临床常用免疫学检查0课件.ppt
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- 临床 常用 免疫学 检查 课件
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1、临床常用免疫学检查临床常用免疫学检查石石 亮亮1概述:概述:免疫学免疫学(Immunology)是研究免疫系统的结构与功能,是研究免疫系统的结构与功能,并通过对其在免疫应答过程中所产生的免疫保护与免疫并通过对其在免疫应答过程中所产生的免疫保护与免疫损伤机制的研究,探讨有效的免疫措施,实现以防病、损伤机制的研究,探讨有效的免疫措施,实现以防病、治病为目的的一门现代医学学科。治病为目的的一门现代医学学科。临床免疫学检查临床免疫学检查常用于感染性疾病、自身免疫性疾病、常用于感染性疾病、自身免疫性疾病、变态反应性疾病、免疫缺陷病、肿瘤等疾病的诊断与疗变态反应性疾病、免疫缺陷病、肿瘤等疾病的诊断与疗效监
2、测。效监测。2一、免疫球蛋白一、免疫球蛋白(IgIg)的检测的检测包括:包括:IgGIgG、A A、M M、D D、E E IgIg的产生、结构与功能的产生、结构与功能 IgIg通常是指一组具有通常是指一组具有抗体活性抗体活性或或化学结构与抗体相似化学结构与抗体相似的球蛋白,由的球蛋白,由浆细胞合成和分泌,有特异性识别浆细胞合成和分泌,有特异性识别抗原的功能,但必须与抗原结合形抗原的功能,但必须与抗原结合形成免疫复合物后才能启动效应功能。成免疫复合物后才能启动效应功能。3(一)(一)IgGIgG 含量含量:7.0-16.6g/L,7.0-16.6g/L,占占70-8070-80(含量最多含量最
3、多)特点特点:再次免疫应答抗体再次免疫应答抗体、具抗菌、抗病毒活性,、具抗菌、抗病毒活性,能通过胎盘能通过胎盘 意义意义:感染(病毒、细菌)多克隆:感染(病毒、细菌)多克隆 免疫增殖病、免疫增殖病、MMMM单克隆单克隆 减低:免疫缺陷、重链病、轻链病、肾病减低:免疫缺陷、重链病、轻链病、肾病4(二)(二)IgAIgA 含量含量:0.7-3.5g/L0.7-3.5g/L,占,占10-1510-15 特点特点:分泌型(:分泌型(SIgA)SIgA),局部粘膜抗感染功能局部粘膜抗感染功能 可存在于各种分泌物中可存在于各种分泌物中(初乳)血清型(血清型(为单体,免疫作用弱)为单体,免疫作用弱)意义意义
4、:IgAIgA型型MMMM,SLESLE,类风关等,类风关等 反复呼吸道感染,非反复呼吸道感染,非IgAIgA免疫增殖病免疫增殖病5(三)三)IgMIgM 含量含量:0.5-2.6g/L,0.5-2.6g/L,占占5-105-10 特点特点:为五聚体,为五聚体,分子量最大的分子量最大的IgIg 如天然凝集素抗如天然凝集素抗A A、抗、抗B B 意义意义:早期抗体,出现早早期抗体,出现早,消失快。,消失快。6(四)(四)IgDIgD、IgEIgE IgD:IgD:含量低、作用不很明确含量低、作用不很明确 测定较难,测定较难,ELISAELISA法测定法测定 IgEIgE:含量最少,:含量最少,E
5、LISAELISA法测定为法测定为0.1-0.9mg/L0.1-0.9mg/L 与变态反应、寄生虫病、皮肤过敏有关与变态反应、寄生虫病、皮肤过敏有关 7二、补体(二、补体(ComplementComplement,C C)的测定的测定 补体是存在血清及组织液中的一组补体是存在血清及组织液中的一组具有酶原活性具有酶原活性的糖蛋白,的糖蛋白,可溶解细胞,灭活病原体,清除免疫复合物可溶解细胞,灭活病原体,清除免疫复合物1.1.总补体活性总补体活性CH50CH50测定测定(complement hemolysis 50%(complement hemolysis 50%)溶血素(抗体)致敏绵羊红细胞溶
6、血素(抗体)致敏绵羊红细胞 补体补体 溶血溶血 溶血程度与补体正相关,为溶血程度与补体正相关,为S S形曲线。形曲线。正常参考值:正常参考值:50-100kU/L50-100kU/L意义:意义:减低常见于各种免疫复合物性疾病减低常见于各种免疫复合物性疾病溶血程度与补体含量的关系溶血程度与补体含量的关系82.2.补体补体C3C3与与C4C4测定测定 补体系统有补体系统有C1C1、2 2、C9C9及其它成分组成及其它成分组成 C3C3含量最高含量最高,是传统和旁路途径激活的关键,是传统和旁路途径激活的关键 含量含量:C3:0.8-1.5g/L:C3:0.8-1.5g/L C4:0.2-0.6g/L
7、 C4:0.2-0.6g/L 补体测定的意义:补体测定的意义:炎症、肿瘤等:炎症、肿瘤等 :肾炎、自身免疫病等:肾炎、自身免疫病等9三、细胞免疫的测定三、细胞免疫的测定 T T细胞亚群的检测细胞亚群的检测 1.E1.E玫瑰花结形成试验(玫瑰花结形成试验(ERFT)ERFT):检测:检测T T细胞数量细胞数量 原理:原理:T T细胞表面具细胞表面具SRBCSRBC受体受体 正常正常 58-7258-72左右左右 意义:意义:见于自身免疫性疾病及器官移植排斥反应等见于自身免疫性疾病及器官移植排斥反应等 见于免疫缺陷性疾病等。见于免疫缺陷性疾病等。2.2.淋巴细胞转化试验(淋巴细胞转化试验(LCT)
8、:LCT):检测检测T T细胞的生物学功能细胞的生物学功能 原理:淋原理:淋T T PHA PHA 淋母细胞淋母细胞 意义:意义:转化率降低,见于细胞免疫缺陷或细胞免疫功能低下患者。转化率降低,见于细胞免疫缺陷或细胞免疫功能低下患者。10 淋巴细胞亚群的分化抗原测定淋巴细胞亚群的分化抗原测定 (cluster differentiation CD)(cluster differentiation CD)T T细胞:细胞:CDCD3 3-总总T T标志标志 CDCD4 4-T-TH H标志标志(help T cell)(help T cell)CD CD8 8-Ts-Ts标志标志(suppres
9、sor T cell)(suppressor T cell)CDCD4 4/CD/CD8:8:T TH H/Ts/Ts,降低常见于,降低常见于AIDSAIDS。B B细胞:细胞:CDCD1919、CDCD2020、CDCD2222等等三、细胞免疫的测定三、细胞免疫的测定11 细胞因子细胞因子(Cytokine,CK)(Cytokine,CK)测定测定 活化的免疫细胞分泌产生的免疫调节性小分子多肽。活化的免疫细胞分泌产生的免疫调节性小分子多肽。1.1.白介素白介素2 2(IL-2)IL-2)和和IL-2RIL-2R:白细胞介素白细胞介素(IL)多种细胞多种细胞产生的能介导免疫细胞间的相互作用。产
10、生的能介导免疫细胞间的相互作用。IL-2IL-2是由活化是由活化T T细胞产生,细胞产生,具有多向性作用的细胞因子具有多向性作用的细胞因子 2.2.肿瘤坏死因子(肿瘤坏死因子(TNF)TNF):引起肿瘤组织出血、坏死和杀引起肿瘤组织出血、坏死和杀伤作用。伤作用。3.3.干扰素(干扰素(IFN)IFN):抗病毒、抗肿瘤作用抗病毒、抗肿瘤作用三、细胞免疫的测定三、细胞免疫的测定12四、肿瘤标志物检测四、肿瘤标志物检测 肿瘤标志物肿瘤标志物(tumor marker)tumor marker)是指在肿瘤发生和增是指在肿瘤发生和增殖过程中,由肿瘤细胞本身合成、释放或者是由机体对殖过程中,由肿瘤细胞本身
11、合成、释放或者是由机体对肿瘤细胞反应而产生的一类物质。包括蛋白质类、糖类肿瘤细胞反应而产生的一类物质。包括蛋白质类、糖类和酶类肿瘤标志物。和酶类肿瘤标志物。肿瘤标志物检测的意义是:肿瘤标志物检测的意义是:高危人群的筛查、辅助高危人群的筛查、辅助诊断、观察疗效和肿瘤复发检测以及判断预后。诊断、观察疗效和肿瘤复发检测以及判断预后。13肿瘤标志物介绍以下肿瘤标志物介绍以下6种种甲胎蛋白(甲胎蛋白(AFP)癌胚抗原(癌胚抗原(CEA)前列腺特异抗原(前列腺特异抗原(PSA)糖链抗原糖链抗原199(CA199)癌抗原癌抗原125(CA125)癌抗原癌抗原15-3(CA15-3)141.1.甲胎蛋白(甲胎
12、蛋白(-fetoprotein,AFP)AFP是胎儿发育早期合成的一种糖蛋白是胎儿发育早期合成的一种糖蛋白(1球蛋白球蛋白),分子量,分子量70kD,胎儿出生后不久即,胎儿出生后不久即逐渐消失。逐渐消失。参考值参考值:血清血清25g/L300g/L,但有部分患者,但有部分患者AFP始终始终不升高;不升高;病毒性肝炎与肝硬化患者,血清中病毒性肝炎与肝硬化患者,血清中AFP可有不同程度可有不同程度的增高,但一般在的增高,但一般在300g/L以下;以下;生殖系统肿瘤和胚胎性肿瘤,如睾丸癌、畸胎瘤等升生殖系统肿瘤和胚胎性肿瘤,如睾丸癌、畸胎瘤等升高;高;妊娠三个月后,血清妊娠三个月后,血清AFP含量开
13、始升高,分娩后三周含量开始升高,分娩后三周恢复正常。若孕妇血清中恢复正常。若孕妇血清中AFP异常升高,应考虑有胎儿异常升高,应考虑有胎儿神经管缺损畸形的可能性。神经管缺损畸形的可能性。16 参考值参考值:血清血清5.0g/L5.0g/L 临床意义临床意义:结肠癌结肠癌、直肠癌直肠癌、胰腺癌、肺癌、乳腺癌、胃癌,转移性、胰腺癌、肺癌、乳腺癌、胃癌,转移性 恶性肿瘤也有不同程度的阳性率;在恶性肿瘤的随访,恶性肿瘤也有不同程度的阳性率;在恶性肿瘤的随访,病情监测,疗效评价等方面有重要价值。病情监测,疗效评价等方面有重要价值。肠道息肉、憩室炎、结肠炎、肝硬化、肝炎、胰腺炎和肺肠道息肉、憩室炎、结肠炎、
14、肝硬化、肝炎、胰腺炎和肺 部疾病也可有不同程度的升高;部疾病也可有不同程度的升高;吸烟者中有部分人吸烟者中有部分人CEACEA5g/L5g/L。2.2.癌胚抗原癌胚抗原(carcino-embryonic antigencarcino-embryonic antigen,CEACEA)173.3.前列腺特异抗原(前列腺特异抗原(PSAPSA)PSAPSA是一种由前列腺上皮细胞分泌的单链糖蛋白。在血清是一种由前列腺上皮细胞分泌的单链糖蛋白。在血清中中PSAPSA以两种生化形式存在:以两种生化形式存在:一部分一部分(20%)(20%)是以低分子量是以低分子量(33kD)(33kD)的的 游离游离P
15、SAPSA(f-PSAf-PSA)形式存在;)形式存在;大部分大部分(80%)(80%)是以是以PSAPSA和和11抗糜蛋白酶、抗糜蛋白酶、2-2-巨球蛋白等结合的形式存在,巨球蛋白等结合的形式存在,称复合称复合PSA(c-PSA)PSA(c-PSA)。总总PSAPSA(t-PSAt-PSA),包括血清中包括血清中f-PSAf-PSA和和c-PSAc-PSA。参考值:血清参考值:血清 t-PSA 4.0 g/L,f-PSA 0.2518PSA 临床意义临床意义血清血清PSAPSA升高升高 前列腺癌患者前列腺癌患者升高,但大约升高,但大约25%25%患者,其患者,其PSAPSA水平正常;而水平正
16、常;而大约有大约有50%50%的良性前列腺疾病患者的良性前列腺疾病患者PSAPSA水平增高。为增加水平增高。为增加PSAPSA对对前列腺癌检测的敏感性和特异性,可使用前列腺癌检测的敏感性和特异性,可使用PSAPSA年龄特异性参考年龄特异性参考范围,范围,PSAPSA密度、密度、PSAPSA速率、速率、f-PSA/t-PSAf-PSA/t-PSA比值等;比值等;前列腺肥大,前列腺炎和泌尿生殖系统的疾病,也可见血前列腺肥大,前列腺炎和泌尿生殖系统的疾病,也可见血清清PSAPSA水平升高,故当水平升高,故当PSAPSA在在4.0g/L4.0g/L10.0g/L10.0g/L的灰区时,的灰区时,须进行
17、须进行f-PSAf-PSA和和 f-PSA/t-PSAf-PSA/t-PSA比值的测定。比值的测定。【注意事项注意事项】在采集病人的血标本前进行直肠指诊、前列腺按摩,在采集病人的血标本前进行直肠指诊、前列腺按摩,导尿等,将会导致血清导尿等,将会导致血清PSAPSA升高,应注意避免。升高,应注意避免。19(二二)、糖脂类肿瘤标志物检测:、糖脂类肿瘤标志物检测:(1 1)糖链抗原)糖链抗原19-9(CA19-9)(3 3)糖链抗原)糖链抗原15-3(CA 15-3)(2 2)糖链抗原糖链抗原125 (CA 125)20(1 1)糖链抗原)糖链抗原19-9(CA19-9)CA19-9CA19-9是一
18、种与胰腺癌,胆囊癌,是一种与胰腺癌,胆囊癌,结肠癌和胃癌相关的肿瘤标志物,又结肠癌和胃癌相关的肿瘤标志物,又称胃肠癌相关抗原。称胃肠癌相关抗原。参考值:血清参考值:血清CA199 37 kU/LCA199 37 kU/L 胰腺癌胰腺癌首选指标首选指标,血清,血清CA19-9CA19-9水平明显升高,尤其是胰腺水平明显升高,尤其是胰腺 癌晚期病人,血清癌晚期病人,血清CA 19-9CA 19-9浓度可达浓度可达4040万万kU/LkU/L,是重要的辅助诊,是重要的辅助诊 断指标;断指标;胆囊癌、胆管壶腹癌、胃癌、结肠癌时,血清胆囊癌、胆管壶腹癌、胃癌、结肠癌时,血清CA19-9CA19-9水平明
19、显升高。水平明显升高。胆囊癌、胆管壶腹癌阳性率约为胆囊癌、胆管壶腹癌阳性率约为85%85%,胃癌、结肠癌阳性率约为,胃癌、结肠癌阳性率约为40%40%;急性胰腺炎,胆囊炎,胆汁淤积性胆管炎,肝硬化,肝炎等急性胰腺炎,胆囊炎,胆汁淤积性胆管炎,肝硬化,肝炎等 疾病,疾病,CA 19-9CA 19-9也有不同程度的升高,注意与恶性肿瘤的鉴别。也有不同程度的升高,注意与恶性肿瘤的鉴别。21 (2 2)糖链抗原糖链抗原125 (CA 125)CA125CA125是一种糖蛋白性肿瘤相关抗原,存在于卵是一种糖蛋白性肿瘤相关抗原,存在于卵巢肿瘤的上皮细胞内,对诊断巢肿瘤的上皮细胞内,对诊断卵巢癌卵巢癌有较大
20、临床有较大临床价值。价值。参考值参考值 :血清:血清CA 125 35kU/LCA 125 35kU/L 卵巢癌卵巢癌,阳性率可达阳性率可达5090%。手术和化疗有效者。手术和化疗有效者CA 125CA 125水平很快水平很快 下降,若有复发,下降,若有复发,CA 125CA 125升高可先于临床症状出现之前。升高可先于临床症状出现之前。其他恶性肿瘤,如乳腺癌、胰腺癌、胃癌其他恶性肿瘤,如乳腺癌、胰腺癌、胃癌47%47%、肺癌、结肠直肠癌、肺癌、结肠直肠癌、其他妇科肿瘤等也有一定的阳性反应。其他妇科肿瘤等也有一定的阳性反应。非恶性肿瘤,如子宫内膜异位症,盆腔炎,卵巢囊肿,胰腺炎,肝炎,非恶性肿
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