生物：检测生物组织中糖类、脂肪和蛋白质课件.ppt

1、一一.实验原理：实验原理：.还原性糖的鉴定：还原性糖的鉴定：还原性糖还原性糖+.脂肪的鉴定：脂肪的鉴定：脂肪脂肪+脂肪脂肪+.蛋白质的鉴定：蛋白质的鉴定：蛋白质蛋白质+斐林试剂斐林试剂砖红色沉淀砖红色沉淀苏丹苏丹橘黄色橘黄色苏丹苏丹红色红色双缩脲试剂双缩脲试剂紫色紫色二二.目的要求：目的要求：尝试用化学试剂检测生物组织中糖类、尝试用化学试剂检测生物组织中糖类、脂肪和蛋白质脂肪和蛋白质1 1、还原糖的检测和观察：、还原糖的检测和观察：选材选材 应该选择含应该选择含 量高量高.颜色为颜色为 的植物组织，的植物组织，以以苹果苹果.梨梨为最好。为最好。糖糖白色或近于白色白色或近于白色制备组织样液：制备

2、组织样液：制浆制浆 过滤过滤 取液取液三三.实验过程实验过程:用一层纱布用一层纱布可溶性还原糖与斐林试剂在加热的过可溶性还原糖与斐林试剂在加热的过程中生成砖红色沉淀，程中生成砖红色沉淀，说明植物组织说明植物组织样液中含有还原糖。样液中含有还原糖。注入注入2mL2mL苹果组苹果组织样液织样液注入注入1mL1mL刚配制好的刚配制好的斐林试剂斐林试剂水浴加热约水浴加热约2min2min呈色反应呈色反应变成变成砖红色砖红色50-650C的温水的温水结论：结论：甲乙液等量混匀甲乙液等量混匀振荡、混振荡、混合摇匀合摇匀呈呈现蓝色现蓝色 还原糖有还原糖有 。试剂：试剂：.（甲液：（甲液：0.1g/ml 的的

3、 ,乙液：乙液：0.05g/ml的的 .）甲乙液必须甲乙液必须 后再加入样后再加入样 液中，液中，。必须必须 。葡萄糖，果糖，麦芽糖葡萄糖，果糖，麦芽糖用水浴加热用水浴加热斐林试剂斐林试剂NaOHCuSO4等量混合均匀等量混合均匀现配现用现配现用注意事项：注意事项：颜色变化：颜色变化：浅蓝色浅蓝色棕色棕色砖红色砖红色2 2、脂肪的检测和观察：、脂肪的检测和观察：圆形小颗粒呈橘黄色，说明有脂肪存在。圆形小颗粒呈橘黄色，说明有脂肪存在。方法一：方法一：待测组织样液待测组织样液+苏丹苏丹染液染液橘黄色橘黄色取材：取材：花生种子花生种子(浸泡浸泡3 34h4h），将子叶削成薄片），将子叶削成薄片方法二

4、：制作子叶临时切片，用显微镜观察方法二：制作子叶临时切片，用显微镜观察 子叶细胞的着色情况。子叶细胞的着色情况。制片制片取最理想的薄片取最理想的薄片在薄片上滴苏丹在薄片上滴苏丹染液（染液（2 23min3min）去浮色（用去浮色（用5050酒精）酒精）制成临时装片制成临时装片观察观察低倍镜下寻找到已着色的圆形小颗粒，低倍镜下寻找到已着色的圆形小颗粒，然后用高倍镜观察然后用高倍镜观察结论：结论：注意事项：注意事项：切片要薄，切片要薄，如厚薄不均就会导致观察如厚薄不均就会导致观察时有的地方清晰有的地方模糊。时有的地方清晰有的地方模糊。酒精的作用是：酒精的作用是：。需需使用显微镜观察使用显微镜观察

5、使用不同的染色剂染色时间不同使用不同的染色剂染色时间不同颜色变化：颜色变化：。洗去浮色洗去浮色橘黄色或红色橘黄色或红色3 3、蛋白质的检测和观察：、蛋白质的检测和观察：选材选材 应该选择含应该选择含 丰富丰富 的的豆浆豆浆或或鸡蛋清鸡蛋清溶液。（避免材料自身的颜色对溶液。（避免材料自身的颜色对 实验变化颜色的掩盖）实验变化颜色的掩盖）蛋白质蛋白质黄豆浆滤液或蛋清稀释液黄豆浆滤液或蛋清稀释液制备组织样液制备组织样液呈色反应呈色反应组织组织样液样液2mL2mL双缩脲试双缩脲试剂剂A A液液1mL1mL双缩脲试双缩脲试剂剂B B液液4 4滴滴摇匀后变摇匀后变成紫色成紫色结论：结论：说明组织样液中存在

6、蛋白质。说明组织样液中存在蛋白质。（3 3）注意事项：）注意事项：试剂：试剂：（A液：液：0.1g/ml的的 ；B液：液：0.01g/ml的的 ）先加先加 ，再加，再加 。B液要求量适中，否则液要求量适中，否则多余多余 的的B液液将会将会与与A液液发生反应生发生反应生成成Cu（OH）2显色而遮盖原有的颜色显色而遮盖原有的颜色。鉴定前，留出一部分组织样液，以便对比鉴定前，留出一部分组织样液，以便对比双缩脲试剂双缩脲试剂A A液液1ml1mlB B液液4 4滴滴NaOHCuSO4蛋白质的检测结果用于蛋白质鉴定的蛋清必须稀释，以免用于蛋白质鉴定的蛋清必须稀释，以免实验后粘住试管壁，不易洗刷实验后粘住

7、试管壁，不易洗刷斐林试剂与双缩脲试剂的比较：斐林试剂与双缩脲试剂的比较：A A液液:0.1g/mLNaOH:0.1g/mLNaOHB B液液:0.010.01g/mLCuSOg/mLCuSO4 4甲液甲液:0.1g/mLNaOH:0.1g/mLNaOH乙液乙液:0.050.05g/mLCuSOg/mLCuSO4 4紫色物质生成紫色物质生成砖红色沉淀砖红色沉淀先加先加A A液液，再加再加B B液液，不不需加热需加热甲液与乙液甲液与乙液先混再用先混再用，且且现配现用现配现用，需，需加热加热蛋白质蛋白质还原性糖还原性糖试剂试剂组成组成检验检验结果结果试剂试剂用法用法检测检测对象对象双缩脲试剂双缩脲试

8、剂斐林试剂斐林试剂l斐林试剂与双缩脲试剂的不同点斐林试剂与双缩脲试剂的不同点l斐林试剂与双缩脲试剂都由斐林试剂与双缩脲试剂都由NaOH和和CuSO4组成，组成，但二者有如下但二者有如下3点不同：点不同：la.溶液浓度不同、斐林试剂中溶液浓度不同、斐林试剂中NaOH的浓度为的浓度为0.1gmL，CuSO4的浓度为的浓度为0.05gmL；双缩；双缩脲试剂中脲试剂中NaOH的浓度为的浓度为0.1gmL，CuSO4的的浓度为浓度为0.01gmL。lb.使用原理不同。斐林试剂实质是新配制的使用原理不同。斐林试剂实质是新配制的Cu(OH)2溶液；双缩脲试剂实质是在碱性环境下溶液；双缩脲试剂实质是在碱性环境

9、下的的Cu2+。lc.使用方法不同。斐林试剂使用时，先把使用方法不同。斐林试剂使用时，先把NaOH溶液和溶液和CuSO4溶液混合，而后立即使用。双缩脲溶液混合，而后立即使用。双缩脲试剂使用时，先加入试剂使用时，先加入NaOH溶液，然后再加入溶液，然后再加入CuSO4溶液。溶液。4 4、淀粉的检测和观察：、淀粉的检测和观察：取材：取材：马铃薯匀浆马铃薯匀浆检测检测组织组织样液样液2mL2mL碘液碘液2 2滴滴结论：结论：说明组织样液中存在淀粉。说明组织样液中存在淀粉。注意：注意：常用材料：马铃薯常用材料：马铃薯 试剂：试剂：。颜色变化：。颜色变化：。碘液碘液变蓝变蓝摇匀后变摇匀后变成蓝色成蓝色1

10、.在下列四支试管中分别加入一些物质，在下列四支试管中分别加入一些物质，甲试管甲试管:豆浆豆浆;乙试管乙试管:氨基酸溶液氨基酸溶液;丙试丙试管管:牛奶和蛋白酶牛奶和蛋白酶;丁试管丁试管:人血液中的红人血液中的红细胞和蒸馏水细胞和蒸馏水.上述四支试管中加入双上述四支试管中加入双缩脲试剂振荡后缩脲试剂振荡后,有紫色反应的是有紫色反应的是()A.甲、丁甲、丁 B.甲、乙、丁甲、乙、丁C.甲、乙、丙甲、乙、丙 D.甲、丙甲、丙 对应训练对应训练D2.2.下列关于实验操作步骤的叙述中，正确的下列关于实验操作步骤的叙述中，正确的是是用于鉴定可溶性还原糖的斐林试剂甲用于鉴定可溶性还原糖的斐林试剂甲液和乙液，可

11、直接用于蛋白质的鉴定液和乙液，可直接用于蛋白质的鉴定.脂肪的鉴定需要用显微镜才能看到被染脂肪的鉴定需要用显微镜才能看到被染成橘黄色的脂肪滴成橘黄色的脂肪滴 C.C.鉴定可溶性还原糖时，要加入斐林试剂甲鉴定可溶性还原糖时，要加入斐林试剂甲液摇匀后，再加入乙液液摇匀后，再加入乙液用于鉴定蛋白质的双缩脲试剂用于鉴定蛋白质的双缩脲试剂A A液与液与B B液要混合均匀后，再加入含样品的试管中，液要混合均匀后，再加入含样品的试管中，且必须现配现用且必须现配现用（）3 3.甘薯和马铃薯都富含淀粉，但甘薯吃起来比马甘薯和马铃薯都富含淀粉，但甘薯吃起来比马铃薯甜，为探究其原因，某兴趣小组以甘薯和铃薯甜，为探究其

12、原因，某兴趣小组以甘薯和马铃薯块茎为材料，在不同温度、其他条件相马铃薯块茎为材料，在不同温度、其他条件相同的情况下处理同的情况下处理30min30min后，测定还原糖含量，结后，测定还原糖含量，结果表明马铃薯不含还原糖，甘薯的还原糖含量果表明马铃薯不含还原糖，甘薯的还原糖含量见下表：见下表：处理温度（处理温度（）0 01010202030304040甘薯还原糖含量甘薯还原糖含量（mg/gmg/g）22.122.123.323.325.825.837.637.640.540.5 处理温度（处理温度（）50506060707080809090甘薯还原糖含量甘薯还原糖含量（mg/gmg/g）47.4

13、47.454.754.768.968.945.345.328.628.6（1 1）由表可见，温度为）由表可见，温度为7070时甘薯还原糖含量时甘薯还原糖含量最高，这是因为最高，这是因为_ _ _。（2 2）马铃薯不含还原糖的原因是）马铃薯不含还原糖的原因是_。（3 3）为了确认马铃薯不含还原糖的原因，请完）为了确认马铃薯不含还原糖的原因，请完成以下实验：成以下实验：实验原理：实验原理：_；_。备选材料与用具：甘薯提取液（去淀粉和还原备选材料与用具：甘薯提取液（去淀粉和还原糖，马铃薯提取液（去淀粉），二苯胺试剂，糖，马铃薯提取液（去淀粉），二苯胺试剂，斐林试剂，双缩脲试剂，质量分数为斐林试剂，双

14、缩脲试剂，质量分数为3%3%的淀粉的淀粉溶液和质量分数为溶液和质量分数为3%3%的蔗糖溶液等。的蔗糖溶液等。还原糖的产生是酶作用的结还原糖的产生是酶作用的结果，果，70时酶活性最高时酶活性最高不含淀粉酶不含淀粉酶淀粉酶水解淀粉产生还原糖淀粉酶水解淀粉产生还原糖还原糖与斐林试剂反应，产生砖红色沉淀还原糖与斐林试剂反应，产生砖红色沉淀实验步骤：实验步骤：第一步：取第一步：取A A、B B两支试管，在两支试管，在A A管中加入甘薯管中加入甘薯提取液，提取液，B B管中加入等量的马铃薯提取液。管中加入等量的马铃薯提取液。第二步：第二步：7070水浴保温水浴保温5min5min后，在后，在A A、B B两支试两支试管中各加入管中各加入_,_,第三步：第三步：7070水浴保温水浴保温5min5min后，在后，在A A、B B两支试管两支试管中再各加入中再各加入_，第四步：第四步：_._.实验结果：实验结果：_等量淀粉溶液。等量淀粉溶液。等量斐林试剂。等量斐林试剂。沸水浴加热沸水浴加热1min2min。A试管呈现砖红色，试管呈现砖红色，B试管呈现蓝色试管呈现蓝色