实验室操作规范与安全课件.pptx
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- 实验室 操作 规范 安全 课件
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1、实验室操作规范与安全20192019中国医科大学Manipulation&Biosafty in biolaboratories主要内容0101实验室规章制度实验室规章制度0303实验室感染事实验室感染事件类件类型型0404实验室生物安全实验室生物安全0505对生物恐怖活动的防范对生物恐怖活动的防范0606同位素的实验室操作规范同位素的实验室操作规范与安全与安全0202微生物和生物医学实验室微生物和生物医学实验室生物安全通用准则生物安全通用准则实验室规章制度实验室规章制度 实实验室感染事件时有发生,这主要是因为验室感染事件时有发生,这主要是因为从事专从事专职微生物研究职微生物研究的人员比其他工
2、作人员有更多接触病原的人员比其他工作人员有更多接触病原微生物的机会,稍有疏忽大意,就可能被试验的对象微生物的机会,稍有疏忽大意,就可能被试验的对象所感染。有人统计,从事病原微生物研究的工作人员所感染。有人统计,从事病原微生物研究的工作人员传染病发生率比普通人群高传染病发生率比普通人群高5 57 7倍。实验室感染事件倍。实验室感染事件的发生有可能成为传染源,造成危害公众健康的严重的发生有可能成为传染源,造成危害公众健康的严重后果。因此必须引起重视。后果。因此必须引起重视。实验室规章制度实验室规章制度建立健全实验室各种规章制度(建立健全实验室各种规章制度(SOP)是科研工作有序进行的必要是科研工作
3、有序进行的必要前提。前提。实验室规章制度一般包括:实验室规章制度一般包括:v人员规章制度,包括培训制度。人员规章制度,包括培训制度。v仪器使用制度。仪器使用制度。v动物使用制度。动物使用制度。v药品使用及保管制度。药品使用及保管制度。v实验室环境与生物安全制度。实验室环境与生物安全制度。v紧急情况下应急制度。例如:生物实验室里应紧急情况下应急制度。例如:生物实验室里应备有急救药剂和用品如:创可贴,纱布,烫伤备有急救药剂和用品如:创可贴,纱布,烫伤药品等。药品等。主要内容0101实验室规章制度实验室规章制度0303实验室感染事实验室感染事件类件类型型0404实验室生物安全实验室生物安全0505对
4、生物恐怖活动的防范对生物恐怖活动的防范0606同位素的实验室操作规范同位素的实验室操作规范与安全与安全0202微生物和生物医学实验室微生物和生物医学实验室生物安全通用准则生物安全通用准则微生物和生物医学实验室生物安全通用准则微生物和生物医学实验室生物安全通用准则v生物安全制度是所有制度中的最重要的制度生物安全制度是所有制度中的最重要的制度,为此,为此,我国也和其他国家一样制订了本项制度。我国也和其他国家一样制订了本项制度。v中华人民共和国卫生行业标准中华人民共和国卫生行业标准微生物和生物医学实微生物和生物医学实验室生物安全通用准则验室生物安全通用准则(WS 2332002)(WS 233200
5、2)该通用准该通用准则是以美国则是以美国CDCCDCNIHNIH微生物和生物医学实验室的生微生物和生物医学实验室的生物安全物安全第四版为蓝本制定的。第四版为蓝本制定的。微生物和生物医学实验室生物安全通用准则微生物和生物医学实验室生物安全通用准则 生物安全防护的生物安全防护的基本原则基本原则、实验室的、实验室的分类、分级分类、分级及适用及适用范围、一般生物安全防护实验室的范围、一般生物安全防护实验室的基本要求基本要求、实验脊椎动物、实验脊椎动物生物安全防护实验室、生物危险标志及使用、生物安全防护实验室、生物危险标志及使用、新建三级和四新建三级和四级生物安全防护实验室的验收和现有生物安全防护实验室
6、的级生物安全防护实验室的验收和现有生物安全防护实验室的检测检测、现有三级和四级生物安全实验室的使用和维护、附录、现有三级和四级生物安全实验室的使用和维护、附录A安全操作规程、附录安全操作规程、附录B二级生物安全柜的现场检测、附录二级生物安全柜的现场检测、附录C各各国的微生物与生物安全防护实验室适用级别表等。国的微生物与生物安全防护实验室适用级别表等。微生物和生物医学实验室的生物安全微生物和生物医学实验室的生物安全基本内容基本内容主要内容0101实验室规章制度实验室规章制度0303实验室感染事实验室感染事件类件类型型0404实验室生物安全实验室生物安全0505对生物恐怖活动的防范对生物恐怖活动的
7、防范0606同位素的实验室操作规范同位素的实验室操作规范与安全与安全0202微生物和生物医学实验室微生物和生物医学实验室生物安全通用准则生物安全通用准则实验室感染事件类型实验室感染事件类型 第一第一种是事故性感染种是事故性感染,一般是因为试验人员操作过,一般是因为试验人员操作过程中的疏忽,使程中的疏忽,使本来接触不到的微生物本来接触不到的微生物污染环境,直接污染环境,直接或间接感染实验人员。或间接感染实验人员。19561956年前苏联的一个实验室中,年前苏联的一个实验室中,有有9 9支装有支装有委内瑞拉马脑炎病毒鼠脑委内瑞拉马脑炎病毒鼠脑的安瓿被打破。事的安瓿被打破。事后没能很好地进行处理及采
8、取必要的措施,也未进行彻后没能很好地进行处理及采取必要的措施,也未进行彻底消毒,结果在几天内造成底消毒,结果在几天内造成2424名工作人员感染。名工作人员感染。实验室感染事件有四种类型实验室感染事件有四种类型实验室感染事件类型实验室感染事件类型 第二种是实验室动物引起的感染第二种是实验室动物引起的感染,由于实验人员,由于实验人员接触接触了被微生物感染的实验动物了被微生物感染的实验动物导致的感染。例如在导致的感染。例如在20092009年年我国沈阳的某高校在使用大白鼠进行试验时,有两名学我国沈阳的某高校在使用大白鼠进行试验时,有两名学生被大白鼠咬伤,还有一些学生给实验的老鼠放血、解生被大白鼠咬伤
9、,还有一些学生给实验的老鼠放血、解剖。在实验过程中,这些学生均未按照要求戴手套操作,剖。在实验过程中,这些学生均未按照要求戴手套操作,结果在结果在2929名实验人员中造成名实验人员中造成9 9人感染了人感染了流行性出血热流行性出血热。实验室感染事件类型实验室感染事件类型 第三第三种类型是气溶胶导致的感染种类型是气溶胶导致的感染,是由于实验室中的,是由于实验室中的病原病原微生物以气溶胶的形式飘散微生物以气溶胶的形式飘散在空气中,人呼吸了这在空气中,人呼吸了这种空气造成的感染。最严重的一次实验室气溶胶感染事种空气造成的感染。最严重的一次实验室气溶胶感染事故是故是1961年在莫斯科的一家研究所发生的
10、。他们的实验年在莫斯科的一家研究所发生的。他们的实验人员从人员从流行性出血热疫区捕捉到一些野鼠流行性出血热疫区捕捉到一些野鼠带回实验室,带回实验室,由于疏忽而把这些野鼠放在了室内暴露的场所。过了不由于疏忽而把这些野鼠放在了室内暴露的场所。过了不久,该实验室中有久,该实验室中有63人出现发热的症状,开始被误诊为人出现发热的症状,开始被误诊为流感,流感,1周内又增加了周内又增加了30人,才开始怀疑到是流行性出人,才开始怀疑到是流行性出血热。本次事故被认为是血热。本次事故被认为是野鼠身上带有的出血热病毒以野鼠身上带有的出血热病毒以气溶胶的形式污染了空气气溶胶的形式污染了空气所致。所致。实验室感染事件
11、类型实验室感染事件类型 第四种类型是人为破坏第四种类型是人为破坏,生物武器可以说是一种人为,生物武器可以说是一种人为的实验室感染。日本侵华战争时期的的实验室感染。日本侵华战争时期的731731细菌部队细菌部队在中国在中国犯下了制造实验室感染和细菌武器的犯下了制造实验室感染和细菌武器的滔天罪行滔天罪行。20012001年年以来在美国境内屡屡制造炭疽的恐慌事件,造成几十人以来在美国境内屡屡制造炭疽的恐慌事件,造成几十人染病,数人死亡,美国白宫和国会先后成为被袭击的目染病,数人死亡,美国白宫和国会先后成为被袭击的目标。现已有证据表明,该事件是来自美国军队的生化实标。现已有证据表明,该事件是来自美国军
12、队的生化实验室。验室。主要内容0101实验室规章制度实验室规章制度0303实验室感染事实验室感染事件类件类型型0404实验室生物安全实验室生物安全0505对生物恐怖活动的防范对生物恐怖活动的防范0606同位素的实验室操作规范同位素的实验室操作规范与安全与安全0202微生物和生物医学实验室微生物和生物医学实验室生物安全通用准则生物安全通用准则实验室生物安全实验室生物安全一、生物危害评估一、生物危害评估 当实验室活动涉及当实验室活动涉及传染或潜在传染性生物因子传染或潜在传染性生物因子时,应进行危害程度评估。危害程度评估应由适当时,应进行危害程度评估。危害程度评估应由适当的有经验的的有经验的专业人员
13、专业人员进行。进行。实验室生物安全实验室生物安全1.危害程度评估所涉及的内容:危害程度评估所涉及的内容:生物因子的种类(已知的、未知的、基因修饰生物因子的种类(已知的、未知的、基因修饰的或未知传染性的生物材料)、来源、传染性、致的或未知传染性的生物材料)、来源、传染性、致病性、传播途径、在环境中的稳定性、感染剂量、病性、传播途径、在环境中的稳定性、感染剂量、浓度、动物实验数据、预防和治疗。浓度、动物实验数据、预防和治疗。实验室生物安全实验室生物安全2.生物危险度评生物危险度评估估1)微生物的致病性和感染数量 2)暴露的潜在后果3)自然感染途径4)实验室操作所致的其他感染途径(非消化 道途径、空
14、气传播、食入)5)微生物在环境中的稳定性 实验室生物安全实验室生物安全2.生物危险度评生物危险度评估估6)所操作微生物的浓度和浓缩标本的容量7)适宜宿主(人或动物)的存在8)从动物研究和实验室感染报告或临床报告得到的信息9)计划进行的实验室操作(超声处理、气溶胶化、离心等)10)可能会扩大微生物的宿主范围或改变微生物对于已知有效治疗方案敏感性的所有基因技术11)当地是否能进行有效的预防或治疗干预实验室生物安全实验室生物安全二、生物危害程度的分级二、生物危害程度的分级根据对个体和群体的危害性分四级:根据对个体和群体的危害性分四级:级:级:指危害性最低指危害性最低的病毒、细菌、真菌和寄生虫的病毒、
15、细菌、真菌和寄生虫等生物因子;等生物因子;级:指级:指中等危害中等危害的生物因子,多为条件致病菌或的生物因子,多为条件致病菌或机会致病菌;机会致病菌;级:指能引起级:指能引起个体的个体的严重感染,但不易在人群中严重感染,但不易在人群中传播扩散的生物因子;可用抗生素治疗传播扩散的生物因子;可用抗生素治疗级:级:指能引起指能引起个体和群体个体和群体严重感染,难治疗严重感染,难治疗实验室生物安全实验室生物安全四级操作规范四级操作规范 除下列修改以外,应采用三级生物安全水除下列修改以外,应采用三级生物安全水平的操作规范平的操作规范:v实行双人工作制实行双人工作制,任何情况下严禁任何人单独在实验室内,任
16、何情况下严禁任何人单独在实验室内工作。这一点在防护服型四级生物安全水平实验室中工作工作。这一点在防护服型四级生物安全水平实验室中工作时尤其重要。时尤其重要。v在进入实验室之前以及离开实验室时,要求在进入实验室之前以及离开实验室时,要求更换全部衣服更换全部衣服和鞋子和鞋子。v工作人员要接受人员受伤或疾病状态下工作人员要接受人员受伤或疾病状态下紧急撤离紧急撤离程序培训程序培训。v在四级生物安全水平的最高防护实验室中的工作人员与实在四级生物安全水平的最高防护实验室中的工作人员与实验室外面的支持验室外面的支持人员之间人员之间,必须建立,必须建立常规情况和紧急情况常规情况和紧急情况下的联系下的联系方法。
17、方法。实验室生物安全实验室生物安全三、生物安全水平分级及相应的实验设备要求三、生物安全水平分级及相应的实验设备要求 生物安全水平生物安全水平(biosafety level,BSL)(biosafety level,BSL)分级:分级:1.BSL-1 BSL-1 实验室实验室:基础实验室。无特殊要求2.BSL-2 BSL-2 实验室实验室:基础实验室。配备高压灭菌设备,着专用工作服,带乳胶手套,生物安全柜(A2级)内操作实验室生物安全实验室生物安全实验室生物安全实验室生物安全实验室生物安全实验室生物安全实验室生物安全实验室生物安全实验室生物安全实验室生物安全实验室生物安全实验室生物安全实验室生
18、物安全实验室生物安全实验室生物安全实验室生物安全实验室生物安全实验室生物安全实验室生物安全实验室生物安全3.BSL-3 实验室实验室:高度安全实验室高度安全实验室选址:选址:建筑物中可隔离的区域或独立建筑物分布:分布:清洁区、半污染区、污染区,各区之 间设缓冲区通风:通风:独立的负压通风保护系统,气流方向:清洁区半污染区污染区安全柜:安全柜:B2级实验室生物安全实验室生物安全最最(高度高度)安全实验室安全实验室选址:选址:远离人口密集区,独立建筑,周围有 密封的安全隔离带着装:着装:正压防护服安全柜:安全柜:型(全密封型)实验室生物安全实验室生物安全实验室生物安全实验室生物安全实验室生物安全实
19、验室生物安全四、个人生物安全防护装备四、个人生物安全防护装备实验室防护服实验室防护服面部防护:面部防护:安全护目镜、面罩手套:手套:乳胶手套呼吸防护:呼吸防护:口罩实验室生物安全实验室生物安全五、安全工作行为五、安全工作行为1.有相应的危害分级标准和与之相应的实验室条件;2.对工作人员进行生物安全知识培训;3.制定相关的实验室安全管理条例和操作细则;4.实验操作时要遵守操作规程,如有危险样品泄漏,应立即报告,及时处理。实验室生物安全实验室生物安全动物实验室的生物安全防护设施应参照BSL-1BSL-4实验室的相应要求,还应考虑对动物呼吸、排泄、毛发、抓咬、挣扎、逃逸、动物实验(如染毒、医学检查、
20、取样、解剖、检验等人动物饲养、动物尸体及排泄物的处置)等过程产生的潜在生物危害的防护。应特别注意对动物源性气溶胶的防护,例如对感染动物的剖检应在负压剖检台上进行。实验室生物安全实验室生物安全 应根据动物的种类、身体大小、生活习性、实验目的等选择具适当防护水平专用于动物并符合国家相关标准的生物安全柜、动物饲养设施、动物实验设施、消毒设施和清洗设施等。实验室建筑应确保实验动物不能逃逸,非实验室动物(如野鼠、昆虫等)不能进入。实验室设计(如空间、迸出通道等)应符合所用动物的需要。实验室生物安全实验室生物安全实验室中标本的安全操作 移液管和移液辅助器的使用 避免感染性物质的扩散生物安全柜的使用避免感染
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