲线斜有明显上升,且上升曲线斜率会陡然变大,在此阶段率会陡然变大,在此阶段血清血清Cr是氮质血是氮质血症病情观察和疗效判断的有效指征。症病情观察和疗效判断的有效指征。9血清血清Cr一天内
5、生理变动幅度通常在一天内生理变动幅度通常在10%内,内,但与个体肌肉量有关。但与个体肌肉量有关。肌肉发达者与肌肉发达者与消瘦者的血清消瘦者的血清Cr浓度可有明显差异浓度可有明显差异妊娠期内因生理原因妊娠期内因生理原因GFR可上升,但肌可上升,但肌酐生成速度不变,血清酐生成速度不变,血清Cr因血浆稀释作用因血浆稀释作用而比常人低而比常人低10剧烈肌肉活动后血清剧烈肌肉活动后血清Cr有一过性增加有一过性增加进肉食对血清进肉食对血清Cr有一定影响,根据调查,有一定影响,根据调查,进食肉食后进食肉食后2-4小时内血清肌酐可增加小时内血清肌酐可增加3444mol/L可超出正常值上限,约可超出正常值上限,
6、约12小时小时候接近正常水平候接近正常水平11尿素(尿素(Urea)的测定)的测定血中蛋白质以外的含氮化合物称为非蛋白血中蛋白质以外的含氮化合物称为非蛋白氮组分(氮组分(NPN)。)。NPN大部分由肾排出,大部分由肾排出,血中血中NPN浓度是反映浓度是反映GFR功能的一个指标。功能的一个指标。血中血中NPN组分多达组分多达15种以上,种以上,其中血尿素其中血尿素氮(氮(BUN)占)占45%,因此因此BUN的变化更能的变化更能反映反映GFR功能,且测定方法更简单。因而功能,且测定方法更简单。因而BUN测定逐渐取代测定逐渐取代NPN而成为常规方法而成为常规方法12测定原理测定原理:尿素在尿素酶催化
7、下,水解生成氨和二氧化尿素在尿素酶催化下,水解生成氨和二氧化碳。氨在碳。氨在-酮戊二酸和还原理辅酶酮戊二酸和还原理辅酶I 存在下,存在下,经谷氨酸脱氧酶经谷氨酸脱氧酶(GLDH)催化,生成谷氨酸。催化,生成谷氨酸。同时同时NADH 被氧化成被氧化成NAD,可在可在340nm波长波长处监测吸光度下降的速率,计算样品中尿处监测吸光度下降的速率,计算样品中尿素的含量素的含量 尿素尿素+H2O 2NH3+CO2 NH3+-酮戊二酸酮戊二酸+NADH+H+谷氨酸谷氨酸+NAD+H2O 参考值参考值:Surea:1.78.3mmol/L尿素酶尿素酶GLDH13临床意义:临床意义:在蛋白质摄入及体内分解代谢
8、较恒定的在蛋白质摄入及体内分解代谢较恒定的状态下状态下Surea浓度取决于从肾排出的速度。浓度取决于从肾排出的速度。因此在一定程度上因此在一定程度上Surea能反映能反映GFR的功能,的功能,但是只有在有效肾单位约但是只有在有效肾单位约50%以上受损时以上受损时Surea才开始上升才开始上升肾外因素:肾外因素:、肾前因素:肾前因素:肾血流量明显肾血流量明显减少,减少,GFR减退,导致尿素排出减少,血中减退,导致尿素排出减少,血中浓度上升。常见于脱水、急性失血、休克浓度上升。常见于脱水、急性失血、休克等有效循环容量急剧减少。等有效循环容量急剧减少。、肾后因素:、肾后因素:见于尿路梗阻,尿路结石、
9、肿瘤、前列腺见于尿路梗阻,尿路结石、肿瘤、前列腺肿瘤或肥大等肿瘤或肥大等14蛋白质分解亢进:见于消化道出血,甲蛋白质分解亢进:见于消化道出血,甲状腺亢进、烧伤、挤压综合症等状腺亢进、烧伤、挤压综合症等生理性增高:见于高蛋白饮食生理性增高:见于高蛋白饮食生理性减低:见于妊娠期生理性减低:见于妊娠期15附注:附注:血氨升高时,可使尿素测定结果偏高,溶血氨升高时,可使尿素测定结果偏高,溶血标本对测定有干扰。血标本对测定有干扰。在测定过程中,各种器材和蒸溜水应无氨在测定过程中,各种器材和蒸溜水应无氨离子污染,否则结果偏高。离子污染,否则结果偏高。16尿酸(尿酸(UA)的测定)的测定在人体内,嘌呤核苷酸
10、分解生成嘌呤核苷在人体内,嘌呤核苷酸分解生成嘌呤核苷及嘌呤后,经水解脱氨和氧化,最后生成及嘌呤后,经水解脱氨和氧化,最后生成尿酸。尿酸。UA随尿排出,随尿排出,血中血中UA全部通过肾小全部通过肾小球滤出,在近端肾小管几乎被完全重吸收,球滤出,在近端肾小管几乎被完全重吸收,故故UA的清除率极低(的清除率极低(10%)由肾排出的)由肾排出的UA占一日总排出量的占一日总排出量的2/33/4,其余在胃肠道其余在胃肠道内被微生物的酶分解,内被微生物的酶分解,GFR减低时减低时UA不能不能正常排出,血中正常排出,血中UA浓度升高。浓度升高。17测定方法测定方法:(酶偶联测定法)(酶偶联测定法)尿酸+O2+
11、H2O 尿囊素+H2O2+CO22H2O2+4-APP+3,5-DHBSA 醌亚胺+4H2O参考值:参考值:男性:男性:202417mol/L 女性:女性:143340mol/L尿酸酶POD注:3,5-DHBSA -3,5二羟基苯磺酸18临床意义:临床意义:GFR减退时血清减退时血清UA上升,但因其肾外影上升,但因其肾外影响因素较多,血中浓度变化不一定与肾损响因素较多,血中浓度变化不一定与肾损伤程度平行伤程度平行UA主要用作与痛风的诊断指标。主要用作与痛风的诊断指标。痛风石痛风石嘌呤代谢失调所致,血清嘌呤代谢失调所致,血清UA可明显升高可明显升高核酸代谢亢进可引起内源性核酸代谢亢进可引起内源性
12、UA生成增加,生成增加,血清血清UA上升。见于白血病、多发性骨髓瘤、上升。见于白血病、多发性骨髓瘤、真性红细胞增多症等真性红细胞增多症等19高血压等肾血流量减少的病变,因高血压等肾血流量减少的病变,因UA排排泄减少而使血清泄减少而使血清UA升高升高其他:血清其他:血清UA升高还见于慢性铅中毒、升高还见于慢性铅中毒、氯仿及四氯化碳中毒氯仿及四氯化碳中毒血清血清UA减低见于肝豆状核变性、严重贫减低见于肝豆状核变性、严重贫血血20附注:附注:遇高浓度维生素遇高浓度维生素C 的标本,可使测定结果的标本,可使测定结果偏低,应在试剂盒中加入抗坏血酸氧化酶偏低,应在试剂盒中加入抗坏血酸氧化酶(双试剂法双试剂
13、法),消除维生素,消除维生素C 的干扰。的干扰。21胱胱 抑抑 素素 C22主要内容胱抑素胱抑素C C的生物学特性的生物学特性胱抑素胱抑素C C的检测方法及参考范围的检测方法及参考范围胱抑素胱抑素C C检测的意义和临床应用检测的意义和临床应用23什么是胱抑素什么是胱抑素C?1961 年年Clausen 于脑脊液中发现一种物质于脑脊液中发现一种物质,因因它与哺乳动物胱蛋白它与哺乳动物胱蛋白A和胱蛋白和胱蛋白B的结构及活的结构及活性相似性相似,当时被称为胱蛋白当时被称为胱蛋白C。半胱氨酸蛋白酶抑制剂超家族中的一员半胱氨酸蛋白酶抑制剂超家族中的一员 半胱氨酸蛋白酶抑制剂超家族三个主要成员:半胱氨酸蛋
14、白酶抑制剂超家族三个主要成员:1.Stefins(type 1):StefinA(CystatinA)、StefinB(CystatinB)2.Cystatins(type 2):Cystatin C、D、S、SN、SA 3.Kininogens(type 3)激肽原:高分子糖激肽原:高分子糖 基化蛋白激肽原、低分子糖基化蛋白基化蛋白激肽原、低分子糖基化蛋白 激肽原激肽原24生物学特性生物学特性分子量约为分子量约为13KD,是一种低分子量、碱性蛋白质,是一种低分子量、碱性蛋白质(等电点(等电点9.3),含含120个氨基酸残基,是一种非糖个氨基酸残基,是一种非糖基化多肽链,完整的基化多肽链,完整
15、的Cys-C基因编码的多肽链含有基因编码的多肽链含有146个氨基酸残基,其中前个氨基酸残基,其中前26个氨基酸为分泌性信号个氨基酸为分泌性信号肽肽。Cys C基因可视为看家基因(基因可视为看家基因(house-keeping gene),),因为在基因的因为在基因的5端有端有“看家基因看家基因”启动子的特点,即启动子的特点,即无典型的无典型的CAAT框,富含框,富含GC,并含有一个转录,并含有一个转录SP结结合位点,即在所有有核细胞中恒定持续的转录表达。合位点,即在所有有核细胞中恒定持续的转录表达。Cystatin C是一种分泌性蛋白质是一种分泌性蛋白质,故广泛地存故广泛地存 在于各种体液中,
16、在于各种体液中,精浆和脑积液中含量最高,精浆和脑积液中含量最高,尿液中最低。尿液中最低。25Cys C的生理作用(的生理作用(1)Cys C是一个内源性广谱蛋白酶抑制剂。是一个内源性广谱蛋白酶抑制剂。在生理条件下在生理条件下Cys-C的重要功能是的重要功能是抑制内源抑制内源性半胱氨酸蛋白酶的活性。性半胱氨酸蛋白酶的活性。Cys C是半胱氨是半胱氨酸蛋白酶抑制剂家族中对组织蛋白酶酸蛋白酶抑制剂家族中对组织蛋白酶B抑制抑制作用最强的抑制物,对木瓜蛋白酶、无花作用最强的抑制物,对木瓜蛋白酶、无花果蛋白酶、组织蛋白酶果蛋白酶、组织蛋白酶H及及L也有抑制作用。也有抑制作用。有研究表明:有研究表明:Cys
17、-C有抗病毒和原虫有抗病毒和原虫 感染的功能。感染的功能。26Cys C的生理作用(的生理作用(2)Cys-C可影响中性粒细胞迁移,对细胞内蛋可影响中性粒细胞迁移,对细胞内蛋白质的转换、骨胶原的降解、蛋白质前体白质的转换、骨胶原的降解、蛋白质前体的分离有重要作用。的分离有重要作用。Cys-C还可参与肿瘤的侵袭和转换,参与炎还可参与肿瘤的侵袭和转换,参与炎症过程,以及一些神经性疾病。症过程,以及一些神经性疾病。所以在疾病中,所以在疾病中,主要应考虑主要应考虑Cys-C与与 其抑制物是否处于平衡状态,一旦失其抑制物是否处于平衡状态,一旦失 衡将衡将 造成一些病理损伤。造成一些病理损伤。27Cys
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