不同基质对木霉菌产几丁质酶活性探讨课件.ppt

1、第三組B9732076 邱品學(乙)B9732080 詹筑茵(乙)B9732082 陳亭仰(乙)B9732102 林明縈(乙)指導老師:林世彬、陳莉臻老師第1页，共20页。大綱木黴菌Trichoderma spp.Trichoderma spp.幾丁質幾丁質酶不同碳源對酶活性的影響不同氮源對酶活性的影響不同培養時間對產酶效果的影響不同初始pH對產酶效果的影響不同培養溫度對產酶效果的影響第2页，共20页。木黴菌Trichoderma spp.木黴菌是屬於絲狀真菌類，對於土媒性真菌，如鐮刀病菌、腐霉病菌、白絹病菌及立枯絲核菌等病原菌具有拮抗作用，能部份取代化學性的殺真菌劑，而減少對環境的衝擊，故常

2、應用於生物防治上。(Benitez et al,2004)第3页，共20页。木黴菌Trichoderma spp.分類分類無性世代無性世代有性世代有性世代門不完全菌門子囊菌門綱絲孢綱核菌綱目叢梗孢目肉座菌目屬木黴菌屬肉座菌屬http:/www.nsc.gov.tw/files/popsc/2005_79/34-39.pdf第4页，共20页。在掃描式電子顯微鏡下，一種木黴菌的外觀。http:/www.nsc.gov.tw/files/popsc/2005_79/34-39.pdf第5页，共20页。幾丁質(chitin)幾丁質在自然界的分布廣泛，諸如蝦蟹殼等水生甲殼類的外殼、昆蟲、真菌的細胞壁中皆

3、有豐富的含量。幾丁質是含氮高分子的聚合物，它是由1000至3000個N-乙醯葡萄糖胺以-1,4鍵結構成的天然多醣類。(Busam，1997；Clendennen，1997)第6页，共20页。幾丁質經去乙醯反應後產生之去乙醯產物稱為幾丁聚醣，其可應用在食品、農業、化妝品、紡織、生物技術，環保等產品。幾丁質的相關製品中以幾丁寡醣最具保健食品及醫藥上的價值。N-乙醯幾丁寡醣及幾丁寡醣的製備常用化學法或酵素法。(Bolar，2001)第7页，共20页。化學法多使用大量的酸水解幾丁質生成幾丁寡醣。酵素法則利用幾丁質酵素(chitinase)及幾丁聚醣酵素水解幾丁質及幾丁聚醣，酵素法具有高專一性，但酵素價

4、格昂貴為其缺點。(Koga，1999)第8页，共20页。幾丁質酶(chitinase)幾丁質酶的分子量約在19至110 kDa之間，在細菌與真菌中多為30-120 kDa。大多數微生物的幾丁質酶作用最適pH值在4-6之間，酶穩定的pH範圍一般在4-11之間作用的最適温度多為50-60，温度過高，酶活力容易喪失。(Koga，1999)第9页，共20页。目前研究和利用幾丁質酶降解幾丁質從而進行病蟲害防治、醫藥生產、飼料加工一直是人們關注的課題。(Koga，1999)第10页，共20页。第11页，共20页。注:1:1%麩皮+1%澱粉；2:1%麩皮+1%乳糖；3:1%麩皮+1%麥芽糖；4:1%麩皮+1

5、%蔗糖；5:1%麩皮+1%CMC-Na；6:1%麩皮+1%葡萄糖；7:1%麩皮+1%果糖；8:1%麩皮+1%木糖；9:1%麩皮+1%濾紙。圖一、不同碳源對酶活性的影響(Agricultural Sciences，2010)第12页，共20页。圖二、不同碳源比例對酶活性的影響注:1：1%濾紙+1%麩皮；2：1%濾紙+2%麩皮；3：1%濾紙+3%麩皮；4：1%濾紙+4%麩皮；5：2%濾紙+1%麩皮；6：3%濾紙+1%麩皮；7：4%濾紙+1%麩皮(Agricultural Sciences，2010)第13页，共20页。1:硝酸銨；2:硝酸鉀；3:硫酸銨；4:尿素；5:蛋白腖；6:明膠；7:酵母析出

6、液圖三、不同氮源對酶活性的影響(Agricultural Sciences，2010)第14页，共20页。圖四、不同蛋白腖濃度對酶活性的影響(Agricultural Sciences，2010)蛋白腖濃度蛋白腖濃度第15页，共20页。圖五、不同培養時間對產酶效果的影響(李等，2008)濾紙酶濾紙酶FPA纖維素酶纖維素酶CMC時間時間第16页，共20页。圖六、不同初始pH對產酶效果的影響(李等，2008)濾紙酶濾紙酶FPA纖維素酶纖維素酶CMC第17页，共20页。圖七、不同培養溫度對產酶效果的影響(李等，2008)濾紙酶濾紙酶FPA纖維素酶纖維素酶CMC第18页，共20页。結論碳源為麩皮與濾紙

7、的組合，且比例為1%:2%時、CMCase與FPase有較高的酶活力以蛋白腖時為最適氮源蛋白腖濃度為0.5%時最佳培養時間為3-4天產酶能力強液體培養基起始pH在4-6的條件下產酶活性最旺盛培養溫度在26-30具有最高的酶活力第19页，共20页。參考文獻http:/www.nsc.gov.tw/files/popsc/2005_79/34-39.pdfBenitez,T.,A.M.Rincon,and A.C.Codon.(2004),Biocontrol mechanism of Trichoderma strains.Int.Microbiol,7:249-260.Bolar J.P.,N

8、orelli J.L.,Harman G.E.,Brown S.K.,and Aldwinckle H.S.(2001)Synergistic activity of endochitinase and exochitinase from Trichoderma atroviride(T.harzianum)against the pathogenic fungus(Venturia inaequalis)in transgenic apple plants.Transgenic Res.10(6):533-43.陳榮輝(20012001)幾丁質、幾丁聚醣的生產製造、檢測與應用，科學發展月刊，2929(11):776-787。第20页，共20页。