神经生物学实HRP神经束路追踪医学课件.ppt

1、神经束路追踪技神经束路追踪技术术n神经束路追踪技术是利用神经元轴神经束路追踪技术是利用神经元轴浆运输（浆运输（axoplasmic transportaxoplasmic transport）现象的示（追）踪法，主要用于研现象的示（追）踪法，主要用于研究神经元间广泛的神经纤维联系。究神经元间广泛的神经纤维联系。n轴浆运输包括从胞体向轴突及其终轴浆运输包括从胞体向轴突及其终末的顺行运输和从轴突及其终末向末的顺行运输和从轴突及其终末向胞体的逆行运输。胞体的逆行运输。n神经束路追踪法主要有辣根过氧化神经束路追踪法主要有辣根过氧化物酶示踪技术、荧光素示踪技术、物酶示踪技术、荧光素示踪技术、同位素示踪技

2、术及顺行示踪技术等。同位素示踪技术及顺行示踪技术等。n目前较常应用辣根过氧化物酶法进目前较常应用辣根过氧化物酶法进行神经束路追踪，本章对其作重点行神经束路追踪，本章对其作重点介绍介绍。HRPHRP的特性的特性：HRPHRP的细胞外给药法的细胞外给药法：法法 微量注射器或微玻管注射，常用。微量注射器或微玻管注射，常用。离子透入技术是以负载电荷的化学离子透入技术是以负载电荷的化学分子或示踪剂注入组织的方法。分子或示踪剂注入组织的方法。HRPHRP的结合与扩散的结合与扩散:（TMBTMB法法）n实验步骤：实验步骤：1.1.2 2。2.2.3.3.：4.4.灌注固定灌注固定：蔗糖的蔗糖的0.1mol/l PBS0.1mol/l PBS（PH7.4 PH7.4）于）于44 冰箱过夜。冰箱过夜。.：.10.10.11.11.。12.12.：13.13.：TH酪氨酸羟化酶酪氨酸羟化酶HRP labelling neurons in oculomotor nucleus of catHRP labelling neurons in dLGN（背外侧（背外侧膝状核）膝状核）HRPHRP法的优缺点法的优缺点 THANK YOU!