CIK细胞免疫治疗在恶性肿瘤中的应用-课件.ppt

1、CIK细胞免疫治疗在恶性肿瘤中的应用细胞免疫治疗在恶性肿瘤中的应用生物治疗病区2014-3-10汇报内容：汇报内容：CIK免疫细胞的概念及抗肿瘤机制 CIK免疫细胞的制备 CIK细胞免疫治疗在各种恶性肿瘤中的应用 生物治疗病区目前的工作及新技术的应用免疫细胞治疗在肿瘤治疗中的概况免疫细胞治疗在肿瘤治疗中的概况手术放疗化疗免疫生物治疗长期以来，部分从事肿瘤临床治疗的科学家认为免疫治疗是辅助治疗；但随着肿瘤免疫认识的深入，越来越多的资料提示免疫学因素是肿瘤治疗不可或缺的考虑因素宿主免疫系统对肿瘤进展具有调控作用，肿瘤内有效免疫细胞的存在与预后直接关联，然而，多数化疗药对免疫细胞具有剿灭作用，从而限

2、制了免疫细胞对肿瘤的对抗反应。通过激发机体免疫反应的抗肿瘤途径通过激发机体免疫反应的抗肿瘤途径可能更有效与持久可能更有效与持久免疫细胞治疗肿瘤的临床评价免疫细胞治疗肿瘤的临床评价30%550目前临床开展的目前临床开展的免疫细胞免疫细胞种类种类:树突状细胞：树突状细胞：DC细胞细胞 细胞毒性细胞毒性T细胞（细胞（CTL）GDTC细胞（细胞（abT）自然杀伤细胞：自然杀伤细胞：NK细胞细胞 细胞因子诱导的杀伤细胞：细胞因子诱导的杀伤细胞：CIK细胞细胞 自然杀伤样自然杀伤样T细胞细胞:NKT细胞细胞 肿瘤浸润淋巴细胞肿瘤浸润淋巴细胞：TIL细胞细胞 CIK细胞的概念细胞的概念 细胞因子诱导的杀伤细

3、胞（Cytokine induced killer cells），是一种新型的免疫活性细胞，是将人外周血中的单个核细胞在体外用多种细胞因子如IFN-、IL-1、IL-2、anti-CD3单抗共同培养一段时间后获得的一群异质细胞，主要由CD3+CD56+细胞和CD3+CD8+细胞两种细胞群构成，其中CD3+CD56+其主要的效应细胞，具有T淋巴细胞的强大抗肿瘤活性和非主要组织相容性复合体（MHC）限制性的特点，增殖速度快，杀瘤谱广，杀瘤活性高。CIK的免疫表性的免疫表性File:03-zhangbin.062Sample ID:CTL BPatient ID:P541Acquisition Da

4、te:26-Mar-09Quad%GatedUL29.94UR65.35LL2.42LR2.28File:03-zhangbin.062Sample ID:CTL BPatient ID:P541Acquisition Date:26-Mar-09Quad%GatedUL0.09UR67.97LL7.09LR24.85File:03-zhangbin.062Sample ID:CTL BPatient ID:P541Acquisition Date:26-Mar-09Quad%GatedUL0.11UR12.63LL11.88LR75.38File:03-zhangbin.062Sample

5、ID:CTL BPatient ID:P541Acquisition Date:26-Mar-09Quad%GatedUL13.23UR83.10LL1.24LR2.4302004006008001000FSC-Height03-zhangbin.062R1100101102103104CD3 PerCP03-zhangbin.062100101102103104CD3 PerCP03-zhangbin.062100101102103104CD3 PerCP03-zhangbin.062100101102103104CD8 PE03-zhangbin.062express both the T

6、-cell marker CD3 and natural killer cell marker CD56 and non-MHC-restrictedCIK cells have intercellular adhesion molecule-l(ICAM-l).CIKCIK cells possess cytoplasmic granules,which contain the protein perforin(cytolysin).CIK cells are effective against FasL-positive malignant cells and cells with mul

7、tidrug resistance(MDR)CIK cells can themselves secrete many cytokines,such as IL-2,TNF-a,GM-CSF and so on.CIK cells migrated to tumor sites by the 7th hour after injection and remained detectable at these sites for an additional 9 days CIK免疫细胞的抗肿瘤机制免疫细胞的抗肿瘤机制CIK免疫细胞的制备免疫细胞的制备细胞接种数2106/ml,IFN-r 1000u

8、/mlFicoll 分离，回收PBMCIl-2、IL-1a、anti-CD3McAb 各1000u/ml抽血：50ml扩增培养，2天换液，IL-2持续培养收集细胞，回输患者体内3d抽血：50ml1d2d14d培养扩增前后淋巴细胞总数及比例变化培养扩增前后淋巴细胞总数及比例变化CIK细胞免疫治疗联合化疗的临床路径细胞免疫治疗联合化疗的临床路径化疗开始化疗开始 -1 1 2 3 4 5 12 13 14 15 20 21 22（天）（天）化疗前1-3天抽血50ml12-15天内回输CIK细胞化疗结束化疗结束第二次化疗第二次化疗抽血培养第2疗程CIKIL-2（100-200万万U）皮下注射）皮下注射

9、或静滴或静滴7-10天天备注：备注：1、必须于化疗开始前抽血；2、抽血前1周内忌糖皮质激素治疗；CIK细胞免疫治疗在各种恶性肿瘤中的应用细胞免疫治疗在各种恶性肿瘤中的应用 多次输注多次输注CIK在老年恶性血液病临床治疗中的实践在老年恶性血液病临床治疗中的实践多次输注多次输注CIK在老年恶性大在老年恶性大B淋巴瘤临床治疗中的实践淋巴瘤临床治疗中的实践DC-CIK/CIK治疗肿瘤的治疗肿瘤的“千人计划千人计划”目前，我科共完成近2000余例，近10000人次 白血病微残 非T淋巴瘤，骨髓瘤等 肺癌 卵巢癌等妇科肿瘤 肝癌 胃癌/结直肠癌等消化系统肿瘤 肾癌、黑色素瘤等其他肿瘤 肉瘤（无效）CIK细

10、胞免疫治疗存在的问题细胞免疫治疗存在的问题1、到达肿瘤位置：发生接触效应，体内难以实现2、通过接触激发免疫细胞内的酶系统实际上，输注的免疫细胞到达肿瘤部位的很少，缺乏靶向性。新技术：新技术：嵌合抗原受体T细胞（Chimeric antigen receptor,CART）在恶性肿瘤中的应用嵌合抗原受体（嵌合抗原受体（CAR）为免疫细胞）为免疫细胞靶向性治疗提供可能靶向性治疗提供可能国外开展的国外开展的CART细胞的相关临床试验细胞的相关临床试验我科目前已开展的我科目前已开展的CART细胞治疗细胞治疗N Normanno,C Bianco,et al.Endocrine-Related Canc

11、er(2003)10,1-21设计原理：EGFR抗体表位绑定在杀伤力强的CD8/CD56阳性(CIK主要成分)T细胞表面1、靶向性；2、持续的杀伤性；3、酶系统激活复发或难治性 实体瘤基线评估l 实验室复核EGFRl ECOG 2l 血常规、IL-6l 血生化l 肿瘤标记物l 胸腹部CT或PET/CTl 细胞因子，送免疫室靶病灶2cm靶病灶2cm-d10 -d7 0 d7.1mon 2mon采集单个核细胞化疗不化疗回输期间注意事项：回输期间注意事项：1.持续心电监护2.回输前30min异丙嗪、苯海拉明抗过敏预处理3.回输过程中及回输后监测生命变化并记录，4.详细记录发热、寒战等不良反应开始及持

12、续时间5.给予碱化、补液治疗，对症治疗1.血常规2.血生化3.IL-64.细胞因子5.RT-PCR免疫室每月复查项目：1.血常规2.血生化3.肿瘤标记物4.IL65.细胞因子6.RT-PCR7.CT或PET/CTCART-EGFR检查治疗流程图检查治疗流程图CT或PET/CT复查CRPR或SDPD每月复查、随访RT-PCR拷贝数 每月复查、随访RT-PCR拷贝数CART-EGFR again新发肿瘤病灶原病灶增大更换方案靶病灶穿刺活检富含免疫细胞无或少量免疫细胞RT-PCR拷贝数RT-PCR拷贝数观察CART-EGFR again可CART-EGFR again或更换方案CART-EGFR检查治疗流程图检查治疗流程图 PFSSafetyToxicity典型病例患者李XX，女，55岁，2012年12月确诊左肺中低分化腺癌期、多发骨转移、肝转移、左侧胸腔积液，确诊后给予过化疗、放疗及吉非替尼等治疗，病情进展后于我科接受CART-EGFR免疫治疗，病情缓解，PFS：5.7个月，进展后复查病理，EGFR表达强度及比例明显降低，病理切片以EGFR阴性癌细胞为主。影像学比较影像学比较CART前CART后-1monthCART后-3month影像学比较影像学比较CART前CART后-1monthCART后-3monthCAR-EGFR T细胞治疗前后肿瘤细胞EGFR抗原表达变化治疗前治疗后