12微生物的培养技术及应用课件.pptx

1、 学习目标 1.概述培养基的配制方法和微生物纯培养的基本操作要求,进行酵母菌的纯培养。2.阐明微生物选择培养的原理。3.进行土壤中分解尿素的细菌的分离和计数 思考讨论-从社会中来P9 经过杀菌处理的牛奶中添加某些对人体有益的细菌，在经过发酵就可以制成酸奶，由于制作工艺并不复杂，一些人会在家里自制酸奶，自制酸奶虽然方便，但是食用自制酸奶导致肠胃不适的事件屡见不鲜，主要原因是制作过程中有杂菌混入。解析：应做好无菌处理，控制发酵条件，避免杂菌混入。微生物1.种类 微生物2.培养条件：提供合适的营养和环境条件 确保其它微生物无法混入培养基无菌技术 一.培养基的配制 1.概念：人们按照微生物对营养物质的

2、不同需求，配置出供其生长繁殖的营养基质。2.种类（按物理性质）加凝固剂琼脂液体培养基 固体培养基 2.培养基种类分类分类标准标准培养基种类培养基种类培养基特点培养基特点作用作用物理性质固体培养基加凝固剂，如琼脂微生物的分离与鉴定，活菌计数，保藏菌种半固体培养基容器放倒不致流出，剧烈震动则破散 观察微生物的运动、分类鉴定液体培养基不加凝固剂常用于工业生产功能选择培养基根据某种微生物的特殊营养要求配置 选择分离鉴别培养基加入能与目的菌的代谢产物发生显色反应的指示剂鉴定成分来源天然培养基含化学成分不明确的天然物质工业生产合成培养基用已知的化学物质配制分类鉴定 一.培养基的配制 3.用途：用以培养、分

3、离、鉴定、保存微生物或积累其代谢物营养。4.营养成分：水、无机盐、碳源、氮源，此外还要满足微生物生长对PH、特殊营养物质以及氧气的需求。4.营养成分营养要素营养要素来源来源功能功能碳源无机碳源CO2、NaHCO3等含碳无机物构成细胞物质和一些代谢产物；有机碳既是碳源又是能源有机碳源糖类、脂质、蛋白质、有机酸、石油等氮源无机氮源N2、NH3，氨盐、硝酸盐等将无机氮合成含氮的代谢产物有机氮源牛肉膏、蛋白胨、尿素、氨基酸等合成蛋白质、核酸和含氮的代谢废物生长因子维生素、氨基酸、碱基酶和核酸的组成成分；参与代谢过程中的酶促反应水外界摄入良好的溶剂；维持生物大分子结构的稳定无机盐无机物提供除碳、氮以外的

4、各种重要元素 思考讨论 P10 1.为什么培养基需要氮源?【答案】培养基中的氮元素是微生物合成蛋白质、核酸等物质所必需的。2.无菌技术除用来防止实验室的培养物被其他外来微生物污染外，还有什么作用？【答案】无菌技术还能有效避免操作者被微生物感染。二.无菌技术 1.获得纯净的微生物培养物的关键是防止杂菌污染 2.常用的灭菌、消毒方法比较灭菌和消毒种类灭菌和消毒种类主要操作主要操作应用范围应用范围灼烧灭菌酒精灯微生物接种工具，如涂布器、接种环、接种针或其他金属用具，试管口，瓶口干热灭菌160到170，加热23小时玻璃器皿如吸管、培养皿，金属用具等湿热灭菌100千帕，121维持1530分钟 培养基及多

5、种器材煮沸消毒法100煮沸56分钟家庭餐具巴氏消毒法6265，消毒30分钟牛奶、啤酒、果酒、酱油等不宜进行高温灭菌的液体紫外线消毒紫外线照射30分钟接种箱、接种室、超净工作台化学药物消毒法体积分数为70%-75%的酒精，碘酒，石炭酸等皮肤伤口等组织表面、空气、手术器械、塑料等 2.常用的灭菌、消毒方法比较干热灭菌箱 高压蒸汽灭菌锅 紫外线消毒 三.微生物的纯培养 1.纯培养（1）纯培养物：由单一个体繁殖所获得的微生物群体。（2）纯培养：获得纯培养物的过程。2.酵母菌纯培养的操作过程2.1制备培养基2.2接种和分离酵母菌注意事项：第一次划线及每次划线之前都需要灼烧接种环灭菌划线，操作结束后仍需灼

6、烧接种环。灼烧接种环后，要待其冷却后才能伸入菌液，以免温度太高杀死菌种。划线时，最后一区不要与第一区相连，划线时用力大小要适当，防止用力过大将培养基划破。2.3培养酵母菌将接种后的平板和一个未接种的平板倒置;放入28度左右的恒温培养箱中，培养2448小时。避免接种环上可能存在的微生物污染培养物灼烧杀死接种环上残留的菌种，避免菌种污染环境和感染操作者灼烧杀死上次划线结束后接种环上残留的菌，使每次划线的菌种来自上次划线的末端 探究 实践 P13 1.在未接种的培养基表面是否有菌落生长？如果有，说明了什么？【答案】在未接种的培养基表面应该没有菌落生长，如果有，说明培养基被杂菌污染。2.在接种酵母菌的

7、培养基上，你是否观察到了单菌落？这些菌落的颜色、形状 和大小是否一致？如果你观察到了不同形态的菌落，你能分析出可能是由哪些原因引起的吗？【提示】在泡菜发酵初期，由蔬菜表面带入的大肠杆菌、酵母菌等较为活跃，它们可进行发酵，发酵产物中有较多的CO2，如果泡菜坛装得太满，发酵液可能会溢出坛外。另外，泡菜坛装得太满，会使盐水不太容易完全淹没菜料，从而导致坛内菜料变质腐烂。泡菜坛留有一定的空间，也更方便拿取泡菜。思维训练 P14【提示】所谓“酵素”，就是“酶”的另一种说法。“酵素”制作就是利用微生物进行无氧呼吸的原理，进行像制作泡菜一样的发酵。这样制作的“酵素”中可能有糖类(包括一些简单的糖和膳食纤维等)、蛋白质(包括多种酶)、有机酸等成分，不存在它独有的、特殊的营养物质，其中甚至可能含有微生物发酵产生的有毒物质,食用后可能会危害人体健康。因此,“吃水果酵素可以美容、减肥、促进消化和提高免疫力”的论点值得怀疑。可以通过查阅专业学术期刊上发表的有关研究论文，或亲自检测水果“酵素”中的成分，获取科学可靠的证据进行全面论证。