临床检验学基础教师熊立凡概论课件.pptx

1、临床检验学基础第 讲授课教师：熊立凡羊水检验羊水检验羊水检验概念羊水检验概念羊水羊水（amniotic fluidamniotic fluid）妊娠时羊膜腔中液体妊娠时羊膜腔中液体来源来源 妊娠早期：母体血浆经胎膜透析妊娠早期：母体血浆经胎膜透析 胎儿脐带、胎盘表面羊膜及胎儿脐带、胎盘表面羊膜及 未角化胎儿皮肤产生透析液未角化胎儿皮肤产生透析液 妊娠中晚期：胎尿（主要来源）妊娠中晚期：胎尿（主要来源）动态平衡动态平衡 胎儿与母体之间胎儿与母体之间 l l适应证适应证高危妊娠高危妊娠有流产、早产、死胎史者有流产、早产、死胎史者疑胎儿遗传性疾病者疑胎儿遗传性疾病者亲代有代谢性缺陷病者亲代有代谢性缺

2、陷病者曾分娩过染色体异常婴儿者曾分娩过染色体异常婴儿者高龄孕妇高龄孕妇确定性连锁遗传病携带者胎儿性别者确定性连锁遗传病携带者胎儿性别者疑母儿血型不合者疑母儿血型不合者妊娠早期受大剂量电离辐射者妊娠早期受大剂量电离辐射者曾患严重病毒感染性疾病者曾患严重病毒感染性疾病者检查宫内胎儿有无感染者检查宫内胎儿有无感染者l l标本采集和理学检验标本采集和理学检验标本采集标本采集羊水标本由妇产科医师采集羊水标本由妇产科医师采集标本项目标本项目标本要求标本要求妊娠妊娠1620周周诊断胎儿遗传性疾病或性基因诊断胎儿遗传性疾病或性基因羊水羊水2030ml妊娠晚期妊娠晚期判断胎儿成熟度及疑有母婴血判断胎儿成熟度及疑

3、有母婴血型不合型不合羊水羊水1020ml标本送检标本送检立即，或立即，或4冰箱保存，小于冰箱保存，小于24h标本处理标本处理10002000r/min，离心离心10min后，上清液作生化检查后，上清液作生化检查中期妊娠羊水中期妊娠羊水细胞细胞作染色体核型分析或先天性代作染色体核型分析或先天性代谢缺陷病检查谢缺陷病检查晚期妊娠羊水晚期妊娠羊水沉淀物沉淀物作脂肪细胞及其他有形成份检作脂肪细胞及其他有形成份检查查穿刺时间取决于羊水检查的目的穿刺时间取决于羊水检查的目的(表表)：项目项目病理病理颜色透明度颜色透明度正常：正常：妊娠早期：无妊娠早期：无色透明或淡黄色透明或淡黄色色妊娠晚期：略妊娠晚期：略

4、混浊混浊黄绿色或深绿色：胎儿窘迫，羊黄绿色或深绿色：胎儿窘迫，羊水含胎粪水含胎粪金黄色：母儿血型不合，羊水因金黄色：母儿血型不合，羊水因大量胆红素大量胆红素脓性混浊臭味：脓性混浊臭味：羊膜腔感染羊膜腔感染黄色粘稠：胎盘功能减退、过期黄色粘稠：胎盘功能减退、过期妊娠妊娠比密：足月妊娠比密：足月妊娠1.0071.025酸碱度：酸碱度：7.207.60妊娠后期渗透压：妊娠后期渗透压：230270mmol/kg粘度：粘度：1.751.85表表羊水理学检查羊水理学检查16周：约周：约250ml足月：足月：800ml1200ml羊水过多（羊水过多（polyhydramnios）2000ml：胎儿畸形：胎儿

5、神经管缺陷：胎儿畸形：胎儿神经管缺陷：无脑儿、脑膨出、脊柱裂。消化无脑儿、脑膨出、脊柱裂。消化道畸形：食管或小肠闭锁道畸形：食管或小肠闭锁胎盘脐带病变：胎盘绒毛血管胎盘脐带病变：胎盘绒毛血管瘤、脐带帆状附着瘤、脐带帆状附着孕妇及胎儿其他疾病：糖尿病孕妇及胎儿其他疾病：糖尿病、ABO或或Rh血型不合血型不合多胎妊娠多胎妊娠特发性羊水过多：原因不明，特发性羊水过多：原因不明，孕妇、胎儿及胎盘均无异常孕妇、胎儿及胎盘均无异常2羊水过少（羊水过少（oligohydramnios）妊娠晚期羊水量妊娠晚期羊水量300ml胎儿畸型：胎儿先天肾缺如、胎儿畸型：胎儿先天肾缺如、双肾发育不全、尿道闭锁双肾发育不全

6、、尿道闭锁过期妊娠：胎盘功能减退过期妊娠：胎盘功能减退胎儿宫内发育迟缓胎儿宫内发育迟缓羊水化学检查羊水化学检查水分水分98%99%有机物和无机盐：有机物和无机盐：1%2%有形成分：少量白细胞、胎儿上皮细胞有形成分：少量白细胞、胎儿上皮细胞表表化学检查项目化学检查项目检查项目检查项目妊娠期妊娠期临床意义临床意义电解质电解质（mmol/L）足月妊娠足月妊娠钠钠3441钾钾6.56.7氯氯108110钙钙2.252.5镁镁0.418.82气体气体PO2（mmHg）早期早期PCO23355（4.47.3kPa）后期后期PCO24255（5.67.3kPa）蛋白质蛋白质3640周：达最高周：达最高超过预

7、产期：下降，故可用超过预产期：下降，故可用作诊断过期妊娠的指标。作诊断过期妊娠的指标。为母体血清蛋白的为母体血清蛋白的1/20。60%70%为清蛋白。为清蛋白。增高：前清蛋白来增高：前清蛋白来自胎儿并随胎龄自胎儿并随胎龄的增长而增高。的增长而增高。重症母婴重症母婴Rh血型血型不合、死胎及无不合、死胎及无脑儿时脑儿时检查项目检查项目妊娠期妊娠期临床意义临床意义脂肪脂肪脂肪：脂肪：500mg/L，50%脂肪酸，脂肪酸，磷脂磷脂3045mg/L妊娠后半期：妊娠后半期：胆固醇胆固醇0.522.48mg/L甘油三脂甘油三脂68mol/L胆红素胆红素28周前：多为未结合胆红素周前：多为未结合胆红素随着胎儿

8、肝脏发育随着胎儿肝脏发育成熟未结合胆红成熟未结合胆红素减少而结合胆素减少而结合胆红素增加红素增加葡萄糖葡萄糖2.022.76mmol/L37周后：轻度降低周后：轻度降低来自母体，可以反来自母体，可以反映胎儿肾成熟程映胎儿肾成熟程度度代谢产物代谢产物肌酐、肌酐、尿酸、尿酸、尿素尿素评价胎儿肾成熟度评价胎儿肾成熟度的指标。的指标。检查项目检查项目妊娠期妊娠期临床意义临床意义甲胎蛋白甲胎蛋白1620周：周：40mg/L32周：为周：为25mg/L增高：主要见于开增高：主要见于开放型神经管畸形放型神经管畸形酶：酶：-谷胺酰转移酶、肌酸激酶、胆碱脂酶、碱性磷酸酶、乳酸脱氢酶等。谷胺酰转移酶、肌酸激酶、胆

9、碱脂酶、碱性磷酸酶、乳酸脱氢酶等。酶主要来自破坏的羊水细胞和少量来自胎儿，常用于胎儿遗传性代谢酶主要来自破坏的羊水细胞和少量来自胎儿，常用于胎儿遗传性代谢缺陷病产前诊断缺陷病产前诊断1.激素：激素：2.蛋白激素、前列腺素、甲状腺激素、甾体激素，等蛋白激素、前列腺素、甲状腺激素、甾体激素，等3.来自胎盘及胎儿来自胎盘及胎儿胎儿成熟度检验胎儿成熟度检验目的：决定选择高危妊娠有利分娩时机；目的：决定选择高危妊娠有利分娩时机；降低新生儿死亡率降低新生儿死亡率方法：监测羊水成份变化，评价相关器官方法：监测羊水成份变化，评价相关器官功能状况功能状况胎儿肺成熟度检查胎儿肺成熟度检查羊水泡沫试验羊水泡沫试验（

10、foamstabilitytest或或shaketest）检测原理检测原理羊水中肺泡：羊水中肺泡：表面活性物质和磷脂经振荡后所表面活性物质和磷脂经振荡后所形成的泡沫，在室温下可保持形成的泡沫，在室温下可保持数小时。数小时。检测特点检测特点最常用床边试验，是间接估量羊最常用床边试验，是间接估量羊水磷脂的方法。操作简单、报水磷脂的方法。操作简单、报告迅速告迅速临床应用临床应用阳性：两试管液面均有完整泡沫阳性：两试管液面均有完整泡沫环，表示环，表示L/S2、胎儿肺已成、胎儿肺已成熟。两管均无泡沫环，示胎儿熟。两管均无泡沫环，示胎儿肺未成熟肺未成熟第第1管液面有完整泡沫环，表示管液面有完整泡沫环，表示

11、L/S2薄层色谱法薄层色谱法卵磷脂（卵磷脂（lecithin，L）与鞘磷脂（）与鞘磷脂（sphingomyelin，S）比值测定（）比值测定（L/S）检测原理检测原理肺泡表面活性物质能维持肺泡的稳定性。肺泡表面活性物质能维持肺泡的稳定性。34周前：卵磷脂与鞘磷脂含量接近。周前：卵磷脂与鞘磷脂含量接近。35周后：卵磷脂合成明显加快，周后：卵磷脂合成明显加快，37周时，达高峰。周时，达高峰。求出求出L/S的比值。的比值。检测特点检测特点临床最早评估胎儿肺成熟度状态的实用化学分析方法，临床最早评估胎儿肺成熟度状态的实用化学分析方法，准确性较高，至今仍为参考方法；但费力、耗时准确性较高，至今仍为参考方

12、法；但费力、耗时临床应用临床应用L/S2，提示胎儿肺已成熟。，提示胎儿肺已成熟。L/S1.51.9，为临界值，为临界值，IRDS发生率为发生率为50%。注意：注意：当母体无糖尿病：当母体无糖尿病：L/S2时，对预测无时，对预测无IRDS的可能性为的可能性为95%，表，表明明L/S诊断特异性高；诊断特异性高；L/S2时，对预测发生时，对预测发生IRDS的可能性为的可能性为25%，表，表明明L/S诊断灵敏度很低诊断灵敏度很低当母体有糖尿病：当母体有糖尿病：即使即使L/S2时，仍可发生时，仍可发生IRDS。磷脂酰甘油测定磷脂酰甘油测定（phosphatidylglycerol，PG）检测原检测原理理

13、磷脂酰甘油是肺泡表面活性物质磷磷脂酰甘油是肺泡表面活性物质磷脂成份之一，约占羊水中总磷脂脂成份之一，约占羊水中总磷脂的的10%。妊娠。妊娠35周后羊水中出现周后羊水中出现磷脂酰甘油，含量随妊娠时间而磷脂酰甘油，含量随妊娠时间而增加。增加。检测方法：酶法、快速胶乳凝集试检测方法：酶法、快速胶乳凝集试验测定验测定检测特检测特点点直接检测羊水中卵磷脂和磷脂酰甘直接检测羊水中卵磷脂和磷脂酰甘油；油；灵敏度和特异性高。灵敏度和特异性高。临床应临床应用用PG阳性，提示胎儿肺已成熟，新阳性，提示胎儿肺已成熟，新生儿一般不会发生生儿一般不会发生IRDSPG阴性，即使阴性，即使L/S比值比值2，仍可能，仍可能发

14、生发生IRDS。羊水吸光度测定羊水吸光度测定检测原理检测原理检测特点检测特点羊水磷脂类物羊水磷脂类物质含量与其质含量与其浊度之间呈浊度之间呈正比，磷脂正比，磷脂类物质越多，类物质越多，则吸光度越则吸光度越大。大。间接估量羊水间接估量羊水磷脂，其他磷脂，其他羊水成分浊羊水成分浊度的影响。度的影响。荧光偏振微粘度测量法荧光偏振微粘度测量法（microviscositytestbyfluorescencedepolarizationmethod）检测原理检测原理检测特点检测特点根据较高的表面活性根据较高的表面活性物质可产生较低的物质可产生较低的偏振值的原理，测偏振值的原理，测定羊水肺泡表面活定羊水肺

15、泡表面活性物质。性物质。价廉、准价廉、准确。灵确。灵敏度敏度87%，特异性特异性92%。新生儿特发性呼吸窘迫综合征（新生儿特发性呼吸窘迫综合征（idiopathicrespiratorydistresssyndrome，IRDS）肺泡表面活性物质卵磷脂缺乏，是新生儿肺泡表面活性物质卵磷脂缺乏，是新生儿严重疾病之一。主要见于严重疾病之一。主要见于37周前早产儿、周前早产儿、剖宫产儿、糖尿病产妇或妊娠高血压综合剖宫产儿、糖尿病产妇或妊娠高血压综合征的初生儿征的初生儿胎儿肾发育成熟检测项目胎儿肾发育成熟检测项目检验项目检验项目临床意义临床意义羊水葡萄羊水葡萄糖测定糖测定（amnioticfluidg

16、lucose，AFG）羊水葡萄糖主要来源母体血浆、部分来自羊水葡萄糖主要来源母体血浆、部分来自胎尿。胎尿。0.56mmol/L，提示胎儿肾发育成熟，提示胎儿肾发育成熟0.80mmol/L，提示胎儿肾不成熟，提示胎儿肾不成熟妊娠妊娠24周，周，AFG达峰值约达峰值约2.29mmol/L。当胎儿肾逐渐发育成熟当胎儿肾逐渐发育成熟，肾小管重吸收葡，肾小管重吸收葡萄糖作用增强，胎儿尿排入羊水的葡萄糖萄糖作用增强，胎儿尿排入羊水的葡萄糖减少。减少。随胎龄增加，胎盘通透性降低，母体血浆随胎龄增加，胎盘通透性降低，母体血浆进入羊水的葡萄糖减少，进入羊水的葡萄糖减少，AFG逐步降低。逐步降低。胎儿肝成熟度检测

17、项目胎儿肝成熟度检测项目检测原理检测原理临床意义临床意义用分光光度用分光光度计测定羊计测定羊水中胆红水中胆红素吸光度：素吸光度：羊水胆红羊水胆红素浓度与素浓度与胎儿肝脏胎儿肝脏酶系统发酶系统发育成熟程育成熟程度有关。度有关。A450A450：0.020.02：胎：胎肝成熟肝成熟0.020.020.040.04：肝成：肝成熟可疑熟可疑 0.040.04：胎肝未：胎肝未成熟。随胎儿肝成熟。随胎儿肝脏酶系统发育成脏酶系统发育成熟，羊水未结合熟，羊水未结合胆红素逐渐减少胆红素逐渐减少，结合胆红素逐，结合胆红素逐渐增多。渐增多。胎儿皮肤成熟度检查胎儿皮肤成熟度检查检测原理检测原理临床应用临床应用羊水脂肪

18、细胞百羊水脂肪细胞百分率随胎龄增加分率随胎龄增加而增高。而增高。羊水沉淀物用硫羊水沉淀物用硫酸尼罗蓝水溶液酸尼罗蓝水溶液染色，镜检脂肪染色，镜检脂肪细胞的百分率（细胞的百分率（脂肪细胞染成桔脂肪细胞染成桔黄色、无核，其黄色、无核，其他细胞呈蓝色）他细胞呈蓝色）脂肪细胞百分率：脂肪细胞百分率：20%20%，胎儿皮肤成熟，胎儿皮肤成熟10%10%20%20%，胎儿皮肤成熟可疑，胎儿皮肤成熟可疑10%10%，胎儿皮肤未成熟，胎儿皮肤未成熟脂肪细胞来自胎儿皮脂腺及汗脂肪细胞来自胎儿皮脂腺及汗腺脱落细胞。随胎龄增加，胎腺脱落细胞。随胎龄增加，胎儿皮脂腺逐渐发育成熟，脂肪儿皮脂腺逐渐发育成熟，脂肪细胞出现

19、率增高。细胞出现率增高。1.36mmol/L1.36mmol/L硫酸尼罗蓝，硫酸尼罗蓝，胎儿唾液腺成熟度检查胎儿唾液腺成熟度检查检验原理检验原理临床应用临床应用羊水唾液腺羊水唾液腺型淀粉酶型淀粉酶活性在妊活性在妊娠娠3636周后周后显著增高。显著增高。用用SomogyiSomogyi法检测法检测羊水淀粉酶羊水淀粉酶120 U/L120 U/L为成熟。为成熟。羊水胰腺型同功酶活性在妊娠过羊水胰腺型同功酶活性在妊娠过程中无明显变化。程中无明显变化。妊娠妊娠2828周左右，羊水唾液腺型淀周左右，羊水唾液腺型淀粉酶活性快速增高。妊娠粉酶活性快速增高。妊娠3636周后周后，其活性显著上升。，其活性显著上

20、升。先天性遗传性疾病产前诊断先天性遗传性疾病产前诊断产前诊断（产前诊断（prenataldiagnosis）出生前诊断（出生前诊断（antenataldiagnosis）宫内诊断宫内诊断(intrauterinediagnosis)检查目的检查目的判断胎儿有无先天性遗传性疾病，判断胎儿有无先天性遗传性疾病，以确定是否进行选择性流产以确定是否进行选择性流产检查方法检查方法影像学、生物化学、细胞遗传学、影像学、生物化学、细胞遗传学、分子生物学等技术分子生物学等技术产前诊断疾病种类：产前诊断疾病种类：染色体病染色体病染色体异常染色体异常染色体疾病染色体疾病常染色常染色体数目体数目异常异常常染色体多常

21、染色体多1 1条条染色体称为三染色体称为三体体先天愚型（先天愚型（2121三体综三体综合征）合征）常染色常染色体结构体结构异常异常染色体缺失、染色体缺失、重复、倒位及重复、倒位及易位易位性染色性染色体数目体数目异常异常性染色体数异性染色体数异常常先天性卵巢发育不全症先天性卵巢发育不全症（4545，XOXO）产前诊断疾病种类：产前诊断疾病种类：染色体病染色体病染色体异常染色体异常染色体疾病染色体疾病单基因遗单基因遗传病传病仅有仅有1对基因发生对基因发生突变或异常，突变或异常，多为酶缺陷引多为酶缺陷引起代谢紊乱、起代谢紊乱、代谢中间产物代谢中间产物累积累积用生化方法可诊断用生化方法可诊断300多种

22、多种先天性代谢缺陷病。先天性代谢缺陷病。用羊水细胞诊断用羊水细胞诊断80多种先多种先天性代谢缺陷病。天性代谢缺陷病。多基因遗多基因遗传病传病2对以上基因发生对以上基因发生突变。占产前突变。占产前诊断的诊断的40%50%先天畸形如唇腭裂和畸形先天畸形如唇腭裂和畸形足、脊柱裂、无脑儿、足、脊柱裂、无脑儿、神经管畸形、幽门狭窄；神经管畸形、幽门狭窄；先天性心脏病先天性心脏病先天性髋关节脱位，等先天性髋关节脱位，等染色体核型分析染色体核型分析是产前诊断染色体病主要方法是产前诊断染色体病主要方法染色体细胞制备培养时间：染色体细胞制备培养时间：胎儿羊水细胞胎儿羊水细胞912d绒毛细胞绒毛细胞714d胎儿血

23、细胞胎儿血细胞2448原位杂交技术或引物原位原位杂交技术或引物原位DNA合成合成技术，技术，1h可获染色体核型分析准确可获染色体核型分析准确结果结果先天性遗传性疾病产前诊断先天性遗传性疾病产前诊断性连锁遗传病性连锁遗传病(sex-linkedinheritancedisease)：多为多为X连锁隐性遗传病，临床常见有血友病连锁隐性遗传病，临床常见有血友病甲、血友病乙、甲、血友病乙、G-6-PD缺乏症等。缺乏症等。如：父亲为如：父亲为X连锁隐性基因携带者，母亲为连锁隐性基因携带者，母亲为正常，则男性胎儿正常，女性胎儿全为正常，则男性胎儿正常，女性胎儿全为X连连锁隐性基因携带者锁隐性基因携带者如：

24、母亲为如：母亲为X连锁隐性基因携带者，父亲为连锁隐性基因携带者，父亲为正常，则男性正常胎儿和患儿各占正常，则男性正常胎儿和患儿各占50%，女，女性正常胎儿和基因携带者各性正常胎儿和基因携带者各50%X染色质检查染色质检查（examinationofXchromatin，Barrtest）羊水细胞羊水细胞染色染色硫瑾或甲苯胺蓝硫瑾或甲苯胺蓝可数细胞可数细胞胞核大、核膜完整，染色质胞核大、核膜完整，染色质均匀，结构清晰均匀，结构清晰X染色质染色质（Barr小体）小体）呈深蓝色染色质块，位于可呈深蓝色染色质块，位于可数细胞核膜内缘处。计数数细胞核膜内缘处。计数100个可数细胞核中与核个可数细胞核中与

25、核膜相贴的膜相贴的X染色质，计算染色质，计算百分率。百分率。女胎女胎6%，男胎，男胎5%非可数细非可数细胞胞细胞核固缩，染色较深，结细胞核固缩，染色较深，结构不清构不清Y染色质检查染色质检查（examinationofYchromatin）染色染色法法阿的平荧光染色法阿的平荧光染色法显微显微镜镜检检查查Y染色质呈闪亮荧光弧染色质呈闪亮荧光弧状小体，直径约状小体，直径约0.3m，边缘清晰，荧光亮度强边缘清晰，荧光亮度强于其周边核染色质。计于其周边核染色质。计数数100个核质均匀、核个核质均匀、核膜完整的可数细胞，计膜完整的可数细胞，计算算Y染色体细胞百分率。染色体细胞百分率。男胎男胎5%，女胎，

26、女胎4%性别基因诊断性别基因诊断目的：羊水细胞性别检查复杂，干扰因素多。基目的：羊水细胞性别检查复杂，干扰因素多。基因诊断可提高正确性、可靠性。因诊断可提高正确性、可靠性。性别基因诊断最常用方法性别基因诊断最常用方法Y特异特异DNA探探针针Y染色体特异的染色体特异的SRY基因基因区域（区域（sexdeterminatingregionofYchromosome）聚合聚合酶酶链链反反应应(PCR)目前认为，目前认为，SRY是睾丸决是睾丸决定因子的最佳候选基因定因子的最佳候选基因神经管缺陷产前诊断神经管缺陷产前诊断1甲胎蛋白甲胎蛋白(AFP)测定：神经管缺陷产前诊断最测定：神经管缺陷产前诊断最常用

27、方法常用方法来源来源AFP主要在胎儿肝脏和卵黄囊合成，部份来自胎儿胃主要在胎儿肝脏和卵黄囊合成，部份来自胎儿胃肠道、羊膜及绒毛膜细胞，随胎儿尿液排入羊水肠道、羊膜及绒毛膜细胞，随胎儿尿液排入羊水正常妊娠正常妊娠1620周羊水中达周羊水中达40mg/L2022周逐步下降周逐步下降32周后降至周后降至25mg/L至妊娠足月至妊娠足月无脑儿、脊无脑儿、脊柱裂等开柱裂等开放性神经放性神经管缺陷胎管缺陷胎儿儿胎儿血胎儿血AFP是羊水是羊水AFP的的150200倍。倍。患儿：可使羊水中患儿：可使羊水中AFP含量高于正常妊娠羊水中含量高于正常妊娠羊水中10倍以上。倍以上。母血筛查母血筛查诊断开放性神经管缺陷

28、，准确率诊断开放性神经管缺陷，准确率90%以上以上其他其他AFP增增高疾病高疾病胎儿脑积水、先天肾脏病及糖尿病，先兆子痫等所致胎儿脑积水、先天肾脏病及糖尿病，先兆子痫等所致胎盘功能不足、流产、死胎等胎盘功能不足、流产、死胎等2羊水胆碱酯酶测定羊水胆碱酯酶测定羊水总胆碱酯酶测定羊水总胆碱酯酶测定(total cholinesterase(total cholinesterase，TChE)TChE)正常妊娠正常妊娠妊娠妊娠1212周，羊水周，羊水ChEChE活性明显增高活性明显增高开放性神经开放性神经管缺陷胎儿管缺陷胎儿胎儿脑脊液和血液：直接渗入羊水，羊胎儿脑脊液和血液：直接渗入羊水，羊水水Ch

29、EChE活性明显增高。活性明显增高。羊水真性胆碱酯酶测定羊水真性胆碱酯酶测定(actual cholinesterase(actual cholinesterase，AChE)AChE)检测方法检测方法聚丙烯酰胺凝胶电泳分析。聚丙烯酰胺凝胶电泳分析。筛诊阳性率可达到筛诊阳性率可达到99.5%99.5%活性增高活性增高有助于确诊胎儿开放性神经管畸形。有助于确诊胎儿开放性神经管畸形。其他：严重先天畸形、流产、胎儿脐疝等其他：严重先天畸形、流产、胎儿脐疝等粘多糖沉积病产前诊断粘多糖沉积病产前诊断发病机制发病机制细胞溶酶体酸性水解酶先天性缺陷细胞溶酶体酸性水解酶先天性缺陷临床表现临床表现肝脾肿大、智力

30、障碍、骨骼畸形等肝脾肿大、智力障碍、骨骼畸形等最佳方法最佳方法测定培养羊水细胞内酸性水解酶活性测定培养羊水细胞内酸性水解酶活性常用方法常用方法甲苯胺蓝甲苯胺蓝定性试定性试验验正常妊娠早期：弱阳性正常妊娠早期：弱阳性正常妊娠中、后期：阴性。正常妊娠中、后期：阴性。阳性：提示胎儿患有粘多糖沉积病阳性：提示胎儿患有粘多糖沉积病糖醛酸半糖醛酸半定量试定量试验验肌酐中糖醛酸含量反映酸性粘多糖的多少肌酐中糖醛酸含量反映酸性粘多糖的多少正常妊娠正常妊娠1620周：含量为周：含量为3.37.0mg/mgCr。增高：提示胎儿患粘多糖沉积病增高：提示胎儿患粘多糖沉积病胰腺纤维囊性变产前诊断胰腺纤维囊性变产前诊断-

31、谷氨酰转移酶（谷氨酰转移酶（-GT）测定）测定产前早期诊断胰腺纤维囊性变的最佳指标产前早期诊断胰腺纤维囊性变的最佳指标正常妊娠正常妊娠1415周：为母体血清周：为母体血清10100倍。随倍。随着胎龄增长，着胎龄增长，-GT活性逐渐下降。活性逐渐下降。3040周：为妊娠周：为妊娠15周的周的1/40。胰腺纤维囊性变胰腺纤维囊性变胎儿胎儿妊娠妊娠15周，羊水周，羊水-GT活性明显降低活性明显降低其他疾病其他疾病21三体或三体或18三体综合征畸胎三体综合征畸胎碱性磷酸酶碱性磷酸酶(ALP)测定测定正常妊娠正常妊娠19周左右，周左右，ALP活性最高。活性最高。29周后周后ALP活性稳定在产前水平。活性

32、稳定在产前水平。胎儿胰腺囊性变胎儿胰腺囊性变ALP活性明显降低活性明显降低羊水细胞内酶分析羊水细胞内酶分析先天性代谢缺陷病：系因基因突变导致某先天性代谢缺陷病：系因基因突变导致某种酶的缺失种酶的缺失多数先天性代谢缺陷病：尚无有效的治疗多数先天性代谢缺陷病：尚无有效的治疗方法（除苯丙酮尿症、肝豆状核变性等可方法（除苯丙酮尿症、肝豆状核变性等可通过控制饮食和药物治疗外）通过控制饮食和药物治疗外）分子生物学技术在产前诊断中应用分子生物学技术在产前诊断中应用DNA探针技术：单股探针技术：单股DNA小片段以放射性小片段以放射性同位素、酶、荧光素或化学发光物标记后，同位素、酶、荧光素或化学发光物标记后，同

33、被检同被检DNA中的同源互补系列杂交，从而中的同源互补系列杂交，从而检出所要查明的检出所要查明的DNA（基因）。（基因）。常用检测基因方法常用检测基因方法1核酸分子杂交法核酸分子杂交法点杂交点杂交一般用于多拷贝基因的探测或筛选。如一般用于多拷贝基因的探测或筛选。如Y基因探针胎儿基因探针胎儿性别诊断性别诊断Southern印印迹杂交迹杂交最常用核酸分子杂交法：最常用核酸分子杂交法：（1）限制酶图谱法：用于基因缺失或突变涉及限制位）限制酶图谱法：用于基因缺失或突变涉及限制位点改变的基因诊断。如点改变的基因诊断。如珠蛋白生成障碍性贫血，纤珠蛋白生成障碍性贫血，纤维囊性变等可用限制酶图谱法。维囊性变等

34、可用限制酶图谱法。（2）寡核苷酸直接探测法：用于探测点突变或框架位）寡核苷酸直接探测法：用于探测点突变或框架位移。移。（3）限制内切酶片段长度多态性（）限制内切酶片段长度多态性（restrictionfragmentlengthpolymorphism，RFLP）分析法：）分析法：用于基因突变位点不清，分子病理学改变复杂的遗用于基因突变位点不清，分子病理学改变复杂的遗传病的基因探测。传病的基因探测。2聚合酶链反应聚合酶链反应PCR具有快速、简便、灵敏度和特异性高的特点具有快速、简便、灵敏度和特异性高的特点40写在最后写在最后成功的基础在于好的学习习惯成功的基础在于好的学习习惯The foundation of success lies in good habits谢谢大家荣幸这一路，与你同行ItS An Honor To Walk With You All The Way讲师：XXXXXX XX年XX月XX日