开题PPT{泌尿外科研究生}课件(PPT 25页).pptx

1、*医院 2011级泌尿外科研究生 开 题 报 告 2012-12第1页，共25页。题目：*导导 师：师：*教授教授 研研 究究 生：生：*研究方向：泌尿外科学研究方向：泌尿外科学第2页，共25页。目录第3页，共25页。研究背景研究背景一一.概况概况1.膀胱癌是泌尿系最常见的恶性肿瘤，其中90以上为移行细胞癌2.膀胱癌具有易复发和晚期恶性加重的特点，给患者及其家庭带来沉重的心理压力及经济负担第4页，共25页。研究背景研究背景二二.发病率发病率1.膀胱癌发病率在全球恶性肿瘤中位居第十一位,其中在男性恶性肿瘤中排名第七位2.虽然在我国膀胱癌发病率远低于西方发达国家水平，但是近年我国部分城市报告膀胱癌

2、发病率有增高趋势3.城市居民膀胱癌死亡率明显较农村为高第5页，共25页。研究背景研究背景膀胱癌中非肌层浸润性膀胱癌予:经尿道膀胱肿瘤电切术后+膀胱内灌注化疗或免疫治疗仍易复发三.治疗第6页，共25页。研究背景研究背景四.治疗1.至今，术后膀胱内灌注化疗和全身化疗仍是最重要的辅助治疗手段2.但由于化疗药物本身的毒副作用以及肿瘤易产生抗药性，从而使其疗效显著降低3.近些年来，寻找安全、有效的防治膀胱癌复发的治疗方法一直众人关注的热点研究方向第7页，共25页。研究背景研究背景四.治疗1.至今，术后膀胱内灌注化疗和全身化疗仍是最重要的辅助治疗手段2.但由于化疗药物本身的毒副作用以及肿瘤易产生抗药性，从

3、而使其疗效显著降低3.近些年来，寻找安全、有效的防治膀胱癌复发的治疗方法一直众人关注的热点研究方向第8页，共25页。研究背景曲古抑菌素A（TSA）简介：1.源自链霉菌代谢产物，最先作为抗真菌药物使用2.一种氧肟酸类组蛋白去乙酰化酶抑制剂，近来研究表明其具有抑制组蛋白去乙酰化酶的活性第9页，共25页。研究背景曲古抑菌素A对肿瘤的作用：1.其被证明可在小剂量，低浓度情况下导致肿瘤分化，并选择性地抑制肿瘤生长而对正常细胞无毒副作用2.其日益受到临床医学界重视,而对TSA抑制膀胱癌生长的具体作用机制和途径尚未明确第10页，共25页。研究背景概念：PTEN（phosphatase and tensin

4、homolog deleted on chromosome ten）:为人第10号染色体缺失的磷酸酶及张力蛋白同源的抑癌基因第11页，共25页。研究背景作用：在体内、外均可使FAK 脱磷酸,从而阻碍整合素介导的肿瘤细胞扩散、转移、侵袭和骨架蛋白组装第12页，共25页。研究背景pten特异性使PIP3脱3C磷酸PI3K/AKt信号转导途径细胞中Akt磷酸化水平显著细胞生长周期关键激酶抑制因子P27kipl干扰细胞生长信号使细胞阻滞于G1期并增加细胞对凋亡的敏感性第13页，共25页。研究背景概念：RUNX3(human runt2related transcription fac2 tor3)：人

5、 R U N T 相 关 转 录 因 子 3，是 属 于 RUNT家族成员的肿瘤抑制基因第14页，共25页。研究背景作用：在Runx蛋白作用下Smad复合物从细胞质内转入特定的靶位点,当Runx基因表达受抑制时,影响TGF2信号通路的转导,从而诱导肿瘤的发生。第15页，共25页。研究背景现状：已证实在胃癌等恶性肿瘤中都出现了Runx3基因转录和翻译水平的下调，但在泌尿系肿瘤尤其是膀胱癌中有关Runx3的研究报道相对较少第16页，共25页。相关概念半定量反转录聚合酶链反应半定量反转录聚合酶链反应 （SqRT-PCRSqRT-PCR）是近年来常用的一种简捷、特异是近年来常用的一种简捷、特异 的定量

6、的定量RNARNA测定方法测定方法第17页，共25页。相关概念SqRT-PCRSqRT-PCR基本原理：基本原理：1.1.通过通过mRNAmRNA反转录成反转录成cDNAcDNA，再进行，再进行PCRPCR扩扩增，并测定增，并测定PCRPCR产物的数量可以推测样产物的数量可以推测样品中特异品中特异mRNAmRNA的相对数量的相对数量2.2.以半定量以半定量RT-PCRRT-PCR为基础建立起来的为基础建立起来的mRNAmRNA含量测定技术，较含内标化的含量测定技术，较含内标化的RT-RT-PCRPCR定量测定的定量测定的mRNAmRNA的方法更为简便可行的方法更为简便可行 第18页，共25页。

7、研究目的和意义TSA膀胱移行细胞癌BIU-87细胞株PTEN 表达情况Runx3表达情况作用于探讨：TSA抗癌的可能的作用机制和途径第19页，共25页。实验方案RPMI-1640培养基酶解并配成1x105/ml细胞悬液第20页，共25页。可行性分析1.本课题人员具备扎实的理论和实验技术基础，导师刘久华主任在膀胱癌研究领域具有较深造诣，其丰富的专业背景和知识将有助于指导本项目的顺利开展，保证该项目的顺利进行。2.*科研中心实验室仪器配置保证了试验顺利进行及指标检测。3.大量阅读文献，加深对相关基因的作用机制的认识，跟随导师所习得的关于细胞培养和半定量RT-PCR技术让试验的进行更加有保障。第21

8、页，共25页。预期目标1.SqRT-PCR结果可能显示TSA处理能明 显诱导PTEN和Runx3基因表达增加并呈现浓度与时间依赖性2.故而可以得出：TSA体外抗膀胱癌作用机制可能与其诱导PTEN、Runx3 mRNA的表达上调有关第22页，共25页。经费预算试验细胞及培养 3500元购买试剂 4500元仪器使用及台租 2500元科室协调费1500元合计12000元第23页，共25页。进度安排第一阶段（2012.10-2013.3）查阅文献、选题开题、掌握实验基本步骤。按课题设计申购实验用的各种试剂（盒）及实验细胞株第二阶段（2013.3-2013.9）按照课题设计，完成全部实验，处理样本,检测指标第三阶段（2013.9-2013.11）整理资料，处理数据第四阶段（2013.11-2014.5）发表论文，论文答辩 第24页，共25页。谢 谢！谢第25页，共25页。