内质网与高尔基体ppt课件.ppt

1、内内 质质 网网 由脂类和蛋白质构成。内质网膜含丰由脂类和蛋白质构成。内质网膜含丰富的磷脂酰胆碱，而鞘磷脂含量很富的磷脂酰胆碱，而鞘磷脂含量很少。内质网膜含的蛋白质含量比细少。内质网膜含的蛋白质含量比细胞膜高。胞膜高。内质网膜具有大量的酶，其中葡萄糖内质网膜具有大量的酶，其中葡萄糖6磷酸酶是内质网的标志酶。磷酸酶是内质网的标志酶。内质网是由单位内质网是由单位膜围成的一些膜围成的一些形状大小不同形状大小不同的小管、小泡的小管、小泡及扁囊状结构及扁囊状结构,相互连接形成相互连接形成一个连续的网一个连续的网状膜系统状膜系统 1、粗面内质网(rough endoplasmic reticulum,RE

2、R)2、滑面内质网 （smooth endoplasmic reticulum,SER)l微粒体微粒体(microsome)在细胞匀浆和差速离心过程中获得在细胞匀浆和差速离心过程中获得的由破碎的内质网自我融合形成的近似球形的膜囊泡的由破碎的内质网自我融合形成的近似球形的膜囊泡状结构状结构,在体外实验中在体外实验中,具有蛋白质合成、蛋白质糖基化具有蛋白质合成、蛋白质糖基化和脂类合成等内质网的基本功能。和脂类合成等内质网的基本功能。l肌质网肌质网(sarcoplasmic reticulum)心肌和骨骼肌细胞中心肌和骨骼肌细胞中的一种特殊的内质网的一种特殊的内质网,其功能是参与肌肉收缩活动。其功能

3、是参与肌肉收缩活动。形态上多为板层状排列的扁囊。形态上多为板层状排列的扁囊。在合成分泌蛋白的细胞中粗面在合成分泌蛋白的细胞中粗面内质网发达内质网发达,如胰腺外分泌细胞粗面如胰腺外分泌细胞粗面内质网在胞质中密集排列内质网在胞质中密集排列,形成同心形成同心层板状结构。层板状结构。分化较完善的细胞分化较完善的细胞,粗面内质网亦发达；粗面内质网亦发达；而未成熟或未分化好的细胞而未成熟或未分化好的细胞(如干细胞、如干细胞、胚胎细胞等胚胎细胞等)与相应的正常成熟的细胞与相应的正常成熟的细胞相比相比,则不发达。则不发达。粗面内质网的发达程度可作为粗面内质网的发达程度可作为判断细胞分化程度和功能状态的一种判断

4、细胞分化程度和功能状态的一种形态学指标。形态学指标。参与蛋白质合成后的运输参与蛋白质合成后的运输 向细胞外分泌的蛋白质向细胞外分泌的蛋白质(或称外输蛋白或称外输蛋白),包括酶类、肽包括酶类、肽类激素和抗体及胞外基质蛋白，这类蛋白常以分泌的类激素和抗体及胞外基质蛋白，这类蛋白常以分泌的形式输送到细胞外。形式输送到细胞外。一些膜嵌蛋白、如细胞膜蛋白、内质网等膜性细胞器一些膜嵌蛋白、如细胞膜蛋白、内质网等膜性细胞器膜上的膜蛋白，还有膜受体和膜抗原等。膜上的膜蛋白，还有膜受体和膜抗原等。需要与其它细胞组分严格隔离的蛋白质，如溶酶体蛋需要与其它细胞组分严格隔离的蛋白质，如溶酶体蛋白等。白等。一些需要进行

5、复杂修饰的蛋白质。一些需要进行复杂修饰的蛋白质。一些蛋白合成后一些蛋白合成后,需进入内质网腔进行糖基化需进入内质网腔进行糖基化,形成糖蛋白形成糖蛋白,然后转运至相应的部位然后转运至相应的部位l微粒体实验微粒体实验l在在George Palade用离心技术分离到有核糖体结合的微用离心技术分离到有核糖体结合的微粒体粒体,即发现膜结合核糖体即发现膜结合核糖体(membrane-bounded ribosome)之后之后,科学家推测科学家推测:膜结合核糖体合成的蛋白膜结合核糖体合成的蛋白质首先要进入内质网的腔质首先要进入内质网的腔,然后通过选择性的分泌过程然后通过选择性的分泌过程输出到细胞外输出到细胞

6、外,而游离核糖体上合成的蛋白质则留在细而游离核糖体上合成的蛋白质则留在细胞内使用。胞内使用。l为了研究内质网上合成的蛋白质是否进入了内质网的为了研究内质网上合成的蛋白质是否进入了内质网的腔腔,Colvin Redman 和和 David Sabatini用分离的用分离的RER小小泡泡(微粒体微粒体)进行无细胞系统的蛋白质合成进行无细胞系统的蛋白质合成,证明了膜结证明了膜结合核糖体上合成的蛋白质进入了微粒体的腔。合核糖体上合成的蛋白质进入了微粒体的腔。为什么有些核糖体合成蛋白质时不同内质网结为什么有些核糖体合成蛋白质时不同内质网结合合,有些正在合成蛋白质的核糖体要同内质网有些正在合成蛋白质的核糖

7、体要同内质网结合结合,并将合成的蛋白质插入内质网并将合成的蛋白质插入内质网?对此对此,美国美国洛克菲勒大学的洛克菲勒大学的 Gnter Blobel、David Sabatini 和和Bernhard Dobberstein 等于等于1971年年提出两点建议提出两点建议:分泌蛋白的分泌蛋白的N-端含有一段特别的信号序列端含有一段特别的信号序列(signal sequence),可将多肽和核糖体引导到可将多肽和核糖体引导到ER膜上膜上;多肽通过多肽通过ER膜上的水性通道进入膜上的水性通道进入ER的腔中的腔中,并推测多肽是在合成的同时转移的。并推测多肽是在合成的同时转移的。1972年年,Csar

8、Milstein和他的同事用无细胞系统和他的同事用无细胞系统研究免疫球蛋白研究免疫球蛋白(IgG)轻链合成时获得了信号轻链合成时获得了信号序列存在的直接证据序列存在的直接证据,证明证明Blobel等的建议是正等的建议是正确的。他们用分离纯化的核糖体在无细胞体系确的。他们用分离纯化的核糖体在无细胞体系中用编码免疫球蛋白轻链的中用编码免疫球蛋白轻链的mRNA指导合成多指导合成多肽肽,发现合成的多肽比分泌到细胞外的成熟的免发现合成的多肽比分泌到细胞外的成熟的免疫球蛋白在疫球蛋白在N端有一段多出的肽链端有一段多出的肽链,它有它有20个氨个氨基酸基酸,他们推测他们推测,这段肽具有信号作用这段肽具有信号作

9、用,使使IgG得得以通过粗面内质网并继而分泌到细胞外。以通过粗面内质网并继而分泌到细胞外。膜结合核糖体体的蛋白质合成与转运膜结合核糖体体的蛋白质合成与转运（1）脂类的合成）脂类的合成食物中的脂肪血 液磷 脂 和 胆 固 醇 肾上腺皮质细胞、睾丸间质细胞肾上腺皮质细胞、睾丸间质细胞和卵巢黄体细胞滑面内质网也很和卵巢黄体细胞滑面内质网也很发达，含有合成胆固醇的全套酶发达，含有合成胆固醇的全套酶系和使胆固醇转化为皮质激素（系和使胆固醇转化为皮质激素（如肾上腺激素、雄性激素和雌性如肾上腺激素、雄性激素和雌性激素）的酶类。此外激素）的酶类。此外,皮脂腺细胞皮脂腺细胞也分泌脂肪性物质也分泌脂肪性物质,它亦

10、有发达的它亦有发达的滑面内质网。滑面内质网。催化类型酶作用部位碳水化合物代谢葡萄糖6-磷酸酶腔中-葡糖醛酸酶腔中葡糖醛酸转移酶腔中糖基转移酶胞质溶胶脂代谢脂肪酸CoA连接酶胞质溶胶磷脂醛磷酸酶胞质溶胶胆固醇羟基化酶胞质溶胶转磷酸胆碱酶胞质溶胶磷脂转位酶胞质溶胶和腔中与药物脱毒相关的氧化酶细胞色素P-450胞质溶胶NADPH-细胞色素P-450还原酶胞质溶胶细胞色素 b5胞质溶胶 NADH-细胞色素b5还原酶胞质溶胶蛋白质的加工信号肽酶蛋白二硫异构酶腔中腔中微粒体上检测到的光面内质网上存在的酶类微粒体上检测到的光面内质网上存在的酶类 在光面内质网膜中合成磷脂酰胆碱在光面内质网膜中合成磷脂酰胆碱（

11、2）糖原的合成与分解）糖原的合成与分解（肝细胞）（肝细胞）在肝细胞中糖原颗粒的分布常与滑面在肝细胞中糖原颗粒的分布常与滑面内质网紧密伴随。在滑面内质网膜上内质网紧密伴随。在滑面内质网膜上含有葡萄糖含有葡萄糖-6-磷酸酶磷酸酶,在肝细胞在肝细胞,它可它可以催化由细胞质基质中肝糖原降解所以催化由细胞质基质中肝糖原降解所产生的葡萄糖产生的葡萄糖-6-磷酸磷酸,使之分解为磷使之分解为磷酸与葡萄糖酸与葡萄糖,然后葡萄糖进入内质网然后葡萄糖进入内质网腔再被释放到血液中。腔再被释放到血液中。（3）解毒作用）解毒作用（肝细胞）（肝细胞）由肠道吸收的外源性毒物或药物由肠道吸收的外源性毒物或药物以及机体代谢自生的

12、内源性毒物以及机体代谢自生的内源性毒物,均由肝细胞中的滑面内质网通过均由肝细胞中的滑面内质网通过氧化、甲基化、结合等方式氧化、甲基化、结合等方式,使毒使毒性降低或去毒后排泄。性降低或去毒后排泄。（4）横纹肌的收缩）横纹肌的收缩（骨骼肌和心肌（骨骼肌和心肌）滑面内质网围绕在每条肌原纤维的周围滑面内质网围绕在每条肌原纤维的周围,形成一形成一个十分精致的网络状结构系统个十分精致的网络状结构系统,称肌质网。当肌称肌质网。当肌纤维膜的兴奋传到肌质网时纤维膜的兴奋传到肌质网时,引起肌质网释放引起肌质网释放Ca2到肌微丝之间到肌微丝之间,Ca2+激活激活ATP酶酶,使使ATP转变为转变为ADP并释放能量并释

13、放能量,激发肌丝的滑行激发肌丝的滑行,引起肌肉的收引起肌肉的收缩。当肌纤维松弛时缩。当肌纤维松弛时,肌质网又重新获得肌质网又重新获得Ca2+因因此此,滑面内质网在肌纤维中通过摄取和释放滑面内质网在肌纤维中通过摄取和释放Ca2+以参与肌肉的收缩活动以参与肌肉的收缩活动。（5）水和电解质代谢）水和电解质代谢（胃底腺（胃底腺壁细胞壁细胞）细胞膜内陷而形成细胞分泌小管。在细胞膜内陷而形成细胞分泌小管。在分泌小管的周围可见很多管泡状的滑分泌小管的周围可见很多管泡状的滑面内质网。这些滑面内质网能将血浆面内质网。这些滑面内质网能将血浆中的中的CL传递到细胞内分泌小管的膜传递到细胞内分泌小管的膜上上,CL可与

14、胞质中由碳酸解离的可与胞质中由碳酸解离的H+在在膜上结合而产生膜上结合而产生HCL,排出细胞外。排出细胞外。（6）胆汁的生成）胆汁的生成（肝细胞）（肝细胞）胆红素原系非溶性颗粒胆红素原系非溶性颗粒,它们自血液入肝它们自血液入肝细胞内细胞内,经滑面内质网上的葡萄糖醛酸转经滑面内质网上的葡萄糖醛酸转移酶的作用移酶的作用,成为水溶性的结合胆红素成为水溶性的结合胆红素,而而利于排出细胞外利于排出细胞外,进入毛细胆管形成胆汁进入毛细胆管形成胆汁。高尔基复合体高尔基复合体(Golgi apparatus)一、形态结构：一、形态结构：1、一般由、一般由48个扁平膜囊堆叠成（直径个扁平膜囊堆叠成（直径1um，

15、中间窄，中间窄，周缘呈泡状），扁囊间距周缘呈泡状），扁囊间距1530nm。2、有极性：形成面、有极性：形成面(forming face)或顺面或顺面(cis face)成熟面成熟面(mature face)或反面或反面(trans face)顺面膜囊；中间膜囊；反面膜囊；泡囊顺面膜囊；中间膜囊；反面膜囊；泡囊高尔基体高尔基体3，化学反应：，化学反应：嗜锇反应（形成面）嗜锇反应（形成面）焦磷酸硫胺素酶反应（成熟面的焦磷酸硫胺素酶反应（成熟面的1 12 2层膜）层膜）胞嘧啶单核苷酸酶反应（膜囊状，管状结构）胞嘧啶单核苷酸酶反应（膜囊状，管状结构）烟酰胺腺嘌呤二核苷酸酶（烟酰胺腺嘌呤二核苷酸酶（NA

16、DPNADP酶）反应酶）反应 （中间几层）（中间几层）顺面膜囊顺面膜囊（forming face,cis Golgi）接受内质网新合成的物质，分类后转入中间膜囊，接受内质网新合成的物质，分类后转入中间膜囊，小部分返回（驻留蛋白）；丝氨酸小部分返回（驻留蛋白）；丝氨酸O-连接的糖基化，连接的糖基化，跨膜蛋白胞质侧的酰基化跨膜蛋白胞质侧的酰基化中间膜囊中间膜囊（medial Golgi）多数糖基化修饰，膜质形成，多糖合成多数糖基化修饰，膜质形成，多糖合成反面膜囊反面膜囊（trans Golgi，网状结构），网状结构）管网状，连接囊泡；参与蛋白质的分类与包装，管网状，连接囊泡；参与蛋白质的分类与包装

17、，最后输出；囊泡运输最后输出；囊泡运输 4 4、化学组成：、化学组成：高尔基体膜含有大约高尔基体膜含有大约60%的蛋白和的蛋白和40%的脂类，具有一的脂类，具有一些和些和ER共同的蛋白成分。共同的蛋白成分。膜脂中磷脂酰胆碱的含量介于膜脂中磷脂酰胆碱的含量介于ER和质膜之间，中性脂类和质膜之间，中性脂类主要包括胆固醇，胆固醇酯和甘油三酯。主要包括胆固醇，胆固醇酯和甘油三酯。高尔基体中的酶主要有糖基转移酶、磺基高尔基体中的酶主要有糖基转移酶、磺基-糖基转移酶、糖基转移酶、氧化还原酶、磷酸酶、蛋白激酶、甘露糖苷酶、转移酶和氧化还原酶、磷酸酶、蛋白激酶、甘露糖苷酶、转移酶和磷脂酶等不同的类型。磷脂酶等

18、不同的类型。二、高尔基体的功能二、高尔基体的功能高尔基体的主要功能是将内质网合成的蛋白质进行加工、分类、与包装，然高尔基体的主要功能是将内质网合成的蛋白质进行加工、分类、与包装，然后分门别类地送到细胞特定的部位或分泌到细胞外。后分门别类地送到细胞特定的部位或分泌到细胞外。1、蛋白质的糖基化及其修饰、蛋白质的糖基化及其修饰 N-连接的糖链合成起始于内质网，完成于高尔基体。连接的糖链合成起始于内质网，完成于高尔基体。许多糖蛋白同时具有许多糖蛋白同时具有N-连接的糖链和连接的糖链和O-连接的糖链。连接的糖链。O-连接的糖基化在高连接的糖基化在高尔基体中进行，通常第一个连接上去的糖单元是尔基体中进行，

19、通常第一个连接上去的糖单元是N-乙酰半乳糖，连接的部位乙酰半乳糖，连接的部位为为Ser、Thr和和Hyp的的OH基团，然后逐次将糖基转移上去形成寡糖链。基团，然后逐次将糖基转移上去形成寡糖链。糖基化的结果使不同的蛋白质打上不同的标记，改变多肽的构象和增加蛋糖基化的结果使不同的蛋白质打上不同的标记，改变多肽的构象和增加蛋白质的稳定性。白质的稳定性。在高尔基体上还可以将一至多个氨基聚糖链通过木糖安装在核心蛋白的丝在高尔基体上还可以将一至多个氨基聚糖链通过木糖安装在核心蛋白的丝氨酸残基上，形成蛋白聚糖。这类蛋白有些被分泌到细胞外形成细胞外基质氨酸残基上，形成蛋白聚糖。这类蛋白有些被分泌到细胞外形成细

20、胞外基质或粘液层，有些锚定在膜上。或粘液层，有些锚定在膜上。内质网和高尔基体中与糖基化和寡糖加工有关的酶都是整合膜蛋白。内质网和高尔基体中与糖基化和寡糖加工有关的酶都是整合膜蛋白。寡糖在内质网和高尔基体上的合成寡糖在内质网和高尔基体上的合成2、参与细胞分泌活动、参与细胞分泌活动 负责对细胞合成的蛋白质进行加工，分类，并运出，其过程是负责对细胞合成的蛋白质进行加工，分类，并运出，其过程是SER上合成蛋白质上合成蛋白质，进入进入ER腔腔，出芽形成囊泡出芽形成囊泡，进入进入CGN，在在medial Gdgi中加工中加工，在在TGN形成囊泡形成囊泡，囊泡与质膜融合、排出。囊泡与质膜融合、排出。高尔基体

21、对蛋白质的分类，依据的是蛋白质上的信号肽或信号斑。高尔基体对蛋白质的分类，依据的是蛋白质上的信号肽或信号斑。分选：每一类蛋白质都有特异的标识（溶酶体中的酶带有分选：每一类蛋白质都有特异的标识（溶酶体中的酶带有M6P,6-磷酸磷酸甘露醇）；分选主要与蛋白质有关，分选和转运的信息存在于基因本甘露醇）；分选主要与蛋白质有关，分选和转运的信息存在于基因本身。身。3、进行膜的转化功能、进行膜的转化功能 高尔基体的膜无论是厚度还是在化学组成上都处于内质网和质膜之高尔基体的膜无论是厚度还是在化学组成上都处于内质网和质膜之间，因此高尔基体在进行着膜转化的功能，在内质网上合成的新膜转移间，因此高尔基体在进行着膜

22、转化的功能，在内质网上合成的新膜转移至高尔基体后，经过修饰和加工，形成运输泡与质膜融合，使新形成的至高尔基体后，经过修饰和加工，形成运输泡与质膜融合，使新形成的膜整合到质膜上。膜整合到质膜上。4、将蛋白水解为活性物质、将蛋白水解为活性物质 如将蛋白质如将蛋白质N端或端或C端切除，成为有活性的物质（胰岛素端切除，成为有活性的物质（胰岛素C端）或将端）或将含有多个相同氨基序列的前体水解为有活性的多肽，如神经肽。含有多个相同氨基序列的前体水解为有活性的多肽，如神经肽。5、参与形成溶酶体。、参与形成溶酶体。6、参与植物细胞壁的形成，合成纤维素和果胶质。、参与植物细胞壁的形成，合成纤维素和果胶质。三、高

23、尔基体与细胞内的膜泡运输三、高尔基体与细胞内的膜泡运输组织信号的位置类型信号顺序的长度线粒体N-端氨基酸1230aa叶绿体N-端氨基酸25aa核中部碱性氨基酸7-9aa过氧化物酶体C-端SKL(Ser Lys Leu)3aa 导肽(leading peptide)又称转运肽(transit peptide)或导向序列(targeting sequence)，它是游离核糖体上合成的蛋白质的 N-端信号。导肽是新生蛋白N-端一段大约2080个氨基酸的肽链,通常带正电荷的碱性氨基酸(特别是精氨酸和赖氨酸)含量较为丰富,如果它们被不带电荷的氨基酸取代就不起引导作用，说明这些氨基酸对于蛋白质的定位具有重

24、 要作用。这些氨基酸分散于不带电荷的氨基酸序列之间。转运肽序列中不含有或基本不含有带负电荷的酸性氨基酸，并且有形成两性螺旋的倾向。转运肽的这种特征性的结构有利于穿过线粒体的双层膜。不同的转运肽之间没有同源性，说明导肽的序列与识别的特异性有关，而与二级或高级结构无太大关系。导肽运送蛋白质时具有以下特点:需要受体;消耗ATP;需要分子伴侣;要电化学梯度驱动;要信号肽酶切除信号肽;通过接触点进入;非折叠形式运输。l常指新合成多肽链中用于指导蛋白质跨膜转移（定位）的N-末端的氨基酸序列（有时不一定在N端），至少含有一个带正电荷的氨基酸，中部有一高度疏水区以通过细胞膜。l信号肽假说认为，编码分泌蛋白的m

25、RNA在翻译是首先合成的是N末端带有疏水氨基酸残基的信号肽，它被内质网膜上的受体识别并与之相结合。信号肽经由膜中蛋白质形成的孔道到达内质网内腔，随机被位于腔表面的信号肽酶水解，由于它的引导，新生的多肽就能够通过内质网膜进入腔内，最终被分泌到胞外。核定位信号(nuclear localization signal,NLS)l定位信号是另一种形式的信号肽,可位于多肽序列的任何部分。一般含有 48个氨基酸,且没有专一性,作用是帮助亲核蛋白进入细胞核。入核信号与导肽的区别在于:由含水的核孔通道来鉴别;入核信号是蛋白质的永久性部分,在引导入核过程中,并不被切除,可以反复使用,有利于细胞分裂后核蛋白重新入核。l有多种类型的核定位信号，这些信号都具有一个带正电荷的肽核心。第一个被确定的NLS序列的蛋白质是SV40的T抗原(MW=92kDa),它在细胞质中合成后很快积累在细胞核中,是病毒DNA在核内复制所必需的蛋白质。其野生型的氨基酸序列为Pro-Lys-Lys-Lys-Arg-Lys-Val,即使单个氨基酸突变所产生的突变型NLS(Pro-Lys-Tyr-Lys-Arg-Lys-Val)也能阻止这种蛋白质进入细胞核而停留在细胞质中。如果将这种信号接到非核蛋白的随机Lys的侧链上,则非核蛋白也能转变成核蛋白。