生化分析仪幻灯课件.ppt

1、光学基本知识 生化分析仪器是利用光谱分析方法的仪器之一，它主要工作在紫外光和可见光光波谱区内。以仪器的原理看，它基本是由一台比色计或一台分光光度计组成。所以了解一些基本的光学知识。无论对生化分析仪原理的理解和对仪器的维修及计量都十分必要。故这里对光的基础知识做一些简单介绍。光的基本性质光的基本性质 光具有波动性和微粒性，统称为光的波粒两象性或两重性.各种不同波长的光，按其波长和频率的不同可以分为若干个谱区。人们日常所见的白光如日光，光的波长范围为400760纳米的混合电波，它是由红橙黄绿青蓝紫等颜色的光按一定比例混合而成的复合光。不同波长的光被人感觉的颜色是不同的 光对物质的选择吸收光对物质的

2、选择吸收 一、光对物质的选择吸收一、光对物质的选择吸收 不同溶液呈现不同的颜色，这是由于物质对光选择性吸收的缘故 物质对光吸收最大处叫吸收峰，不同物质对光吸收的吸收峰不同。吸收曲线反映了溶液对光吸收的选择性。吸收程度随浓度增加，因此，可以选择一部分波长被吸收程度即吸光度来测定溶液的浓度。比色分析的基本理论比色分析的基本理论 许多化学物质具有颜色，有些无色的化合物也可以和显色剂作用，生成有色物质。事实证明，当有色溶液的浓度改变时，颜色的深浅也随之改变。浓度越大，颜色越深；浓度越小，颜色越浅。因此，可以通过比较溶液颜色深浅的方法来确定有色溶液的浓度，对溶液中所含的物质进行定量分析。溶液颜色的深浅与

3、浓度之间的关系可以用吸收定律来描述。吸收定律 0art（t0）朗伯比尔定律 吸光度与透射比的关系如下：lg 全自动生化分析仪 BS-300 全自动生化分析仪主要用于定量测定血清、血浆、尿液、脑脊液等的临床生化项目、免疫项目、治疗性药物浓度监测及药物滥用监测等。光的互补光的互补 若把两种不同的光，接一定的强度比例混合，可以得到“白光”，这两种光叫做互为补色。由于有色物质对光的吸收具有选择性，因此在测定溶液吸光度时，只能用光波中能被有色溶液吸收的一部分光线，即应用特定的单色光进行。至于不被有色溶液吸收的光线，则应设法在未透过有色溶液之前将其消除。仪器构成仪器构成 光的传播光的传播 一、光的反射与折

4、射一、光的反射与折射三、透镜三、透镜 四、光的色散四、光的色散二、平面镜和球面镜二、平面镜和球面镜 三、透镜三、透镜 光的干涉光的干涉光的衍射光的衍射单色器单色器 一、滤光片一、滤光片12m 干涉滤光片干涉滤光片 色散棱镜色散棱镜 衍射光栅衍射光栅 二极管 生化分析仪工作原理及基本结构生化分析仪工作原理及基本结构 一、概述一、概述 生化分析仪（生化分析仪（Biochemical analyzer，Clinical chemistry analyzer）自）自20世纪世纪50年代末面世以年代末面世以来，发展十分迅速。它可用于药品、水质、食品来，发展十分迅速。它可用于药品、水质、食品和临床分析等领

5、域。在临床分析方面，生化分析和临床分析等领域。在临床分析方面，生化分析仪主要用来对人的血液和其他体液中的各种生化仪主要用来对人的血液和其他体液中的各种生化指标如血红蛋白、胆固醇、转氨酶、葡萄糖、淀指标如血红蛋白、胆固醇、转氨酶、葡萄糖、淀粉酶、尿素氮、白蛋白、总蛋白、无机磷、尿酸、粉酶、尿素氮、白蛋白、总蛋白、无机磷、尿酸、钙等进行分析。由于生化分析可以给医生提供受钙等进行分析。由于生化分析可以给医生提供受检者的综合性信息，近些年来，生化分析仪已成检者的综合性信息，近些年来，生化分析仪已成为临床分析最常用的检验仪器之一。为临床分析最常用的检验仪器之一。优点 如精度高，可达0.001A；重复性好

6、，可达0.002A；功能齐全，能进行吸光度、浓度以及酶活力的测定；能使用终点法、动力学法和初速度法等方法进行分析；可进行自动、半自动、快速、微量测定等。要求 分析方法多、测试项目多、样品及试剂用量少、准确、快速、微量、耐用等 分类 从不同的角度来分类。如按照结构形式来分，可分为连续式、离心式和分立式三种。按自动化程度来分，生化分析仪可以分为全自动和半自动两种。按仪器同时测定的项目分，可分为单通道和多通道两种。单通道型的生化分析仪，每次进样只能测定一个项目，多通道一次进样可以同时测量多个项目。按仪器复杂程度来分，可以分为大型、中型和小型三种。大型生化分析仪均为多通道、全自动型的，可以同时测定10

7、个以上的项目，且分析项目可以自由选择.近些年还出现了一种干片式生化分析仪。这种分析仪结构简单、用血量少、标本不必预先处理、直接用全血测量、操作简便快速、结果准确，特别适合儿科、急诊、野外等使用。生化参数生化参数肝功1 白蛋白ALB2 总蛋白TP3 球蛋白GLB4 白蛋白/球蛋白ALB/GLB5 总胆红素T BILI6 直接胆红素D BILI7 间接胆红素I BILI8 谷草转氨酶AST9 谷丙转氨酶ALT10 谷草转氨酶/谷丙转氨酶AST/ALT11 Lr谷氨酰移换酶GGT12 碱性磷酸酶ALP13 乳酸脱氢酶LDH14 乳酸脱氢酶/谷草转氨酶LDH/AST15 Lr谷氨酰移换酶/谷草转氨酶G

8、GT/AST16 总胆汁酸TBA17 前白蛋白PALB18 葡萄糖（OXI）GLU 接上表 肾功1 尿素UREA2 肌酐CR3 尿酸UA4 总蛋白TP5 白蛋白ALB6 葡萄糖GLU心肌酶1 肌酸激酶CK2 肌酸激同工酶CK-MB3 谷草转氨酶AST4 乳酸脱氢酶LDH血脂分析1 胆固醇CHOL2 甘油三脂TRIG3 高密度脂蛋白胆固醇HDL-C4 低密度脂蛋白胆固醇HDL-C5 载脂蛋白A ApoA6 载脂蛋白BApoB7 载脂蛋白A/载脂蛋白BApoA/ApoB8 载脂蛋白EApoE血铁分析1 铁IRON2 总铁结合率TIBC离子及其他1 钾K2 钠Na3 氯Cl4 钙Ca5 镁Mg6 无

9、机磷P7 铜Cu8 锌Zn9 葡萄糖GLU10 淀粉酶AMS11 脂肪酶LPS生化分析仪工作原理及基本结构生化分析仪工作原理及基本结构 一、工作原理一、工作原理 目前，绝大多数生化分析仪都是基于光电比色法目前，绝大多数生化分析仪都是基于光电比色法进行工作的。尽管所有的生化分析仪最基本的工进行工作的。尽管所有的生化分析仪最基本的工作部件是一台比色计或分光光度计，但生化分析作部件是一台比色计或分光光度计，但生化分析仪并不仅仅是一台普通的光电比色计或分光光度仪并不仅仅是一台普通的光电比色计或分光光度计，而是集加样、稀释、混合、进样、反应、比计，而是集加样、稀释、混合、进样、反应、比色、计算、记录、打

10、印全部或部分功能于一身的色、计算、记录、打印全部或部分功能于一身的自动化仪器。此外，它还需要和试剂、方法学紧自动化仪器。此外，它还需要和试剂、方法学紧密结合起来进行工作。密结合起来进行工作。各类生化分析仪原理 连续式生化分析仪 离心式生化分析仪 分离式生化分析仪 干片式生化分析仪 1）反射光度法 2）差示电位法仪器基本结构仪器基本结构 重要部件 1、稀释器 2、进样盘装置3、打印机 1）针式打印机 2）热敏打印机 3)喷墨打印机 4)激光打印机热敏打印机示意图 生化分析仪的分析方法生化分析仪的分析方法 一、终点法一、终点法:一点终点法一点终点法 二点终点法 比浊法:比浊法也是一种终点法，不过是

11、一种浊度测定，而不是比色测定。双波长法:同时用两个波长检测，用主波长的吸光度减去副波长的吸光度，标准物与待测物同等对待，计算待测物的浓度 连续监测法连续监测法:属于动态法监测的一种，适用属于动态法监测的一种，适用于酶活性和代谢物检测，多有酶的参与。于酶活性和代谢物检测，多有酶的参与。双项同测法双项同测法:多项同测法是指在反应过程的多项同测法是指在反应过程的不同时间向同一个比色杯中加人几种试剂，不同时间向同一个比色杯中加人几种试剂，并能够测定两个或两个以上的项目。并能够测定两个或两个以上的项目。双项同测连续监测法 三点双项同测法 一点终点法 二点终点法 连续监测法 同波长双项同测法同波长双项同测

12、法 不同波长双项同测连续监测法 几种生化分析仪简介几种生化分析仪简介 ISP型半自动生化分析仪型半自动生化分析仪 技术指标技术指标 1、测量范围:越大越好2、分辨力:越小越好3、显示：本机采用六位液晶显示。第一位是功能符号显示。第二位只能显示0和1。后四位显示测量数值。4、波长范围：（3001000）nm5、波长选择：干涉滤光片。其半宽度为（812）nm6、光源：石英碘灯12V、20W7、打印机：可打印字母和数字，每行20个字符。8、电源：220V（或110V）22V（或11V）9、泵：泵的吸入量为（251500）l。设置时，输入25l的倍数值。10、流动比色皿：为可拆式石英比色皿，容量为32

13、l。11、环境温度：（1030）工作原理工作原理 仪器结构仪器结构 1、光路部分:1）光源灯 2）滤光片3）流动比色皿 4）光电池 2、电路部分:主电路板、控制电路板、打印机控制电路板、显示电路板以及插在主电路板上的存储电路板。3、吸液部分:吸液部分由吸液嘴、流动池、电磁阀、管路连接器以及小马达带动的泵体部件所组成。ISP小型生化分析仪管路图 本机使用的是B6P型热敏式打印机,所谓热敏式打印，是通过加热电路将热敏打印头上的半导体加热点加热，加热点在受热显色的热敏纸上烫出字符。打印机 电路分析电路分析主电路板 1）前置放大器2）电压/对数转换器 电压对数转换原理 由朗伯-比尔定律可知：A=1og

14、（It/I0）设前置放大器测得的空白液的电压信号为V0，测得的样品信号电压为VX。在前置放大电路中，在增益系数K0相同的条件下，A=-log It/I0=-log K0VX/K0V0=-log VX/V0使空白液输出为10V。这样上式可变换为；A1logVX对数曲线发生器 RC放电电路波形。VP10e-kt t（1-logVP）/kloge若令kloge=1则：tl-logVP即RC放电电路中电容器C上的电压Vp和时间呈对数关系。时间与吸光度的关系 将测量电压VX和电容器的放电电压Vp连接到比较器CMP1的两个输入端，其输出端控制一个触发器，此触发器再去控制一个计数器、当RC放电时，VX便开始

15、按对数曲线下降，计数器也开始计数。由比较器的性质可知：当Vp下降到等于VX时，比较器CMP1翻转，使触发器改变状态，计数器停止计数。此时：tl-logVp1-logVXA由式中可以看出，吸光度A与时间t呈正比关系，t越大，计数值越大.电源电路 光源电路 使用方法使用方法 1、面板介绍 显示的字符及其意义:A吸光度 b调零 C浓度 d吸光度/分钟或吸光度 F因数 n样品号 P步骤或参数 S标准 t时间（秒）E0000低于范围 E9999超出范围 HELP仪器有故障，需要排除 发光二极管指示灯:kinetic 动力学法 endpoint 终点法 two point 两点法 measuring ti

16、me 测量时间 delay 延迟时间 factor 因数 standard 标准 reagent 试剂 sample 样品 blank 空白编程序动力学方法a在4069之间选一未使用的程序号。b按procreturn此时打印机打印出“PROGRAM MODETEST NUMBER（测试号）”c输入编程序的号码。如输入40，则在测试号行打印出“40”d输入测试项目（用英文输）。ISP的说明书中附有编码表。用不同数码的组合代表不同的英文字母。如33，34，35，58分别代表A，B，C，Z，26个大写英文字母；6590分别代表az 26个小写英文字母。在编程序的过程中需要输入英文字母时，应输入相应的

17、编码。如39代表G，48代表P，52代表T，若欲输入GPT时，则需依次输入“39 enter”“48enter”“59 enter”，打印机便依次打出G、P、T。e按enter键。此时打印机打印出：FILTER：（滤光片）。f输入测试项目所需要的滤光片的波长并在滤光片槽中换上相应的滤光片。如测GPT所需要的是340nm的滤光片，则需输入“340”，并在滤光片槽中换上340nm的滤光片即行。此时打印机在FILTER后面打印出：340，接着打出：SELECT SIPPER VOLUME（选择吸入容量）。g输入所需要吸入的样品液量。如选350l，则依次按“3”“5”“0”三个键即可。此时仪器在VOL

18、UME后面打印出：350，接着打出 SELECT TEMPERATURE（选择温度）。j如有因数，按yes键，并输入F值。F值可按以下公式计算：无标准时：例如：GPT 因为GPT是负反应，该值应为负值，故应输入-1768 有标准时：k有试剂空白输入yes，否则输入no。blank（空白）与reagent（试剂）指示灯同时闪烁。l输入测量时间（秒）。GPT应输入20，enter。Measuing time（测量时间）指示灯闪。m输入延迟时间。GTP应输入40，enter。delay（延迟）灯闪。n动力学方法结果计算：酶活力单位（样品每分钟酶活力变化试剂空白每分钟酶活力变化）因数 如果程序中不输入

19、试剂空白，则认为试剂空白每分钟吸光度的变化为0。假如反应方式是吸光度下降，应在同数前面加负号。h输入测试所需设的温度。如需30，则按30 enter。此时，打印机在TEMP后面打印出30，接着打印出来SELECT PROC AND SET PARAMTER（选择程序和设置参数）。i此时仪器右方操作板最上方的三个指示灯闪亮、显示器显示“P”。提示操作者在这三个参数中选一个。在测GTP时，因使用的是动态法，应选kinetic旁边的代号“1”，即按“1 enter”。此时2和3两个指示灯灭，指示灯1即kinetic亮，显示器显示“P1”。接下来factor指示灯闪，询问是否需要因数。常见故障常见故障

20、 1、仪器的检查与调校 在检查与调校之前应先将仪器预热15分钟以上，并使比色池中吸入蒸馏水。用4位半数字电压表测量电压。1）先用手按住proc键再打开电源开关，直至仪器显示“H0”止 2）电压测量。以主电路板上的数字“地”，即C点为参考点，测量以下各点（主电路印刷板上已注明）的电压。常见故障的排除 1）不吸液。2）使用其他滤光片时正常，但使用340nm滤光片调零时，仪器显示AE9999。3）打出来的字严重模糊或缺列。4）打印机不走纸。5）打印出的字对不齐。6）零点漂移严重，或重复性差。美国美国RT1904C生化分析仪生化分析仪仪器键盘 比色池及蠕动泵 A-6 半自动生化分析仪半自动生化分析仪

21、主菜单 测 试 项 目 维 护 管 理 编 辑 项 目 通 讯 功 能 结 果 数 据 质 控 管 理维护管理维护管理 滤光片与吸光度检测 光源灯与打印机管理 蠕 动 泵 管 理 控 温 管 理 时 间 管 理 光 度 计 校 正 返 回光源灯的更换 蠕动泵泵管的更换 生化分析仪计量检定生化分析仪计量检定 中华人民共和国国家计量检定规程中华人民共和国国家计量检定规程 JJG 46496 仪器类型仪器类型 1 按仪器分光原理的不同可分为一、二类。2 按仪器技术性能水平的不同可分为A、B、，C是三级 检定检定 项目 1、外观检查 2、零点漂移的测定 3、吸光度准确度与重复性 4、杂散光：5、线性误

22、差的测量 6、交叉污染的测定 7、吸收池温度准确度的测定生化分析仪检定用溶液标准物质生化分析仪检定用溶液标准物质 本溶液标准物质作为量值传递的标准，用于手动、半自动、全自动各类生化分析仪的吸光度、杂散光、线性误差和交叉污染等项目的检定。国家标物中心生产.仪器类型仪器类型 类 分类原理 级 一 棱镜式或光栅式 A B C 二 干涉滤光片 或吸收滤光片 A B C仪器分类情况 类分类原理级一棱镜式或光栅式ABC二干涉滤光片或吸收滤光片ABCBS-300 全自动生化分析仪。主要用于定量测定血清、血浆、尿液、脑脊液等的临床生化项目、免疫项目、治疗性药物浓度监测及药物滥用监测等。分光光度计 分光光度计的

23、类型 按工作波长范围不同来划分，分光光度计分为红外分光光度计、紫外分光光度计和可见（光）光分光光度计三类。按待分析物质对光的吸收性质不同，可分为分子吸收光分光光度计和原子吸收分光分光光度计两类。按待分析物质对光的作用效果来分，可分为发射光谱类分光分光光度计和吸收光谱类分光光度计两大类。可见分光光度计的原理及结构 工作原理工作原理 吸收式分光光度计都是根据物质对不同波吸收式分光光度计都是根据物质对不同波长的光具有选择性地吸收的特点而进行工长的光具有选择性地吸收的特点而进行工作的，它们都以朗伯作的，它们都以朗伯-比尔定律作为定量依比尔定律作为定量依据。据。T（t0）100%lgt0通过对透射进行负

24、对数计算，可以得到吸通过对透射进行负对数计算，可以得到吸光度值。再将吸光度除以相应的系数，便光度值。再将吸光度除以相应的系数，便可求出待测溶液的浓度。可求出待测溶液的浓度。基本结构基本结构 一般的可见分光光度计由光源、单色器、比色皿、光电转换器、前置放大器、对数放大器、显示部件及电源电路组成.显示器光源灯单色器比色皿光电转换前置放大对数放大浓度调节电源电路TTTAAC光源灯 可见分光光度计的光源灯通常为钨丝灯和卤钨灯两种。前者的体积较大、寿命较短。并且随使用时间的延长，发光强度会慢慢变弱。卤钨灯可克服上述缺陷。这两种灯能产生从近紫外（320nm）到近红外（2500nm）之间的光谱。其发光稳定性

25、与所加的电压有关。单色器 单色器又叫单色光器。其作用是把复合光分解成分析时所需要的单色光。其分光方式有棱镜式和光栅式两种。棱镜式分光的方式比较落后。近代分光光度计都采用光栅分光。光源灯产生的光通过单色器后，被分解成红橙黄绿青蓝紫的光谱带。投照在出光狭缝的内壁。改变波长调节装置，棱镜或光栅的角度随之变化，其分解后的光谱便在狭缝内壁移动，所需要的单色光便从狭缝中透出来。与此同时，波长显示装置出将所调节的波长显示出来。比色皿 比色皿有多种称呼：如比色杯、比色槽、比色池、吸收池、测量池等。其作用是用来盛装比色溶液。可见光区使用的比色皿都用光学玻璃制成，它只能用于可见光区。不能在紫外分光光度计上使用。比

26、色皿有5mm、10mm、20mm、40mm等多种规格。其中10mm是最常用的标准规格。大于10mm用于溶液过稀的场合，小于10mm用于溶液过浓的场合。光电检测器 光电转换器又叫光电检测器，是用来将光能转换成电能的器件。分光光度计所使用的光电检测器均采用线性转换器件。常用的光电检测器的类型有光电池、真空光电管、光电倍增管以及半导体光电二极管、光敏电阻等 前置放大与对数放大 光电检测器转换成的电信号，通常先送到前置放大器，前置放大后的信号与溶液的透射比T成正比。只有将透射比作负对数放大后，才能线性地显示吸光度A.浓度调节电路 浓度调节电路通常由电位器组成。在比色皿中放入已知浓度的标准溶液后，调节浓

27、度调节电路，使仪器显示其浓度值。而后，才能进行浓度测定。显示装置 可见分光光度计常用的显示装置有磁电式表头及数字式表头两种。电源电路 电源电路用于产生光源灯所需要的稳定电压及仪器放大电路所需要的其他直流电压。721型和型和721A型分光光度计型分光光度计 721分光光度计，除了光路部分较少变化外，其他部分则不尽相同。如除了指针式读数外，还有采用数字表头读数的721A型。721A型将显示部分改为数字表头显示，电路部分增加了对数放大器，可以线索性地读取吸光度，还可以读取浓度。其他部分变化不太大。一、技术指标一、技术指标 721型分光光度计的使用方法型分光光度计的使用方法 1在仪器未接通电源时，电表

28、的指针必须位于“0”刻线上。若不是这种情况，应卸下仪器上盖板，调节电表上的校正螺丝，使表头指在“0”位。2将灵敏度旋钮调至“1”挡。此时，仪器的放大倍数最小，稳定性最好。3调节仪器波长旋钮，调至所需波长处。4打开试样室盖，开启电源。调“0”旋钮，使电表指示“0”。盖上试样室盖，调“100”旋钮使电表指示100附近。若调不到“100”，可调节灵敏度钮，增加灵敏度挡数。打开试样室盖，将仪器预热20分钟。5在试样室盖打开的情况下，再次调节0旋钮，使电表指示“0”。使用方法使用方法 6将装有参比溶液及样品液的比色皿放置于比色架中。参比液放一份，样品液可以放置三份。参比液通常放置于最前或最后位置。注意，

29、比色皿外壁的液体一定要擦拭干净，否则，会造成大的测量误差。7盖上试样室盖，将装有参比溶液的比色皿（有时以空气作参比）拉或推入光路，调节“100”旋钮，使电表指示“100”。如果调不到“100”，则可适当增加灵敏度挡数。上述“调0”及“调100”步骤应反复调节两三次。8将装有被测溶液的比色皿依次推或拉入光路中，然后，从指示表头上读出被测量溶液的透射比T或吸光度A值，并将其记录下来。721型分光光度计使用注意事项型分光光度计使用注意事项 1在能使参比液调到“100”的情况下，尽可能采用灵敏度较低的挡。在低挡时，仪器有更高的稳定性。所以使用时一般先放置在“1”挡，灵敏度不够时再逐渐升高。改变灵敏度后

30、必须重新校正“0”和“100”。2在大幅度改变波长或大幅度旋转“100”旋钮后，需等待片刻后才能正常工作。因光能量急剧变化，光电管及钨丝灯均需一段响应平衡时间。3根据溶液含量的不同，可以酌情选用不同光径长度的比色皿，目的是尽可能使电表读数或数字显示处于（0.20.8）A吸光度值内。在这一区域内的读数更准确 使用注意事项使用注意事项 4本仪器还配有0.5A、1A及1.5A三块中性滤光片。这三块滤光片是在测量浓度过高的溶液时用的。例如，在测定吸光度为1.7A左右的溶液时，我们在电表指示上易造成过大的读数误差（721型）或数字显示吸光度值不稳（721A）。如果在测定时，在参比溶液处再加放一块1A的中

31、性滤光片，则电表读数（721）或数字（721A）为0.74A，则实际值为1.74A。但是，要注意的是：这三块滤光片只是粗略的标称值。具体到在每个波长下的值或你需要的波长下的值是多少，都是未知数。使用前，需要在计量合格的更高一级的分光光度计上确定其数值后，才能这样使用。否则，有可能会引起更大的误差。使用注意事项使用注意事项 5取放比色皿时应拿其磨沙面，并经常检查所用的同一套比色皿是否配套正常。检查方法是：在比色皿中放入相同的溶液，在相同的波长下测量，测出的透射比误差不大于0.5%。否则，应对比色皿进行清洁处理。处理后若仍有不合格者，应将其剔除，不能再使用。需要注意的是，每个仪器的比色皿都是配套的

32、，不能和其他仪器的比色皿单独调换。6仪器使用完毕，应用塑料套罩住整个仪器，并在塑料套内放置数袋防潮硅胶。7经常注意仪器底部旋入的两个干燥剂筒及试样室盒内的干燥剂袋内的硅胶是否变色，如发现变红，应及时将其取出调换或烘干至蓝色，等冷却后放回原处。8比色皿每次使用完毕后，应立即用蒸馏水洗净，再用细软而易吸水的布或镜头纸擦干，存于比色皿的盒子内。使用注意事项使用注意事项 5在试样室盖打开的情况下，再次调节0旋钮，使电表指示“0”。6将装有参比溶液及样品液的比色皿放置于比色架中。参比液放一份，样品液可以放置三份。参比液通常放置于最前或最后位置。注意，比色皿外壁的液体一定要擦拭干净，否则，会造成大的测量误

33、差。7盖上试样室盖，将装有参比溶液的比色皿（有时以空气作参比）拉或推入光路，调节“100”旋钮，使电表指示“100”。如果调不到“100”，则可适当增加灵敏度挡数。上述“调0”及“调100”步骤应反复调节两三次。8将装有被测溶液的比色皿依次推或拉入光路中，然后，从指示表头上读出被测量溶液的透射比T或吸光度A值，并将其记录下来。分光光度计的调校分光光度计的调校 该仪器使用较长时间后，可能发生一些故障，或者仪器的性能指标有所变化。需要进行调校或修理。1光源灯的调整 打开试样室盖，先将光量调节器即面板上100旋钮顺时针方向调到头，再把波长调节至580nm处，在比色皿暗盒通光孔处放一张白色纸卡，然后，

34、把仪器接上电源，使光源灯的灯丝部分正确垂直地对准灯架上园形光孔。观察白色卡片纸上的单色光，应为明亮的黄色光斑，边缘无光晕或杂色现象。否则，调节光源灯的位置，或仪器底座上固定光源灯架的三个螺丝，使达上述效果。2仪器光源灯电压的调整：为了保证仪器使用的稳定性并延长光源灯的使用寿命，钨灯稳压电源的输出电压最高调整为11.5V。即，在100旋钮顺时针旋到底时，光源灯盒接线座的两端的电压应为11.5V。否则，可调电源电路板上的W201电位器，将电压调到11.5V。3调不到零点情况的处理 调节仪器面板上的调零钮时，如果仪器的零点受调，但调到了极限也到不了零点。对于这种情况，可以调节仪器的粗调零电位器来解决

35、。调节方法如下：先将面板上的调零钮调到中间位置。该调零钮通常为10圈电位器，从任一端向中间调五圈即行。然后，打开仪器左侧的小盖板，用小螺丝刀慢慢调节里面的一只电位器，使指针指零即行。4波长校正：。波长准确度指的是波长盘所显示的波长值，与狭缝此时出射的实际的波长值（又叫真值）之间的符合程度。通常用二者之差来表示其误差的大小。波长误差大，会影响测量准确度。所以,无论何种型号的分光光度计，均要求它在波长精（准确）度的允许误差范围内工作。如果发现波长超差，就需要及时校正。检查721型仪器波长是否超差的方法如下：打开试样室盖，用100%电位器先将光源灯调到最亮。然后，将波长盘置于580nm处,观察仪器出

36、射的光应为黄色。然后，将波长盘置于590nm处，观察仪器出射的光应为橙色。在这种情况下，误差通常都在允许范围之内，可不必调整。若不是这种情况，说明波长超差，应对波长进行校正。5吸光度（A）斜率的调整 将选择开关置于“T”挡，波长任选，先调“00.0”，再调节仪器的显示值为“100.0”。然后，将选择开关置“A”，旋动吸光度调零旋钮，使得显示值为“.000”。接下来，再将选择开关再置回“T”挡，调整“100”旋钮，使透射比值为“10.0”；而后，将选择开关再置“A”挡，仪器的显示应为1.000。否则，要揭去上盖板斜面上白色装饰钮，可见到“吸光度斜率调整电位器”，也有的仪器将该电位器标着“E（A）调1”。用小螺丝刀轻微的旋动，使显示值为“1.000”。总体构成总体构成功能单元功能单元仪器的背面仪器的背面