实验动物与动物实验室的生物安全防护x课件.pptx

1、实验动物与动物实验室的生物安全防护实验动物与动物实验室的生物安全防护南方医科大学实验动物中心南方医科大学实验动物中心 xx谢谢你的关注2019-11-7一、实验动物及实验动物设施一、实验动物及实验动物设施二、实验动物重要的人畜共患病及传染病二、实验动物重要的人畜共患病及传染病三、动物实验室的生物安全防护三、动物实验室的生物安全防护四、各级动物生物安全实验室设施与防护要求四、各级动物生物安全实验室设施与防护要求五、五、实验室生物安全事件应急预案实验室生物安全事件应急预案六、我国实验动物管理的组织机构及相关法规简介六、我国实验动物管理的组织机构及相关法规简介内内 容容谢谢你的关注2019-11-7

2、一、实验动物及实验动物设施一、实验动物及实验动物设施1、实验动物实验动物(Laboratory animals)：是指经人工培育，对其：是指经人工培育，对其携带的微生物和寄生虫实行控制；遗传背景明确，来源携带的微生物和寄生虫实行控制；遗传背景明确，来源清楚；用于科学实验、药品、生物制品的生产和检定及清楚；用于科学实验、药品、生物制品的生产和检定及其他科学实验的动物。其他科学实验的动物。2、实验用动物实验用动物(Animals for research/Experimental animals）：所有用于科学实验的动物统称为实验用动物）：所有用于科学实验的动物统称为实验用动物。包括实验动物，野生

3、。包括实验动物，野生 动物，经济动物和观赏动物。动物，经济动物和观赏动物。谢谢你的关注2019-11-73、实验动物微生物等级实验动物微生物等级普通级动物（一级）：普通级动物（一级）：不携带主要人畜共患病和动物烈性不携带主要人畜共患病和动物烈性传染病病原的动物。传染病病原的动物。清洁级动物（二级）：清洁级动物（二级）：除不能携带主要人畜共患病和动物除不能携带主要人畜共患病和动物烈性传染病的病原外，不能携带对动物危害大和对科研烈性传染病的病原外，不能携带对动物危害大和对科研干扰大的病原。（干扰大的病原。（国外无此等级动物国外无此等级动物）SPF级动物（三级）：级动物（三级）：又称无特定病原体动物

4、，除一、二又称无特定病原体动物，除一、二级动物应排除的病原外，不携带主要潜在感染或对科研级动物应排除的病原外，不携带主要潜在感染或对科研干扰大的病原。干扰大的病原。无菌级动物（四级）：无菌级动物（四级）：不携带可检出的一切病原体。悉生不携带可检出的一切病原体。悉生动物则是在无菌动物物体内移入一种或几种已知微生物动物则是在无菌动物物体内移入一种或几种已知微生物后的动物。后的动物。谢谢你的关注2019-11-74 4、实验动物设施、实验动物设施(Laboratory Animal Facility)的概念概念 广义上广义上是指进行实验动物生产和从事动物实验的场所。是指进行实验动物生产和从事动物实验

5、的场所。狭义上狭义上指保种、繁殖、生产、育成实验动物的场所。指保种、繁殖、生产、育成实验动物的场所。（1）实验动物设施分类）实验动物设施分类 按设施按设施使用功能使用功能分类分类 实验动物实验动物生产设施生产设施：动物动物实验设施实验设施：特特殊殊动动物实验设施：物实验设施：包括感染、应用放射性物质或包括感染、应用放射性物质或其他特殊化学物质等动物实验的设施。其他特殊化学物质等动物实验的设施。谢谢你的关注2019-11-7按设施的按设施的平面布局平面布局分类分类 无走廊式无走廊式：一般为普通级设施一般为普通级设施 单走廊式：单走廊式：可为普通级或清洁级设施可为普通级或清洁级设施 双走廊式双走廊

6、式：是常用的一种实验动物屏障设施类型。是常用的一种实验动物屏障设施类型。可有效的分割可有效的分割 清洁区和污染区清洁区和污染区 三走廊式：三走廊式：动物隔离良好，人员、动物、物品进入动物隔离良好，人员、动物、物品进入有专门通道，可有效避免交叉感染，但空间利用率有专门通道，可有效避免交叉感染，但空间利用率低，而且投资大低，而且投资大 谢谢你的关注2019-11-7按按实验动物设施实验动物设施环境内环境内气流组织形式气流组织形式分类分类 乱流式：乱流式：又称非单向流洁净室，是指气流以不均匀又称非单向流洁净室，是指气流以不均匀的速度成不平行的流动，伴有回流或涡流的洁净室。的速度成不平行的流动，伴有回

7、流或涡流的洁净室。可依靠送风气流不断稀释室内空气，把室内污浊气体可依靠送风气流不断稀释室内空气，把室内污浊气体逐渐地排出。逐渐地排出。单向流式单向流式：气流以均匀的截面速度，沿着平行流线气流以均匀的截面速度，沿着平行流线以单一方向在整个室截面上通过的洁净房间，又称层以单一方向在整个室截面上通过的洁净房间，又称层流室或平行流室。流室或平行流室。谢谢你的关注2019-11-7顶送侧排顶送侧排涡流或乱流涡流或乱流垂直单向流垂直单向流谢谢你的关注2019-11-7按实验动物设施环境内按实验动物设施环境内微生物控制程度微生物控制程度分类分类普通环境普通环境符合动物居住的基本要求；符合动物居住的基本要求；

8、控制人员和物品、动物的出入；控制人员和物品、动物的出入；不能完全控制传染因子；不能完全控制传染因子；适用于饲育教学等用途的适用于饲育教学等用途的普通级实验动物普通级实验动物；该设施内空气与外界环境相通，但有必要的防野鼠、该设施内空气与外界环境相通，但有必要的防野鼠、蚊蝇设施；蚊蝇设施；洁净等级未作要求洁净等级未作要求。谢谢你的关注2019-11-7普通环境示意图普通环境示意图谢谢你的关注2019-11-7屏障环境：屏障环境：符合动物居住的基本要求；符合动物居住的基本要求；严格控制人员、物品和空气的进出严格控制人员、物品和空气的进出：（1 1）进入系统的进入系统的空气空气应经过初、中、高效三级过

9、滤；应经过初、中、高效三级过滤；（2 2）进入）进入系统系统的的设备、设备、动物、饲料、水、垫料、实验用品动物、饲料、水、垫料、实验用品均均需有严格的微生物控制；需有严格的微生物控制；（3 3）人员人员须经淋浴、更换灭菌服方可进入室内。须经淋浴、更换灭菌服方可进入室内。适用于饲育适用于饲育清洁级清洁级及及无特定病原体无特定病原体(SPF)实验动物；实验动物；洁净等级要求达到洁净等级要求达到7级。级。谢谢你的关注2019-11-7屏障环境设屏障环境设施平面布局施平面布局屏障环境示意图屏障环境示意图谢谢你的关注2019-11-7隔离环境：隔离环境：采用采用无菌隔离装置无菌隔离装置以保证无菌状态或无

10、外来污染物以保证无菌状态或无外来污染物;隔离装置内的隔离装置内的空气、饲料、水、垫料和设备空气、饲料、水、垫料和设备均为无菌均为无菌，动物和物料的动态传递须经特殊的传递系统动物和物料的动态传递须经特殊的传递系统;该系统既能保证与外环境的绝对隔离，又能满足转运该系统既能保证与外环境的绝对隔离，又能满足转运动物时保持与内环境的一致动物时保持与内环境的一致;该设施适用于饲育该设施适用于饲育SPF、悉生及无菌动物；、悉生及无菌动物；洁净等级要求达到洁净等级要求达到5级或级或7级。级。谢谢你的关注2019-11-7隔离器隔离器谢谢你的关注2019-11-7 改良的屏障设施改良的屏障设施独立供气动物笼系统

11、独立供气动物笼系统 （Independent ventilation cage，IVC）该系统采用具有先进水平的该系统采用具有先进水平的微型隔离微型隔离技术，通过技术，通过在笼子内部输送经过在笼子内部输送经过高效过滤高效过滤的空气以保证动物的空气以保证动物免受免受微生物的污染微生物的污染，可以使动物生活在一个相对隔离的环，可以使动物生活在一个相对隔离的环境中。在普通环境下加境中。在普通环境下加IVC 就可成为一个就可成为一个清洁级的动清洁级的动物房物房。换笼及实验操作均在超净工作台内进行。换笼及实验操作均在超净工作台内进行。谢谢你的关注2019-11-7独立供气动物笼独立供气动物笼系统系统(I

12、VC)谢谢你的关注2019-11-7（2）人员、物品和动物进出屏障环境基本要求）人员、物品和动物进出屏障环境基本要求人员进出屏障环境基本要求：人员进出屏障环境基本要求：所有进出人员应养成所有进出人员应养成随手关门随手关门的好习惯，并能严格的好习惯，并能严格遵守遵守“人员入室流程图人员入室流程图”所示的方向和要求所示的方向和要求单向流单向流动动；进入按以下顺序，即：更衣进入按以下顺序，即：更衣-淋浴淋浴-更灭菌衣更灭菌衣-洁净洁净走廊走廊-动物实验室动物实验室-污染走廊污染走廊-洗消室洗消室-更衣更衣-外部。外部。所有进出人员必须严格遵守屏障环境管理规定。所有进出人员必须严格遵守屏障环境管理规定

13、。谢谢你的关注2019-11-7物品进出屏障物品进出屏障环境环境的基本要求：的基本要求：双扉双扉高压蒸汽灭菌器高压蒸汽灭菌器：耐高压蒸汽灭菌物品的灭菌。：耐高压蒸汽灭菌物品的灭菌。带紫外线消毒的带紫外线消毒的传递窗传递窗：不耐高温高压、不能药液：不耐高温高压、不能药液浸泡以及内包装已经由浸泡以及内包装已经由高压蒸汽高压蒸汽、60CO辐照辐照和和环氧环氧乙烷乙烷等灭菌方式灭菌过的物品的灭菌。等灭菌方式灭菌过的物品的灭菌。盛满消毒液的盛满消毒液的不锈钢渡槽不锈钢渡槽：不耐高温高压和不便于：不耐高温高压和不便于从传递窗传入的物品的灭菌。从传递窗传入的物品的灭菌。谢谢你的关注2019-11-7动物进出

14、屏障环境的基本要求：动物进出屏障环境的基本要求：引入的动物应为引入的动物应为相应的等级相应的等级；引进的动物需有引进的动物需有明确的动物品种明确的动物品种/系、性别、数量、系、性别、数量、出生日期和质量合格证出生日期和质量合格证及遗传背景资料等；及遗传背景资料等；动物运达后应先动物运达后应先检查运输盒密封材料的完整性检查运输盒密封材料的完整性；验收后，按以下顺序将动物传入：动物验收后，按以下顺序将动物传入：动物(专用包装专用包装 盒盒)传递窗检疫室清洁走廊饲育室或实验室传递窗检疫室清洁走廊饲育室或实验室 ；实验后或生产供应；实验后或生产供应包装后包装后污染走廊污染走廊外部。外部。谢谢你的关注2

15、019-11-7项项 目目指指 标标小鼠小鼠/大鼠大鼠豚鼠豚鼠/地鼠地鼠犬犬/猴猴/小型猪小型猪/兔兔/猫猫鸡鸡屏障屏障环境环境隔离隔离环境环境普通普通环境环境屏障屏障环境环境隔离隔离环境环境普通普通环境环境屏障屏障环境环境隔离隔离环境环境屏障屏障环境环境温度温度/202618292026162820261628相对湿度相对湿度/4070最小换气次数最小换气次数/(次次/h),15208152081520气流速度气流速度/(m/s),0.2相对区域最小静压差相对区域最小静压差/Pa,10501050105010空气洁净度空气洁净度/级级75or775or775or75or7沉降菌最大平均浓度沉

16、降菌最大平均浓度/(CFU/0.5h90mm平皿平皿),3无检无检出出无检无检出出3无检无检出出无检无检出出氨浓度氨浓度/(mg/m3),14噪声噪声/dB(A),60照度照度/Lx最低工作照度最低工作照度200动物照度动物照度1520100200510昼夜照明交替时间昼夜照明交替时间/h12/12 或或 10/14（3）实验动物设施环境技术指标）实验动物设施环境技术指标GB14925-2010谢谢你的关注2019-11-7一、流行性出血热一、流行性出血热二、淋巴细胞性脉络丛脑膜炎二、淋巴细胞性脉络丛脑膜炎三、狂犬病三、狂犬病四、猴四、猴B B病毒病病毒病五、弓形虫病五、弓形虫病六、沙门氏菌病

17、六、沙门氏菌病七、钩端螺旋体病七、钩端螺旋体病八、结核分支杆菌病八、结核分支杆菌病九、志贺菌病九、志贺菌病十、鼠痘十、鼠痘十一、兔出血症十一、兔出血症 几乎所有的生命科学领域的科几乎所有的生命科学领域的科研研/教学教学/生产生产/检定检定/安全评价等都安全评价等都离不开医学动物实验。而动物实离不开医学动物实验。而动物实验存在生物安全的危险。验存在生物安全的危险。人畜共患病：人畜共患病：是指脊椎动物是指脊椎动物与人类之间自然传播和感染疾病，与人类之间自然传播和感染疾病，即人类和脊椎动物由共同病原体即人类和脊椎动物由共同病原体引起，在流行病学上又有关联的引起，在流行病学上又有关联的疾病。疾病。21

18、二、实验动物重要的人畜共患病及传染病二、实验动物重要的人畜共患病及传染病谢谢你的关注2019-11-7（一）流行性出血热（一）流行性出血热 由流行性出血热病毒引起的主要发生于大鼠的烈性传染病由流行性出血热病毒引起的主要发生于大鼠的烈性传染病，也是一种，也是一种人畜共患人畜共患的自然疫源性传染病。的自然疫源性传染病。1981年年WHO统一命统一命名为肾综合征出血热（名为肾综合征出血热（HFRS）。）。1、自然宿主：、自然宿主：主要是小型主要是小型啮齿动物啮齿动物，大鼠为实验动物型，大鼠为实验动物型HFRS的主要传染源。的主要传染源。2、传播：、传播：气溶胶吸入，人类主要接触宿主动物及排泄物而受感

19、气溶胶吸入，人类主要接触宿主动物及排泄物而受感染。染。3、症状：、症状：人：人：发热，头痛，肌肉痛，结膜水肿充血（点状），发热，头痛，肌肉痛，结膜水肿充血（点状），出血性肾损伤（肾综合症出血热），最后肾衰竭，出现尿毒出血性肾损伤（肾综合症出血热），最后肾衰竭，出现尿毒症，严重可导致死亡。大症，严重可导致死亡。大鼠：鼠：多多为隐性感染，长期排毒，一为隐性感染，长期排毒，一般无临床症状，也不死亡。一般不影响实验进程。般无临床症状，也不死亡。一般不影响实验进程。谢谢你的关注2019-11-7（二）淋巴细胞性脉络丛脑膜炎（二）淋巴细胞性脉络丛脑膜炎 由淋巴细胞脉络丛脑膜炎病毒由淋巴细胞脉络丛脑膜炎病毒

20、(LCMV)引起的一种急性传染病引起的一种急性传染病，为，为人畜共患病人畜共患病。主要侵害中枢神经系统，呈现脑脊髓炎症状。主要侵害中枢神经系统，呈现脑脊髓炎症状。1、传播动物：、传播动物：LCMV是人和多种动物共患的病毒性疾病，是人和多种动物共患的病毒性疾病，小鼠小鼠、大鼠、豚鼠、犬、猴、兔均易感、大鼠、豚鼠、犬、猴、兔均易感。持续感染小家鼠，急性感。持续感染小家鼠，急性感染金黄地鼠。许多小鼠为无症状带毒者染金黄地鼠。许多小鼠为无症状带毒者2、症状：、症状：人：人：潜伏期周，流感样症状和脑膜炎、发烧，潜伏期周，流感样症状和脑膜炎、发烧，肌痛，恶心，厌食等。肌痛，恶心，厌食等。小鼠：小鼠：大脑型

21、大脑型：多数呆滞，嗜睡，被毛：多数呆滞，嗜睡，被毛粗乱，弓背，消瘦，特征性表现抓尾巴倒提时，头部震颤，肢粗乱，弓背，消瘦，特征性表现抓尾巴倒提时，头部震颤，肢体阵挛性惊厥，后肢强直性伸展。症状出现后体阵挛性惊厥，后肢强直性伸展。症状出现后天内死亡天内死亡。内脏型：内脏型：被毛粗乱，结膜炎等，部分小鼠出现腹水。被毛粗乱，结膜炎等，部分小鼠出现腹水。迟发型迟发型：先天性带毒小鼠。开始无症状，先天性带毒小鼠。开始无症状，0.5-1年后表现为：被毛粗乱年后表现为：被毛粗乱，弓背，尿蛋白，腹水，生长缓慢等。，弓背，尿蛋白，腹水，生长缓慢等。23谢谢你的关注2019-11-7（三）狂犬病（三）狂犬病 由狂

22、犬病毒由狂犬病毒(Rabies Virus，RV)引起的急性直接接触性为主的引起的急性直接接触性为主的人畜共患病。主要特征：人畜共患病。主要特征：侵害中枢神经系统，呈现狂躁不安，意侵害中枢神经系统，呈现狂躁不安，意识紊乱，最后麻痹死亡识紊乱，最后麻痹死亡。1、传播动物：、传播动物：几乎所有温血动物都对几乎所有温血动物都对RV易感。易感。最易感动物最易感动物包括包括犬、狐、狼，袋鼠；犬、狐、狼，袋鼠；次易感动物次易感动物包括仓鼠、豚鼠、兔等啮齿类动包括仓鼠、豚鼠、兔等啮齿类动物；物；中度易感动物中度易感动物包括牛、绵羊、马、灵长类动物。野生啮齿类包括牛、绵羊、马、灵长类动物。野生啮齿类动物如野鼠

23、等在一定条件下可成为本病长期存在的危险疫源。四动物如野鼠等在一定条件下可成为本病长期存在的危险疫源。四季均可发生，春夏稍高。季均可发生，春夏稍高。2、症状：、症状：(1)前驱期前驱期(沉郁期沉郁期)；(2)兴奋期兴奋期(狂暴期狂暴期)；(3)麻痹期麻痹期24谢谢你的关注2019-11-7（四）猴（四）猴B病毒病病毒病 由猴由猴B病毒病毒(Simian Bvirus Infections)（又称疱疹病（又称疱疹病毒）引起的毒）引起的人和猴人和猴共患的一种传染病。共患的一种传染病。猴猴是是B病毒的自然病毒的自然宿主，感染率可达宿主，感染率可达1060。多数情况下仅在口腔出现。多数情况下仅在口腔出现

24、疱疹和溃疡，之后病毒可长期潜伏在呼吸道或泌尿生殖器疱疹和溃疡，之后病毒可长期潜伏在呼吸道或泌尿生殖器官附近的神经节，也可长期潜伏在组织器官内，产生官附近的神经节，也可长期潜伏在组织器官内，产生B病病毒抗体。毒抗体。人类感染人类感染主要表现主要表现脑炎脑炎或脑脊髓炎症状，多数病或脑脊髓炎症状，多数病人发生死亡。人发生死亡。大多数猴呈隐性感染。种族差异明显，白种人死亡大多数猴呈隐性感染。种族差异明显，白种人死亡率高，黄种人低。率高，黄种人低。25谢谢你的关注2019-11-7（五）弓形虫病（五）弓形虫病 本病是由属本病是由属孢子纲孢子纲的的刚第弓形虫刚第弓形虫引起的，能够在引起的，能够在人人与动物

25、与动物之间传染的重要人兽共患病。小鼠、大鼠、地鼠之间传染的重要人兽共患病。小鼠、大鼠、地鼠、豚鼠、犬和猴为、豚鼠、犬和猴为中间宿主中间宿主，猫为，猫为终末宿主终末宿主。症状：症状：常无明显症状。常无明显症状。人：多数为无症状的隐性感染；人：多数为无症状的隐性感染；实验动物：少数被毛疏松不整，淋巴结肿大，出现实验动物：少数被毛疏松不整，淋巴结肿大，出现流产或死胎现象。流产或死胎现象。26谢谢你的关注2019-11-7（六）沙门氏菌（六）沙门氏菌 沙门菌沙门菌(Salmonella sp)是是1880年年Eberth首先发现。是一类重要首先发现。是一类重要的的人兽共患疾病人兽共患疾病病原体。对实验

26、动物威胁较大的是病原体。对实验动物威胁较大的是鼠伤寒和肠炎鼠伤寒和肠炎菌菌。在动物中可交叉感染，或同时感染两种沙门菌。在动物中可交叉感染，或同时感染两种沙门菌。豚鼠豚鼠对沙门对沙门菌高度敏感，感染后可发生严重的临床疾病；小菌高度敏感，感染后可发生严重的临床疾病；小鼠和大鼠鼠和大鼠也很敏也很敏感，并常以亚临床感染的形式长期带菌。感，并常以亚临床感染的形式长期带菌。沙门菌主要通过沙门菌主要通过消化道传染消化道传染，即动物食入污染沙门菌的粪便，即动物食入污染沙门菌的粪便或被粪便污染的饲料、饮水、垫料。或被粪便污染的饲料、饮水、垫料。症状：症状：1.急性型：急性型：爆发性流行，爆发性流行，45天内大批

27、死亡；天内大批死亡；2.亚急性亚急性型型:行为呆滞行为呆滞,腹泻，被毛蓬松，食欲不振，呈肠炎症状；腹泻，被毛蓬松，食欲不振，呈肠炎症状；3.慢性慢性型型:下痢为主要症状下痢为主要症状,消瘦，产仔数减少，也有部分呈隐性感染。消瘦，产仔数减少，也有部分呈隐性感染。哺乳期小鼠发病率高达哺乳期小鼠发病率高达70%，BALB/c敏感敏感，CDF1不敏感不敏感27谢谢你的关注2019-11-7（七）钩端螺旋体病（七）钩端螺旋体病 钩端螺旋体病钩端螺旋体病(Leptospirosis)是一种重要而复杂的是一种重要而复杂的人畜共患病人畜共患病和和自然疫源性自然疫源性传染病。临床表现形式多样，传染病。临床表现形

28、式多样，主要有主要有发热、黄疸、血红蛋白尿、出血、流产、皮肤和发热、黄疸、血红蛋白尿、出血、流产、皮肤和黏膜坏死、水肿黏膜坏死、水肿等。等。钩端螺旋体的动物宿主非常广泛，几乎所钩端螺旋体的动物宿主非常广泛，几乎所有温血有温血动物都可感染动物都可感染，其中啮齿目的鼠类是最重要的贮存宿主，其中啮齿目的鼠类是最重要的贮存宿主 28谢谢你的关注2019-11-7（八）结核分支杆菌病（八）结核分支杆菌病 由结核分支杆菌由结核分支杆菌(Mycobacterium tuberculosis)引引起的起的人和动物共患的一种细菌性疾病人和动物共患的一种细菌性疾病。人人感染后形成感染后形成结核病，结核病，猴、犬、

29、豚鼠、兔和猫等均可感染猴、犬、豚鼠、兔和猫等均可感染，以猴发，以猴发病率最高。病率最高。29（九）志贺菌病（九）志贺菌病 由志贺菌由志贺菌(Shigella spp)或称痢疾杆菌引起或称痢疾杆菌引起人和实人和实验动物肠道感染验动物肠道感染的一种细菌性疾病。的一种细菌性疾病。人和猴以细菌性人和猴以细菌性痢疾痢疾为主要症状。为主要症状。谢谢你的关注2019-11-7（十）鼠（十）鼠 痘痘 小鼠鼠痘小鼠鼠痘(Mousepox，MPV)是小鼠的一种是小鼠的一种毁灭性、高度毁灭性、高度传染性疾病，其病原为脱脚病病毒传染性疾病，其病原为脱脚病病毒，鼠痘的特点鼠痘的特点在在于感染后于感染后不但引起全身或局部

30、皮肤的痘疹，还可发生肢、尾肿胀，发不但引起全身或局部皮肤的痘疹，还可发生肢、尾肿胀，发炎和坏疽，肢体脱落呈炎和坏疽，肢体脱落呈“缺肢缺肢“的畸形，故被称为的畸形，故被称为传染性脱传染性脱脚病。脚病。流行：流行：小鼠鼠痘在世界各地广为流行，常造成小鼠大批小鼠鼠痘在世界各地广为流行，常造成小鼠大批死亡，有的呈隐性感染，但在实验条件下，病毒可转化为显死亡，有的呈隐性感染，但在实验条件下，病毒可转化为显性染，从而严重影响和干扰实验研究的顺利进行。性染，从而严重影响和干扰实验研究的顺利进行。诊断：诊断：血清学方法血清学方法:血凝抑制试验血凝抑制试验；补体结合试验；免疫；补体结合试验；免疫荧光；免疫酶试验

31、；酶联免疫吸附试验等。荧光；免疫酶试验；酶联免疫吸附试验等。30谢谢你的关注2019-11-7（十一）兔出血症（十一）兔出血症 由兔出血症病毒由兔出血症病毒(Rabbit Hemorrhagic Disease Virus)引起的兔的一种引起的兔的一种烈性传染病烈性传染病，又称，又称“兔瘟兔瘟”。主要特征。主要特征是病兔突然死亡，临死兴奋，挣扎、抽搐、惨叫。是病兔突然死亡，临死兴奋，挣扎、抽搐、惨叫。本病只发生于兔，不同品种的兔均易感，不同性别本病只发生于兔，不同品种的兔均易感，不同性别兔的易感性无差异。不同年龄兔的易感性差异很大，兔的易感性无差异。不同年龄兔的易感性差异很大，主主要发生于要发

32、生于60日龄以上的青年兔和成年兔，发病急，死亡日龄以上的青年兔和成年兔，发病急，死亡率高率高，断乳后育成兔死亡率稍低，哺乳期仔兔很少发病，断乳后育成兔死亡率稍低，哺乳期仔兔很少发病死亡。死亡。31谢谢你的关注2019-11-7 由于实验动物常采取群体饲养，易造成动物疾病的由于实验动物常采取群体饲养，易造成动物疾病的暴发和流行。且多数病原属人畜共患病病原，可同时暴发和流行。且多数病原属人畜共患病病原，可同时引起人和动物的疾病，就更具危险性。严格实验动物引起人和动物的疾病，就更具危险性。严格实验动物的管理制度、预防在先是杜绝人和动物间疾病传播的的管理制度、预防在先是杜绝人和动物间疾病传播的根本保证

33、。根本保证。三、动物实验室的生物安全防护三、动物实验室的生物安全防护谢谢你的关注2019-11-71、动物实验室生物危害的来源、动物实验室生物危害的来源（1）动物性气溶胶）动物性气溶胶（Animal Aerosol）的产生：感染动物）的产生：感染动物在观察饲养期间，它们在呼吸、排泄、抓咬、挣扎、逃逸、在观察饲养期间，它们在呼吸、排泄、抓咬、挣扎、逃逸、跳跃时；在更换垫料、饲料、进行感染接种时；在尸体剖跳跃时；在更换垫料、饲料、进行感染接种时；在尸体剖检、病理组织、排泄物的处理等过程中会大量产生传播危检、病理组织、排泄物的处理等过程中会大量产生传播危害性极大的动物性气溶胶。因此对气溶胶的生物安全

34、防护，害性极大的动物性气溶胶。因此对气溶胶的生物安全防护，应当是动物实验室建设中的核心。应当是动物实验室建设中的核心。谢谢你的关注2019-11-7（2）实验动物：）实验动物：特别是特别是实验用动物实验用动物（羊、马、蟾蜍等）本（羊、马、蟾蜍等）本身可能患有能感染人的人畜共患病。如：身可能患有能感染人的人畜共患病。如：谢谢你的关注2019-11-7 病例一：病例一：2010年年12月月17日日东北农大动物医学学院东北农大动物医学学院做羊的剖做羊的剖腹产实验，腹产实验，19日日应用技术学院应用技术学院利用该利用该羊做羊的解剖实验羊做羊的解剖实验，结，结果果致致27名同学、名同学、1名教师被感国家

35、乙类传染病名教师被感国家乙类传染病布氏杆菌病布氏杆菌病！后经调查是学院未后经调查是学院未严格遵守相应的实验操作规程，严格遵守相应的实验操作规程，购买了购买了不不合格动物合格动物羊羊所致。所致。此病体内终生带菌，关节疼痛、损伤身此病体内终生带菌，关节疼痛、损伤身体其他器官、不孕不育！最终丧失劳动能力，直接阻碍了今体其他器官、不孕不育！最终丧失劳动能力，直接阻碍了今后生活和工作的正常进行！后生活和工作的正常进行！病例二：病例二：2009年年中山大学北校区中山大学北校区科研人员在没有科研人员在没有“实验动实验动物使用许可证物使用许可证”的实验室利用大鼠做实验时，导致的实验室利用大鼠做实验时，导致实验

36、室实验室多多名名工作人员工作人员感染感染流行性出血热流行性出血热!谢谢你的关注2019-11-72、动物实验室生物安全防范的基本措施、动物实验室生物安全防范的基本措施（1）实验动物设施为单独区域，与办公和其他实验场所实验动物设施为单独区域，与办公和其他实验场所分开。分开。（2）动物实验人员需经培训，取得上岗证，实行）动物实验人员需经培训，取得上岗证，实行持证上持证上岗岗。（3）动物应从具有）动物应从具有“实验动物生产许可证实验动物生产许可证”的单位购买；的单位购买；不同品种（系）、不同来源的动物必须分室饲养，不同不同品种（系）、不同来源的动物必须分室饲养，不同对象、不同内容的实验分室进行。对象

37、、不同内容的实验分室进行。（4）实验人员实验人员更换工作服、鞋、戴帽、手套、口罩、风更换工作服、鞋、戴帽、手套、口罩、风淋后方可进入。淋后方可进入。谢谢你的关注2019-11-7（5）动物动物由动物传递窗，外包装经紫外线照射或喷洒消由动物传递窗，外包装经紫外线照射或喷洒消毒液后传入，入室后要检疫（毒液后传入，入室后要检疫（小动物小动物7天，大动物天，大动物14天天）。）。（6）所有样品、饲料所有样品、饲料（钴（钴60照射）经渡槽或传递窗紫外线照射）经渡槽或传递窗紫外线照射或喷洒消毒液后传入。照射或喷洒消毒液后传入。（7）非实验用品非实验用品（如食物、饮水、香烟和手机等）一律（如食物、饮水、香烟

38、和手机等）一律不得带入动物实验室。不得带入动物实验室。（8）饲养笼、实验）饲养笼、实验器具、饮水瓶、垫料器具、饮水瓶、垫料等须经高压灭菌等须经高压灭菌后方可使用。动物饮水：屏障环境内使用灭菌水。后方可使用。动物饮水：屏障环境内使用灭菌水。谢谢你的关注2019-11-7（9）按操作规程抓取、固定动物等实验操作。）按操作规程抓取、固定动物等实验操作。（10）设置安全出口、出口指示、灭火器械；配置应急洗）设置安全出口、出口指示、灭火器械；配置应急洗眼器。眼器。（11）实验废弃物由污物走廊传出，专门放在指定位置统）实验废弃物由污物走廊传出，专门放在指定位置统一处理，动物死体专用塑料袋包装后冷冻保存，送

39、专门一处理，动物死体专用塑料袋包装后冷冻保存，送专门机构做机构做无害化处理无害化处理。谢谢你的关注2019-11-73、动物实验过程的行为规范、动物实验过程的行为规范（1）物理限制：）物理限制：是指在实验过程中（包括检查、收集标是指在实验过程中（包括检查、收集标本、给药、治疗或实验操作等），用手或工具限制动物本、给药、治疗或实验操作等），用手或工具限制动物活动的过程。主要原则和要求包括：活动的过程。主要原则和要求包括：不能作为常规的饲养工具；不能作为常规的饲养工具；工具的设计应合理；工具的设计应合理；尽量减少限制的时间；尽量减少限制的时间；在限制过程中，如果发生损伤或严重的行为改变，应在限制过

40、程中，如果发生损伤或严重的行为改变，应暂停或禁止限制，并给予处理或治疗。暂停或禁止限制，并给予处理或治疗。保证实验人员和周围人员的安全。保证实验人员和周围人员的安全。谢谢你的关注2019-11-7（2）手术操作）手术操作操作一定要使用适当的镇静、镇痛或麻醉方法；操作一定要使用适当的镇静、镇痛或麻醉方法；禁止不必要的重复操作；禁止不必要的重复操作；不提倡利用一个动物进行多个手术实验；（不提倡利用一个动物进行多个手术实验；（东农学东农学生师生感染事件生师生感染事件）严格实验操作规程，防止发生血液严格实验操作规程，防止发生血液/体液外溅和刺伤，体液外溅和刺伤，避免生物污染；避免生物污染；手术后的动物

41、、标本以及所用器具材料等必须按照手术后的动物、标本以及所用器具材料等必须按照规定程序妥善处置。规定程序妥善处置。谢谢你的关注2019-11-7（3）动物实验的有关操作）动物实验的有关操作 给药给药：根据实验要求，按不同的动物，不同途径给药。主根据实验要求，按不同的动物，不同途径给药。主要包括要包括灌胃和静脉注射灌胃和静脉注射。大动物大动物，将动物，将动物麻醉麻醉后后方可进行方可进行灌胃或静脉注射。灌胃或静脉注射。小动物小动物可可根据情况根据情况选择是否麻醉，静脉选择是否麻醉，静脉注射时需使用固定器。注射时需使用固定器。采样采样：原则上：原则上活检活检时应对动物进行时应对动物进行麻醉麻醉。大动物

42、进行采血。大动物进行采血或体检时，要求将动物麻醉。对小动物进行采血时，可不或体检时，要求将动物麻醉。对小动物进行采血时，可不麻醉动物，但要防止动物咬抓。麻醉动物，但要防止动物咬抓。标本的运输标本的运输：要求用：要求用防渗漏防渗漏的容器装标本。容器应确保的容器装标本。容器应确保密密封封。将大、小动物标本从实验室。将大、小动物标本从实验室传出传出应应严格按照严格按照有关有关规定规定程序执行。程序执行。谢谢你的关注2019-11-7（4）实验标本、废弃物和尸体处理）实验标本、废弃物和尸体处理血液和体液标本的处理：血液和体液标本的处理：用于抗体、抗原、病原微生物、用于抗体、抗原、病原微生物、生化指标等

43、检查的血液和体液，按照要求进行处理并检生化指标等检查的血液和体液，按照要求进行处理并检测，检测后的标本经测，检测后的标本经121，30min高压灭菌处理。高压灭菌处理。动物组织脏器的处理：动物组织脏器的处理：动物器官组织，尤其是用于病原动物器官组织，尤其是用于病原微生物分离的组织按照标准程序进行处理；用于病理切微生物分离的组织按照标准程序进行处理；用于病理切片的组织，均需经过甲醛固定后再进行切片。剩余的组片的组织，均需经过甲醛固定后再进行切片。剩余的组织经织经121，30min高压灭菌处理高压灭菌处理。谢谢你的关注2019-11-7 动物尸体的处理动物尸体的处理：安乐死后的动物尸体，取材完毕，

44、：安乐死后的动物尸体，取材完毕，经经121，30min高压灭菌处理高压灭菌处理后，集中送环保部门后，集中送环保部门处理。处理。动物咽拭子的处理：动物咽拭子的处理：用于病原分离和用于病原分离和PCR检测的咽拭检测的咽拭子，按照各自的要求处理后，进行病毒分离和子，按照各自的要求处理后，进行病毒分离和PCR检测，检测，剩余的标本经剩余的标本经121，30min高压消毒高压消毒处理。处理。病原分离培养物的处理：病原分离培养物的处理：病原分离的培养物，不论是病原分离的培养物，不论是阳性还是阴性结果，均需经阳性还是阴性结果，均需经121，30min高压消毒高压消毒处理。处理。谢谢你的关注2019-11-7

45、4、实验动物使用程序和要求、实验动物使用程序和要求（1）实验动物的基本使用程序和要求：）实验动物的基本使用程序和要求：1）购买实验动物时，应从有）购买实验动物时，应从有“实验动物实验动物生产许可证生产许可证”的的单位购买。单位购买。2）进行动物实验时，应向有）进行动物实验时，应向有“实验动物实验动物使用许可证使用许可证”的的单位提交单位提交“动物实验申请动物实验申请”和和“实验动物福利与伦理审查实验动物福利与伦理审查申请申请”（发表论文）；（发表论文）；3）动物实验申请获得批准后，动物实验室根据申请的动）动物实验申请获得批准后，动物实验室根据申请的动物种属和数量，将动物安排在指定的区域内饲养和

46、实验；物种属和数量，将动物安排在指定的区域内饲养和实验；4）实验结束后，需要动物实验室开具）实验结束后，需要动物实验室开具“动物实验证明动物实验证明”。谢谢你的关注2019-11-7（2）含有感染性材料的动物实验要求）含有感染性材料的动物实验要求 1）涉及感染性材料的操作要在生）涉及感染性材料的操作要在生物安全柜中进行物安全柜中进行，并防止泄露在安全柜底面；并防止泄露在安全柜底面；2）动物笼具在清洗前先做清除污染处理；）动物笼具在清洗前先做清除污染处理；3）污物、一次性物品需放入医疗废物专用垃圾袋中，）污物、一次性物品需放入医疗废物专用垃圾袋中，经经高压灭菌后高压灭菌后方可拿出实验室；方可拿出

47、实验室；4）动物尸体用双层医疗废物专用垃圾袋包裹后，放）动物尸体用双层医疗废物专用垃圾袋包裹后，放入标有动物尸体专用的容器中，用消毒液喷雾容器表入标有动物尸体专用的容器中，用消毒液喷雾容器表面后处理。面后处理。5）生物安全柜每次使用后应该消毒。）生物安全柜每次使用后应该消毒。谢谢你的关注2019-11-76）废液废液需按需按比例倒入有消毒液比例倒入有消毒液的桶中，倒入时需沿容器壁的桶中，倒入时需沿容器壁轻倒，应戴眼罩，防止溅入眼中；轻倒，应戴眼罩，防止溅入眼中；7）如果有）如果有感染性物质溅到生物安全柜感染性物质溅到生物安全柜上、地上以及其他地上、地上以及其他地方，应按方，应按“菌（毒）外溢在

48、台面、地面和其他表面菌（毒）外溢在台面、地面和其他表面”处处理方法处理；理方法处理；8）每天工作结束时，应）每天工作结束时，应用消毒液擦拭用消毒液擦拭门把手门把手和和地面地面等表面等表面区域。区域。9）废物放入高压灭菌器内时需同时）废物放入高压灭菌器内时需同时粘贴指示条粘贴指示条，物品移出，物品移出前观察前观察指示条是否达到灭菌要求指示条是否达到灭菌要求。颜色不符时需重复高。颜色不符时需重复高压灭菌。压灭菌。10）高压灭菌器需）高压灭菌器需每月做灭菌测试一次每月做灭菌测试一次，并作记录。，并作记录。谢谢你的关注2019-11-7（3）动物的检疫）动物的检疫和疾病的控制处理要求和疾病的控制处理要

49、求1）外购实验动物需要进行）外购实验动物需要进行检疫检疫，各动物的检疫期不同，各动物的检疫期不同，大大动物为动物为2周周，小动物为小动物为1周周；2）在检疫期内观察动物的精神状态、食欲、营养状况、排）在检疫期内观察动物的精神状态、食欲、营养状况、排泄物等，如有任何异常，动物不得用于实验，应退出动物泄物等，如有任何异常，动物不得用于实验，应退出动物检疫室；检疫室；3）检疫合格的动物经适当处理后由缓冲间或物流通道进入）检疫合格的动物经适当处理后由缓冲间或物流通道进入动物实验室。动物实验室。4）动物发生疾病死亡应及时进行病理尸检或其他实验室检）动物发生疾病死亡应及时进行病理尸检或其他实验室检谢谢你的

50、关注2019-11-7 查，作出诊断，提出处理意见。查，作出诊断，提出处理意见。4）当动物发生）当动物发生传染病传染病时，原则上全部销毁，并及时报告时，原则上全部销毁，并及时报告实验室负责人或上级主管部门。实验室、用具、笼架、实验室负责人或上级主管部门。实验室、用具、笼架、垫料、衣帽等必须进行彻底消毒。动物室消毒后封锁一垫料、衣帽等必须进行彻底消毒。动物室消毒后封锁一段时间，经检测合格才能使用。段时间，经检测合格才能使用。5）当动物发生）当动物发生烈性传染病流行烈性传染病流行时，应立即上报实验动物时，应立即上报实验动物检定机构，同时采取严格的检定机构，同时采取严格的隔离消毒隔离消毒措施，以免传