2021高考生物二轮复习专题课件:专题十生物技术实践2.ppt
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- 2021 高考 生物 二轮 复习 专题 课件 生物技术 实践
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1、专题10生物技术实践考向1微生物的培养与应用(2020(2020全国全国卷卷)生物生物选修选修1:1:生物技术实践生物技术实践 某种物质某种物质S(S(一种含有一种含有C C、H H、N N的有机物的有机物)难以降解难以降解,会对环境造成污染会对环境造成污染,只有某些细菌能降解只有某些细菌能降解S S。研究人员按。研究人员按照下图所示流程从淤泥中分离得到能高效降解照下图所示流程从淤泥中分离得到能高效降解S S的细菌菌株。实验过程中需要的细菌菌株。实验过程中需要甲、乙两种培养基甲、乙两种培养基,甲的组分为无机盐、水和甲的组分为无机盐、水和S,S,乙的组分为无机盐、水、乙的组分为无机盐、水、S S
2、和和Y Y。回答下列问题回答下列问题:(1)(1)实验时实验时,盛有水或培养基的摇瓶通常采用盛有水或培养基的摇瓶通常采用_的方法进行灭菌。的方法进行灭菌。乙培养基中的乙培养基中的Y Y物质是物质是_。甲、乙培养基均属于。甲、乙培养基均属于_培养基。培养基。(2)(2)实验中初步估测摇瓶实验中初步估测摇瓶M M中细菌细胞数为中细菌细胞数为2 210107 7 个个/mL,/mL,若要在每个平板上涂布若要在每个平板上涂布100 L 100 L 稀释后的菌液稀释后的菌液,且保证每个平板上长出的菌落数不超过且保证每个平板上长出的菌落数不超过200200个个,则至少则至少应将摇瓶应将摇瓶M M中的菌液稀
3、释中的菌液稀释_倍。倍。(3)(3)在步骤在步骤的筛选过程中的筛选过程中,发现当培养基中的发现当培养基中的S S超过某一浓度时超过某一浓度时,某菌株对某菌株对S S的的降解量反而下降降解量反而下降,其原因可能是其原因可能是_(_(答出答出1 1点点即可即可)。(4)(4)若要测定淤泥中能降解若要测定淤泥中能降解S S的细菌细胞数的细菌细胞数,请写出主要实验步骤请写出主要实验步骤_。(5)(5)上述实验中上述实验中,甲、乙两种培养基所含有的组分虽然不同甲、乙两种培养基所含有的组分虽然不同,但都能为细菌的生但都能为细菌的生长提供长提供4 4类营养物质类营养物质,即即_。【审答思维】【审答思维】1.
4、1.审要求审要求:(1)(1)确定灭菌方法、判断培养基类型。确定灭菌方法、判断培养基类型。(2)(2)已知菌落数目计算细菌的稀释倍数。已知菌落数目计算细菌的稀释倍数。(3)(3)分析分析S S的降解量下降原因的降解量下降原因,设计实验统计菌落数目。设计实验统计菌落数目。2.2.解题流程解题流程:【命题陷阱】【命题陷阱】陷阱陷阱1:1:混淆培养基的类型及作用混淆培养基的类型及作用:(1)(1)固体培养基固体培养基(含琼脂含琼脂):):能形成单菌落能形成单菌落,一般用于单克隆菌株筛选。一般用于单克隆菌株筛选。(2)(2)液体培养基液体培养基:是为了得到大量的细胞或细胞产物是为了得到大量的细胞或细胞
5、产物,如富集培养时选择液体培如富集培养时选择液体培养基。养基。陷阱陷阱2:2:不能科学地对细菌计数不能科学地对细菌计数:微生物的接种方法最常用的有两种微生物的接种方法最常用的有两种:稀释涂布平稀释涂布平板法和平板划线法板法和平板划线法,但对菌落计数只能选择稀释涂布平板法。但对菌落计数只能选择稀释涂布平板法。【解析】【解析】本题主要考查培养基的类型及其应用、无菌技术和微生物的分离与本题主要考查培养基的类型及其应用、无菌技术和微生物的分离与计数。计数。(1)(1)常用高压蒸汽灭菌法处理盛有水或培养基的摇瓶。由图中常用高压蒸汽灭菌法处理盛有水或培养基的摇瓶。由图中过程可知过程可知,甲甲为液体培养基为
6、液体培养基,乙为固体培养基乙为固体培养基,所以乙培养基中需要加入的所以乙培养基中需要加入的Y Y为琼脂。甲和乙为琼脂。甲和乙培养基可以用于筛选能降解培养基可以用于筛选能降解S S的菌株的菌株,因此均属于选择培养基。因此均属于选择培养基。(2)(2)若要在每个平板上涂布若要在每个平板上涂布100 L100 L稀释后的菌液稀释后的菌液,且每个平板上长出的菌落数且每个平板上长出的菌落数不超过不超过200200个个,根据计算公式根据计算公式:细菌细胞数细菌细胞数=(C=(CV)V)M M可知可知,稀释倍数稀释倍数M=2M=210107 7V VC=2C=210107 71000100010010020
7、0=10200=104 4。(3)(3)当培养基中的当培养基中的S S超过某一浓度后超过某一浓度后,可能会抑制菌株的生长可能会抑制菌株的生长,从而造成其对从而造成其对S S的的降解量下降。降解量下降。(4)(4)要测定淤泥中能降解要测定淤泥中能降解S S的细菌的细胞数的细菌的细胞数,可以取淤泥加无菌水制成菌悬液可以取淤泥加无菌水制成菌悬液,稀稀释涂布到乙培养基上释涂布到乙培养基上,培养后进行计数。培养后进行计数。(5)(5)甲和乙培养基均含有水、无机盐、碳源、氮源等成分。甲和乙培养基均含有水、无机盐、碳源、氮源等成分。答案答案:(1)(1)高压蒸汽灭菌琼脂选择高压蒸汽灭菌琼脂选择(2)10(2
8、)104 4(3)S(3)S的浓度超过某一值时会抑制菌株的生长的浓度超过某一值时会抑制菌株的生长(4)(4)取淤泥加入无菌水取淤泥加入无菌水,稀释涂布到乙培养基上稀释涂布到乙培养基上,培养后计数培养后计数(5)(5)水、碳源、氮源和无机盐水、碳源、氮源和无机盐人类正面临人口膨胀、陆地资源减少和环境恶化等全球性问题人类正面临人口膨胀、陆地资源减少和环境恶化等全球性问题,传统的生产模传统的生产模式已很难适应快速发展的经济式已很难适应快速发展的经济,生物反应器应运而生。微生物作为生物反应器生物反应器应运而生。微生物作为生物反应器具有诸多优点具有诸多优点,但也存在生产过程易染菌、大量消耗淡水等缺点。科
9、学家计划但也存在生产过程易染菌、大量消耗淡水等缺点。科学家计划从自然环境中筛选耐高温、耐盐碱的微生物菌株来解决这些缺点。从自然环境中筛选耐高温、耐盐碱的微生物菌株来解决这些缺点。(1)_,(1)_,是获得纯净的培养物的关键。传统生物制造利用微生物生产产是获得纯净的培养物的关键。传统生物制造利用微生物生产产品时品时,需要对实验操作的空间、操作者的衣着和手进行需要对实验操作的空间、操作者的衣着和手进行_,_,对用于培对用于培养微生物的器皿、接种用具和培养基等进行养微生物的器皿、接种用具和培养基等进行_。新题预测新题预测技法演练场技法演练场(2)(2)科学家应在科学家应在_的环境条件下筛选目的菌株。
10、将相应环境中的环境条件下筛选目的菌株。将相应环境中取得的样液利用取得的样液利用_法接种到培养基中法接种到培养基中,以获得单菌落用于进一以获得单菌落用于进一步分离纯化。步分离纯化。(3)(3)对分离的微生物作进一步的鉴定对分离的微生物作进一步的鉴定,常需要借助生物化学的方法。如在以常需要借助生物化学的方法。如在以_为唯一氮源的培养基中加入为唯一氮源的培养基中加入_,_,可用来鉴定分解尿素的细菌可用来鉴定分解尿素的细菌;在在以以_为唯一碳源的培养基中加入为唯一碳源的培养基中加入_,_,可用来鉴定纤维素分解菌。可用来鉴定纤维素分解菌。(4)(4)用筛选得到的耐高温、耐盐碱菌种作为生物反应器用筛选得到
11、的耐高温、耐盐碱菌种作为生物反应器,生产过程不易染菌生产过程不易染菌,原原因是因是:_:_。【解析】【解析】(1)(1)防止杂菌入侵是获得纯净的培养物的关键。传统生物制造利用防止杂菌入侵是获得纯净的培养物的关键。传统生物制造利用微生物生产产品时微生物生产产品时,需要对实验操作的空间、操作者的衣着和手进行清洁和消需要对实验操作的空间、操作者的衣着和手进行清洁和消毒毒,对用于培养微生物的器皿、接种用具和培养基等进行灭菌。对用于培养微生物的器皿、接种用具和培养基等进行灭菌。(2)(2)根据题目信息根据题目信息,若要获得目的菌若要获得目的菌,应在高温、高盐、高碱的环境条件下进行应在高温、高盐、高碱的环
12、境条件下进行培养和筛选培养和筛选,为了分离和纯化目的菌为了分离和纯化目的菌,可采用平板划线法或稀释涂布平板法进行可采用平板划线法或稀释涂布平板法进行接种和培养。接种和培养。(3)(3)微生物的鉴定常用鉴别培养基微生物的鉴定常用鉴别培养基,在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂示剂,观察是否变红观察是否变红,可用来鉴定分解尿素的细菌可用来鉴定分解尿素的细菌;在以纤维素为唯一碳源的培在以纤维素为唯一碳源的培养基中加入刚果红养基中加入刚果红,观察是否有透明圈产生观察是否有透明圈产生,可用来鉴定纤维素分解菌。可用来鉴定纤维素分解菌。(4)(4)由于在生产过程设
13、置高温、盐碱的培养条件由于在生产过程设置高温、盐碱的培养条件,此条件下杂菌一般无法存活此条件下杂菌一般无法存活,所以用筛选得到的耐高温、耐盐碱菌种作为生物反应器所以用筛选得到的耐高温、耐盐碱菌种作为生物反应器,生产过程不易染菌。生产过程不易染菌。答案答案:(1)(1)防止杂菌入侵清洁和消毒灭菌防止杂菌入侵清洁和消毒灭菌(2)(2)高温、高盐、高碱高温、高盐、高碱(高温地区高温地区的盐湖、盐沼、海水等的盐湖、盐沼、海水等)稀释涂布平板稀释涂布平板(或平板划线或平板划线)(3)(3)尿素酚红指示剂尿素酚红指示剂纤维素刚果红纤维素刚果红(4)(4)生产过程设置高温、盐碱的培养条件生产过程设置高温、盐
14、碱的培养条件,此条件下杂菌一般此条件下杂菌一般无法存活无法存活【高分必备点】【高分必备点】1.1.培养基的成分、类型和条件培养基的成分、类型和条件:2.2.无菌技术的关键与方法无菌技术的关键与方法:3.3.细菌纯化培养的过程细菌纯化培养的过程:【规避失分点】【规避失分点】1.1.选择培养基和鉴别培养基的作用不同选择培养基和鉴别培养基的作用不同:(1)(1)选择培养基是允许特定种类微生物生长。选择培养基是允许特定种类微生物生长。(2)(2)鉴别培养基是加入能与目的菌的无色代谢产物发生显色反应的指示剂鉴别培养基是加入能与目的菌的无色代谢产物发生显色反应的指示剂(如刚如刚果红、伊红美蓝果红、伊红美蓝
15、)。2.2.消毒和灭菌的原理不同消毒和灭菌的原理不同:(1)(1)消毒消毒:只能杀死物体表面或内部的部分微生物。只能杀死物体表面或内部的部分微生物。(2)(2)灭菌灭菌:能杀死所有的微生物能杀死所有的微生物,包括芽孢和孢子。包括芽孢和孢子。【深挖增分点】【深挖增分点】微生物生长所需的营养物质微生物生长所需的营养物质(1)(1)碳源碳源:提供细胞生命活动所需的能量提供细胞生命活动所需的能量,提供合成产物的碳架。提供合成产物的碳架。对于大多数化能异养微生物对于大多数化能异养微生物,碳源兼有能源功能。碳源兼有能源功能。(2)(2)氮源氮源:提供细胞原生质和其他结构物质中的氮源提供细胞原生质和其他结构
16、物质中的氮源,一般不作为能源使用。一般不作为能源使用。对于硝化细菌来说氮源兼有氮源和能源双重功能。对于硝化细菌来说氮源兼有氮源和能源双重功能。(3)(3)无机盐无机盐:细胞中某些复杂化合物和结构的重要组成成分。细胞中某些复杂化合物和结构的重要组成成分。(4)(4)水水:良好的溶剂良好的溶剂,参与细胞中的生化反应参与细胞中的生化反应;为细胞提供液体环境为细胞提供液体环境,运输营养物运输营养物质和代谢废物。质和代谢废物。考向2酶的研究与应用(2020(2020全国全国卷卷)生物生物选修选修1:1:生物技术实践生物技术实践 研究人员从海底微生物中分研究人员从海底微生物中分离到一种在低温下有催化活性的
17、离到一种在低温下有催化活性的-淀粉酶淀粉酶A3,A3,并对其进行了研究。回答下列问并对其进行了研究。回答下列问题题:(1)(1)在以淀粉为底物测定在以淀粉为底物测定A3A3酶活性时酶活性时,既可检测淀粉的减少既可检测淀粉的减少,检测应采用的试剂检测应采用的试剂是是_,_,也可采用斐林试剂检测也可采用斐林试剂检测_的增加。的增加。(2)(2)在在A3A3的分离过程中可采用聚丙烯酰胺凝胶电泳检测其纯度的分离过程中可采用聚丙烯酰胺凝胶电泳检测其纯度,通常会在凝胶中通常会在凝胶中添加添加SDS,SDSSDS,SDS的作用是的作用是_和和_。(3)(3)本实验中本实验中,研究人员在确定研究人员在确定A3
18、A3的最适的最适pHpH时使用了三种组分不同的缓冲系统时使用了三种组分不同的缓冲系统,结果如图所示。某同学据图判断结果如图所示。某同学据图判断,缓冲系统的组分对酶活性有影响缓冲系统的组分对酶活性有影响,其判断依据其判断依据是是_。(4)(4)在制备在制备A3A3的固定化酶时的固定化酶时,一般不宜采用包埋法一般不宜采用包埋法,原因是原因是_(_(答答出出1 1 点即可点即可)。【审答思维】【审答思维】1.1.审题干审题干:(1)(1)检测淀粉、利用斐林试剂检测。检测淀粉、利用斐林试剂检测。(2)(2)识图、缓冲系统组分对酶活性的影响识图、缓冲系统组分对酶活性的影响,不采用包埋法。不采用包埋法。2
19、.2.解题思维解题思维:【命题陷阱】【命题陷阱】陷阱陷阱1:1:混淆颜色反应中所需试剂及现象变化混淆颜色反应中所需试剂及现象变化(1)(1)淀粉淀粉:遇碘变蓝。遇碘变蓝。(2)(2)还原糖还原糖:与斐林试剂水浴加热呈砖红色。与斐林试剂水浴加热呈砖红色。(3)(3)蛋白质与双缩脲试剂呈紫色。蛋白质与双缩脲试剂呈紫色。(4)DNA(4)DNA与二苯胺沸水浴条件下呈蓝色。与二苯胺沸水浴条件下呈蓝色。陷阱陷阱2:2:不能正确理解电泳技术的原理不能正确理解电泳技术的原理:电泳利用了待分离样品中各种分子带电电泳利用了待分离样品中各种分子带电性质的差异及分子本身的大小、形状的不同性质的差异及分子本身的大小、
20、形状的不同,使分子产生不同的迁移速度使分子产生不同的迁移速度,从而从而实现样品中各种分子的分离。实现样品中各种分子的分离。【解析】【解析】本题主要考查化合物的检测、蛋白质的分离、本题主要考查化合物的检测、蛋白质的分离、pHpH对酶活性的影响以对酶活性的影响以及固定化酶技术。及固定化酶技术。(1)-(1)-淀粉酶淀粉酶A3A3催化淀粉水解生成葡萄糖催化淀粉水解生成葡萄糖,可用碘液检测淀粉的减少量可用碘液检测淀粉的减少量,也可采也可采用斐林试剂检测还原糖的生成量。用斐林试剂检测还原糖的生成量。(2)(2)蛋白质在聚丙烯酰胺凝胶中迁移的速率取决于它所带净电荷的多少以及分蛋白质在聚丙烯酰胺凝胶中迁移的
21、速率取决于它所带净电荷的多少以及分子的大小等因素。为了消除净电荷对迁移率的影响子的大小等因素。为了消除净电荷对迁移率的影响,加入加入SDS,SDS,还能使蛋白质发还能使蛋白质发生变性。生变性。(3)(3)在在pHpH分别为分别为7.57.5和和9.09.0时时,不同缓冲系统条件下所测得的相对酶活性都不同。不同缓冲系统条件下所测得的相对酶活性都不同。(4)(4)细胞多采用包埋法固定化细胞多采用包埋法固定化,而酶分子体积小而酶分子体积小,容易从包埋材料中漏出容易从包埋材料中漏出,更适合更适合采用化学结合和物理吸附法固定化。采用化学结合和物理吸附法固定化。答案答案:(1)(1)碘液还原糖碘液还原糖(
22、或葡萄糖或葡萄糖)(2)(2)消除蛋白质所带净电荷对迁移率的影响使蛋白质发生变性消除蛋白质所带净电荷对迁移率的影响使蛋白质发生变性(3)(3)在在pHpH相同时相同时,不同缓冲系统条件下所测得的相对酶活性不同不同缓冲系统条件下所测得的相对酶活性不同 (4)(4)酶分子体积小酶分子体积小,容易从包埋材料中漏出容易从包埋材料中漏出如图如图1 1表示制备固定化酵母细胞的某步操作表示制备固定化酵母细胞的某步操作,图图2 2是利用固定化酵母细胞进行酒是利用固定化酵母细胞进行酒精发酵的示意图精发酵的示意图,请据图分析回答请据图分析回答:新题预测新题预测技法演练场技法演练场(1)(1)图图1 1中中,将溶化
23、好的海藻酸钠溶液将溶化好的海藻酸钠溶液_,_,加入已活化的酵母细胞加入已活化的酵母细胞,进进行充分搅拌行充分搅拌,使其混合均匀使其混合均匀,再转移至注射器中。海藻酸钠载体的特点是再转移至注射器中。海藻酸钠载体的特点是_。(2)(2)某同学在图某同学在图1 1步骤结束后得到图步骤结束后得到图3 3所示的实验结果所示的实验结果,出现此结果的可能原因是出现此结果的可能原因是海藻酸钠浓度过海藻酸钠浓度过_(_(填填“高高”或或“低低”)。(3)(3)图图1 1中制备的凝胶珠用中制备的凝胶珠用_后再转移到图后再转移到图2 2装置中。装置中。(4)(4)下面是制备固定化酵母细胞的步骤下面是制备固定化酵母细
24、胞的步骤,正确的是正确的是_。配制配制CaClCaCl2 2溶液溶液配制海藻酸钠溶液配制海藻酸钠溶液海藻酸钠与酵母细胞混合海藻酸钠与酵母细胞混合酵母细胞活化酵母细胞活化固定化酵母细胞固定化酵母细胞A.A.B.B.C.C.D.D.(5)(5)若用固定化酶技术生产高果糖浆若用固定化酶技术生产高果糖浆,需要使用需要使用_酶。从酶数量的角度分酶。从酶数量的角度分析析,与固定化酶技术相比与固定化酶技术相比,固定化细胞固定的是固定化细胞固定的是_。如果反应物是大。如果反应物是大分子物质分子物质,应采用固定化应采用固定化_(_(填填“酶酶”或或“细胞细胞”)技术。技术。【解析】【解析】(1)(1)图图1 1
25、中中,将溶化好的海藻酸钠溶液冷却至室温将溶化好的海藻酸钠溶液冷却至室温(防止高温杀死酵母防止高温杀死酵母菌菌),),加入已活化的酵母细胞加入已活化的酵母细胞,进行充分搅拌进行充分搅拌,使其混合均匀使其混合均匀,再转移至注射器中。再转移至注射器中。海藻酸钠载体的特点是不溶于水、多孔。海藻酸钠载体的特点是不溶于水、多孔。(2)(2)某同学在图某同学在图1 1步骤结束后得到图步骤结束后得到图3 3所示的实验结果所示的实验结果,即凝胶珠不成形即凝胶珠不成形,出现此出现此结果的可能原因是海藻酸钠浓度过高。结果的可能原因是海藻酸钠浓度过高。(3)(3)图图1 1中制备的凝胶珠用蒸馏水洗涤后再转移到图中制备
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