安捷伦气质联用仪(AgilentGCMS)培训教材.ppt

1、安捷伦气质联用仪(AgilentGCMS)培训教材第一章第一章 气相色谱气相色谱/质谱基础质谱基础*3主要内容：主要内容：MS和GC检测器的对比MS的基本理论*45973 MSD 和 6890 GC5975B MSD 和 6890 GC安捷伦安捷伦GC/MS产品线的演变产品线的演变5975C MSD 和 7890 GC*5INTERFACEGCMSD10-5 Torr2 mL/min760 Torr0.5-15 mL/min传输线传输线*6气相色谱和质谱的联用技术气相色谱和质谱的联用技术传输线传输线传输线涡轮泵自动进样器离子源炉箱*7色谱柱流量控制器稳压器空气氢气载气分子筛脱水管固定进样口检测

2、器电子部件PC限流器典型的气相色谱典型的气相色谱*8分子筛分子筛P/N 5060-9084捕氧管捕氧管P/N IOT-2-HP1/8”铜环铜环P/N 5180-4196勿泄露勿泄露气路连接气路连接主供气开关法阀主供气开关法阀二级减压阀二级减压阀*9这些气体必须：n根据所使用的检测器类型而选择n惰性n干燥n纯净使用压缩气体的安全性请从贵公司的安全部门或当地 气体供应商处获得安全知识。载气和检测器支持气载气和检测器支持气*10氧气捕集器微量的氧气会破坏色谱柱，特别是对毛细管柱。氧气也会降低ECD检测器的功能。氧气捕集器 应连接在分子筛干燥器和仪器设备的进样口之间。分子筛干燥器分子筛干燥器*11n须

3、使用GC 专用铜管或不锈钢管。n塑料管会渗透O2和其它污染物。还可能会释放其它可被检测到的干扰物。n管子使用前先用溶剂冲洗，载气吹干。n根据工厂的推荐更换过滤器，以防止发生气体的污染。n每隔一定时间，应对所有外加接头进检漏（大约每隔 4-6个月）。管路和净化器管路和净化器*12根据所用的柱类型，载气压力应在60-100psi(大孔径柱即取60，细孔径柱即取 100)。空气压力应为 80 psi。推荐管线压力推荐管线压力氢气压力应为 60 psi。载气必须通过控制形成恒定的压力和恒定的流量。上下游控制器压差保持1公斤以上。减压阀和流量控制器减压阀和流量控制器*13n保留时间n用于确定样品组分，即

4、进行样品定性分析。n峰面积n用于测定样品的含量，即定量分析。典型色谱图典型色谱图*14柱长(米)I.D.(mm).5-102-45-100.5305-100.1-.25填充柱530系列柱细孔径柱填充柱开管柱（毛细管柱）壁涂开管柱色谱柱类型色谱柱类型*Agilent 7890A 前视图前视图15检测器盖检测器进样口 阀 显示屏 键盘电源开关炉箱开关*Agilent 7890A后视图后视图16炉箱排气出口进样口和检测器出口气路连接口电缆连接口电源连接口炉箱冷却风进口*Agilent 7890A 键盘介绍键盘介绍17运行按键气相部件按键数字按键信息按键方法存储和自动运行按键维护按键*18Agilen

5、t GC6890前视图前视图*19Agilent GC6890侧后视图侧后视图*20即时功能键即时功能键功能键功能键快捷键快捷键信息键信息键数字键数字键多功能键多功能键方法存贮与自动方法存贮与自动运行运行Agilent GC6890键盘介绍键盘介绍*21质谱基础质谱基础*22质谱常用术语质谱常用术语 丰度 质荷比(M/Z)基峰 分子离子 碎片离子 偶电子离子 奇电子离子5101520253035404550556065707580859095 100 105050010001500200025003000350040004500500055006000650070007500800085009

6、00095008541561006727CH3O*23常见元素同位素表常见元素同位素表*24离子源离子源离子源传输线*25推斥极 灯丝灯丝eeeeeeeeeMMMMM+.M+.FF+.12Meee eeeeeeeeeeeeeeeeeee电子电离（电子电离（EI）*26电离技术简介电离技术简介为了得到分子离子峰，采用了一些“软电离”技术：化学电离（CI）快原子轰击（FAB）场电离与场解析（FI，FD）电喷雾电离（ESI）大气压化学电离（APCI）这些电离方式与EI方式不同。它们共同之处在于电离时所需的能量比较低，因而不容易导致分子离子继续断裂。*27四极杆四极杆*28+-四级杆检测器离子聚焦高能

7、打拿极电子倍增器电子正离子信号输出高能打拿极和电子倍增器高能打拿极和电子倍增器*29(0 to-3000 V)+Incoming IonX-Ray Lens(0 to 218 V)Signal OutEM Voltage电子倍增器电子倍增器 电压有使用上限（3000伏）电压的提高，可以提高检测器的信号*30电子倍增器的寿命曲线电子倍增器的寿命曲线*31提供足够的平均自由程提供无碰撞的离子轨道减少离子-分子反应减少背景干扰延长灯丝寿命消除放电增加灵敏度 为什么为什么MS需要真空需要真空*32M/Z M/Z Abundance8216618230350100150200250 1000000Sca

8、n 32(5.281 min):ALKDEMO.DAbundance8216618230350100150200250 1000000Scan 33(5.289 min):ALKDEMO.DM/Z 50100 150200250 Abundance82166182303 1000000Scan 34(5.297 min):ALKDEMO.DM/Z Abundance8216618230350100150200250 1000000Scan 35(5.305 min):ALKDEMO.DTimeAbundance5.255.265.275.285.295.305.315.325.33 20000

9、00 4000000 6000000 8000000TIC:ALKDEMO.D32333435313630总离子流色谱总离子流色谱*33125010015020025030011109876Time minutesMass daltons气质联用数据是三维的气质联用数据是三维的*34出口气相高真空泵传输线化学工作站软件（电脑）离子源质量分析器机械泵检测器质谱仪器内部连接示意图仪器内部连接示意图*35第二章第二章ChemStation简介与开机关机的介绍简介与开机关机的介绍*36远程开机系统硬件浏览系统硬件浏览(网络化的网络化的)LAN集线器LANLAN*37进入工作站进入工作站 仪器控制窗口仪

10、器控制窗口 用于编辑和运行方法、序列、设定工作站控制级别等*界面切换通过功能键视图界面切换通过功能键视图38*39调谐和真空控制窗口调谐和真空控制窗口*40用于数据后处理（积分、本底扣除、谱库检索、定量分析等）数据分析窗口数据分析窗口*41ChemStation文件夹文件夹*42 放气阀须关好 MSD连接到接地的电源上 MSD的接口伸入柱温箱 老化好的毛细柱接好两端 99.999%的氦载气接到GC上,推荐使用净化器开机前的准备开机前的准备:5975的放气阀位置5973的放气阀位置*43597X MSD开机顺序开机顺序 打开计算机 打开气相色谱及597X质谱电源。待气相色谱完成自检，597X质谱

11、真空泵工作正常（如果机械泵声音不正常，检查侧门和放空阀是否关闭）进入工作站*44系统开机系统开机或者*45系统放空系统放空,关机关机*46系统放空（续）系统放空（续）5973 的放气的放气阀位置阀位置5975开盖装置开盖装置*47质谱的本地控制面板质谱的本地控制面板 诊断 放空/抽真空 调谐 运行/停止*48第三章第三章 调调 谐谐*49主要内容主要内容 MS调谐的基本原理 化学工作站中的不同调谐*50调谐做什么调谐做什么?设定离子源部件的电压,以得到良好的灵敏度 设定 amu gain 和 amu offset 以得到正确峰宽 设定 mass gain 和mass offset以保证正确的质

12、量分配 设定 EM 电压*51稳定可挥发碎片涵盖质量范围宽仅有C-13 和 N-15同位素无质量缺陷全氟三丁胺(PFTBA)650Scan:10.00-650.00 Samples:16 Thresh:500 117 peaks Base:69.00 Abundance:1974784 Mass Abund Rel Abund Iso Mass Iso Abund Iso Ratio 69.00 1974784 100.00 70.00 20344 1.03 219.00 1161216 58.80 219.95 45968 3.96 502.00 56648 2.87 503.00 5690

13、 10.045010015020025030035040045050055060005010013121926469414502614F CF CF CF CN CF CF CF CF.3 2 2 2 F CF CF CF C 3 2 2 2 2 2 2 3调谐标样调谐标样*52AMU gain,offset高能打拿极电子倍增器入口透镜推斥极离子化区域样品入口灯丝灯丝拉出极离子聚焦Mass axis gain,offset补偿调谐参数调谐参数 EI部件部件电压电压影响影响灯丝通常为70ev电子束能量推斥极0 42.7 volts推离子出离子源拉出极不加电孔径入口离子聚焦0 242.0 volt

14、s相对丰度入口透镜0 128 mV/amu相对丰度入口透镜补偿t0 127.5 volts相对丰度AMU Gain0 4095AMU Offset0 255HED-10,000 volts将离子转换为电子电子倍增器0 3000 volts灵敏度Mass Axis Gain2047质量分配Mass Axis Offset499质量分配*53离子源结构离子源结构 电离室：永久磁铁、灯丝、靶 透镜：推斥极、拉出极、离子聚焦、入口透镜GCMS5975C新型高温离子源*54参数阶程参数阶程*55四极杆质谱四极杆质谱0+-RF 振幅振幅DC 振幅振幅极性极性RF 频率频率*56-0+负棒负棒RF 振幅振幅

15、0+-正棒正棒DC 振幅振幅两对电极上的复合电压大小相等，直流电压极性相反两对电极上的复合电压大小相等，直流电压极性相反*57过滤高质量过滤高质量-0+负棒电位负棒负棒M+*58M+*Positive RodPositive Rod正棒电位正棒电位过滤低质量过滤低质量0+-*59Mathieu Stability Diagram马绍方程图解50221969RF 电压扫描线DC 电压斜率=AMU GAINAMUOFFSETAMU Gain 及其偏移及其偏移*60扫描线AMU Gain 及其偏移及其偏移DC 电压扫描线选择220218219AMUOFFSET斜率=AMU GAINRF 电压*61A

16、MU GAIN69219502AMU OFFSET69219502AMU Gain 渐增会:峰宽受影响大的是 影响高质量和低质量区AMU Offset 渐增会:AMU Gain 及其偏移如何及其偏移如何 影响峰宽影响峰宽峰宽分辨本领灵敏度*四极杆是由四根金属棒构成的，他们等距离且相互平衡，相互位置为对角位置。工作原理是在一对相对位置的四极杆上加上相同的直流电压DC和射频电压RF，在另一相对对杆上加上与上述的一对四极杆极性相反但大小相同的DC电压和相位相反但振幅相同的RF电压。通过精确设置调节这两种电压并应用在四极杆上，可以实现scan、sim和全通过的扫描模式。这两种电压决定了增益和补偿（马修

17、方程），决定了扫描线的位置从而而增益和补偿影响了灵敏度和分辨率。仪器通过使用调谐液，因为调谐液中所电离出来的离子都为已知的，通过已知的离子来对扫描线进行校正来调节增益和补偿，从而调节分辨率和灵敏度。一般手动调谐的参数过多，包括从离子源到光学传输组件到四极杆到检测器等一系列参数的调节，不建议使用。如果调谢不当，会影响仪器的性能。*63予期质量观测质量MassAxisGain10020030040050050040030020010069219502质量轴校正质量轴校正MassAxis offset*64为什么做自动调谐为什么做自动调谐?提供:1.诊断2.编写系统性能变化表3.提高灵敏度*65 寻

18、找质量峰 粗调EM电压和峰宽 调节离子源部件使灵敏度达到最佳 调节EM和峰宽达到最佳 质量轴校正 保存文件自动调谐流程图自动调谐流程图*66例如例如:*This is known as AutoTune on the HP5973 MSD上述丰度值不是精确值，只做演示用(Default Value)mVamu()M/Z Ent.LensOffset入口透镜电压ENTR(Set to Maximize M/Z 69)M/Z 69 502Ent.LensOffsetEntrance Lens VoltageENTRmV(amu)最 大 灵 敏 度 调 谐标 准 谱 图 调 谐使 用 最 大 灵 敏

19、 度 调 谐 对 不同 M/Z 的 增 大E M V1 6 0 0 V1 6 0 0 Vm/z 6 91,0 0 0,0 0 02 5 0,0 0 04 Xm/z 2 1 93 5 0,0 0 01 2 5,5 0 02 -3 Xm/z 5 0 21 0,0 0 01 0,0 0 01 X自动调谐与标准谱图调谐比较自动调谐与标准谱图调谐比较69 502*67 相近的峰宽平滑对称的峰形适当的EM电压合适的丰度值Low water and air正确的质量分配 典型的相对丰度自动调谐报告自动调谐报告合适的同位素比例峰的数目*68 质量数的峰宽平滑对称的峰合适的电子倍增器电压适当的丰度值低水峰及空气

20、峰正确的质量分配合适的相对丰度合适的同位素比例标准谱图调谐报告标准谱图调谐报告*69 amu gain 和 amu offset,EM 电压 及质量 轴校正 调整 所有其它源参数不变 调谐69，219，502三个质量数快速调谐快速调谐*7069 131 219 502M/Z Entrance Lens Offset目标调谐目标调谐*71BFB调谐的评价调谐的评价BrF*72DFTPP（十氟三苯磷）（十氟三苯磷）调谐评价调谐评价基峰基峰 M/Z =198.00可替换基峰可替换基峰 M/Z =442MassRel.to M/Z%Low%HighAlt.Base51.00198.0030.080.0

21、N68.0069.000.02.0N69.00198.000.0100.0N70.00198.000.02.0N127.00198.0025.075.0N197.00198.000.01.0N199.00198.005.09.0N275.00198.0010.030.0N365.00198.000.75100.0N441.00443.000.01100.0N442.00198.0040.0110.0Y443.00442.0015.024.0NPFFFFFFFFFF*73有权使用MS参数易于建立用户调谐文件诊断手动调谐手动调谐*74影响质量轴影响峰宽(分辨与灵敏度)离子源透镜参数影响灵敏度(传输

22、效率)手动调谐手动调谐*75通过手动调谐检漏通过手动调谐检漏*76调谐菜单调谐菜单*77真空真空菜单菜单*78参数菜单参数菜单*79编辑调谐和显示参数菜单编辑调谐和显示参数菜单*80归一化法的自动调谐归一化法的自动调谐(Gain Normalization Autotune，5975C新增功能新增功能)针对需要提高灵敏度的用户 提供良好稳定的高灵敏度自动调谐 更好的数据可比性App Note:5989-6050EN*81第四章第四章色谱进样技术色谱进样技术*82分流分流/不分流毛细管柱进样口分解图不分流毛细管柱进样口分解图插入件组件插入件组件衬管衬管绝缘层绝缘层垫圈垫圈变径接头变径接头保温层保

23、温层垫圈垫圈柱螺母柱螺母进样垫固定螺母进样垫固定螺母进样垫进样垫O形环形环分流出口管线分流出口管线分流分流/不分流不分流进样口实体进样口实体固定螺母固定螺母分流平板分流平板保温套保温套*83衬管的作用衬管的作用 保护色谱柱：不挥发组分滞留在衬管内。但当污染物积攒到一定量时，会吸附样品造成峰拖尾/分裂或出现鬼峰 衬管内少量经硅烷化处理的石英玻璃毛可防止注射器针尖的歧视（即针尖内的溶剂和易挥发组分首先汽化）；加速样品汽化；避免固体物质进入并堵塞色谱柱等 如果衬管太脏，可以用1N盐酸或硝酸浸泡8小时，清洗烘干后用硅烷化试剂配制成10甲苯溶液，浸泡8小时，再依次用甲苯、甲醇清洗。硅烷化处理可以选用DM

24、DCS（二甲基二氯硅胺）如果使用ECD检测器或CI源，一定要选择不含卤素的硅烷化试剂。如：HMDS、BSTFA、BSA、TSIM等。注意：高温下工作时，硅烷化的有效期只有几天。因此衬管需要及时清洗或更换。*8419251-6054018740-60840900 uL1000 uL100C)时使用。n 减少分析时间并使峰变窄。n 增加柱流失，引起基线漂移。n 可设多阶程序升温。n HP6890、7890可设“快速变化速率”至 120C/min。柱温操作柱温操作*116第五章第五章样品采集技术样品采集技术*117讨论主题:4SCAN采集方式的适用性4各种数据采集参数对数据的影响Scan 采集原理采

25、集原理*118Time-Abundance4.765.775.886.436.807.074.505.005.506.006.507.007.50 0 2000000 4000000 6000000 8000000 1e+007 1.2e+007TIC:DRUGDEMO.D总离子色谱总离子色谱*119MASSTIMEMS 采集参数质量范围e.g.35-350A/D se.g.N=2or 4 samplesper 0.1 amu Scan high low,0.1 amu steps Signal averaging with 2 determinations per 0.1 amu data

26、pointMASSTIME质量峰检测质量峰检测*120影响扫描时间的因素：平均每 0.1 amu 采集数据点的数目(sampling rate)扫描质量范围 每个色谱峰通过5-10次扫描可以很好地 定性定性!每个色谱峰通过10-20次扫描可以很好地 定量定量!MASSTIME程序时间回扫时间扫描时间扫描循环时间数字式扫描过程数字式扫描过程*1211E22E23E24E25E26E27E28E29E21E31E3ABUNDANCE150.0151.0152.0153.0154.0155.0M/Z 1.1E3阈值321451234532145STORES:154.10,1137用五个邻近的数据点平

27、滑确定中心质量(质量峰最大).质量中心的水平应超过质量阈值数据文件同时储存质量和丰度阈阈 值值*122阈值过高82182M/Z 丰度M/Z 丰度82303182阈值设置适当阈值对质谱图质量的影响阈值对质谱图质量的影响*123本章将学到 如何输入 GC 参数 如何输入 MS(Scan)参数 如何输入 MS(SIM)如何输入 如何设置系统监控数据采集设置数据采集设置*124“方法”是为仪器和计算机设定的采集和处理数据的一个完整指示。数据采集采集方式调谐文件MS 质谱应用参数GC 色谱应用参数 Methods Methods 在在 MSDCHEMnMethodsMSDCHEMnMethods 子目录

28、子目录下由下由 “.m.m”扩展名识别。扩展名识别。数据文件在数据文件在 MSDCHEMnDATA MSDCHEMnDATA 子目录下子目录下 由由 “.d.d”扩展名识别。扩展名识别。n n 表示仪器编号表示仪器编号什么是方法什么是方法?*125首先编辑首先编辑GC的配置的配置(GC7890界面界面)*126首次连接首次连接GC7890A-配置阀和其它参数配置阀和其它参数*127 首次连接首次连接GC7890A-配置色谱柱配置色谱柱*128首次连接首次连接GC7890A-配置模块配置模块*129首次连接首次连接GC7890A-配置自动进样器配置自动进样器*130编辑完整方法编辑完整方法*13

29、1方法信息方法信息*132进样方式进样方式 选择样品来源(GC 或其他)选择进样方式(手动,GC自动进样器或阀)如果是手动,选择进样口的位置 如果用质谱采集数据选择“使用质谱”；如果用GC检测器就不选*133设置进样器设置进样器*1347890A独有样品重叠进样功能独有样品重叠进样功能抓瓶l准备进样针和样品进样分析炉膛降温，数据分析第二次运行第三次运行.6890抓瓶准备进样针和样品+第一次运行.第二次运行.第三次运行.抓瓶准备进样针和样品+第一次运行.7890A*135设置样品盘设置样品盘*136设置分流不分流进样口设置分流不分流进样口*137设置色谱柱的流量设置色谱柱的流量*138设置柱箱温

30、度设置柱箱温度*139输入 GC 检测器温度设定值(如果有GC检测器）检测器检测器*140保存 GC 检测器数据(如果有GC检测器)监控温度监视流量或压力信号信号*141输入辅助部件（MS接口）温度输入辅助部件压力辅助部件辅助部件*142运行期间可自动运行25个时间表运行时间表运行时间表*143设置反吹设置反吹(GC7890A)*144设置诊断计数器设置诊断计数器(GC7890A)*145从仪器控制面板监视信号时观察GC检测器保留时间（如果有GC检测器）GC 实时绘图实时绘图*146仪器控制仪器控制(GC6890 配配MSD)所有的仪器控制界面都可以从这一界面看到 当前的方法和序列可以在标题栏

31、看到*147选择方法的某部分进行编辑 方法/编辑完整方法编辑方法编辑方法 *148填入关于方法的说明选择“数据采集”和“数据分析”方法信息方法信息*149进样方式进样方式 选择样品来源(GC 或其他)选择进样方式(手动,GC自动进样器或阀)如果是手动,选择进样口的位置 如果用质谱采集数据选择“使用质谱”；如果用GC检测器就不选*150自动进样器自动进样器 进样体积及洗针次数 按“配置”设定进样针体积 按“更多”设定取样位置等*151黏度：最后一次泵起至进样的时间。有效值0-7样品深度：0.00表示针尖与标准瓶底距离3.6mm.有效值-230.0进样前注射器在进样口停留时间,有效值0.00-1.

32、00进样后注射器在进样口停留时间,有效值0.00-1.00进针速度注射器控制（注射器控制（More)*152阀进样阀进样 必须先配置阀(如果安装了)用运行时间 对话框，控制阀的运行事件*153分流模式分流模式 选择分流 输入所有的设置*154不分流模式不分流模式 选择“不分流 输入所有的设置*155脉冲不分流模式脉冲不分流模式 选择“脉冲不分流 输入所有设置*156脉冲分流模式脉冲分流模式 选择“脉冲分流 输入所有设置*157色谱柱色谱柱 设定流量模式，连接方式等参数*158安装安装色谱色谱柱柱*159*160添加、更换柱子添加、更换柱子使用其他厂家柱子 从目录中选择柱子 在目录中增加柱子 从

33、目录中删除柱子*161校正柱长校正柱长步骤1.首先用1微升空气进样，记录其保留时间。点击 change/calibrate步骤2*162输入空气峰的真实保留时间步骤2步骤3步骤4输入空气峰的输入空气峰的真实保留时间真实保留时间*163 输入炉温设定值炉温炉温*164 输入 GC 检测器温度设定值(如果有GC检测器)检测器检测器*165 保存 GC 检测器数据(如果有GC检测器)监控温度 监视流量或压力信号信号*166输入辅助部件（MS接口）温度输入辅助部件压力辅助部件辅助部件*167运行期间可自动运行25个时间表运行时间表运行时间表*168为方法定义压力单位锁住 HP6890 键盘GC 检测器

34、柱补偿(如果有GC检测器)选项选项*169选择用于MS采集的调谐文件MS 调谐文件调谐文件*170MS采集参数（采集参数（SCAN）*171MS采集参数（续）采集参数（续）*172MS采集参数（时间和扫描范围）采集参数（时间和扫描范围）*173MS 扫描参数扫描参数（阈值和采样率）（阈值和采样率）为每一组定义阈值和采样率*174MS 扫描参数（绘图）扫描参数（绘图）定义要绘图的量和范围 激活由 SIM/Scan 参数面板的“实时绘图”控制的区域*175定时事件定时事件 检测器 on/off 时间程序 倍增电压随时间变化程序 阀时间程序*176用于监视MS源压力，阀和MS温度范围。MS 监控监控

35、*177适用于远距离控制监控警告器监控警告器*178采集数据采集数据*179CTC 控制界面控制界面*180讨论主题:选择离子检测（SIM）与扫描的区别 SIM 采集参数如何影响数据 SIM 方式如何进行数据采集选择离子检测的原则选择离子检测的原则*181SIM是什么是什么?只监视所选择信息的质荷比它如何做它如何做?控制质量分析器，仅仅对感兴趣的质量进行分析为什么做为什么做?提高灵敏度改善峰形改善精确度应用应用痕量分析复杂基质常规定量选择离子检测选择离子检测*182SIM 数据采集DwelltimeSIMmass 1SIMmass 2SIM 循环时间四极杆电压(amu)TIMESIMmass

36、3空中时间扫描数据采集扫描时间扫描循环时间空中时间四极杆电压(amu)TIMESIM与与SCAN比较比较*183 选择:离子/组数目 每个离子驻留时间 以便获得良好的数据采集所需的循环/峰数目 目标:每个峰通过 15-25 次循环 每个离子驻留时间相同 运用时间规划(SIM Groups)使 采集/循环离子数目最少设置设置 SIM 采集采集*184RF 电压DC 电压扫描线选择153151152高-维持质量峰宽 为 0.6 amu低(默认值)-质量峰宽增大到 0.9 amu选择“LOW”可增加灵敏度低分辨方式不适合于质量差别低分辨方式不适合于质量差别 3 amu300&四极杆四极杆150 并且

37、并且 质量质量 800u 禁止禁止!在较高温度下，调谐化合物谱图会发生“扭曲”。*197Kahuna Support IntroductionPage 197电子倍增器节能电子倍增器节能 电子倍增器节能只在SIM采集时才会被用到。用户为一个质量数选择总的强度限制。防止倍增器因为大的离子电流而“烧伤”(电子倍增器烧伤会导致信号响应下降)。使用:用于扩展的线性SIM研究。(高浓度下的SIM)优势:在使用高浓度的样品或标准品时，能够得到更连续一致的响应。不足:会损失一些离子比率重现性*198Page 198电子倍增器节能电子倍增器节能:打开或关闭打开或关闭在 方法 菜单栏中-默认状态为关闭的默认并推

38、荐的总和限值为108。*199第第六六章章定性分析定性分析*200本章将学到:数据分析主菜单的特征数据浏览工具熟练处理数据的性能积分参数利用反检索(PBM)进行定性分析自动谱库检索及报告参数恢复如何自建库定性分析定性分析*201数据分析窗口数据分析窗口 调用数据 放大缩小图 获得质谱图 背景扣除 峰纯度 谱库检索*202数据分析中鼠标的功能及按相对丰度显示质谱图数据分析中鼠标的功能及按相对丰度显示质谱图*203数据分析界面的鼠标右键功能数据分析界面的鼠标右键功能 可以通过点击工具栏快捷键，切换是否启动右键功能 右键在导航界面，总离子流图和质谱图的内容不同*204下拉菜单文件（下拉菜单文件（F）

39、*205本底扣除本底扣除*206SIM/Scan 同步数据同步数据 可以选择要调用的数据 通常都是同时显示。如图所示*207方法方法 下拉菜单下拉菜单*208重新处理菜单重新处理菜单*209色谱图色谱图 下拉菜单下拉菜单*210提取离子色谱提取离子色谱*211提取离子色谱提取离子色谱*212 简易简易EICs在EIC图上同时点击左右键*213不纯峰纯度峰纯度纯不纯*214绘制关联色谱图绘制关联色谱图绘制与当前质谱图相关联的所有扫描的离子流图*215用于设置化学工作站积分参数用于保存当前化学工作站积分参数用于加载，修复，保存化学工作站积分参数化学工作站积分参数化学工作站积分参数保存为方法的一部分

40、保存为方法的一部分*216 B B B BB=基线B V BV=峰谷点B P BP=基线渗透B H HH=水平基线(基线漂移）各种积分事件各种积分事件*217用于设置 RTE 积分参数用于保存当前 RTE 积分参数用于加载，修复，保存 RTE积分参数RTE 积分参数积分参数峰起点与终点高度差与峰高相比基线位置。分离相邻两峰的最少扫描次数基线下落或切线峰位置（顶点或峰重心最小峰面积最多峰数目保存为方法的一部分RTE积分文件扩展名为.P*218将检索结果标注在色谱图上将检索结果标注在色谱图上将PBM检索的第一个匹配结果（连同匹配度）标注在峰上*219谱图下拉菜单谱图下拉菜单*220质谱图浓缩谱图(

41、15-26 个最重要的峰)PBM 库检索的概念库检索的概念*221选择所要检索的谱库从质谱菜单/选择谱库谱库检索谱库检索选择谱库*222PBM检索结果检索结果*223PBM检索结果文本文件检索结果文本文件*224检索统计表检索统计表*225将检索报告作为方法的一部分自动谱库检索自动谱库检索选择 Method/Edit Method.选择 LibSearch Report设定期望的报告风格及打印目的地*226自动谱库检索摘要报告自动谱库检索摘要报告*227建立自建库建立自建库*228添加和编辑信息添加和编辑信息将用户当前数据文件中的一张质谱图放入自建库将用户当前数据文件中的一张质谱图放入自建库*

42、229参数检索参数检索*230参数反向检索结果参数反向检索结果*231选用分子结构数据库步骤选用分子结构数据库步骤*232在molstruc处双击左键点击确认*233工具下拉菜单工具下拉菜单*234自动化工具：运行扫描自动化工具：运行扫描*235信噪比测定信噪比测定*236信噪比测定信噪比测定(续续)*237编写及运行宏程序编写及运行宏程序*238分析多个数据文件分析多个数据文件通过同时显示来自多数据文件的总离子流图和提取离子色谱图比较数据*239分析多个数据文件窗口分析多个数据文件窗口*240分析多个质谱图分析多个质谱图通过谱图比较、重叠、差减的方式对照两张质谱图*241多谱图查看窗口多谱图

43、查看窗口*242第七章第七章定量基础定量基础*243校正（定量）校正（定量）校正即是利用某个峰的峰高或峰面积来确定其对应组分的浓度或含量 当检测器灵敏度针对不同的组分而变化；及检测器对同一组分不同含量响应值发生变化时需做校正校正方法校正方法 *面积百分比法AREA%*峰高百分比法HEIGHT%归一化法NORM%外标法ESTD 内标法ISTD*不是校正方法*244面积百分比法面积百分比法AREA%AREA(pk)AREA%=x100%AREA(pk)假定检测器响应都相同 所有组分都流出所有组分都被检测到优点缺点无需做校正以上所有的假定简单、快速的定量过程需测量所有的组分进样量不要求严格所有的面积

44、都必须准确*245响应因子响应因子绝对响应因子RF=含量/面积校正检测器响应与组分的含量及其它组分的存在无关含量 100100 200面积30002500 4000*246归一化法归一化法(NORM)RF(pk)x AREA(pk)NORM%=x100%RF(pk)x AREA(pk)假定所有组分都流出所有组分都被检测到优点缺点简单、快速的定量过程所有组分峰都要流出进样量不要求严格需测量所有的组分必须校正所有的峰*247外标法（外标法（ESTD）含量面积(pk)x RF(pk)优点校正检测器的响应只对欲分析的组分峰做校正无需所有峰都能被检测到缺点进样量必须准确仪器必须有良好的稳定性需定期做再校

45、正*248定量分析定量分析*249单级校正单级校正 对每一峰只做一次校正 单级校正中做了如下假设：响应因子不会因为某峰对应物质的含量变化而发生变化响应曲线须通过原点含量响应值(A或H)含量 响应值 A或HA(istd)或H(istd)*250多级校正多级校正 对每一峰需做至少两次校正 可以补偿检测器对不同含量的样品组分而给出非线性响应。响应曲线可以不通过原点*251多级校正过程多级校正过程 首先准备一个混合标样，其浓度应高于欲分析物的浓度 将浓标样等梯度稀释，其中最低浓度低于待测物的浓度 运行每一级稀释好的标样 在每一级上进行校正 运行待测样品并使用校正表分析它 需要时进行再校正*252线性拟

46、合（最小二乘法）含量响应值(A或H)点到点校正曲线含量响应值(A或H)非线性拟合含量响应值(A或H)含量响应值(A或H)含量响应值(A或H)含量响应值(A或H)*253RF(pk)面积(pk)含量RF(ISTD)面积(ISTD)优点进样量不严格要求.内标的加入消除了由于进样量、仪器不稳定等因素带来的系统误差。只对欲分析的组分峰做校正缺点必须加一个组分进到样品，易增加面积测量误差。*内标含量 =*内标含量面积(pk)面积(ISTD)RF 内标法（内标法（ISTD）*254选择内标物的标准选择内标物的标准1.样品中不存在2.化学性质与样品相似3.与样品有相同的浓度范围4.不会与样品发生反应5.在感

47、兴趣组分附近流出6.*可得到分离良好的、干净利落的峰7.色谱性质稳定8.可迅速容易得到*255本章将学到:1.如何设置并调试定量数据2.如何编辑定量结果3.如何产生定量报告定量数据分析定量数据分析*256步骤 3:查找限定离子步骤 2:保留时间窗口内查找目标离子步骤 1:在信号窗口内查找峰积分化学工作站定量概念化学工作站定量概念*257分析标准物分析未知物建立标准曲线由曲线计算含量ResponseAmountStd 1UnknownUnknown amtUnknown responseStd 2定量过程定量过程*2583连同校正表下载方法文件.3下载第一个标准数据文件3选择 校正/设置定量设置

48、定量数据资料设置定量数据资料*259选择校正/设置定量.定量数据资料表定量数据资料表 参考峰窗口：仅用于内标 非参考缝窗口：用于其它化合物 相关窗口：允许目标离子与限定离子的保留时间之差 默认值+/-：峰起点与终点须在此范围内是否用RTE积分*260*261单击“插入上方输入化合物输入化合物*262输入化合物输入化合物(续续)*263内标指令内标指令*264用于:增加新级别级别再校正删除级别更新校正表更新校正表内标物浓度*265编辑化合物信息表编辑化合物信息表鉴定鉴定*266*267编辑化合物信息表编辑化合物信息表校正校正*268编辑化合物信息表编辑化合物信息表用户定义用户定义*269编辑化合

49、物信息表编辑化合物信息表高级的高级的*270编辑化合物信息表编辑化合物信息表报告中报告中*271用于:增加新级别级别再校正删除级别更新校正表更新校正表(1701DA版版)内标物浓度*272化合物信息化合物信息-第第 1页页*273*274化合物信息化合物信息-第第 2页页*275化合物信息化合物信息-第第 3页页校正曲线*276校正曲线校正曲线*277调用未知化合物的数据使用定量调用未知化合物的数据使用定量/计算计算*27831.选择 方法/编辑方法.32.选定“定量报告33.选定报告格式和目的地34.保存方法!自动生成定量报告自动生成定量报告*279定量报告选项定量报告选项*280使用使用

50、定量编辑定量结果定量编辑定量结果 手动再积分手动再积分*281使用下列工具:跟踪模式定量 查找化合物/查找全部化合物 快捷定性如果 峰/限定离子找不到,检查:1.积分2.数据文件中的质量数3.时间范围4.信号相关窗口如果出现奇怪的校准曲线,检查:1.数量2.积分事件3.响应定量数据库故障排除定量数据库故障排除*282修正保留时间校正离子比率设置信号萃取窗口快捷定性快捷定性*283第第八八章章用户报告和资料库用户报告和资料库*284本章将学到本章将学到:如何建立模板及产生报告如何建立资料库及其更新用户报告和资料库用户报告和资料库*285形象的运行时间程序一旦安装,直接建立 hpchemcustr