临床标本检验课件.ppt
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- 临床 标本 检验 课件
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1、临床标本检验临床标本检验基本要求基本要求l认真核对:认真核对:l了解诊断:了解诊断:l联系临床:联系临床:2020/11/32正确采集和处理标本正确采集和处理标本l无菌操作:对无菌或有菌标本不同处理无菌操作:对无菌或有菌标本不同处理l盛放容器:无菌容器盛放容器:无菌容器l采集时间、部位:采集时间、部位:l送检时间、方法:及时送检、低温或保温保存送检时间、方法:及时送检、低温或保温保存l安全防护:安全防护:l及时检验和报告:及时检验和报告:2020/11/33选择合适的培基养和培养方法选择合适的培基养和培养方法增菌增菌血平板血平板SSSSMAC/MAC/EMBEMB巧克力巧克力培养基培养基SNA
2、SNANYENYESASA备注备注血液血液骨髓骨髓+可同时做厌氧、需氧培可同时做厌氧、需氧培养,做菌计养,做菌计尿液尿液+做菌计、需要时做厌氧做菌计、需要时做厌氧粪粪/肛拭肛拭+弧菌培养选用碱性蛋白弧菌培养选用碱性蛋白胨水和胨水和TCBSTCBS培养基培养基痰痰/咽拭咽拭+直接涂片镜检直接涂片镜检脓液脓液分泌物分泌物+直接涂片镜检、可同时直接涂片镜检、可同时做厌氧、需氧培养做厌氧、需氧培养 生殖道生殖道标本标本+可直接涂片镜检可直接涂片镜检眼耳口鼻眼耳口鼻标本标本+直接涂片镜检直接涂片镜检体液体液+直接涂片镜检,可同时直接涂片镜检,可同时做厌氧、需氧培养做厌氧、需氧培养 2020/11/34血
3、液和骨髓血液和骨髓l采血时间与次数:采集血培养都应该在使采血时间与次数:采集血培养都应该在使用在使用抗生素之前进行;对间歇性寒战,用在使用抗生素之前进行;对间歇性寒战,应该估计寒战或体温高峰时间。应该估计寒战或体温高峰时间。l采血部位:肘静脉或肘动脉采血部位:肘静脉或肘动脉l骨髓采集:骨髓采集:l增菌培养:培养基中加入增菌培养:培养基中加入SPSSPS2020/11/35检测方法和报告检测方法和报告l普通培养:分别做厌氧和需氧培养普通培养:分别做厌氧和需氧培养l阳性表现:阳性表现:均匀浑浊,革兰阴性菌均匀浑浊,革兰阴性菌 浑浊有绿色,肺炎链球菌浑浊有绿色,肺炎链球菌 表面有菌膜有绿色荧光,铜绿
4、假单胞菌表面有菌膜有绿色荧光,铜绿假单胞菌 下面沉淀,链球菌下面沉淀,链球菌 溶血,溶血性链球菌溶血,溶血性链球菌 浑浊有胶胨,葡萄球菌浑浊有胶胨,葡萄球菌 灰白色菌膜,枯草芽孢杆菌灰白色菌膜,枯草芽孢杆菌l涂片革兰染色镜检,直接药敏、分离培养涂片革兰染色镜检,直接药敏、分离培养l报告临床报告临床l阴性结果阴性结果7 7天报告天报告 2020/11/36检测方法和报告检测方法和报告l特殊培养特殊培养 脑膜炎奈瑟菌培养:脑膜炎奈瑟菌培养:3737加加5-10%CO5-10%CO2 2 伤寒或其它沙门菌:接种葡萄糖胆汁肉汤或胆盐肉汤伤寒或其它沙门菌:接种葡萄糖胆汁肉汤或胆盐肉汤 草绿色链球菌:胰酶
5、酪蛋白大豆肉汤,同时做需要、草绿色链球菌:胰酶酪蛋白大豆肉汤,同时做需要、COCO2 2和厌氧培养和厌氧培养 L L型细菌:高渗液体培养基,型细菌:高渗液体培养基,“油煎蛋油煎蛋”菌落菌落 厌氧培养:厌氧培养:真菌培养:真菌培养:2020/11/37临床意义临床意义l确诊菌血症和败血症确诊菌血症和败血症l金黄色葡萄球菌见疖、痈、脓肿引起的败血症金黄色葡萄球菌见疖、痈、脓肿引起的败血症l革兰阴性菌见尿路、胆道、胃肠道引起的败血症革兰阴性菌见尿路、胆道、胃肠道引起的败血症l草绿色链球菌引起亚急性心内膜炎草绿色链球菌引起亚急性心内膜炎l铜绿、金葡引起烧伤后败血症铜绿、金葡引起烧伤后败血症2020/1
6、1/38尿液的处理尿液的处理l标本采集:标本采集:一般培养采用清洁中段尿。采样前,用肥皂一般培养采用清洁中段尿。采样前,用肥皂水或清水清洗外阴,排出尿液前段需丢弃,中水或清水清洗外阴,排出尿液前段需丢弃,中段和后段尿液段和后段尿液10-20ml10-20ml盛装于无菌的容器。盛装于无菌的容器。肾盂尿采集法肾盂尿采集法 膀胱穿刺尿采集法膀胱穿刺尿采集法 结核菌涂片或培养用结核菌涂片或培养用2424小时尿取沉淀。小时尿取沉淀。2020/11/39检测方法和报告检测方法和报告l直接镜检直接镜检 -离心沉淀涂片革兰染色离心沉淀涂片革兰染色 -淋球菌镜检淋球菌镜检l假丝酵母镜检假丝酵母镜检l结核分枝杆菌
7、镜检结核分枝杆菌镜检2020/11/310检测方法和报告检测方法和报告l分离培养分离培养 -普通培养:普通培养:-淋球菌培养:淋球菌培养:-厌氧菌培养:厌氧菌培养:-真菌培养:真菌培养:2020/11/311检测方法和报告检测方法和报告l菌落计数菌落计数 倾注平皿法:倾注平皿法:尿液稀释成尿液稀释成1 1:1010、1 1:100100、1 1:10001000,取此液取此液1ml1ml放入直径放入直径9cm9cm灭菌平皿内,同时加入已熔化并灭菌平皿内,同时加入已熔化并冷至冷至5050的培养基与尿混合,待凝固后置的培养基与尿混合,待凝固后置35 35 培养。培养。定量接种环涂抹法:使用定量接种
8、环涂抹法:使用 1ul1ul的定量接种环沾满尿液,的定量接种环沾满尿液,在分离培养基分离培养。生长的菌落数乘以在分离培养基分离培养。生长的菌落数乘以 10001000,等于,等于每毫升尿中的菌数。每毫升尿中的菌数。l 报告:报告:革兰阴性菌革兰阴性菌10105 5cfu/mlcfu/ml,革兰阳性菌革兰阳性菌10104 4cfu/mlcfu/ml有临床意义有临床意义 阴性报告为阴性报告为“48h48h培养无菌生长培养无菌生长”2020/11/312l患者徐某,男,患者徐某,男,2626岁,因烧伤入住岁,因烧伤入住某院烧伤病房等待植皮手术。期间某院烧伤病房等待植皮手术。期间,患者烧伤创面有蓝绿色
9、有甜腥气,患者烧伤创面有蓝绿色有甜腥气味的粘稠分泌物渗出,随后患者出味的粘稠分泌物渗出,随后患者出现现4141高热、呼吸急促、血压下降高热、呼吸急促、血压下降、昏迷。临床诊断为败血症休克,、昏迷。临床诊断为败血症休克,立即给予广谱抗生素抗菌治疗与对立即给予广谱抗生素抗菌治疗与对症支持治疗,同时采集血标本送检症支持治疗,同时采集血标本送检验科微生物室检验并要求做药敏试验科微生物室检验并要求做药敏试验。请问,该患者可能为哪种细菌验。请问,该患者可能为哪种细菌感染?血培养将会出现什么现象?感染?血培养将会出现什么现象?该如何进一步鉴定?该如何进一步鉴定?2020/11/313l患者周某,男,患者周某
10、,男,6565岁,结肠癌术后化疗三日后出现高岁,结肠癌术后化疗三日后出现高热,常规应用抗生素治疗无效,遂临床采集血标本送热,常规应用抗生素治疗无效,遂临床采集血标本送检验科微生物室,要求血培养鉴定病原菌及药敏试验检验科微生物室,要求血培养鉴定病原菌及药敏试验。微生物室工作人员血标本经。微生物室工作人员血标本经1818h h培养后,出现均匀培养后,出现均匀混浊,酚红指示剂变色。请问该病人可能是什么细菌混浊,酚红指示剂变色。请问该病人可能是什么细菌感染?如何进一步鉴定?感染?如何进一步鉴定?2020/11/314l患者李某,女,患者李某,女,5757岁,术后留置导尿岁,术后留置导尿3 3d d后出
11、后出现发热(现发热(3838以上)、尿痛、排尿困难,查以上)、尿痛、排尿困难,查体有下腹触痛与肾区叩痛,临床初步判断为体有下腹触痛与肾区叩痛,临床初步判断为肾盂肾炎,病房要求检验科派人协助采集尿肾盂肾炎,病房要求检验科派人协助采集尿液标本送检。请问如何正确采集标本,并如液标本送检。请问如何正确采集标本,并如何进行检验?何进行检验?2020/11/315粪便标本粪便标本l自然排便法:挑取脓血、黏液的粪便自然排便法:挑取脓血、黏液的粪便2-3g2-3g于无于无菌的纸盒中,或放置于增菌液中送检菌的纸盒中,或放置于增菌液中送检l直肠肛拭子法:直接送检或放入运送培养基中直肠肛拭子法:直接送检或放入运送培
12、养基中送检送检2020/11/316检测方法检测方法直接镜检:针对特殊细菌,如霍乱弧菌、结核、真菌等直接镜检:针对特殊细菌,如霍乱弧菌、结核、真菌等 -霍乱弧菌:鱼群样排列的革兰阴性菌,动力阳性霍乱弧菌:鱼群样排列的革兰阴性菌,动力阳性 -葡萄球菌:金葡菌引起的假膜性肠炎葡萄球菌:金葡菌引起的假膜性肠炎 -结核分枝杆菌:结核分枝杆菌:-艰难梭菌:革兰阳性粗大杆菌,无荚膜、有芽孢艰难梭菌:革兰阳性粗大杆菌,无荚膜、有芽孢 -空肠弯曲杆菌:细小、弧形、空肠弯曲杆菌:细小、弧形、S S形或螺旋形革兰阴性形或螺旋形革兰阴性2020/11/317检测方法检测方法 分离培养分离培养 -沙门菌及志贺菌:增菌
13、培养或直接接种于沙门菌及志贺菌:增菌培养或直接接种于SSSS和和MACMAC、CBCB,3718-24h3718-24h培养,挑取可疑菌落接种培养,挑取可疑菌落接种KIA/MIUKIA/MIU,进一步做生化和血清凝集试验进一步做生化和血清凝集试验 -霍乱弧菌:碱性蛋白胨水霍乱弧菌:碱性蛋白胨水3737增菌增菌6h6h,挑取菌膜接,挑取菌膜接种种TCBSTCBS平板,平板,3737培养培养16-20h16-20h,挑选可疑菌落氧化,挑选可疑菌落氧化酶阳性,多价酶阳性,多价“O”O”诊断血清凝集试验诊断血清凝集试验 -大肠杆菌培养:挑取脓血、黏液的粪便接种于大肠杆菌培养:挑取脓血、黏液的粪便接种于
14、MACMAC或或EMBEMB,3737培养培养18-24h18-24h,挑取可疑菌落接种,挑取可疑菌落接种KIA/MIUKIA/MIU,进一步做生化和血清凝集试验进一步做生化和血清凝集试验 -金黄色葡萄球菌培养:接种于高盐甘露醇琼脂,金黄色葡萄球菌培养:接种于高盐甘露醇琼脂,3737培养培养18-2418-24小时小时 -副溶血弧菌培养:增菌后接种与弧菌选择性培养基副溶血弧菌培养:增菌后接种与弧菌选择性培养基与与SSSS培养基。培养基。2020/11/318检测方法检测方法l分离培养分离培养 -小肠耶尔森培养:接种小肠耶尔森培养:接种NYENYE、MACMAC及及SSSS,22-2522-25
15、及及3737培养,挑取可疑菌落接种培养,挑取可疑菌落接种KIA/MIUKIA/MIU,进一步做生化,进一步做生化鉴定。鉴定。-空肠弯曲杆菌:接种弯曲菌培养基,空肠弯曲杆菌:接种弯曲菌培养基,4343微需氧培养微需氧培养24-72h24-72h -艰难梭菌培养:取黄色伪膜状粪便,接种于艰难梭菌培养:取黄色伪膜状粪便,接种于CCFACCFA平板,平板,3737厌氧培养厌氧培养48h48h,挑取可疑菌落检测毒素,挑取可疑菌落检测毒素 2020/11/319临床意义临床意义l检测引起腹泻、食物中毒的肠道菌致病菌检测引起腹泻、食物中毒的肠道菌致病菌l检测肠道正常菌群,预防菌群失调检测肠道正常菌群,预防菌
16、群失调2020/11/320l患者杨某,女,患者杨某,女,2424岁,岁,2 2日前到某海滨城市旅日前到某海滨城市旅游,并在街边小店食入大量海鲜。回家后出现游,并在街边小店食入大量海鲜。回家后出现腹痛、腹泻、呕吐、低热到医院就诊。临床采腹痛、腹泻、呕吐、低热到医院就诊。临床采集粪便标本送检验科微生物室。标本性状为糊集粪便标本送检验科微生物室。标本性状为糊状,常规接种状,常规接种SSSS平板与平板与CBCB平板,培养平板,培养1818h h后发后发现现SSSS平板上除乳糖阳性菌落外有扁平、无色透平板上除乳糖阳性菌落外有扁平、无色透明、蜡滴状小菌落生长,明、蜡滴状小菌落生长,CBCB平板上未见乳糖
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