高考生物一轮复习课件选修3专题2细胞工程.ppt

1、走向高考走向高考 生物生物路漫漫其修远兮路漫漫其修远兮 吾将上下而求索吾将上下而求索人教版人教版 高考总复习高考总复习现代生物科技专题现代生物科技专题选修三选修三选选 考考 内内 容容专题二细胞工程专题二细胞工程选修三选修三考情考点探究考情考点探究方法警示探究方法警示探究 课前基础回扣课前基础回扣核心考点突破核心考点突破课课 时时 作作 业业方法技巧警示方法技巧警示考情考点探究考情考点探究考纲要求考纲要求三年考情三年考情植物的组织培养植物的组织培养2014广东，广东，2013上海、全国上海、全国卷、江苏、重庆、浙江、天卷、江苏、重庆、浙江、天津、山东、海南，津、山东、海南，2012浙江浙江1.

2、动物细胞培养与体细胞克动物细胞培养与体细胞克隆隆2细胞融合与单克隆抗体细胞融合与单克隆抗体2014浙江、新课标浙江、新课标，2013全国、重庆、山东、海南，全国、重庆、山东、海南，2012山东、安徽、福建山东、安徽、福建1.(2014浙江，浙江，3)下列关于动物细胞培养的叙述，正确的下列关于动物细胞培养的叙述，正确的是是()A连续细胞系的细胞大多具有二倍体核型连续细胞系的细胞大多具有二倍体核型B某些癌细胞在合适条件下能逆转为正常细胞某些癌细胞在合适条件下能逆转为正常细胞C由多个祖细胞培养形成的细胞群为一个克隆由多个祖细胞培养形成的细胞群为一个克隆D未经克隆化培养的细胞系细胞具有相同的性状未经克

3、隆化培养的细胞系细胞具有相同的性状答案答案B解析解析本题考查细胞培养的有关知识。连续细胞系的细胞本题考查细胞培养的有关知识。连续细胞系的细胞其核型已发生改变，其核型已发生改变，A错误；一个祖细胞培养形成的细胞群才错误；一个祖细胞培养形成的细胞群才为一个克隆，为一个克隆，C错误；错误；未经克隆化培养的细胞系细胞可能是不同细胞分裂形成的，其未经克隆化培养的细胞系细胞可能是不同细胞分裂形成的，其性状可能不同，性状可能不同，D错误；关于癌细胞转化为正常细胞的事例已错误；关于癌细胞转化为正常细胞的事例已有报道：有报道：2013年年10月月26日在澳门特区澳门政府山顶医院大礼堂日在澳门特区澳门政府山顶医院

4、大礼堂召开的世界中联男科第六届学术年会、国际中医男科第八届学召开的世界中联男科第六届学术年会、国际中医男科第八届学术年会、第三届海峡两岸中医男科学术论坛上，我国南京中医术年会、第三届海峡两岸中医男科学术论坛上，我国南京中医药大学教学和研究基地的盛明山医师宣布：人体癌细胞逆转为药大学教学和研究基地的盛明山医师宣布：人体癌细胞逆转为正常细胞的医疗技术在肝癌肺癌等的临床治疗中获得成功。解正常细胞的医疗技术在肝癌肺癌等的临床治疗中获得成功。解答此类题目一定要准确理解有关的概念内涵，进行解答相关问答此类题目一定要准确理解有关的概念内涵，进行解答相关问题，同时关注科学的发展。题，同时关注科学的发展。2(2

5、013全国大纲，全国大纲，2)关于动物细胞培养和植物组织培关于动物细胞培养和植物组织培养的叙述，错误的是养的叙述，错误的是()A动物细胞培养和植物组织培养所用培养基不同动物细胞培养和植物组织培养所用培养基不同B动物细胞培养和植物组织培养过程中都要用到胰蛋白动物细胞培养和植物组织培养过程中都要用到胰蛋白酶酶C烟草叶片离体培养能产生新个体，小鼠杂交瘤细胞可烟草叶片离体培养能产生新个体，小鼠杂交瘤细胞可离体培养增殖离体培养增殖D动物细胞培养可用于检测有毒物质，茎尖培养可用于动物细胞培养可用于检测有毒物质，茎尖培养可用于植物脱除病毒植物脱除病毒答案答案B解析解析本题考查了细胞培养的相关基础知识。由于动

6、物细本题考查了细胞培养的相关基础知识。由于动物细胞和植物细胞培养环境要求和营养物质不同，二者培养时所选胞和植物细胞培养环境要求和营养物质不同，二者培养时所选的培养基也不同，的培养基也不同，A正确；植物组织培养过程中不需要胰蛋白正确；植物组织培养过程中不需要胰蛋白酶，酶，B不正确；烟草叶片离体可培养成新个体，体现了细胞的不正确；烟草叶片离体可培养成新个体，体现了细胞的全能性，小鼠杂交瘤细胞由于具备癌细胞持续分裂增殖的特点全能性，小鼠杂交瘤细胞由于具备癌细胞持续分裂增殖的特点，可用离体培养增殖，可用离体培养增殖，C正确；许多致畸、致癌物质加入细胞正确；许多致畸、致癌物质加入细胞培养液后，培养细胞会

7、发生染色体结构和数目的变异，根据变培养液后，培养细胞会发生染色体结构和数目的变异，根据变异细胞占全部培养细胞的百分数，可以判断某种物质的毒性，异细胞占全部培养细胞的百分数，可以判断某种物质的毒性，刚刚分裂形成的茎尖细胞一般不含病毒，可用于植物脱除病毒刚刚分裂形成的茎尖细胞一般不含病毒，可用于植物脱除病毒，D正确。正确。解析解析本题以小鼠皮肤细胞培养为载体，综合考查了动物本题以小鼠皮肤细胞培养为载体，综合考查了动物细胞培养相关操作过程和考生的识记理解能力，涉及组织块的细胞培养相关操作过程和考生的识记理解能力，涉及组织块的处理、原代培养和传代培养等相关内容。动物细胞培养需要无处理、原代培养和传代培

8、养等相关内容。动物细胞培养需要无毒无菌的环境，甲过程指从实验小鼠身上取下皮肤组织，该过毒无菌的环境，甲过程指从实验小鼠身上取下皮肤组织，该过程需要对小鼠进行消毒处理，程需要对小鼠进行消毒处理，A项正确；乙过程表示将得到的项正确；乙过程表示将得到的皮肤组织分散成单个细胞制备成细胞悬液，可用胰蛋白酶或胶皮肤组织分散成单个细胞制备成细胞悬液，可用胰蛋白酶或胶原蛋白酶进行处理，原蛋白酶进行处理，B项正确；丙过程表示原代培养，此时的项正确；丙过程表示原代培养，此时的细胞仍能保持正常的二倍体核型，细胞仍能保持正常的二倍体核型，C项错误；丁过程表示传代项错误；丁过程表示传代培养，此时得到的细胞会克服细胞寿命

9、的自然极限，获得不死培养，此时得到的细胞会克服细胞寿命的自然极限，获得不死性，这些细胞已经发生突变，正在朝着等同于癌细胞的方向发性，这些细胞已经发生突变，正在朝着等同于癌细胞的方向发展，展，D项正确。项正确。4(2013重庆，重庆，2)下图是单克隆抗体制备流程的简明示下图是单克隆抗体制备流程的简明示意图。下列有关叙述，正确的是意图。下列有关叙述，正确的是()A是从已免疫的小鼠脾脏中获得的效应是从已免疫的小鼠脾脏中获得的效应T淋巴细胞淋巴细胞B中使用胰蛋白酶有利于杂交瘤细胞的形成中使用胰蛋白酶有利于杂交瘤细胞的形成C同时具有脾脏细胞和鼠骨髓瘤细胞的特性同时具有脾脏细胞和鼠骨髓瘤细胞的特性D是经筛

10、选培养获得的能分泌特异性抗体的细胞群是经筛选培养获得的能分泌特异性抗体的细胞群答案答案D解析解析本题考查单克隆抗体的制备原理方法及识图。分析本题考查单克隆抗体的制备原理方法及识图。分析题图信息可得：是免疫的题图信息可得：是免疫的B细胞；是诱导细胞融合，一般细胞；是诱导细胞融合，一般用灭活的病毒作为诱导剂；是指融合后的杂交瘤细胞，既具用灭活的病毒作为诱导剂；是指融合后的杂交瘤细胞，既具有骨髓瘤细胞无限繁殖的特点，又具有浆细胞产生抗体的特征有骨髓瘤细胞无限繁殖的特点，又具有浆细胞产生抗体的特征；是筛选能够分泌特定抗体的杂交瘤细胞。；是筛选能够分泌特定抗体的杂交瘤细胞。课前基础回扣课前基础回扣一、细

11、胞工程的概念理解一、细胞工程的概念理解1原理和方法原理和方法细胞生物学和细胞生物学和_。2操作水平操作水平_。3工程目的工程目的按照人的意愿来改变按照人的意愿来改变_或获得细胞产或获得细胞产品。品。分子生物学分子生物学 细胞整体水平或细胞器水平细胞整体水平或细胞器水平 细胞内的遗传物质细胞内的遗传物质 4根据操作对象的不同分类根据操作对象的不同分类植物细胞工程和植物细胞工程和_。二、植物细胞工程二、植物细胞工程1理论基础理论基础_(1)概念：具有某种生物全部遗传信息的任何一个细胞，都概念：具有某种生物全部遗传信息的任何一个细胞，都具有发育成具有发育成_的潜能。的潜能。(2)物质基础：细胞中具有

12、本物种物质基础：细胞中具有本物种_。动物细胞工程动物细胞工程细胞的全能性细胞的全能性完整生物体完整生物体全部遗传信息全部遗传信息离体的植物器官、组织、细胞离体的植物器官、组织、细胞完整的植株完整的植株脱分化脱分化愈伤组织愈伤组织再分化再分化3植物体细胞杂交技术植物体细胞杂交技术(1)概念：将概念：将_的植物体细胞，在一定条件下融合成的植物体细胞，在一定条件下融合成_，并把杂种细胞培育成，并把杂种细胞培育成_的技术。的技术。(2)操作流程：操作流程：不同种不同种杂种细胞杂种细胞新的植物体新的植物体(3)流程分析：流程分析：过程过程a为去除为去除_获得具有活力的原生质体，用到获得具有活力的原生质体

13、，用到的酶是的酶是_。过 程 过 程 b 是 原 生 质 体 的 融 合，其 原 理 是是 原 生 质 体 的 融 合，其 原 理 是_。诱导诱导b融合的两种方法：融合的两种方法：物理法包括物理法包括_等；等；化学法一般用化学法一般用_作为诱导剂。作为诱导剂。细胞壁细胞壁纤维素酶和果胶酶纤维素酶和果胶酶细胞膜具有一定的流动性细胞膜具有一定的流动性离心、振动、电激离心、振动、电激聚乙二醇聚乙二醇(PEG)过程过程c是原生质体融合后再生出是原生质体融合后再生出_。过程过程d是是_技术，其原理是技术，其原理是_。(4)意义：意义：_。细胞壁细胞壁植物组织培养植物组织培养细胞的全能性细胞的全能性克服了

14、远缘杂交不亲和的障碍克服了远缘杂交不亲和的障碍微型繁殖微型繁殖作物脱毒作物脱毒胚状体胚状体人工薄膜人工薄膜突变体的利用突变体的利用四、动物细胞培养四、动物细胞培养动物细胞工程技术的基础动物细胞工程技术的基础1动物细胞的培养过程动物细胞的培养过程胰蛋白酶胰蛋白酶 原代培养原代培养 胰蛋白酶胰蛋白酶 传代培养传代培养 2培养条件培养条件(1)无菌、无毒的环境：对无菌、无毒的环境：对_和所有培养用具进行无和所有培养用具进行无菌处理，添加菌处理，添加_，定期更换培养液以清除，定期更换培养液以清除_。(2)营养：除正常的有机和无机营养外，加入营养：除正常的有机和无机营养外，加入_等一些天然成分。等一些天

15、然成分。(3)适宜的温度和适宜的温度和pH：温度为：温度为_(哺乳动物哺乳动物)，pH为为_。(4)气体环境：含气体环境：含95%空气加空气加_的混合气体，其中后的混合气体，其中后者的作用是者的作用是_。3应用应用生物制品的生产、检测生物制品的生产、检测_、医学研究。、医学研究。培养液培养液抗生素抗生素代谢产物代谢产物血清、血浆血清、血浆36.50.5 7.27.4 5%CO2 维持培养液的维持培养液的pH 有毒物质有毒物质 细胞培养细胞培养去核去核重组细胞重组细胞胚胎移植胚胎移植供体供体2原理：原理：_。3结果：结果：_。4应用应用(1)加速家畜加速家畜_进程，促进优良畜群繁育。进程，促进优

16、良畜群繁育。(2)保护保护_。(3)生产医用蛋白。生产医用蛋白。(4)作为异种移植的作为异种移植的_。(5)用于组织器官的用于组织器官的_。动物体细胞核具有全能性动物体细胞核具有全能性 产生新个体产生新个体 遗传改良遗传改良 濒危物种濒危物种 供体供体 移植移植 六、动物细胞融合与单克隆抗体六、动物细胞融合与单克隆抗体1动物细胞融合动物细胞融合(1)原理：原理：_。(2)融合方法：聚乙二醇融合方法：聚乙二醇(PEG)、_、电激等。、电激等。(3)意义：突破了意义：突破了_的局限，使的局限，使_成为可成为可能，也为制造能，也为制造_开辟了新途径。开辟了新途径。细胞膜的流动性细胞膜的流动性灭活的病

17、毒灭活的病毒有性杂交方法有性杂交方法远缘杂交远缘杂交单克隆抗体单克隆抗体2单克隆抗体单克隆抗体(1)制备过程：制备过程：(2)优点：特异性强、优点：特异性强、_，可大量制备。，可大量制备。(3)用 途：作 为用 途：作 为_；用于治疗疾病；用于治疗疾病和和_。杂交瘤细胞杂交瘤细胞能产生所需抗体能产生所需抗体灵敏度高灵敏度高诊断试剂诊断试剂运载药物运载药物1.植物激素中生长素和细胞分裂素的作用如何？植物激素中生长素和细胞分裂素的作用如何？提示提示植物激素在愈伤组织的分化中起重要作用，生长植物激素在愈伤组织的分化中起重要作用，生长素用于诱导细胞的分裂和根的分化。细胞分裂素是促进细胞的素用于诱导细胞

18、的分裂和根的分化。细胞分裂素是促进细胞的分裂和不定芽的分化。分裂和不定芽的分化。2单克隆抗体制备过程中两次筛选的目的是什么？单克隆抗体制备过程中两次筛选的目的是什么？提示提示单克隆抗体制备过程中两次筛选的目的：第一次单克隆抗体制备过程中两次筛选的目的：第一次筛选是为了得到杂交瘤细胞筛选是为了得到杂交瘤细胞(用选择培养基筛选用选择培养基筛选)，第二次筛选，第二次筛选是为了得到能产生特定抗体的杂交瘤细胞是为了得到能产生特定抗体的杂交瘤细胞(抗原抗原抗体杂交检测抗体杂交检测)。1.下列有关植物组织培养的叙述，正确的是下列有关植物组织培养的叙述，正确的是()A愈伤组织是一团有特定结构和功能的薄壁细胞愈

19、伤组织是一团有特定结构和功能的薄壁细胞B二倍体植株的花粉经脱分化与再分化后得到稳定遗传二倍体植株的花粉经脱分化与再分化后得到稳定遗传的植株的植株C用人工薄膜将胚状体、愈伤组织等分别包装可制成人用人工薄膜将胚状体、愈伤组织等分别包装可制成人工种子工种子D植物耐盐突变体可通过添加适量植物耐盐突变体可通过添加适量NaCl的培养基培养筛的培养基培养筛选而获得选而获得答案答案D解析解析本题考查植物组织培养的过程与特点。愈伤组织是本题考查植物组织培养的过程与特点。愈伤组织是由未分化的薄壁细胞组成，没有特定的结构和功能，由未分化的薄壁细胞组成，没有特定的结构和功能，A项错误项错误；二倍体的花粉培养得到的单倍

20、体植株不能产生后代，；二倍体的花粉培养得到的单倍体植株不能产生后代，B项错项错误；人工种子是用富含营养物质和其他必要成分的凝胶物将胚误；人工种子是用富含营养物质和其他必要成分的凝胶物将胚状体包裹起来，不包含愈伤组织，状体包裹起来，不包含愈伤组织，C项错误；在培养基中加入项错误；在培养基中加入适量的氯化钠，可以选择出植物的耐盐突变体，适量的氯化钠，可以选择出植物的耐盐突变体，D正确。正确。2某研究小组对某种动物的肝肿瘤细胞某研究小组对某种动物的肝肿瘤细胞(甲甲)和正常肝细胞和正常肝细胞(乙乙)进行培养，下列叙述正确的是进行培养，下列叙述正确的是 ()A制备肝细胞悬浮液时先用剪刀剪碎肝组织，再用胃

21、蛋制备肝细胞悬浮液时先用剪刀剪碎肝组织，再用胃蛋白酶处理白酶处理B肝细胞培养过程中通常在培养液中通入肝细胞培养过程中通常在培养液中通入5%的的CO2刺激刺激细胞呼吸细胞呼吸C为了防止培养过程中杂菌的污染，可向培养液中加入为了防止培养过程中杂菌的污染，可向培养液中加入适量的干扰素适量的干扰素D用血球计数板计数的方法，可推断乙细胞比甲细胞增用血球计数板计数的方法，可推断乙细胞比甲细胞增殖周期长殖周期长答案答案D解析解析制备肝细胞悬浮液时先用剪刀剪碎肝组织，再用胰制备肝细胞悬浮液时先用剪刀剪碎肝组织，再用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理；肝细胞培养过程中通常在培养液中蛋白酶或胶原蛋白酶处理；肝细胞培养过程中

22、通常在培养液中通入通入5%的的CO2维持培养液维持培养液pH；为了防止培养过程中杂菌的污；为了防止培养过程中杂菌的污染，可向培养液中加入适量的抗生素。染，可向培养液中加入适量的抗生素。3(2014四川成都一中质检四川成都一中质检)下面有关动物细胞工程和植下面有关动物细胞工程和植物细胞工程的叙述，正确的是物细胞工程的叙述，正确的是()A叶肉细胞经再分化过程可形成愈伤组织叶肉细胞经再分化过程可形成愈伤组织B融合植物叶肉细胞中，应先用溶菌酶除去细胞壁融合植物叶肉细胞中，应先用溶菌酶除去细胞壁C动物细胞培养过程中要用到胰蛋白酶，目的是使组织动物细胞培养过程中要用到胰蛋白酶，目的是使组织细胞分散成单个细

23、胞细胞分散成单个细胞D单克隆抗体制备的过程中，只进行了一次筛选单克隆抗体制备的过程中，只进行了一次筛选答案答案C解析解析理解动、植物细胞工程的区别和联系是解题的关键理解动、植物细胞工程的区别和联系是解题的关键。植物叶肉细胞经脱分化过程可形成愈伤组织；融合植物叶肉。植物叶肉细胞经脱分化过程可形成愈伤组织；融合植物叶肉细胞时，应先用纤维素酶和果胶酶除去细胞壁；单克隆抗体制细胞时，应先用纤维素酶和果胶酶除去细胞壁；单克隆抗体制备的过程中，至少要进行两次筛选备的过程中，至少要进行两次筛选(筛选杂交瘤细胞和筛选产筛选杂交瘤细胞和筛选产生单一抗体的杂交瘤细胞生单一抗体的杂交瘤细胞)。核心考点突破核心考点突

24、破一、植物组织培养与动物细胞培养的比较一、植物组织培养与动物细胞培养的比较植物组织培养与动物细胞培养植物组织培养与动物细胞培养(2)作物脱毒：作物脱毒：解决的问题：无性繁殖的作物，感染的病毒在体内逐年解决的问题：无性繁殖的作物，感染的病毒在体内逐年积累，产量降低，品质变差。积累，产量降低，品质变差。解决方法：切取一定大小的茎尖进行组织培养，再生的解决方法：切取一定大小的茎尖进行组织培养，再生的植株就有可能不带病毒，从而获得脱毒苗。植株就有可能不带病毒，从而获得脱毒苗。理论基础：植物分生区附近病毒极少，甚至无病毒。理论基础：植物分生区附近病毒极少，甚至无病毒。成果：采用茎尖组织培养技术，已获得脱

25、毒的马铃薯、成果：采用茎尖组织培养技术，已获得脱毒的马铃薯、草莓、甘蔗、菠萝和香蕉等。草莓、甘蔗、菠萝和香蕉等。解决的问题：解决的问题：a一些植物繁殖周期长，数年后才能结出种子。一些植物繁殖周期长，数年后才能结出种子。b有些作物优良杂种的后代因发生性状分离而丧失其优有些作物优良杂种的后代因发生性状分离而丧失其优良特性。良特性。c常规种子的生产受季节、气候和地域的限制，并且占常规种子的生产受季节、气候和地域的限制，并且占用大量的土地。用大量的土地。3细胞产物的工厂化生产细胞产物的工厂化生产可以利用植物组织培养技术大量生产某些细胞产物，如蛋可以利用植物组织培养技术大量生产某些细胞产物，如蛋白质、脂

26、肪、糖类、药物、香料、生物碱等。白质、脂肪、糖类、药物、香料、生物碱等。(1)不同细胞体现全能性能力的大小不同，具体表现为：受不同细胞体现全能性能力的大小不同，具体表现为：受精卵精卵生殖细胞生殖细胞体细胞，离体细胞的全能性表达与分化程度呈体细胞，离体细胞的全能性表达与分化程度呈负相关，但生殖细胞特殊。负相关，但生殖细胞特殊。(2)脱分化形成愈伤组织的过程不需要光，再分化过程需要脱分化形成愈伤组织的过程不需要光，再分化过程需要光，因为愈伤组织利用有机营养成分，而试管苗需要进行光合光，因为愈伤组织利用有机营养成分，而试管苗需要进行光合作用以自养。作用以自养。(3)植物组织培养中不同培养阶段培养基含

27、有的激素比例不植物组织培养中不同培养阶段培养基含有的激素比例不同，因为培养的目的不同同，因为培养的目的不同(生根或生芽生根或生芽)。(4)植物组织培养中用到的有机碳源一般为蔗糖，用葡萄糖植物组织培养中用到的有机碳源一般为蔗糖，用葡萄糖也可以，但后者的成本高。也可以，但后者的成本高。(5)利用植物组织培养技术生产细胞产物时，有时只需将外利用植物组织培养技术生产细胞产物时，有时只需将外植体培养到愈伤组织，从愈伤组织中获取产物。植体培养到愈伤组织，从愈伤组织中获取产物。(6)人工种子发育初期需要的营养物质由人工胚乳提供。人工种子发育初期需要的营养物质由人工胚乳提供。(7)人工种皮中可以加入适量的养分

28、、无机盐、有机碳源以人工种皮中可以加入适量的养分、无机盐、有机碳源以及农药、抗生素、有益菌等，以利于胚状体生长发育成幼苗。及农药、抗生素、有益菌等，以利于胚状体生长发育成幼苗。解析解析考查动物细胞培养的特点。保留接触抑制的细胞在考查动物细胞培养的特点。保留接触抑制的细胞在培养瓶壁上只能形成单层细胞，所以培养瓶壁上只能形成单层细胞，所以A错。克隆培养法在培养错。克隆培养法在培养细胞时由于所有子代细胞来自于一个亲代细胞，所以基因型一细胞时由于所有子代细胞来自于一个亲代细胞，所以基因型一般都相同，般都相同，B错；二倍体细胞的传代培养在培养错；二倍体细胞的传代培养在培养10代左右多数代左右多数会死亡，

29、少数生存下来的细胞在会死亡，少数生存下来的细胞在50代左右会大量死亡，只有少代左右会大量死亡，只有少数遗传物质改变的才能无限增殖数遗传物质改变的才能无限增殖，C错。恶性细胞系的细胞有错。恶性细胞系的细胞有无限增殖的特点，可以进行传代培养。无限增殖的特点，可以进行传代培养。答案答案D答案答案C解析解析理解动物细胞培养及融合的过程是解题关键。过程理解动物细胞培养及融合的过程是解题关键。过程是将高度分化的成纤维母细胞诱导形成干细胞，属于基因重是将高度分化的成纤维母细胞诱导形成干细胞，属于基因重组；过程的实质是基因的选择性表达，属于细胞分化；丙细组；过程的实质是基因的选择性表达，属于细胞分化；丙细胞是

30、由胞是由B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合后形成的，它同时具备了淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合后形成的，它同时具备了B淋巴细胞和骨髓瘤细胞的特点：既能无限增殖，又能分泌特淋巴细胞和骨髓瘤细胞的特点：既能无限增殖，又能分泌特异性抗体；过程是动物细胞融合，可使用聚乙二醇作为诱导异性抗体；过程是动物细胞融合，可使用聚乙二醇作为诱导剂，过程是动物细胞培养产生单克隆抗体，不需要聚乙二醇剂，过程是动物细胞培养产生单克隆抗体，不需要聚乙二醇。植物体细胞杂交与动物细胞融合植物体细胞杂交与动物细胞融合 1.植物体细胞杂交与动物细胞融合的比较植物体细胞杂交与动物细胞融合的比较植物体细胞杂交植物体细胞杂交动物细胞融合动物细胞融合

31、(单克隆抗体制备单克隆抗体制备)理论基理论基础础(原理原理)细胞膜的流动性、细胞的细胞膜的流动性、细胞的全能性全能性细胞膜的流动性、细胞细胞膜的流动性、细胞增殖增殖融合前融合前处理处理酶解法酶解法(纤维素酶、果胶酶纤维素酶、果胶酶)去除细胞壁去除细胞壁注射特定抗原使正常小注射特定抗原使正常小鼠产生免疫反应鼠产生免疫反应促融促融方法方法物理法：离心、振动、物理法：离心、振动、电刺激等；电刺激等；化学法：聚乙二醇化学法：聚乙二醇(PEG)物化法：与植物细胞物化法：与植物细胞融合相同；融合相同；生物法：灭活的病毒生物法：灭活的病毒植物体细胞杂交植物体细胞杂交动物细胞融合动物细胞融合(单克隆抗体制备单

32、克隆抗体制备)意意义义和和用用途途克服远缘杂交不亲和的障克服远缘杂交不亲和的障碍，大大扩展了可用于杂交的碍，大大扩展了可用于杂交的亲本组合范围；亲本组合范围；突破有性杂交的母系遗传，突破有性杂交的母系遗传，获得细胞质基因的杂合子，研获得细胞质基因的杂合子，研究细胞质遗传究细胞质遗传制备单克隆抗体；制备单克隆抗体；诊断、治疗和预防诊断、治疗和预防疾病，例如：疾病，例如：a肿瘤定位诊断，放肿瘤定位诊断，放射性抗体射性抗体肿瘤；肿瘤；b生物导弹治疗，抗生物导弹治疗，抗体体抗癌药物抗癌药物肿瘤肿瘤2.单克隆抗体的制备单克隆抗体的制备 (1)取相应取相应B淋巴细胞前必须先注射相应抗原蛋白，否则不淋巴细胞

33、前必须先注射相应抗原蛋白，否则不能获得单克隆抗体。能获得单克隆抗体。(2)细胞融合后需经二次筛选：细胞融合后需经二次筛选：第一次：在特定的选择性培养基上，未融合的亲本细胞第一次：在特定的选择性培养基上，未融合的亲本细胞(B淋巴细胞和骨髓瘤细胞淋巴细胞和骨髓瘤细胞)和融合的具有同种核的细胞和融合的具有同种核的细胞(BB融合融合细胞、瘤瘤融合细胞细胞、瘤瘤融合细胞)都会死亡，只有融合的杂交细胞都会死亡，只有融合的杂交细胞(杂交瘤杂交瘤细胞细胞)才能生长。这种杂交细胞的特点是既能迅速大量繁殖，才能生长。这种杂交细胞的特点是既能迅速大量繁殖，又能产生单一的特异性抗体。又能产生单一的特异性抗体。第二次：

34、经选择性培养的杂交瘤细胞并非都是能分泌所第二次：经选择性培养的杂交瘤细胞并非都是能分泌所需抗体的细胞需抗体的细胞(很多种杂交瘤细胞很多种杂交瘤细胞)，需经克隆化培养和抗体检，需经克隆化培养和抗体检测，经筛选后才可获得足够数量的能分泌所需抗体的细胞。测，经筛选后才可获得足够数量的能分泌所需抗体的细胞。(1)植物体细胞杂交与动物细胞融合中酶的作用对象不同，植物体细胞杂交与动物细胞融合中酶的作用对象不同，纤维素酶和果胶酶作用于细胞壁，而胰蛋白酶等作用于细胞间纤维素酶和果胶酶作用于细胞壁，而胰蛋白酶等作用于细胞间的蛋白质。的蛋白质。(2)在细胞融合时，可出现多种杂种细胞，如在细胞融合时，可出现多种杂种

35、细胞，如B细胞细胞B细胞细胞，骨髓瘤细胞，骨髓瘤细胞骨髓瘤细胞，骨髓瘤细胞，B细胞细胞骨髓瘤细胞骨髓瘤细胞(3)动物细胞融合和植物体细胞杂交，均需对杂种细胞进行动物细胞融合和植物体细胞杂交，均需对杂种细胞进行筛选，但筛选的方法不同，前者可用免疫法，后者可用机械方筛选，但筛选的方法不同，前者可用免疫法，后者可用机械方法、生理学或遗传学方法。法、生理学或遗传学方法。(4)各项技术在使用中一般要借助于其他某种技术的协助，各项技术在使用中一般要借助于其他某种技术的协助，如动物细胞融合、单克隆抗体的制备、胚胎移植、核移植等，如动物细胞融合、单克隆抗体的制备、胚胎移植、核移植等，其中动物细胞培养是动物细胞

36、工程技术的基础。其中动物细胞培养是动物细胞工程技术的基础。(5)灭活的病毒保持了其抗原性，但毒性消失。灭活的病毒保持了其抗原性，但毒性消失。(6)植物杂交细胞在激素诱导下能表达出全能性，但动物杂植物杂交细胞在激素诱导下能表达出全能性，但动物杂交细胞的全能性不能表达。交细胞的全能性不能表达。解析解析动物细胞融合技术目前的主要用途是制备单克隆抗动物细胞融合技术目前的主要用途是制备单克隆抗体，它可以克服远缘杂交不亲和的障碍，但还不能获得新物种体，它可以克服远缘杂交不亲和的障碍，但还不能获得新物种。答案答案B(2014临沂模拟临沂模拟)科学家们用磷脂制成双分子层的微球体科学家们用磷脂制成双分子层的微球

37、体，里面包裹着抗癌药物，外面带上单克隆抗体，制成，里面包裹着抗癌药物，外面带上单克隆抗体，制成“生物导生物导弹弹”。下列有关叙述不正确的是。下列有关叙述不正确的是()A单克隆抗体的化学本质多数是蛋白质，少数是单克隆抗体的化学本质多数是蛋白质，少数是RNAB单克隆抗体的制备应用了动物细胞融合和动物细胞培单克隆抗体的制备应用了动物细胞融合和动物细胞培养技术养技术C被被“生物导弹生物导弹”消灭的癌细胞是抗原消灭的癌细胞是抗原D“生物导弹生物导弹”治疗癌症，疗效高，毒副作用小治疗癌症，疗效高，毒副作用小答案答案A解析解析抗体为浆细胞产生，本质为蛋白质，而酶为活细胞抗体为浆细胞产生，本质为蛋白质，而酶为

38、活细胞产生的具催化作用的有机物，多数为蛋白质，少数为产生的具催化作用的有机物，多数为蛋白质，少数为RNA。动物体细胞核移植与克隆动物动物体细胞核移植与克隆动物 1.原理原理动物细胞核的全能性。动物细胞核移植是将动物的一个细动物细胞核的全能性。动物细胞核移植是将动物的一个细胞的细胞核，移入一个已经去掉细胞核的卵母细胞中，使其重胞的细胞核，移入一个已经去掉细胞核的卵母细胞中，使其重组并发育成一个新的胚胎，这个新的胚胎最终发育为动物个体组并发育成一个新的胚胎，这个新的胚胎最终发育为动物个体。用核移植的方法得到的动物称为克隆动物。用核移植的方法得到的动物称为克隆动物。2供核细胞供核细胞一般选优良动物的

39、传代培养一般选优良动物的传代培养10代以内的细胞。代以内的细胞。解析解析培育克隆羊多利的过程中，涉及到细胞核移植、细培育克隆羊多利的过程中，涉及到细胞核移植、细胞培养技术和胚胎移植技术。胞培养技术和胚胎移植技术。答案答案D关于现代生物技术应用的叙述，错误的是关于现代生物技术应用的叙述，错误的是()A蛋白质工程可合成自然界中不存在的蛋白质蛋白质工程可合成自然界中不存在的蛋白质B体细胞杂交技术可用于克隆动物和制备单克隆抗体体细胞杂交技术可用于克隆动物和制备单克隆抗体C植物组织培养技术可用于植物茎尖脱毒植物组织培养技术可用于植物茎尖脱毒D动物细胞培养技术可用于转基因动物的培养动物细胞培养技术可用于转

40、基因动物的培养答案答案B解析解析本题考查现代生物技术的应用过程。用核移植的方本题考查现代生物技术的应用过程。用核移植的方法得到的动物称为克隆动物，体细胞杂交技术可用制备单克隆法得到的动物称为克隆动物，体细胞杂交技术可用制备单克隆抗体，不能用于克隆动物，抗体，不能用于克隆动物，B项错误。项错误。方法技巧警示方法技巧警示细胞工程与基因工程的综合考查细胞工程与基因工程的综合考查例例1(2013新课标卷新课标卷，40)阅读如下资料：阅读如下资料：资料甲：科学家将牛生长激素基因导入小鼠受精卵内，得资料甲：科学家将牛生长激素基因导入小鼠受精卵内，得到了体型巨大的到了体型巨大的“超级小鼠超级小鼠”；科学家采

41、用农杆菌转化法培育；科学家采用农杆菌转化法培育出转基因烟草。出转基因烟草。资料乙：资料乙：T4溶菌酶在温度较高时易失去活性，科学家对编溶菌酶在温度较高时易失去活性，科学家对编码码T4溶菌酶的基因进行改造，使其表达的溶菌酶的基因进行改造，使其表达的T4溶菌酶的第溶菌酶的第3位的位的异亮氨酸变为半胱氨酸，在该半胱氨酸与第异亮氨酸变为半胱氨酸，在该半胱氨酸与第97位的半胱氨酸之位的半胱氨酸之间形成了一个二硫键，提高了间形成了一个二硫键，提高了T4溶菌酶的耐热性。溶菌酶的耐热性。资料丙：兔甲和兔乙是同一物种的两个雌性个体，科学家资料丙：兔甲和兔乙是同一物种的两个雌性个体，科学家将兔甲受精卵发育成的胚胎

42、移植到兔乙的体内，成功产出兔甲将兔甲受精卵发育成的胚胎移植到兔乙的体内，成功产出兔甲的后代，证实了同一物种的胚胎可在不同个体的体内发育。的后代，证实了同一物种的胚胎可在不同个体的体内发育。回答下列问题：回答下列问题：(1)资料甲属于基因工程的范畴。将基因表达载体导入小鼠资料甲属于基因工程的范畴。将基因表达载体导入小鼠的受精卵中常用的受精卵中常用_法。构建基因表达载体常用的工具酶法。构建基因表达载体常用的工具酶有有_和和_。在培育有些转基因植物时，常用农杆。在培育有些转基因植物时，常用农杆菌转化法，农杆菌的作用是菌转化法，农杆菌的作用是_。(2)资料乙属于资料乙属于_工程范畴。该工程是指以分子生

43、物工程范畴。该工程是指以分子生物学相关理论为基础，通过基因修饰或基因合成，对学相关理论为基础，通过基因修饰或基因合成，对_进进行改造，或制造制造一种行改造，或制造制造一种_的技术。在该实例中，引起的技术。在该实例中，引起T4溶菌酶空间结构改变的原因是组成该酶肽链的溶菌酶空间结构改变的原因是组成该酶肽链的_序列序列发生了改变。发生了改变。(4)资料丙属于胚胎工程的范畴。胚胎移植是指将获得的早资料丙属于胚胎工程的范畴。胚胎移植是指将获得的早期胚胎移植到期胚胎移植到_种的、生理状态相同的另一个雌性动物种的、生理状态相同的另一个雌性动物体内，使之继续发育成新个体的技术。在资料丙的实例中，兔体内，使之继

44、续发育成新个体的技术。在资料丙的实例中，兔甲称为甲称为_体，兔乙称为体，兔乙称为_体。体。解析解析本题考查基因工程、蛋白质工程及胚胎工程的流程本题考查基因工程、蛋白质工程及胚胎工程的流程。(1)动物细胞导入基因表达载体通常采用显微注射法；在构建动物细胞导入基因表达载体通常采用显微注射法；在构建基因表达载体的过程中，要用到两种酶，即限制性内切酶和基因表达载体的过程中，要用到两种酶，即限制性内切酶和DNA连接酶；培养转基因植物，多用农杆菌转化法；如果将目连接酶；培养转基因植物，多用农杆菌转化法；如果将目的基因插入到的基因插入到Ti质粒的质粒的TDNA上，通过农杆菌的转化作用，上，通过农杆菌的转化作

45、用，就可以使目的基因进入到植物细胞中。就可以使目的基因进入到植物细胞中。(2)蛋白质工程是指以蛋蛋白质工程是指以蛋白质分子结构规律及其与生物功能关系作为基础，通过基因修白质分子结构规律及其与生物功能关系作为基础，通过基因修饰或基因合成，对现有蛋白质进行改造，或制造一种新的蛋白饰或基因合成，对现有蛋白质进行改造，或制造一种新的蛋白质，以满足人类的生产生活的需求。科学家通过对编码质，以满足人类的生产生活的需求。科学家通过对编码T4溶菌溶菌酶的基因进行改造，产生一种新的酶的基因进行改造，产生一种新的T4溶菌酶，具有较高的耐热溶菌酶，具有较高的耐热性，属于蛋白质工程。性，属于蛋白质工程。(3)胚胎移植

46、过程中要求供体和受体生理状态相同，分析资料可胚胎移植过程中要求供体和受体生理状态相同，分析资料可知，兔甲提供受精卵形成的胚胎为供体，兔乙接受胚胎，为受知，兔甲提供受精卵形成的胚胎为供体，兔乙接受胚胎，为受体。体。答案答案(1)显微注射限制性内切酶显微注射限制性内切酶DNA连接酶农杆菌可连接酶农杆菌可感染植物，将目的基因转移到受体细胞中感染植物，将目的基因转移到受体细胞中(2)蛋白质现有的蛋白质现有的蛋白质新蛋白质氨基酸蛋白质新蛋白质氨基酸(3)同供受同供受对植物体细胞杂交和有性杂交混淆不清对植物体细胞杂交和有性杂交混淆不清例例2关于番茄和马铃薯杂交过程，回答下列问题。关于番茄和马铃薯杂交过程，

47、回答下列问题。(1)若番茄细胞内含若番茄细胞内含A条染色体，马铃薯细胞内含条染色体，马铃薯细胞内含B条染色条染色体，将番茄和马铃薯采用杂交育种方法培育体，将番茄和马铃薯采用杂交育种方法培育(假设能成功假设能成功)，得，得到的后代应含到的后代应含_条染色体，还必须用条染色体，还必须用_来处理幼来处理幼苗，才能得到可育的苗，才能得到可育的“番茄番茄马铃薯马铃薯”植株，此时体细胞中含植株，此时体细胞中含有有_条染色体。条染色体。(2)若番茄是二倍体，马铃薯是四倍体，则杂种植株为若番茄是二倍体，马铃薯是四倍体，则杂种植株为_倍体。倍体。解析解析有性杂交指先减数分裂染色体数目减半再精卵结合有性杂交指先减

48、数分裂染色体数目减半再精卵结合，因无同源染色体一般是不育的，要可育必须用秋水仙素处理，因无同源染色体一般是不育的，要可育必须用秋水仙素处理让其加倍；而体细胞杂交则是简单的直接相加。让其加倍；而体细胞杂交则是简单的直接相加。错因分析错因分析将有性杂交和体细胞杂交混为一谈。将有性杂交和体细胞杂交混为一谈。纠错笔记纠错笔记植物体细胞杂交植物体细胞杂交若两个不同品种的植物细胞若两个不同品种的植物细胞A、B进行融合，进行融合，A含有含有2X条条染色体，染色体，2个染色体组，基因型为个染色体组，基因型为Aabb，B含有含有2Y条染色体，条染色体，2个染色体组，其基因型为个染色体组，其基因型为ccDd，则新

49、植株应为四倍体，其体细，则新植株应为四倍体，其体细胞中染色体数为胞中染色体数为2X2Y，基因型为，基因型为AabbccDd，从中不难看出，从中不难看出，体细胞杂交即两个细胞融合成一个细胞，不管染色体数、基，体细胞杂交即两个细胞融合成一个细胞，不管染色体数、基因组数还是染色体组数都采用直接相加的方法。因组数还是染色体组数都采用直接相加的方法。植物有性杂交植物有性杂交有性杂交的结果：子代细胞中染色体数、基因型分别为有性杂交的结果：子代细胞中染色体数、基因型分别为“XY”、“AbcD”或或“abcD”或或“Abcd”或或“abcd”，即先，即先减半再相加。减半再相加。有性生殖过程符合孟德尔遗传定律，而植物细胞杂交则有性生殖过程符合孟德尔遗传定律，而植物细胞杂交则不符合孟德尔遗传定律。不符合孟德尔遗传定律。课课 时时 作作 业业（点此链接）（点此链接）