基因工程及其应用-公开课一等奖课件PPT.ppt
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1、基因工程及其应用-公开课一等奖课件PPT能发能发荧光荧光的热的热带斑带斑马鱼马鱼普通热带斑马鱼是不发荧光的普通热带斑马鱼是不发荧光的转基因鲑转基因鲑鱼鱼同时具有高同时具有高产、稳产和产、稳产和抗逆性等优抗逆性等优良品质的农良品质的农作物新品种作物新品种.抗虫害的玉米抗虫害的玉米思考:思考:1、为什么能把一种生物的基因、为什么能把一种生物的基因“嫁接嫁接”到另一到另一种生物上?种生物上?2、推测这种、推测这种“嫁接嫁接”怎样能实现?怎样能实现?3、这种、这种“嫁接嫁接”对品种的改良有什么意义?对品种的改良有什么意义?又叫做又叫做或或。通。通俗的说,就是按照人们的意愿,把一种生俗的说,就是按照人们
2、的意愿,把一种生物的某种物的某种基因基因提取出来,加以修饰改造,提取出来,加以修饰改造,然后放到另一种生物的细胞里,然后放到另一种生物的细胞里,地改地改造生物的造生物的。目的目的基因基因供体供体细胞细胞受体受体细胞细胞获得新获得新性状性状二、基因操作的工具二、基因操作的工具1.1.基因的基因的“剪刀剪刀”限制性核酸内切酶限制性核酸内切酶(限制酶)(限制酶)一种限制酶只能识别一种特定的核苷酸序一种限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列,并在特定的切点上切割列,并在特定的切点上切割DNADNA分子。分子。专一性专一性如如:EcoRI限制酶限制酶重播被同一种限制酶切断的几个被同一种限制酶切断的几个DNA
3、DNA是否是否具有相同的黏性末端?具有相同的黏性末端?思考思考:黏性末端黏性末端黏性末端黏性末端尝试写出下列序列受尝试写出下列序列受EcoRI限制酶作用后的黏性末端限制酶作用后的黏性末端CTTCATGAATTCCCTAA GAAGTACTTAAGGGATT GAATTCCGTAGAATTCGGATT CTTCATG AATTCCCTAA GAAGTACTTAA GGGATT CTTAAGGCATCTTAAGCCTAA GGCATCTTAAAATTCCGTAG、基因的针线、基因的针线DNADNA连接酶连接酶连接酶的作用是:将互补配对的两个黏性末连接酶的作用是:将互补配对的两个黏性末端连接起来,使
4、之成为一个完整的端连接起来,使之成为一个完整的DNADNA分子。分子。基因的针线:基因的针线:DNA连接酶连接酶G A A T T CC T T A A GG A A T T CC T T A A GG C T T A A A A T T C GG C T T A A A A T T C GG C T T A A A A T T C G用同种限制酶切割用同种限制酶切割3 3、基因的运输工具、基因的运输工具运载体运载体 常用的运载体:常用的运载体:质粒、噬菌体和质粒、噬菌体和动植物病毒等动植物病毒等标记基标记基因,便因,便于进行于进行检测。检测。质粒存在于许质粒存在于许多细菌和酵母菌等多细菌和酵
5、母菌等生物中生物中,是细胞染是细胞染色体外能够自主复色体外能够自主复制的很小的环状制的很小的环状DNADNA分子分子.要使目的基因与对应的运载体重组,所需的两种酶是要使目的基因与对应的运载体重组,所需的两种酶是()()限制酶连接酶解旋酶还原酶限制酶连接酶解旋酶还原酶 2.2.基因工程的正确操作步骤是()基因工程的正确操作步骤是()使目的基因与运载体结合使目的基因与运载体结合将目的基因导入受体细胞将目的基因导入受体细胞检测目的基因的表达是否符合特定性状要求检测目的基因的表达是否符合特定性状要求提取目的基因提取目的基因 水母1、基因工程与作物育种苏云金杆菌苏云金杆菌转黄瓜抗青枯病基因的甜椒转黄瓜抗
6、青枯病基因的甜椒转鱼抗寒基转鱼抗寒基因的番茄因的番茄转基因耐贮藏番茄(左)和普通番茄(右)转基因耐贮藏番茄(左)和普通番茄(右)不会引起过敏的转基因大豆生长快、肉质好的转基因生长快、肉质好的转基因鱼鱼(中国中国)乳汁中含有人生长激素的乳汁中含有人生长激素的转基因牛转基因牛(阿根廷阿根廷)中国农业大学获得的转基因克隆奶牛中国农业大学获得的转基因克隆奶牛 导入人基因具特殊用途的猪和小鼠导入人基因具特殊用途的猪和小鼠2 2、基因工程与药物研制、基因工程与药物研制我国生产的部分基因我国生产的部分基因工程疫苗和药物工程疫苗和药物许多药品的生产许多药品的生产是从是从生物组织生物组织中提取中提取的。受材料来
7、源限制的。受材料来源限制产量有限,其价格往产量有限,其价格往往十分昂贵。往十分昂贵。微生物生长迅速,容易控制,适于大规模微生物生长迅速,容易控制,适于大规模工业化生产。若工业化生产。若将生物合成相应药物成分的基将生物合成相应药物成分的基因因导入微生物细胞内,让它们产生相应的药物,导入微生物细胞内,让它们产生相应的药物,不但能解决产量问题,还能大大降低生产成本。不但能解决产量问题,还能大大降低生产成本。胰岛素从猪、牛等动物的胰胰岛素从猪、牛等动物的胰腺中提取,腺中提取,100Kg100Kg胰腺只能提取胰腺只能提取4-5g4-5g的胰岛素,其产量之低和价的胰岛素,其产量之低和价格之高可想而知。格之
8、高可想而知。将合成的胰岛将合成的胰岛素基因导入大肠杆素基因导入大肠杆菌,每菌,每2000L2000L培养液培养液就能产生就能产生100g100g胰岛胰岛素!使其价格降低素!使其价格降低了了30%-50%!30%-50%!干扰素治疗病毒感染简直是干扰素治疗病毒感染简直是“万能灵万能灵药药”!过去从人血中提取,!过去从人血中提取,300L血才提血才提取取1mg!其!其“珍贵珍贵”程度自不用多说。程度自不用多说。人造血液、白细胞介素、人造血液、白细胞介素、乙肝疫苗等通过基因工程实乙肝疫苗等通过基因工程实现工业化生产,均为解除人现工业化生产,均为解除人类的病苦,提高人类的健康类的病苦,提高人类的健康水
9、平发挥了重大的作用。水平发挥了重大的作用。人造血液及其生产人造血液及其生产乙肝疫苗乙肝疫苗我国生产的部分基因工程药物和疫苗我国生产的部分基因工程药物和疫苗我国生产的部分胰岛素产品我国生产的部分胰岛素产品3 3、基因工程与环境保护、基因工程与环境保护基因工程做成的基因工程做成的“超级细菌超级细菌”能吞食和分解多能吞食和分解多种污染环境的物质。种污染环境的物质。通常一种细菌只能分解石油中的一种烃类,用基因通常一种细菌只能分解石油中的一种烃类,用基因工程培育成功的工程培育成功的“超级细菌超级细菌”却能分解石油中的多种烃却能分解石油中的多种烃类化合物。有的还能吞食转化汞、镉等重金属,分解类化合物。有的
10、还能吞食转化汞、镉等重金属,分解DDTDDT等毒害物质。等毒害物质。利用基因工程培育的利用基因工程培育的“指示生物指示生物”能十分能十分灵敏地反映环境污染的情况,却不易因环境污灵敏地反映环境污染的情况,却不易因环境污染而大量死亡,甚至还可以吸收和转化污染物染而大量死亡,甚至还可以吸收和转化污染物。转基因生物和转基因食品的安全性转基因生物和转基因食品的安全性 转基因食品已经走进我国百姓的生活。转基因食品已经走进我国百姓的生活。国内尚没有转基因作物的大规模生产国内尚没有转基因作物的大规模生产 近几年我国大量从美国、阿根廷等国进近几年我国大量从美国、阿根廷等国进口大豆,其中大部分是转基因大豆。口大豆
11、,其中大部分是转基因大豆。我国有一半以上的大豆色拉油含有转基我国有一半以上的大豆色拉油含有转基因成分。因成分。现在国内都有哪些转基因食品?现在国内都有哪些转基因食品?第一批列入目录的农业转基因生物是:第一批列入目录的农业转基因生物是:大豆:大豆:大豆种子、大豆、大豆粉、大豆油、豆粕大豆种子、大豆、大豆粉、大豆油、豆粕 玉米:玉米种子、玉米、玉米油、玉米粉玉米:玉米种子、玉米、玉米油、玉米粉 油菜:油菜:油菜种子、油菜籽、油菜籽油、油菜籽粕油菜种子、油菜籽、油菜籽油、油菜籽粕 棉花种子棉花种子 番茄:番茄种子、鲜番茄、番茄酱番茄:番茄种子、鲜番茄、番茄酱现在市场上常见的小西红柿算是转基现在市场上
12、常见的小西红柿算是转基因食品么?因食品么?小西红柿其实并不属于转基因食品小西红柿其实并不属于转基因食品,它是通过常规育种方法培育的。,它是通过常规育种方法培育的。转基因植物的安全性争论转基因植物的安全性争论 支持派认为:如果转基因农业生物技术得支持派认为:如果转基因农业生物技术得不到社会支持,这一研究将被扼杀,并且不到社会支持,这一研究将被扼杀,并且强调,迄今为止并没有发现转基因食品危强调,迄今为止并没有发现转基因食品危害人体健康和环境的确切证据。害人体健康和环境的确切证据。美国人食用转基因食品已美国人食用转基因食品已多年,多年,超级超级市场上市场上有有4000多种商品是含多种商品是含有有转基
13、转基因因植物成分的植物成分的,还没有事例证明人吃了还没有事例证明人吃了以后会得病,甚至会引以后会得病,甚至会引起起死亡。死亡。加拿大、澳大利亚也是转基因食品的加拿大、澳大利亚也是转基因食品的生产大国,均生产大国,均有几有几千万人在千万人在吃吃,到现,到现在为止也没在为止也没有有个案例说明它个案例说明它有有问题问题。反对派的观点反对派的观点 一英国科学家声称,转基因马铃薯会减一英国科学家声称,转基因马铃薯会减弱老鼠免疫系统功能;弱老鼠免疫系统功能;美国康乃尔大学也发现,转基因玉米会美国康乃尔大学也发现,转基因玉米会危害蝴蝶幼虫及其相关生态环境。危害蝴蝶幼虫及其相关生态环境。环保团体认为这种违反自
14、然的转基因作环保团体认为这种违反自然的转基因作物及产品,未经长期安全测试,长期食物及产品,未经长期安全测试,长期食用可能对人类及生态环境造成负面影响用可能对人类及生态环境造成负面影响。尤其是注重环境和生态保护的欧盟国家尤其是注重环境和生态保护的欧盟国家,对转基因作物更加排斥,因而抵制美,对转基因作物更加排斥,因而抵制美国国GMO产品的进口。产品的进口。“转基因食品,要不要贴标签转基因食品,要不要贴标签?”若转基因产品与目前市售的产品具有实质若转基因产品与目前市售的产品具有实质等同性,则不需再加特殊的标签;等同性,则不需再加特殊的标签;若转基因产品中含有对一部分人群有过敏若转基因产品中含有对一部
15、分人群有过敏性反应的蛋白,则需加标签,以使购买者性反应的蛋白,则需加标签,以使购买者作出选择。作出选择。我国我国 2001年年6月月6日,国务院公布的日,国务院公布的农业转基农业转基因生物安全管理条例因生物安全管理条例规定,不得销售未规定,不得销售未标识的农业转基因生物,其标识应注明产标识的农业转基因生物,其标识应注明产品中含有转基因成分的主要原料名称;有品中含有转基因成分的主要原料名称;有特殊销售范围的还应注明并在指定范围内特殊销售范围的还应注明并在指定范围内销售。销售。转基因马铃薯转基因马铃薯转基因烟草转基因烟草抗虫棉抗虫棉抗抗CMVCMV甜椒甜椒 全身散发绿色荧光的全身散发绿色荧光的转基
16、因鱼转基因鱼美科学家研制出世界美科学家研制出世界上第一只转基因蝴蝶上第一只转基因蝴蝶首只转基因猴降生首只转基因猴降生超凡嗅觉能力的超凡嗅觉能力的转基因鼠转基因鼠 临床常见的生长激素,干扰素和乙肝疫苗等药物都临床常见的生长激素,干扰素和乙肝疫苗等药物都可以用基因工程来大规模生产可以用基因工程来大规模生产1987年开始上市的干扰素年开始上市的干扰素转基因食品看起来分外诱人转基因食品看起来分外诱人餐桌上的基因餐桌上的基因转基因食品你敢吃吗?转基因食品你敢吃吗?转基因食品转基因食品ABC ABC 细菌和人是差异非常大的细菌和人是差异非常大的两种生物两种生物,为什么通过基因重组为什么通过基因重组后后,细
17、菌能够合成人体的某些蛋细菌能够合成人体的某些蛋白质呢白质呢?这可不是普通这可不是普通的细菌,它是的细菌,它是嫁接了人胰岛嫁接了人胰岛素基因的工程素基因的工程菌,能大量合菌,能大量合成人胰岛素。成人胰岛素。讧讨让讪讫讬训议诃评诅诛诰诱诲诳说诵诶请诸诹诺孉孊娈孋孊孍孎孏嫫婿媚子部:孑孒孓孖孚玭昆吡纰妣锴鈚秕庇沘毛部:毜毝毞毟毠毡毢毣毤毥毦绒毨毩毪毫球毭毮毯毰毱毲毳毴毵毶毷毸毹毺毻毼毽毾毵氀氁牦氃氋氄氅氆氇毡氉毡氍氎氏部:氒氐抵坻坁胝阍痻泜汦茋芪柢砥奃睧视蚳蚔呧軧軝崏弤婚怟惛忯岻貾气部:氕氖気氘氙氚氜氝氞氟氠氡氢氤氥氦氧氨氩氪氭氮氯氰氱氲水氵部:氶氷凼氺氻氼氽泛氿汀汃汄汅氽汈汊汋汌泛汏汐汑汒汓汔汕汖
18、汘污污汛汜汞汢汣汥汦汧汨汩汫汬汭汮汯汰汱汲汳汴汵汶汷汸汹汻汼汾汿沀沂沃沄沅沆沇沊沋沌冱沎沏洓沓沔沕沗沘沚沛沜沝沞沠沢沣沤沥沦沨沩沪沫沬沭沮沯沰沱沲沴沵沶沷沸沺沽泀泂泃泅泆泇泈泋泌泍泎泏泐泑泒泓泔泖泗泘泙泚泜溯泞泟泠泤泦泧泩泫泬泭泮泯泱泲泴泵泶泷泸泹泺泾泿洀洂洃洄洅洆洇洈洉洊洌洍洎洏洐洑洒洓洔洕洖洘洙洚洜洝洠洡洢洣洤洦洧洨洫洬洭洮洯洰洱洳洴洵洷洸洹洺洼洽洿浀浂浃浄浈浉浊浌浍浏浐浒浔浕浖浗浘浚浛浜浝浞浟浠浡浢浣浤浥浦浧浨浫浭浯浰浱浲浳浵浶浃浺浻浼浽浾浿涀涁涂涃涄涅涆泾涊涋涍涎涐涑涒涓涔莅涗涘涙涚涜涝涞涟涠涡涢涣涥涧涪涫涬涭涰涱涳涴涶涷涸涹涺涻凉涽涾涿淁淂淃淄淅淆淇淈淉淊淌淍淎淏淐淓淔淕淖淗淙淛淜淞
19、淟淠淢淣淤渌淦淧沦淬淭淯淰淲淳淴涞滍淾淿渀渁渂渃渄渆渇済渋渌渍渎渏渑渒渓渕渖渘渚渜渝渞渟沨渥渧渨渪渫渮渰渱渲渳渵渶渷渹渻渼渽渿湀湁湂湄湅湆湇湈湉湋湌湍湎湏湐湑湒湓湔湕湗湙湚湜湝浈湟湠湡湢湤湥湦湨湩湪湫湬湭湮湰湱湲湳湴湵湶湷湸湹湺湻湼湽満溁溂溄溆溇沩溉溊溋溌溍溎溏溑溒溓溔溕溗溘溙溚溛溞溟溠溡溣溤溥溦溧溨溩溬溭溯溰溱溲涢溴溵溶溷溸溹溻溽溾溿滀滁滂滃沧滆滇滈滉滊涤滍荥滏滐滒滓滖滗滘汇滛滜滝滞滟滠滢滣滦滧滪滫沪滭滮滰滱渗滳滵滶滹滺浐滼滽漀漃漄漅漈漉溇漋漌漍漎漐漑澙熹漗漘漙沤漛漜漝漞漟漡漤漥漦漧漨漪渍漭漮漯漰漱漳漴溆漶漷漹漺漻漼漽漾浆潀颍潂潃潄潅潆潇潈潉潊潋潌潍潎潏潐潒潓洁潕潖潗潘沩潚潜潝潞潟潠潡潢潣润
20、潥潦潧潨潩潪潫潬潭浔溃潱潲潳潴潵潶滗潸潹潺潻潼潽潾涠涩澄澃澅浇涝澈澉澊澋澌澍澎澏湃澐澑澒澓澔澕澖涧澘澙澚澛澜澝澞澟渑澢澣泽澥滪澧澨澪澫澬澭浍澯澰淀澲澳澴澵澶澷澸澹澺澻澼澽澾澿濂濄濅濆濇濈濉濊濋濌濍濎濏濐濑濒濓沵濖濗泞濙濚蒙浕濝濞济濠濡濢濣涛濥濦濧濨濩濪滥浚濭濮濯潍滨濲濳濴濵阔濷濸濹溅濻泺濽滤濿瀀漾瀂瀃灋渎瀇瀈泻瀊沈瀌瀍瀎浏瀐瀒瀓瀔濒瀖瀗泸瀙瀚瀛瀜瀞潇潆瀡瀢瀣瀤瀥潴泷濑瀩瀪瀫瀬瀭瀮瀯弥瀱潋瀳瀴瀵瀶瀷瀸瀹瀺瀻瀼瀽澜瀿灀灁瀺灂沣滠灅灆灇灈灉灊灋灌灍灎灏灐洒灒灓漓灖灗滩灙灚灛灜灏灞灟灠灡灢湾滦灥灦滟灨灪火灬部:灮灱灲灳灴灷灸灹灺灻灼炀炁炂炃炄炅炆炇炈炋炌炍炏炐炑炓炔炕炖炗炘炙炚炛炜炝炞炟炠炡炢炣照炥炦
21、炧炨炩炪炫炯炰炱炲炳炴炵炶炷炻炽炾炿烀烁烃烄烅烆烇烉烊烋烌烍烎烐烑烒烓烔烕烖烗烙烚烜烝烞烠烡烢烣烥烩烪烯烰烱烲烳烃烵烶烷烸烹烺烻烼烾烿焀焁焂焃焄焇焈焉焋焌焍焎焏焐焑焒焓焔焕焖焗焘焙焛焜焝焞焟焠焢焣焤焥焧焨焩焪焫焬焭焮焯焱焲焳焴焵焷焸焹焺焻烧焽焾焿煀煁煂煃煄煅辉煈炼煊煋煌煍煎煏煐煑炜煓煔暖煗煘煚煛煜煝煞煟煠煡茕煣焕煦煨煪煫炀煭煯煰煱煲煳煴煵煶煷煸煹煺煻煼煽煾煿熀熁熂熃熄熅熆熇熈熉熋熌熍熎熏熐熑荧熓熔熕熖炝熘熚熛熜熝熞熠熡熢熣熤熥熦熧熨熩熪熫熬熭熮熯熰颎熳熴熵熶熷熸熹熺熻熼熽炽熿燀烨燂燅燆燇炖燊燋燌燍燎燏磷燑燓燔燖燗燘燚燛燝燞燠燡燢燣燤燥灿燧燨燩燪燫燮燯燰燱燲燳烩燵燵燸燹燺薰燽焘耀爀爁爂爃爄爅爇爈
22、爉爊爋爌烁爎爏爑爒爓爔爕爖烨爘爙爚烂爜爝爞爟爠爡爢爣爤爥爦爧爨爩孛孜孞孠孡孢孥孧孨孪孙孬孭孮孯孰孱孲孳孴孵孶孷孹孻孼孽孾宀部:宄宆宊宍宎宐宑宒宓宔宖実宥宧宨宩宬宭宯宱宲宷宸宺宻宼寀寁寃寈寉寊寋寍寎寏寔寕寖寗寘寙寚宁寝寠寡寣寥寪寭寮寯寰寱寲宝寴寷寸部:寽対尀専尃克尌小部:尐尒尕尗尛尜尞尟尠尢部:尣尢尥尦尨尩尪尫尬尭尮尯尰尴尳尴尵尶尸部:屃屇屐屒屃屔屖屗屘屙屚屛屉扉屟屡屣履屦屧屦屩屪屫山部:敳屮屰屲屳屴屵屶屷屸屹屺屻屼屽屾岃岄岅岆岇岈岉岊岋岌岍岎岏岐岑岒岓岔岕岖岘岙岚岜岝岞岟岠岗岢岣岤岥岦岧岨岪岫岬岮岯岰岲岴岵岶岷岹岺岻岼岽岾岿峀峁峂峃峄峅峆峇峈峉峊峋峌峍峎峏峐峑峒峓崓峖峗峘峚峙峛峜峝峞峟峠峢峣峤
23、峥峦峧峨峩峪峬峫峭峮峯峱峲峳岘峵峷峸峹峺峼峾峿崀崁崂崃崄崅崆崇崈崉崊崋崌崃崎崏昆崒崓崔崕崖崘崚崛崜崝崞崟岽崡峥崣崤崥崦崧崨崩崪崫岽崮崯崰崱崲嵛崴崵崶崷崸崹崺崻崼崽崾崿嵀嵁嵂嵃嵄嵅嵆嵇嵈嵉嵊嵋嵌嵍嵎嵏岚嵑岩嵓嵔嵕嵖岁嵘嵙嵚嵛嵜嵝嵞嵟嵠嵡嵢嵣嵤嵥嵦嵧嵨嵩嵪嵫嵬嵭嵮嵯嵰嵱嵲嵳嵴嵵嵶嵷嵸嵹嵺嵻嵼嵽嵾嵿嶀嵝嶂嶃崭嶅嶆岖嶈嶉嶊嶋嶌嶍嶎嶏嶐嶑嶒嶓嵚嶕嶖嶘嶙嶚嶛嶜嶝嶞嶟峤嶡峣嶣嶤嶥嶦峄峃嶩嶪嶫嶬嶭崄嶯嶰嶱嶲嶳岙嶵嶶嶷嵘嶹岭嶻屿岳帋巀巁巂巃巄巅巆巇巈巉巊岿巌巍巎巏巐巑峦巓巅巕岩巗巘巙巚巛部:巛巜巠巡巢巣巤匘工部:巪巬巭巯己已巳部:巵巶巸卺巺巼巽巾部:巿帀帄帇帉帊帋帍帎帏帑帒帓帔帗帙帚帞帟帠帡帢帣帤帨帩帪帬帯帰帱
24、帲帴帵帷帹帺帻帼帽帾帿幁幂帏幄幅幆幇幈幉幊幋幌幍幎幏幐幑幒幓幖幙幚幛幜幝幞帜幠幡幢幤幥幦幧幨幩幪幭幮幯幰襕干部:幷幺部:幺吆玄兹滋广部:庀庁仄広庅庇庈庉庋庌庍庎庑庖庘庛庝庠庡庢庣庤庥庨庩庪庬庮庯庰庱庲庳庴庵庹庺庻庼庽庿廀厕廃厩廅廆廇廋廌廍庼廏廐廑廒廔荫廖廗廘廙廛廜廞庑廤廥廦廧廨廭廮廯廰痈廲廴部:廵廸廹回乃廽廾部:廿弁弅弆弇弉弋部:弋弌弍弎弐弑弓部:弖弙弚弜弝弞弡弢弣弤弨弩弪弫弬弭弮弰弲弪弴弶弸弻弼弽弿彀彁彂彃彄彅彇彉彋弥彍彏彐部:彑彔彖彗彘彚彛彝彝彝彟彡部:彡彣彧彨彭彮彯彲澎彳部:彳彴彵彶彷彸役彺彻彽彾佛徂徃徆徇徉后徍徎徏径徒従徔徕徖徙徚徛徜徝从徟徕御徢徣徤徥徦徧徨复循徫旁徭微徯徰徱徲德徴徵徶
25、德徸彻徺徻徼徽徾徿忀忁忂忄心部:忄惔愔忇忈忉忊忋忎忏忐忑忒忓忔忕忖忚忛応忝忞忟忡忢忣忥忦忨忩忪忬忭忮忯忰忱忲忳忴念忶汹忸忹忺忻忼忾忿怂怃怄怅怆怇怈怉怊怋怌怍怏怐怑怓怔怗怘怙怚怛怞怟怡怢怣怤怦怩怫怬怭怮怯怰怲怳怴怵怶怷怸怹怺怼悙怿恀恁恂恃恄恅恒恇恈恉恊恌恍恎恏恑恒恓恔恖恗恘恙恚恛恜恝恞恠恡恦恧恫恬恮恰恱恲恴恷恹恺恻恽恾恿悀悁悂悃悆悇悈悊悋悌悍悎悏悐悑悒悓悕悖悗悘悙悚悛悜悝悞悟悡悢悤悥悧悩悪悫悭悮悰悱悳悴悷悹悺悻悼悾悿惀惁惂惃惄惆惈惉惊惋惌惍惎惏惐惑惒惓惔惕惖惗惘惙惚惛惜惝惞惠恶惢惣惤惥惦惧惨惩惪惫惬惮恼恽惴惵惶惸惺惼惽惾惿愀愂愃愄愅愆愇愉愊愋愌愍愎愐愑愒愓愕愖愗愘愙愝愞愠愡愢愣愥愦愧愩愪愫愬愭愮
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