流行性脑脊髓膜炎实验室诊断课件.ppt
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- 流行性 脊髓 实验室 诊断 课件
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1、流行性脑脊髓膜炎实验室诊断 天津市卫生防病中心病原生物学部 井良义何谓流行性脑脊髓膜炎?流行性脑脊髓膜炎(简称流脑),是由脑膜炎奈瑟菌(Neisseria meningitides,Nm)通过呼吸道传播所引起的化脓性脑膜炎,常在冬春季节引起发病与流行,患者以儿童为多见,现在成年人发病有增多趋势。人受Nm 感染后大多数表现为鼻咽部带菌状态,只有少数成为流脑患者。正常人群中Nm带菌率可达5 30%。,带菌者为流脑流行的重要传染源。细菌经飞沫传播,患者潜伏期1 4天,其发展经过可分为三期:1.首先侵入鼻咽腔,引起上呼吸道感染,有时局部有炎症。2.少数细菌侵入血流,造成单纯 菌血症,可有突然发作的恶寒
2、、发热、恶心、呕吐等,并可有出血性或红斑性皮疹,或称淤血点。3.大量细菌侵入,由血液或淋巴到达脑脊髓膜,引起脑脊髓膜炎的症状与体征,如头痛、呕吐、颈项强直、发热等一般脑膜炎症状。适宜的检测样品鼻咽拭子、血液、皮肤粘膜出血点挤出液、血清及脑脊液等。其中脑脊液、血液、皮肤粘膜出血点挤出液中检出脑膜炎奈瑟氏菌可直接作为确诊依据。样品采集与运送样品采集与运送 样品采集(一)样品采集(一)脑脊液:无菌操作,吸出CSF 35mL,立即放到无菌试管内离心(2000 3000r/min,30min),用灭菌过的毛细管吸取沉淀物直接接种到10羊血巧克力色琼脂上(CSF上清液部分供检测Nm特异抗原,亦可将其置于2
3、0待测),5二氧化碳环境37培养24 72h,每日检查细菌生长的情况,及时分离纯培养物供鉴定。样品采集(二)样品采集(二)血液:采取病人急性期静脉血液6mL,无菌操作往盛有30mL增菌用的葡萄糖肉汤三角瓶内注入4mL血液(余下的2mL血液同上离心后吸出血清,供检测Nm特异抗原和抗体,亦可将其置于一20待测),同上述条件培养2472h,每日进行分离培养。样品采集(三)样品采集(三)淤血点:选病人皮肤上的新鲜淤血点或淤斑,消毒后用针头挑破,挤出组织液,用无菌棉签蘸取先接种含双抗的葡萄糖增菌肉汤管中增菌812h后分离培养或直接接种10羊血巧克力色琼脂;涂片,干后革兰染色,直接镜检。样品采集(四)样品
4、采集(四)咽拭子:用长柄棉拭子采咽后壁两侧分泌物,立即接种卵黄双抗培养基或巧克力双抗平板,也可将咽拭子放入液体双抗增菌管内,增菌8 12h后分离培养。咽拭子接种咽拭子接种不合格咽拭子接种不合格咽拭子接种样品的处理和运送样品的处理和运送 早期采集样品:应尽可能采集病人用药前的早期样品,这可以明显提高病原的检出水平。及时处理样品:应尽可能地做到床边接种,若无可能则应在最短的时间内送到实验室进行接种培养。保温运送:应尽可能保持样品处于2036之间,切记不能低温运送(检测抗体的血清标本除外)。流脑病原学检查方法流脑病原学检查方法 生长特性脑膜炎双球菌为专性需氧菌,初次分离时需510%的二氧化碳环境才能
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