法医毒物鉴定发展及其质量控制简课件.ppt

1、法医毒物鉴定发展及其质量控制一、法医毒物鉴定概述二、法医毒物鉴定发展趋势三、法医毒物鉴定的质量控制四、法医毒物鉴定结果评价主题充分性充分性n19321932年年 司法行政部法医研究所司法行政部法医研究所n19511951年年 华东军政委员会司法部法医研究所华东军政委员会司法部法医研究所n19531953年年 最高人民法院华东分院法医研究所最高人民法院华东分院法医研究所n19551955年年 司法部法医研究所司法部法医研究所n 司法部司法部司法鉴定司法鉴定科学研究科学研究n19581958年年 公安部三局刑事技术研究所公安部三局刑事技术研究所n19601960年年 因故撤销因故撤销n197919

2、79年年 复建司法部复建司法部司法鉴定司法鉴定科学技术研究所科学技术研究所司法鉴定 鉴定人运用科学技术和专门知识对诉讼诉讼涉及的专门性问题进行鉴别和判断并提供鉴定意见的活动。基本属性:科学性;法律性科学性u 鉴定方法的科学性u 鉴定过程的科学性u 鉴定结果的客观性、可溯源性、可重复性法律性u 鉴定主体的法定性u 鉴定客体的法律性u 鉴定过程的法定性u 鉴定结论的证据属性对各类案(事)件中可能涉及的毒物进行分析鉴定，判明有无毒物、毒物性质、毒物含量及毒物与事件的关系等，为涉及毒物的案(事)件的侦察和审理提供线索或证据。法医毒物鉴定u法医中毒鉴定：法医中毒鉴定：通过对生物检材中毒物的定性定量分析来

3、确定是否存在毒物以及评价毒物中毒程度或对死亡的影响程度。l判定有无毒物判定有无毒物 系统的未知物筛选分析l确定中毒物质确定中毒物质 定性分析鉴别、确认毒物l估计中毒程度估计中毒程度 定量分析确定毒物的含量l推断中毒性质推断中毒性质 体内毒物分布、毒物原体及代谢物状况u体内滥用物质鉴定：体内滥用物质鉴定：通过对涉案者体内滥用物质的定性定量分析，判明其是否滥用、滥用程度和滥用史，以及评价对其行为能力的影响程度。l摄毒鉴定摄毒鉴定 体内毒品分析，判断其是否摄入违禁毒品以及摄毒史 l乙醇鉴定乙醇鉴定 体内乙醇及其代谢物含量测定，判断其是否违规驾驶或有酗酒史 l兴奋剂检测兴奋剂检测 体内合成类固醇等运动

4、兴奋剂测定，提供兴奋剂滥用的证据 l精神活性物质鉴定精神活性物质鉴定 体内精神活性物质分析，判断其对行为能力的影响 u毒品鉴定：毒品鉴定：通过对可疑物品的定性、定量分析，确定所疑物品是否为国家管制的麻醉药品和精神药品等毒品，为涉毒案件的处置提供科学证据。l毒品种类数量毒品种类数量 l毒品来源推断毒品来源推断毒品来源推断海洛因一般检查：一般检查：颜色、形状、质地有机成分比例：有机成分比例：主成分、掺假剂、稀释剂 （LC/MS,GC/MS,CE/UV）痕量有机杂质：痕量有机杂质：副产物、有机溶剂 微量无机元素：微量无机元素：元素的种类和产地（毒品产地签字）（NAA,ICP/MS）稳定同位素比例：稳

5、定同位素比例：13C/12C,15N/14N(同位素签字)GC/C/IRMS 统计分析：因子分析法，选择比对参数，建立数学模型统计分析：因子分析法，选择比对参数，建立数学模型法医毒物鉴定的特点u 分析目标物的不确定性u 检验材料的复杂性u 鉴定方法的综合性u 鉴定工作的严谨性充分性充分性乙醇乙醇 乙醇及其标志物治疗药物治疗药物 新型安眠镇静类、抗忧郁和抗精神病类滥用物质滥用物质 阿片类、苯丙胺类、大麻类、氯胺酮、致幻剂杀鼠剂杀鼠剂 抗凝血类溴敌隆、大隆、毒鼠强犯罪辅助药物犯罪辅助药物 氯硝西泮、唑吡坦、GHB新型除草剂新型除草剂 百草枯、酰胺类除草剂对等生物碱、毒素生物碱、毒素 河豚毒素、乌头

6、碱、马钱子碱金属元素金属元素 铊、砷化学毒物化学毒物 N-二甲基亚硝胺、氯化四甲基胺新精神活性物质新精神活性物质 策划药物、毒品类似物、合法兴奋剂等，如大麻素类、卡 西酮类、苯乙胺类、哌嗪类等 一、毒物种类快速增加一、毒物种类快速增加信息反映时间HoursDaysWeeksMonthsYears血液尿液胃内容指甲头发汗液玻璃体液唾液组织二、生物检材广泛应用二、生物检材广泛应用即时信息检材：即时信息检材：体液组织类，如血液、尿液、唾液、肝脏 反映检材采集时体内毒药物存在情况长程信息检材：长程信息检材：富角蛋白类，如头发，指甲 反映、记录较长时间内的摄毒药史生物检材提供的信息特点生物检材提供的信息

7、特点选取原则u毒物含量高u采集方便u符合分析目的u检测结果有判断价值胃内容物特点：口服者毒物含量大 毒物未分解、代谢注意点：考虑毒物进入体内的途径和时间尿液特点：取样方便检材处理容易药物浓度高(代谢物)检出时限长注意点：尿浓和血浓不呈相关性(饮水量、pH)血液特点：适用范围广判断意义大毒物含量低检出时限短注意点：首选外周血（尸体心血存在死后再分布）组织(肝、肾)特点：适用范围广判断意义大(文献比对，反映用药强度)毒物含量较高检出时限较长毛发、指甲特点：采集、保存方便可重复采样验证消除检材污染 检出时限长反映摄毒或用药史（毛发）其它胆汁、玻璃体液、唾液、汗液信息的充分性：提供多种信息 延长检出时

8、限 信息互补印证气相色谱法气相色谱法 GCu 液相色谱法液相色谱法 HPLCu 气气-质联用法质联用法 GC/MSnu 液液-质联用法质联用法 LC/MSnu 液相色谱液相色谱-高分辨质谱法高分辨质谱法 LC/HRMSu 毛细管电泳毛细管电泳-质谱法质谱法 CE/MSu 电感耦合等离子体质谱法电感耦合等离子体质谱法 ICP/MSu 同位素质谱法同位素质谱法 IRMSu 质谱成像技术质谱成像技术 MALDI/MSI三、分析技术迅猛发展三、分析技术迅猛发展毒物筛选分析（系统毒物分析）毒物筛选分析（系统毒物分析）LC/MSn 高效分离、高灵敏度、高特异性 适用范围广，代谢物、极性物、热不稳定物GC/

9、MSn 高效分离、高灵敏度、高特异性 适用于小分子、易挥发、热稳定化合物 优势优势1.1.范围广：范围广：分子量从几十到几万道尔顿的分子信息 从挥发类物质到小肽类物质的信息，覆盖了绝大部分的毒物类别2.2.信息多：信息多：化合物的元素组成(分子式)、精确分 子量，多级质谱 通过同位素质谱、多级质谱信息验证由精确分子量推断的毒物结构1研究方向：研究方向：未知物分析技术未知物分析技术 高分辨质谱具有实现未知物分析的可能性高分辨质谱具有实现未知物分析的可能性MALDI/MSI质谱成像技术质谱成像技术 u 特点：特点：将质谱的离子扫描技术与成像处理软件相结合的新型成像技术，可实现对样本表面多种物质的原

10、位定性、定量分析。u 问题：问题：方法灵敏度、空间分辨率、离子化抑制、定量准确性等尚存在不足。2手性分析技术手性分析技术 u 对映体之间存在药代动力学、药效学等的不同，必须要考虑手性因素，而不能仅以总的浓度来推断其药理、毒理作用。u GC-MS和LC-MS是手性分析的有效手段。分为直接法（手性柱）和间接法（手性衍生化），GC-MS分析以手性衍生化分离为主，LC-MS则以手性柱分离为多。3组学方法（基因组学、代谢组学、蛋白组学）四、结果解释备受关注四、结果解释备受关注科学性科学性基因组学l法医毒物学的发展方向、研究前沿和国际新热点l2012年-2014年国际法医毒物学年会设专场 药物在人体的代谢

11、和效用与个体的遗传因素密切相关，药物在人体的代谢和效用与个体的遗传因素密切相关，个体差异的个体差异的15%-30%15%-30%由基因因素决定。由基因因素决定。充分性充分性科学性科学性不同代谢表型与相关毒药物的药时曲线关系 弱代谢者弱代谢者药物浓药物浓度高，容易发生度高，容易发生各种不良反应。各种不良反应。超强代谢者超强代谢者引起药引起药物活性代谢物的累物活性代谢物的累积，导致严重后果积，导致严重后果 基因组学 法医毒物学分析应考虑个体遗传因素，即结合不同个体的药物代谢差异与DNA多态性的关系，更加科学地判断药物剂量对死亡或行为能力的作用程度，明确不良后果产生的原因，为法医和法庭提供有效的证据

12、。充分性充分性蛋白组学 差异蛋白组学是从整体水平研究蛋白质组在外界刺激过程中（疾病或中毒等）的变化规律。法医毒物学领域，法医毒物学领域，通过比较毒药物刺激后体内蛋白的变化，寻找反映中毒本质特征的蛋白标志物即“毒性靶标”（Toxicity targets），挖掘毒物性质、剂量、入体时间等深层信息，诠释其作用方式和致毒机制。探索研究：硫化氢探索研究：硫化氢 蛇毒中毒标志物蛇毒中毒标志物代谢组学 通过对生物体系中的小分子化合物进行定性定量分析，解析生物体系的代谢途径并揭示内源性小分子化合物内源性小分子化合物与毒性、疾病、生命活动规律等的相互关系。l毒物毒性的评价l确定毒物作用靶器官及相应的生物标志物

13、l毒物作用机制的研究l药物滥用及药物成瘾研究代谢动力学pharmacokinetics基因组学genomics蛋白组学proteomics代谢组学metabonomics需要多学科的交融交融组学方法（基因组学、代谢组学、蛋白组学）科学理解、使用毒物分析结果人机料法环质量控制质量控制1.1.人员人员资格培训考核监督 确保初始和持续鉴定能力技能考核技能考核 -盲样考核盲样考核 -人员比对人员比对 -能力验证能力验证教育背景教育背景 化学、药学等化学、药学等 2.2.设备设备l配备鉴定所需的仪器设备和标准物质，满足方法的要求l对仪器设备进行有效的量值校准或性能检测l使用控制样对仪器状态进行核查、确认

14、l建立仪器设备的使用和维护规程，有使用记录确保鉴定结果准确、可靠3.检材l检材接收、核查、传递有记录l检材的惟一性标识l检材应分成二份：检测样和复核样l检材在传递、保存过程中应防止降解、污染、混淆、变质证据链要求：检材在流转过程中始终处于受控状态4.方法l 采用国家标准、行业标准或技术规范l 无标准或技术规范时，应制定内部方法并经验证和确认l 方法与当代科技水平相适应l 需要时，应制定作业指导书使用标准物质进行校准2.与其他方法比对3.实验室间比对4.对影响结果的因素作系统性评审5.能力验证满意结果5.设施和环境条件l 配置充分的设施和场所l 必要时，监控并记录环境条件l 有效隔离互不相容的工

15、作区域l 满足安全和环保的要求l 良好的内务管理1.相关规范、方法和程序有 要求；2.对结果的质量有影响。6.质量控制-过程控制过程控制l使用有证的使用有证的标准物质标准物质统一量值统一量值l使用使用控制样控制样控制定性、定量结果质量控制定性、定量结果质量l双份平行样双份平行样分析，定量相对偏差满足要求分析，定量相对偏差满足要求l应用应用控制图控制图等统计技术等统计技术l 阳性控制样 +l 阴性控制样 -l 阳性控制样 -l 阴性控制样 -l 阳性控制样 +l 阴性控制样 +l 阴性控制样 证明分析过程未引入污染而造成假阳性 l 阳性控制样 证明方法的定性检出能力（2-10倍检出限）l 分析控

16、制样 监测定量分析的能力与检材相同或相似的基质制备与检材相同或相似的基质制备6.质量控制-技术核查技术核查l相同的方法重复检验或不同方法比对检验相同的方法重复检验或不同方法比对检验l相同的人员重复检验或不同的人员比对检验相同的人员重复检验或不同的人员比对检验 l留存样品的重复检验留存样品的重复检验6.质量控制-能力控制能力控制l盲样测试对个体能力进行评价盲样测试对个体能力进行评价l能力验证对机构能力进行评价能力验证对机构能力进行评价 机构实施质量控制的有效措施：u本机构鉴定系统（能力、方法、技术、程序）和鉴定质量的自我检验u本机构与同行其他机构就同一案件的鉴定结果的可比性？不一致性（差异）是否

17、控制在公认的允许误差范围内？u实现本机构鉴定能力和鉴定质量的自我改进。u技术方法的科学性问题u未知物系统分析体系问题u质量控制措施尚未健全 问题：充分性充分性一、鉴定方法可靠性评价一、鉴定方法可靠性评价u专属性专属性u灵敏度灵敏度u精密度精密度u准确度准确度u线性范围线性范围u稳定性稳定性1.1.专属性专属性专属性：指在其他成分（如杂质、内源性成分、代谢物、降解物等）可 能存在下，所用方法能正确测定目标物的特性。评价方法：分析一组与待测样品具相同基质的空白样品（通常选取6个不 同来源的空白样品），应在目标物的出峰时间段内无干扰信号。2.2.灵敏度灵敏度检测限检测限 指样品中的目标物对照品经提取

18、处理后依法分析，能区分于噪 音的最低检出浓度。评价方法：评价方法：在最低浓度附近添加一系列已知浓度目标物的双份平行样进 行检测，选取目标物峰附近的一段基线为参照，一般认为信 噪比（S/N）3时的目标物最低浓度为检测限。定量限定量限 指生物样品中的目标物对照品经提取处理后依法分析，能符合 一定精密度和准确度要求的最低检出浓度。评价方法：评价方法：采取5个平行样，以S/N 10，同时满足准确度和精密度要求 （20%内）的目标物最低浓度为定量限。3.3.精密度精密度精密度：精密度：相同基质中相同浓度样品经多次重复测定所得结果的之间的接 近程度。精密度所反映的是方法的随机误差，常用相对标准偏 差（RS

19、D%）或变异系数（CV%）表示。评价方法：评价方法：采用高、中、低三种浓度，每个浓度点6个平行样。日间精密 度是不同批次、不同时间测定的精密度。4.4.准确度准确度准确度：准确度：测定结果与真实值或参考值的接近程度，一般用回收率（%）表示。评价方法：评价方法：选择高、中、低三个目标物浓度，在空白基质样品中添加目 标物对照品，每个浓度点6个平行样，测定平均值与参照值 的百分比值应在85%-115%范围内。5.5.线性范围线性范围线性范围：线性范围：指精密度、准确度均符合要求，且响应值与目标物浓度成线 性相关的被测物浓度变化范围评价方法：评价方法：包含一个空白样品、一个零点样品（空白基质加内标）和

20、 一定梯度的58个目标物浓度点的样品。y=0.0113x+0.0297r=0.996900.10.20.30.40.50.60.70204060MAP concentration(ng/mg)A/A(MAP/I.S.)6.6.稳定性稳定性稳定性：稳定性：通过在一定时间内多次分析控制样获得或通过质控图评价。阳性阳性：注意分析有无干扰：注意分析有无干扰 有无污染有无污染 生前进入还是死后生成生前进入还是死后生成 方法的选择性（干扰）方法的选择性（干扰）是否达中毒血浓度是否达中毒血浓度阴性：阴性：注意分析有无漏检注意分析有无漏检 方法是否合适方法是否合适 灵敏度是否过低灵敏度是否过低 待测物是否分解

21、待测物是否分解二、鉴定结果的评价二、鉴定结果的评价检验报告书检验报告书 客观报告检验结果客观报告检验结果 鉴定意见书鉴定意见书 在检验结果基础上形成专业判断意见在检验结果基础上形成专业判断意见 三、鉴定结果的规范表述三、鉴定结果的规范表述 鉴定结果的规范表述鉴定结果的规范表述u 按格式、要求编写。按格式、要求编写。u 术语规范，使用法定计量单位。术语规范，使用法定计量单位。u 检验方法。注明所用方法的类别、方法所包含的毒物种类检验方法。注明所用方法的类别、方法所包含的毒物种类等。等。u 结果表述（客观、准确）。结果表述（客观、准确）。毒物鉴定报告一：毒物鉴定报告一：检验报告书检验报告书 检验报

22、告编号检验报告编号 一、基本情况一、基本情况 委委 托托 人（单位）：人（单位）：市公安局市公安局 委托日期：委托日期：2020年年月月日日 委托事项：委托事项：常见药物、杀虫剂及毒鼠强成分分析常见药物、杀虫剂及毒鼠强成分分析 被检验人：被检验人：送检材料：胃内容物送检材料：胃内容物10g10g、血液、血液10mL10mL、尿液、尿液10mL10mL 二、检验过程二、检验过程 送检胃内容物、血液和尿液运用送检胃内容物、血液和尿液运用标准或规范名称标准或规范名称（编号）方法分析，均未检出常见药物、（编号）方法分析，均未检出常见药物、杀虫剂及毒鼠强的特征色谱峰和特征碎片离子。杀虫剂及毒鼠强的特征色

23、谱峰和特征碎片离子。三、检验结果三、检验结果 所送所送胃内容物、血液和尿液中均未检出常见药物、杀虫剂及毒鼠强成分。胃内容物、血液和尿液中均未检出常见药物、杀虫剂及毒鼠强成分。鉴定人：职称（签名）鉴定人：职称（签名）鉴定人：职称（签名）鉴定人：职称（签名）日期日期毒物鉴定报告二：毒物鉴定报告二：检验报告书 检验报告编号 一、绪论一、绪论 委委 托托 人（单位）：人（单位）：市公安局市公安局 委托日期：委托日期：2020年年月月日日 案情摘要：案情摘要：被发现在家中死亡，身边有一药瓶。被发现在家中死亡，身边有一药瓶。送检材料：解剖提取死者胃内容物送检材料：解剖提取死者胃内容物10g10g、心血、心

24、血20mL20mL。鉴定要求：送检鉴定要求：送检胃内容物和心血中是否存在药物列表中的药物，并对检出物定量。（见附件）胃内容物和心血中是否存在药物列表中的药物，并对检出物定量。（见附件）二、检验过程二、检验过程 参考参考标准或规范名称标准或规范名称1 1（编号）、（编号）、标准或规范名称标准或规范名称2 2（编号）（编号）-，用，用GC/MSGC/MS分析。分析。三、检验结果三、检验结果 送检的送检的胃内容物和心血中均未检出药物列表中的药物成分。胃内容物和心血中均未检出药物列表中的药物成分。鉴定人：职称（签名）鉴定人：职称（签名）鉴定人：职称（签名）鉴定人：职称（签名）日期日期附件：附件：药物列

25、表：巴比妥，苯巴比妥，速可眠，苯妥英，利眠宁，安定，硝甲安定，氯硝安定，舒乐安定，阿普唑仑，氯丙嗪，异药物列表：巴比妥，苯巴比妥，速可眠，苯妥英，利眠宁，安定，硝甲安定，氯硝安定，舒乐安定，阿普唑仑，氯丙嗪，异丙嗪，丙咪嗪，阿米替林，氯氮平。丙嗪，丙咪嗪，阿米替林，氯氮平。毒物鉴定报告三：毒物鉴定报告三：澳大利亚法医研究所法医毒物学报告毒物鉴定报告三：毒物鉴定报告三：国际法医毒物学报告鉴定结果科学表述的建议：鉴定结果科学表述的建议：u报告关键要素齐全报告关键要素齐全。包括检材采集、检材接受、分析结果、提示说明、附件、分析方法说明等。u核心内容严谨、专业。核心内容严谨、专业。按照国际法医毒物学实

26、验室指南的要求，阴性结果标明方法的最低检出限，以“体现该物质不存在或可能存在但其浓度低于方法的最低检出限”的内涵。各实验室所用方法不同、技术手段不同，其检出能力有很大的差别。附件应给出检测方法的毒物检测能力（毒物范围）。u提供有价值的信息。提供有价值的信息。报告阳性毒物，附件中应给出该毒物的用途、形式、最大使用剂量、体内代谢物、超剂量使用的毒性等有价值的信息，使报告使用者合理、充分利用毒物分析结果。毒物鉴定结果的科学表述模式，可以促进鉴定质量内涵的提升，可以更毒物鉴定结果的科学表述模式，可以促进鉴定质量内涵的提升，可以更为有效地实现法律赋予鉴定结果的证据价值和意义。为有效地实现法律赋予鉴定结果的证据价值和意义。