课件:实验一-实验室基本训练.ppt
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- 关 键 词:
- 课件 实验 实验室 基本 训练
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1、动物生物化学实验主讲:伍红主讲:伍红西南民族大学生命科学与技术学院西南民族大学生命科学与技术学院 实验一 实验室基本知识 实验二 氨基酸纸层析 实验三 血清蛋白含量测定 实验四 影响酶活性的因素 实验五 脂质的薄层层析 实验六 凝胶层析法基本练习 实验七 血清蛋白醋酸纤维薄膜电泳 实验八 动物组织中DNA提取实验一 实验室基本知识 一、实验室规则 二、实验室常用量器及仪器设备介绍 三、试剂配制 四、实验误差与克服 五、实验室安全知识简介 六、实验记录及实验报告一、实验室规则1.1.实验前认真预习实验内容。实验前认真预习实验内容。2.2.实验时遵守课堂纪律,不大声喧哗。实验时遵守课堂纪律,不大声
2、喧哗。3.3.严格按操作规程操作。严格按操作规程操作。4.4.爱护实验室各种器具及仪器设备,如有损坏,及时报告,爱护实验室各种器具及仪器设备,如有损坏,及时报告,并按规定赔偿。并按规定赔偿。5.5.公用试剂用后放回原处,瓶盖随开随盖防止污染。公用试剂用后放回原处,瓶盖随开随盖防止污染。6.6.注意安全,不得将易燃试剂接近火焰,严禁用口吸取有注意安全,不得将易燃试剂接近火焰,严禁用口吸取有毒药品和试剂,凡发生烟雾,有毒气体和不良气味的实验应毒药品和试剂,凡发生烟雾,有毒气体和不良气味的实验应在通风橱内进行。在通风橱内进行。7.7.保持实验室整洁,每次实验毕,由三个组同学打扫及整保持实验室整洁,每
3、次实验毕,由三个组同学打扫及整理实验室。理实验室。二、实验室常用量器及仪器设备介绍 1.1.常用量器常用量器(1 1)容量瓶)容量瓶 凡要求准确(0.01)配制一定浓度的溶液时,必须使用容量瓶。以容量瓶配制试剂时的操作以容量瓶配制试剂时的操作(2 2)刻度吸管)刻度吸管(3 3)移液器)移液器 2.2.常用仪器设备常用仪器设备(1 1)离心机)离心机 承载离心管,并以离心力使管内物质沉降进而造成固体和液体分离的机具。高速冷冻离心机高速冷冻离心机离心技术简介离心技术简介 离心技术在生物科学,特别是在生物化学和分子生物离心技术在生物科学,特别是在生物化学和分子生物学研究领域,已得到十分广泛的应用,
4、每个生物化学和分子学研究领域,已得到十分广泛的应用,每个生物化学和分子生物学实验室都要装备多种型式的离心机。生物学实验室都要装备多种型式的离心机。离心技术主要用于各种生物样品的分离和制备。离心技术主要用于各种生物样品的分离和制备。生物样品悬浮液在高速旋转下,由于巨大的离心力作用,生物样品悬浮液在高速旋转下,由于巨大的离心力作用,使悬浮的微小颗粒(细胞器、生物大分子的沉淀等)以一定使悬浮的微小颗粒(细胞器、生物大分子的沉淀等)以一定的速度沉降,从而与溶液得以分离,而沉降速度取决于颗粒的速度沉降,从而与溶液得以分离,而沉降速度取决于颗粒的质量、大小和密度。的质量、大小和密度。离心力:离心力:当一个
5、粒子(生物大分子或细胞器)在高速旋当一个粒子(生物大分子或细胞器)在高速旋转下受到离心力作用时,此离心力转下受到离心力作用时,此离心力“F F”由下式定义,即:由下式定义,即:F=mF=ma=m.Va=m.V2 2/r=m/r=m2 2 r r a a 粒子旋转的加速度,粒子旋转的加速度,m m 沉降粒子的有效质量,沉降粒子的有效质量,粒子旋转的角速度,粒子旋转的角速度,r r粒子的旋转半径粒子的旋转半径(cm)(cm)。离心的基本原理离心的基本原理 相对离心力:相对离心力:离心力常用地球引力的倍数来表示,因而称离心力常用地球引力的倍数来表示,因而称为相对离心力为相对离心力 “RCF RCF”
6、。或者用数字乘。或者用数字乘“g g”来表示。来表示。相对离心力是指在离心场中,作用于颗粒的离心力相当于相对离心力是指在离心场中,作用于颗粒的离心力相当于地球重力的倍数,单位是重力加速度地球重力的倍数,单位是重力加速度“g g”(980cm/sec980cm/sec2 2),),相对离心力相对离心力RCFRCF可用下式计算:可用下式计算:RCF=1.119RCF=1.11910105 5(rpm)(rpm)2 2 r r (rpm(rpm revolutions per minute revolutions per minute每分钟转数,每分钟转数,r/min)r/min)由上式可见,只要给
7、出旋转半径由上式可见,只要给出旋转半径r r,则,则RCFRCF和和rpmrpm之间可之间可以相互换算。但是由于转头的形状及结构的差异,使每台离心以相互换算。但是由于转头的形状及结构的差异,使每台离心机的离心管,从管口至管底的各点与旋转轴之间的距离是不一机的离心管,从管口至管底的各点与旋转轴之间的距离是不一样的,所以在计算时规定旋转半径均用平均半径样的,所以在计算时规定旋转半径均用平均半径“r ra va v”代替:代替:r ra va v=(r=(r minminr rmaxmax)/2)/2 Rmin旋转轴RaveRmaxr的测量的测量 离心机可分为离心机可分为工业用离心机和实验用离心机工
8、业用离心机和实验用离心机 实验用离心机又分为:实验用离心机又分为:制备型离心机:制备型离心机:主要用于分离各种生物材料,每次分主要用于分离各种生物材料,每次分离的样品容量比较大离的样品容量比较大.分析型离心机:分析型离心机:一般都带有光学系统,主要用于研究纯一般都带有光学系统,主要用于研究纯的生物大分子和颗粒的理化性质,依据待测物质在离心场的生物大分子和颗粒的理化性质,依据待测物质在离心场中的行为(用离心机中的光学系统连续监测),能推断物中的行为(用离心机中的光学系统连续监测),能推断物质的纯度、形状和分子量等。质的纯度、形状和分子量等。分析性离心机都是超速离心分析性离心机都是超速离心机。机。
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